牙根内吸收是由破牙本质细胞活动引起的根管内牙本质缺失的病理性过程。由于其发病具有隐匿性，发现时往往已形成较大病损。前期牙本质层受损是始发因素，持续的牙髓炎症刺激是促进因素。牙外伤、牙髓的慢性炎症、活髓切断术和牙再植术等多种因素均可诱导牙根内吸收的发生。本文针对牙根内吸收的病因和致病机制进行阐述，以期为牙根内吸收的早期阻断治疗提供参考。

病理损伤和临床医源性操作均可导致牙本质脱矿，形成脱矿牙本质基质（demineralized dentin matrix，DDM）。牙本质脱矿激活内源性基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）和半胱氨酸组织蛋白酶（cysteine cathepsin，CC）；同时DDM力学性能降低，因此在酶促降解和物理破坏下DDM易丧失结构完整性，降低DDM在牙本质-树脂粘接修复中的临床价值。采用交联剂和MMP/CC抑制剂是保护DDM结构完整性和实现其临床价值的有效策略。多种化学合成试剂和植物来源提取物能显著改善DDM力学性能，增强DDM酶解耐受性，但化学合成试剂的细胞毒性和植物提取物引起的牙齿着色可显著影响其临床适用性。在保护牙本质胶原的同时发挥抗菌性能是未来DDM保护剂研究的新方向。因此，本综述分别从胶原交联剂、胶原降解酶抑制剂和集两者功效于一体的化合物展开，探讨DDM保护的最新研究进展，并展望其在牙本质-树脂粘接中的应用前景，以期为DDM保护策略的临床应用提供参考。

目的:探究持续激活β-连环蛋白(β-catenin)对拔牙后牙槽骨初期骨改建的影响.方法:构建Catnblox(ex3)/+小鼠(对照组)和 9.6 kb Dmp1-Cre+/-;Catnblox(ex3)/+小鼠(实验组).分别拔除两组小鼠右上颌第一磨牙,1 周后收样,采用苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察两组小鼠拔牙窝愈合情况,免疫组织化学染色检测两组小鼠拔牙窝内成骨细胞特异性基质蛋白表达的差异.结果:成功构建 9.6kb Dmp1-Cre+/-;Catnblox(ex3)/+小鼠;与对照组相比,其拔牙窝内HE染色显示无新生骨质,Masson染色显示胶原矿化减少(P＜0.001),TRAP染色显示破骨细胞数量减少(P＜0.001),免疫组化染色显示成骨细胞的骨钙蛋白(OCN)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)和牙本质基质蛋白(DMP1)的特异性表达减少(P＜0.01).结论:9.6kb DMP1+细胞中持续激活β-catenin,延缓拔牙窝的初期愈合速率.

目的 探讨脱矿牙本质基质(DDM)诱导成骨机制的细胞理论框架和成骨方式.方法 在24只新西兰大耳白兔双侧竖脊肌区制备4个肌袋位点,随机选取3个位点为实验位点,植入DDM,另一位点为对照位点,不植入任何材料.术后1、2、3、4、8、12、16和20周处死动物,制作组织标本,应用苏木精-伊红(HE)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和免疫组织化学染色对间充质干细胞、成骨细胞、软骨细胞及破骨细胞进行鉴定分析.结果 HE染色显示:3周时,实验组可见软骨样基质、骨样基质和成骨样细胞.免疫组化染色显示:各时间点CD44、碱性磷酸酶(ALP)和Ⅱ型胶原表达有统计学意义(P＜0.05).结论 DDM具有良好骨诱导性和组织相容性,其诱导成骨的主要方式可能为软骨内成骨.

目的 应用牙髓再血管化的方法,研究体外培养扩增的自体根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papillae,SCAP)在年轻恒牙根尖周炎组织再生中的作用.方法 分离培养3只比格犬SCAP,研究其生物学特性,包括:克隆形成实验、成骨、成脂、成软骨等多向分化性能以及干细胞相关表面标志物.建立年轻恒牙根尖周炎模型,通过根管冲洗和封药严格控制感染.将24颗实验牙分为4组,正常对照组:不进行任何干预的正常发育牙齿;根尖引血组:刺破根尖引血入根管;外周血组:根管内导入外周血;外周血重悬SCAP组:外周血重悬SCAP后导入根管.除正常对照组外,其余3组在完成牙髓再血管化后均行严密的冠向封闭,定期拍摄根尖X线片,观察牙根发育情况,12周后获取犬颌骨标本进行组织学观察.结果 分离培养的犬SCAP具有克隆形成能力、成骨、成脂和成软骨等多向分化潜能,STRO-1、CD146呈阳性表达,细胞角蛋白呈阴性表达.在进行牙髓再血管化12周后,在感染控制的牙根影像学上可以观察到根管壁增厚.组织学观察发现,在根尖引血组和外周血组织中根管内壁形成的新生组织均含有骨陷窝样结构,并且在外周血组中新组织与原根管壁易于分离;而在外周血重悬SCAP组根管内壁新形成的组织中可见牙本质小管样结构,无骨陷窝样结构,且厚度大于前两组,但牙本质小管的方向不一致.结论 在控制感染的前提下,SCAP在年轻恒牙根尖周炎组织再生中具有重要作用.但是由于数量的缺乏,通过根尖来源的内源性SCAP可能不足以获得真正的组织再生,而导入足够量的体外分离培养的外源性SCAP可能会实现这一目标.

目的 研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶IIδ(CaMKIIδ)过表达对破骨细胞分化的影响.方法 筛选破骨细胞分化中CaMKIIδ 高表达转录本,构建过表达载体.RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKIIδ 表达情况;并在分化诱导5 d后检测破骨细胞生成及骨吸收情况.结果 CaMKIIδ转录本2和3在破骨细胞分化中高表达;用转录本2构建了过表达载体,建立了稳定转染株.过表达组CaMKIIδmRNA水平较对照组、空载体组分别上升107.8％和85.7％(P<0.05),蛋白水平分别上升37.2％和37.1％(P<0.05),证实重组CaMKIIδ 在细胞中得到有效表达.CaMKIIδ 过表达组破骨细胞数目、牙本质吸收陷窝数和面积与对照组和空载体组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 CaMKIIδ过表达对破骨细胞分化和骨吸收无明显影响.

目的 研究钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ (CaMKⅡγ) RNA干扰对破骨细胞分化和骨吸收的影响.方法 构建3个CaMKⅡγ RNA慢病毒重组干扰载体;阴性载体转染RAW264.7细胞, 确定最适转染滴度值 (MOI) 和转染效率.用重组载体转染细胞, 确定干扰效果最佳的重组载体用于后续实验.细胞分为对照组、阴性载体组、干扰载体组;病毒转染5 d后通过TRAP染色及牙本质磨片骨吸收陷窝检测3组破骨细胞生成及骨吸收情况.结果 成功构建了3个CaMKⅡγ重组干扰载体;最适MOI值为30, 转染效率>80％.#3重组载体干扰效果最佳, 干扰效率在mRNA及蛋白水平分别为78.16％和67.02％ (P <0.01) .3组细胞中, 干扰载体组多核破骨细胞数、牙本质吸收陷窝数和面积较对照组分别下降了59.99％、54.19％和57.94％ (P <0.01) , 而阴性载体组和对照组比较差异无显著性 (P> 0.05) .结论 CaMKⅡγ RNA干扰可显著抑制破骨细胞生成和骨吸收功能.

目的:通过动物模型,研究局部激活破骨细胞对应用双膦酸盐后拔牙创愈合的影响,以期找到预防双膦酸盐相关性颌骨坏死的方法.方法:选用24只8周龄雌性SD大鼠随机分为实验组和对照组,行双侧卵巢切除术(ovariectomy,OVX),术后3个月开始应用双膦酸盐.用药一个月后,拔除大鼠左侧上颌第一磨牙.实验组拔牙创内放置含有巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)与核因子-κB受体活化因子配体(the receptor activator of nuclear factor-κB ligand,Rankl)的明胶海绵,对照组放置含有生理盐水的明胶海绵.拔牙后2周,收取样本,评价拔牙创愈合情况.结果:TRAP染色结果显示实验组牙槽窝内的破骨细胞数量较对照组明显增多.免疫组织化学染色结果显示实验组成骨能力标记物骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)表达量增加.组织学检测结果显示实验组拔牙创牙槽窝新生骨质较对照组明显增多.结论:局部激活破骨细胞可以促进应用双膦酸盐后的拔牙创愈合.

目的:探究同种异体牙囊细胞膜片在异种生物牙根再生中的作用.方法:应用酶消化法体外分离人和大鼠的原代牙囊细胞并制备牙囊细胞膜片.通过同种异体牙囊细胞膜片(allogeneic dental follicle cell sheets,aDFCSs)复合异种的处理后牙本质基质(xenogeneic treated dentin matrix,xTDM)构建异种生物牙根.活死细胞染色检测细胞膜片中牙囊细胞的活性.实时荧光定量PCR检测xTDM诱导后牙囊细胞内IL-6和TGF-β基因表达.大鼠颌骨体内移植1周和4周后取材,组织学染色观察生物牙根周围组织的再生情况.TRAP染色检测异种生物牙根再生中破骨细胞情况.结果:复合xTDM后的牙囊细胞IL-6基因表达显著降低,TGF-β基因表达略降低.组织学切片结果表明复合牙囊细胞膜片的生物牙根能够延缓破骨细胞的吸收作用,同促进异种生物牙根再生.结论:aDFCSs复合xTDM构建异种生物牙根可降低免疫炎症反应,促进异种生物牙根再生.