目的:了解2型糖尿病（T2DM）合并非酒精性单纯性脂肪肝（NAFL）与非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患者血清脂质成分的变化轮廓，试筛选NASH的潜在血清标志物。方法:选取2014年9月至2017年10月于天津市第三中心医院内分泌科住院的T2DM合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）并已进行肝活检的患者共40例为研究对象，根据肝活检（SAF评分）结果分为NAFL组（22例）及NASH组（18例），对比2组患者的病历资料，采用超高效液相色谱-质谱法进行血清脂质组学分析。两组间比较采用 t检验。Logistic逐步回归分析及受试者工作特征（ROC）曲线分析筛选T2DM发生NASH的潜在血清标志物。 结果:NASH组肝硬度、NASH评分、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、空腹血糖、血清铁蛋白水平均高于NAFL组（ t=-2.76~-2.06，均 P<0.05）。磷脂酰胆碱（PC）（35∶4）、PC（36∶1）[PC（18∶1/18∶0）]、PC（38∶3）、PC（44∶5）、磷脂酰乙醇胺（PE）（36∶2）、PE（34∶1）[PE-NMe2（18∶1/16∶0）]、PE（34∶1）[PE（20∶1/14∶0）]、磷脂酰丝氨酸（33∶0）、甘油三酯（TG）（54∶2）、鞘磷脂（sphingomyelin）（37∶1）、SM（39∶1）、SM（40∶1）、葡萄糖神经酰胺（40∶2）在NASH组均高于NAFL组（ t=-2.930~-1.380，均 P<0.05）；PC（38∶5）、PC（38∶6）、TG（52∶4）、TG（54∶4）、TG（54∶5）、TG（57∶6）、TG（58∶4）、TG（60∶6）水平在NASH组降低（ t=1.982~2.431，均 P<0.05）；PC（36∶1）[PC（19∶1/17∶0）]、PE（38∶1）、PE（39∶1）、TG（52∶1）、棕榈酰基苯丙氨酸水平在NASH组明显高于NAFL组，差异有统计学意义（ t=-3.789~-2.837， P<0.005）。Logistic逐步回归分析显示，PC（36∶1）及PE（38∶1）升高是T2DM合并NAFLD患者进展为NASH的危险因素[ OR（95 %CI）：1.213（1.076~1.301）、1.119（1.015~1.243）， P<0.05]。ROC曲线分析显示，PC（36∶1）及PE（38∶1）曲线下面积分别为0.803、0.785，灵敏度均为94.4%，特异性均为72.7%，均高于谷丙转氨酶、AST及GGT（曲线下面积分别为：0.689、0.734、0.741；灵敏度分别为：72.2%、77.8%、77.8%；特异性分别为：68.2%、63.6%、68.2%）。 结论:T2DM患者中，与合并NAFL相比，NASH时出现变化的血清脂质主要是甘油磷脂、鞘脂和TG。在T2DM脂肪肝患者中，PC（36∶1）、PE（38∶1）可能成为诊断NASH的潜在血清标志物。

1例62岁男性患者因车祸致第3腰椎爆裂性骨折和多发腰椎横突骨折，给予注射用盐酸丙帕他莫镇痛，头孢呋辛钠预防感染，腺苷钴胺营养神经，低分子量肝素钙抗凝。用药前患者肝功能正常。2 d后在全麻下行腰椎后路骨折切开复位减压植骨内固定术，术前停用低分子量肝素钙。术后第3天（用药第5天）患者诉腹部胀痛，实验室检查示血清丙氨酸转移酶（ALT）9 315 U/L，天冬氨酸转氨酶（AST）10 760 U/L，γ-谷氨酰转氨酶（γ-GT）47 U/L，碱性磷酸酶（ALP）101 U/L，总胆红素（TBil）71.3 μmol/L，直接胆红素（DBil）48.5 μmol/L，间接胆红素（IBil）22.8 μmol/L，考虑为药物引起的肝损伤。停用盐酸丙帕他莫并给予保肝治疗。次日患者出现巩膜及全身皮肤黄染，继而发生神志不清、低血氧饱和度、低血压、低血糖，ALT 5 975 U/L，AST 3 659 U/L，γ-GT 100 U/L，ALP 141 U/L，TBil 175.2 μmol/L，DBil 101.4 μmol/L，IBil 73.8 μmol/L，凝血酶原时间21.2 s，诊断为急性肝衰竭。停用注射用头孢呋辛钠和腺苷钴胺，给予升压、扩容、纠正酸中毒等对症支持治疗后未见明显好转，当日转至外院。转院第4天患者因多器官功能衰竭死亡。

病人,男,18岁,因腹痛、腹泻于2022年8月8日入院.体格检查:上腹部轻微压痛,无放射痛,无黄疸,触诊未发现腹部肿块.实验室检查:门冬氨酸氨基转移酶54 IU/L、丙氨酸氨基转移酶81 IU/L、碱性磷酸酶239 IU/L、γ-谷氨酰胺转肽酶887 IU/L、神经元特异性烯醇化酶(NSE)35.68 ng/ml、细胞角蛋白19片段(CYFRA21～19)4.81 ng/ml、糖类抗原 125(CA125)34 IU/L、糖类抗原 199(CA19-9)45.88 IU/L.

研究鳖甲煎丸对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠肝脂质代谢的影响,探讨鳖甲煎丸调控NASH小鼠脂质代谢和炎症反应的作用机制.通过高脂高胆固醇饲料喂养C57BL/6 小鼠建立NASH模型,给予鳖甲煎丸干预,通过血清和肝脏生化指标及肝脏组织病理学检测评价鳖甲煎丸对NASH小鼠的治疗效果,应用UPLC-Q-TOF-MS技术检测肝脏的脂质代谢物,结合偏最小二乘法判别分析、t检验和受试者工作特征曲线分析筛选差异脂质和主要生物标志物;结合生物标志物结果,利用Western blot和qPCR检测脂质代谢及炎性相关分子.结果表明,鳖甲煎丸能显著降低NASH小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平和肝组织中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量,抑制肝脏脂滴堆积、肝细胞气球样变和纤维化病变;脂质代谢组学结果显示,鳖甲煎丸可调控磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl etha-nolamine,PE)、鞘磷脂(sphingomyelin,SM)、神经酰胺(ceramide,Cer)等NASH相关 11 种脂质标志物;Western blot和qPCR结果显示,鳖甲煎丸可调控固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phospho-AMP-activated pro-tein kinase,p-AMPK)等脂质代谢相关蛋白的表达,及脂肪酸转位酶36(fatty acid translocase 36,Cd36)、Pparγ、心磷脂合酶 1(car-diolipin synthase 1,Crls1)和磷脂酶Cβ2(phospholipase Cβ2,Plcβ2)mRNA水平;抑制磷酸化p38 丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶 1/2(phospho-extracellular signal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)和促炎因子 Il-6、Il-1β、Tnf-α mRNA 表达.综上所述,鳖甲煎丸可调节 PC、PE、SM、Cer 等脂类代谢,调控p-AMPK、SREBP1、PPARγ和Cd36、Crls1、Plcβ2 等脂质调控因子表达,改善脂质代谢紊乱,同时还能抑制MAPK信号通路和促炎因子mRNA水平,缓解炎症反应,发挥治疗NASH的作用.

目的 研究柴胡Bupleuri Radix不同极性部位对慢性不可预知应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠抑郁样行为干预作用和神经递质调节作用,筛选出最佳药效部位,并建立一种能够测定抑郁大鼠胆汁酸谱的方法.方法 雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、盐酸文拉法辛(35mg/kg)组、柴胡低极性部位(15g/kg)组、柴胡中极性部位(15 g/kg)和柴胡高极性部位(15g/kg)组,每组9只,造模28d同时给药,动态测定大鼠的体质量变化,通过糖水偏好实验和旷场实验检测行为学变化;采用UPLC-MS测定血清中色氨酸(tryptophane,Trp)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)、多巴胺(dopamine,DA)、乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、酪氨酸(tyrosine,Tyr)含量;采用全自动生化分析仪测定γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和血清总胆红素(serum bilirubin,TBIL)含量;采用ELISA测定盲肠内容物中总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;采用UPLC-MS/MS拟靶向代谢组学建立36种胆汁酸的拟靶向相对定量方法,测定盲肠内容物胆汁酸谱,并对组间胆汁酸差异性进行分析.结果 柴胡不同极性部位组和盐酸文拉法辛组均可回调CUMS引起的大鼠体质量、糖水偏爱率、直立次数、水平穿越格数异常和血清中 Trp、5-HT、5-HIAA、NE、DA、Ach、GABA、Glu、Tyr 水平(P＜0.05、0.01、0.001),且柴胡低极性部位回调效果最好.同时柴胡低极性部位可显著回调大鼠血清γ-GT活性及血清TBIL、盲肠内容物TBA含量(P＜0.05、0.01);建立了 36种胆汁酸的拟靶向相对定量方法,所建立的方法具有良好的稳定性,胆汁酸谱分析表明,柴胡低极性部位可调节盲肠内容物胆汁酸谱,通过回调其中5种差异胆汁酸(牛磺熊去氧胆酸、熊去氧胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺石胆酸)发挥药效作用.结论 柴胡低极性部位为抗抑郁最佳药效部位,同时能够调节胆汁酸谱的代谢紊乱,发挥肝保护作用.

1 病例资料患者,女,65岁,因"入院3月前无明显诱因出现腹部疼痛,外院行腹部MRI示左侧腰大肌与髂肌间囊实性肿块,考虑为良性神经源性肿瘤"于2017年11月6日入住我院,患者于11月9日行腹部神经纤维瘤切除术,术后第1天(11月10日),患者诉手术切口部位疼痛,遂给予对乙酰氨基酚缓释片(泰诺林,上海强生制药有限公司,批号:150824700)0.65 g,po,q12h;同时使用头孢呋辛1.5 g,ivd,bid 预防手术部位感染;甲钴胺片0.5 mg,po,tid营养神经,帮助恢复神经功能.患者病情逐渐稳定,手术切口部位愈合良好,且切口处疼痛感基本消失,准备出院.2017年11月18日血生化检查示:丙氨酸氨基转移酶(ALT)1575 U?L-1,天冬氨酸氨基转移酶(AST)750 U?L-1,γ-谷氨酰转移酶(GGT)143 U?L-1,碱性磷酸酶(AKP)116 U?L-1,总胆红素(TBIL)8.3 μmol?L-1.

目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs) 向神经样细胞分化影响.方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率.实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(adEMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control) ,诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化.免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后 EMSCs 的轴突膜蛋白(GAP-43) ,微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况.向大鼠脊髓内注射adEMSCs,2周后取脊髓.结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2.诱导7 d后,adEMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高.移植入体内2周的adEMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43.结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性.

[目的]比较不同方法以及不同靶标基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)效率,建立并优化二化螟Chilo suppressalis碱性神经酰胺酶saCER和中性鞘磷脂酶snSMase基因的RNAi的技术体系.[方法]通过培养液浸泡法将果蝇Drosophila daCER基因的dsRNA导入果蝇S2细胞内;分别通过显微注射法和荧光纳米粒子介导喂食法将体外合成的二化螟saCER和snSMase基因的特异性双链RNA (dsRNA)导入二化螟3龄(注射法)和2龄(喂食法)幼虫体内,之后利用qPCR测定靶标基因的mRNA表达水平,比较不同方法对不同基因的RNA干扰效率.[结果]将果蝇S2细胞浸泡在浓度为15 ng/μL的含daCER dsRNA细胞培养液中培养72 h后,daCER基因的表达水平下降了约84％.dsRNA(5 000 ng/μL)注射二化螟3龄幼虫60 h后对saCER基因的干扰效率达到最高(41％),dsRNA (2 500 ng/μL)注射48 h后对snSMase基因的干扰效率最高(47％);给二化螟2龄幼虫喂食dsRNA(48 μg/d)后,分别在第7天和第8天对saCER(32％)和snSMase(52％)基因达到最大干扰效率.对于aCER基因,果蝇S2细胞浸泡法与二化螟注射法和喂食法相比,干扰效率差异极其显著;使用相同方法,对saCER基因和snSMase基因的干扰效率无显著差异;对于二化螟的同一基因(saCER或者snSMase),注射法与荧光纳米粒子喂食法之间干扰效率也无显著性差异.[结论]碱性神经酰胺酶基因和中性鞘磷脂酶基因对导入dsRNA进行RNAi的方法较敏感,本研究建立并优化的显微注射法和荧光纳米粒子介导喂食法RNAi技术体系在鞘脂质代谢酶基因功能的基础研究中具有可行性.注射法和喂食法对二化螟幼虫aCER基因的干扰效率远低于浸泡法对果蝇S2细胞中这一基因的干扰效率,进一步证实二化螟血淋巴中的RNA酶对dsRNA的快速降解以及中肠围食膜的阻隔很大程度上削减了dsRNA进入二化螟细胞内发挥干扰作用.

目的 评估阿卡波糖联合门冬氨酸鸟氨酸对肝硬化伴肝性脑病患者的疗效及安全性.方法 76例肝硬化伴肝性脑病患者随机分为观察组和对照组(各38例),对照组患者在常规治疗基础上给予门冬氨酸乌氨酸治疗,观察组患者在常规治疗基础上给予阿卡波糖联合门冬氨酸鸟氨酸治疗.分别于治疗前后,采用全自动生化分析仪测定天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、血清总胆红素(TBIL)和总蛋白(TP)水平等肝功能指标;采用血氨测定仪检测血氨水平;采用显色基质鲎试剂盒与分光光度计测定血浆内毒素水平.采用简易智力状态检查量表(MMSE)、改良长谷川痴呆量表(HDS-R)评估患者的认知能力,采用NCT-A进行神经心理学测试;测定脑代谢产物胆碱(Cho)、肌醇(mI)、谷氨酰胺复合物(Glx)和N-天门冬氨酸(NAA).观察并记录治疗期间2组患者的不良反应发生情况.结果 治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(89.47％vs 71.05％,P＜0.05).观察组AST、ALT、TBIL、血氨和内毒素水平显著低于治疗前和对照组(P＜0.05),ALP、TP水平显著高于治疗前和对照组(P＜0.05).观察组MMSE和HDS-R评分均显著高于对照组(P＜0.05),NCT时间显著低于对照组(P＜0.05).观察组mI/Cr和Cho/Cr均显著高于治疗前和对照组(P＜0.05),Glx/Cr显著低于治疗前和对照组(P＜0.05).结论 阿卡波糖联合门冬氨酸鸟氨酸可以有效降低血氨和内毒素,改善肝性脑病症状,并起到一定的保肝护肝、保护大脑作用,提高患者生活质量.

目的 探讨西安铁路局动车组列车电磁辐射对机车乘务员健康的影响.方法 以整群随机抽样法,选取西安铁路局动车组机车司机103名、列车员48名作为观察组.另取电力机车司机104名、列车员51名;内燃机车司机100名、列车员54名作为对照组.采用问卷调查的方式对观察组和对照组进行一般情况、健康情况及认知情况调查.测量观察组和对照组人群工作场所中电磁场强度.检测观察组和对照组的血压、心电图、血常规、空腹血糖、肝肾功能等.结果 观察组与对照组机车乘务员在自觉疲劳、晨起有怠倦感、上午会有头晕、头痛、犯困等感觉方面及对工作环境中电磁辐射认知方面差异有统计学意义(P＜0.05).动车组机车司机室、车厢内、车厢连接处和电力机车司机室、车厢连接处存在电磁辐射,各检测点电场强度、磁感应强度测量结果均符合职业卫生相关要求.内燃机车内未检测出电场强度、磁感应强度.动车组司机、电力机车司机与内燃机车司机比较,血小板计数升高、淋巴细胞计数降低、谷氨酰胺转移酶水平升高、尿酸水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).动车组列车员与内燃机车列车员、电力机车列车员比较,血小板计数升高、淋巴细胞计数降低、碱性磷酸酶水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 本次调查发现动车组列车机车乘务员神经衰弱综合征症状明显,个别生化指标有微小波动,但动车组列车电磁辐射对机车乘务员健康的影响还需进一步研究.