目的 探究自发性急性脑出血(ACH)患者血浆可溶性CD163(sCD163)/可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(sTWEAK)比值与预后的关系.方法 纳入ACH患者90例作为病例组,根据格拉斯哥预后评分将病例组分为预后不良组(38例)和预后良好组(52例);另选取同期体检健康者45例为对照组.酶联免疫吸附试验检测血浆sCD163、sTWEAK水平并计算sCD163/sTWEAK比值.分析血浆sCD163、sTWEAK水平及sCD163/sTWEAK比值与临床资料的相关性;Logistic回归分析ACH患者预后不良的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析sCD163/sTWEAK比值对ACH患者预后不良的预测价值.结果 病例组血浆sCD163、sTWEAK水平及sCD163/sTWEAK比值均显著高于对照组;预后良好组上述指标均低于预后不良组(P＜0.05).预后良好组血肿体积、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、高血压及幕下出血比例均低于预后不良组,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于预后不良组(P＜0.05).相关性分析表明,血浆sCD163、sTWEAK水平及sCD163/sTWEAK比值与出血部位、血肿体积、NIHSS评分、白细胞计数、血小板计数、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)呈正相关(P＜0.05).Logistic回归分析显示,sCD163/sTWEAK比值、出血部位、血肿体积、NIHSS评分为ACH患者预后不良的影响因素(P＜0.05).ROC曲线结果表明,sCD163/sTWEAK比值评估ACH患者预后不良的AUC为0.850,敏感度和特异度分别为86.84%和69.23%.结论 sCD163/sTWEAK比值在ACH患者血浆中水平较高,并与预后不良有关,该值对此类患者的预后有一定预测价值.

目的:研究肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)与它的受体成纤维细胞生长诱导因子14(Fn14)及其下游的细胞因子单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)、调节正常T细胞表达和分泌的活性因子(RANTES)、Ro52在皮肌炎(DM)中的表达.方法:免疫组化检测皮肌炎病人与健康对照组皮肤和肌肉中TWEAK、Fn14、MCP-1、RANTES、IP-10、Ro52的表达水平,并进行半定量分析.结果:免疫组化结果显示,皮肌炎患者皮肤中各蛋白的表达水平高于健康对照组;皮肌炎患者肌肉中各蛋白的表达水平高于健康对照组.结论:TWEAK/Fn14信号轴可能参与皮肌炎的发病机制.

目的 利用蛋白芯片筛选高血压脑梗死患者血浆中可能用于脑梗死早期诊断、预后判断的血浆标志物.方法 采用生物素标记抗体芯片技术,对12名高血压患者及12名由高血压引起的脑梗死(高血压脑梗死)患者进行血浆蛋白质组学的检测.采用芯片分析软件提取数据,获得的数据采用AAH-BLG-1000的数据分析软件作统计分析.结果 高血压脑梗死组和高血压对照组相比,生长因子M-CSF、Progranulin、PD-ECGF、VEGF-C,细胞因子TRANCE、TWEAK,具有抗氧化活性的结合珠蛋白Haptoglobin(HP)、过氧化物酶PRDX6,具有信号转导作用的TNF受体超家族成员10C(TNFRSF10C)、DKK类似蛋白1(Soggy-1)、Tool样受体3(TLR3)、Fibrinogen、IL-17RD,趋化因子系统的CCR4、CXCL16、白细胞衍生趋化因子(LECT2),簇集蛋白Clusterin,基质金属蛋白酶MMP-19、MMP-20,以及巢蛋白(Nidogen-1)共20个血浆蛋白差异表达(P＜0.05,Foldchange绝对值＞1.5).结论 蛋白质芯片共检测出20个潜在的高血压脑梗死血浆标志物,这些血浆蛋白参与了脑梗死发生发展过程中的多条路径,如细胞趋化、黏附、迁移、增殖,血栓形成和血管再生,以及介导炎症和免疫反应.蛋白芯片有助于早期鉴别脑卒中类型,诊断脑梗死及判断患者的预后,指导更有效更准确的临床治疗.

目的 探讨肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子 (TWEAK) 及其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14 (Fn14) 对肝星状细胞迁徙的影响及其机制.方法 人源性肝星状细胞株LX-2分别予细胞因子TWEAK处理、特异性下调Fn14 (Fn14 siRNA) 后加入TWEAK处理,Transwell小室检测肝星状细胞迁徙;real-time PCR及Western Blot检测基质金属蛋白酶 (MMP) 9的表达量.计量资料两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 TWEAK处理组较正常LX-2细胞迁徙能力增强[ (105±8) 个vs (164±17) 个,t=5.287,P＜0.01];下调Fn14后加入TWEAK处理的LX-2细胞迁徙数目较阴性对照组减少[ (122±9) 个vs (58±7) 个,t=9.836,P＜0.01];TWEAK处理LX-2细胞后,MMP9的mRNA及蛋白水平增加 (P值均＜0.05),且存在时间依赖性;下调Fn14并加入TWEAK后LX-2细胞MMP9的mRNA及蛋白表达量减少,与单纯TWEAK处理的LX-2细胞组比较,差异有统计学意义 (t=5.358,P＜0.01).结论 TWEAK可通过其受体Fn14上调MMP9促进肝星状细胞迁徙,阻断该通路可能成为治疗肝纤维化的一个潜在的新靶点.

目的 探究隐丹参酮对哮喘小鼠气道重塑模型的治疗作用,以及其机制是否与TWEAK/Fn14和TGF-β1/Smads信号通路相关.方法 选取♀BALB/c小鼠40只,分为5组(每组8只),分别为control组、OVA模型组、隐丹参酮低、高剂量组(20、40 mg·kg-1)、地塞米松阳性对照组(1 mg·kg-1).HE及PAS染色法观察小鼠肺组织的炎症情况及杯状细胞变化;Diff-Quick染色法对小鼠BALF中各类细胞计数;ELISA法检测小鼠BALF中炎性及促炎细胞因子的含量;Western blot检测肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1、Smad2/3、Smad4表达;免疫组化法检测小鼠肺组织中TWEAK、TGF-β1的表达水平.结果 隐丹参酮能减少OVA诱导的炎症细胞渗出及杯状细胞增生;隐丹参酮抑制哮喘小鼠BALF中总细胞及EOS、NEU、LYM的生成,并降低促炎细胞因子的水平;Western blot结果显示,隐丹参酮抑制TWEAK、Fn14、TGF-β1、Smad2/3、Smad4的蛋白表达;免疫组化结果显示,隐丹参酮可减少肺组织中TWEAK、TGF-β1蛋白表达.结论隐丹参酮通过TWEAK/Fn14和TGF-β1/Smads信号通路改善OVA诱导的小鼠气道炎症.

皮肤创伤愈合由炎症、增生和重塑等几个连续且相互重叠的阶段组成,涉及多种细胞类型、细胞因子与细胞外基质间复杂的相互作用.肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导剂(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)通过与其受体成纤维细胞生长诱导因子14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)结合促进炎症反应、调控细胞增殖、迁移、分化和血管形成,从而在皮肤创伤愈合中发挥作用.本文旨在回顾皮肤创伤愈合和TWEAK/Fn14信号通路方面的研究进展,探索TWEAK/Fn14信号在急性皮肤创伤愈合中的重要作用.

TWEAK是一种多功能细胞因子,参与调控多种细胞增殖、迁移、分化、凋亡以及血管生成等.TWEAK通过与受体Fn14 结合形式与多种细胞内信号通路联系密切,并参与调节各种生理过程.TWEAK主要通过Fn14 -TRAF2 -NF-κB 依赖性信号传导下调PGC-1α表达水平诱导心功能不全.或维持PGC-1α表达水平预防心脏功能障碍.所以选择性靶向干预Fn14-TRAF2-NF-κB依赖性信号传导途径或调节PGC-1α水平可以作为心肌病和心力衰竭的新型治疗策略研究方向.本文将近年来关于TWEAK/Fn14 信号通路的相关研究进行总结整理,探讨TWEAK/Fn14信号通路与心肌能量代谢异常的关系,以期对完善临床慢性心力衰竭的诊断、治疗和预后策略有所帮助.

目的 观察丹参通络解毒汤对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)/成纤维细胞生长因子诱导14(Fn14)通路的影响,探讨其对小鼠肺纤维化的影响及机制.方法 取C57B/L小鼠50只随机分为空白组、模型组、1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]组、丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+TWEAK/Fn14抑制剂PDL192组.模型组、1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠气管内注射博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型.造模成功后,空白组和模型组小鼠每日灌胃生理盐水10 mL·kg-1;1,25(OH)2D3组小鼠每日经腹腔注射1,25(OH)2D35μg·kg-1;丹参通络解毒汤组小鼠每日灌胃丹参通络解毒汤汤剂0.039 mL·g-1(按成人60 kg体质量计算,相当于生药15.65 g·kg-1);丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠每日灌胃丹参通络解毒汤汤剂0.039 mL·g-1,并经腹腔注射PDL1923 mg·kg-1;各组小鼠均每日给药1次,连续给药28 d;末次给药后12 h测体质量,然后经腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉、固定,采集肺支气管肺泡灌洗液(BALF),开胸取肺组织,测肺质量,计算小鼠肺系数.采用酶标仪检测5组小鼠BALF中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平.苏木精-伊红染色和Masson三色法染色法观察5组小鼠肺组织病理学变化.实时荧光定量聚合酶链式反应法检测5组小鼠肺组织TWEAK、Fn14、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达.Western blot法检测5组小鼠肺组织炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及肺组织TWEAK/Fn14通路因子TWEAK、Fn14、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、母亲信号蛋白同源物3(Smad3)、磷酸化母亲信号蛋白同源物3(p-Smad3)、信号传导和转录激活因子3(STAT3)、酪氨酸磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白相对表达量.结果 空白组小鼠肺组织结构正常,无结缔组织增生,无明显胶原沉积;模型组小鼠肺组织基本形态结构被破坏,支气管结构较为模糊,部分支气管上皮细胞坏死,间质周围炎症细胞浸润,肺组织有大量的胶原沉积;1,25(OH)2D3组小鼠肺组织基本形态结构被破坏,上皮细胞坏死,坏死区域肺泡腔较为狭窄,内含大量细胞碎片和炎症细胞,部分区域可见成纤维细胞增生,胶原沉积明显减少;丹参通络解毒汤组小鼠部分区域肺组织结构被破坏,支气管结构较为完整清晰,部分肺泡结构模糊,肺泡腔狭窄,间质及周围未见水肿或炎症细胞浸润,胶原沉积明显减少;丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织结构较为正常,各级支气管结构完整清晰,肺泡结构较为清晰,肺泡腔内可见少量炎症细胞散在分布,间质及周围未见水肿或炎症细胞浸润,胶原沉积明显减少.空白组、模型组、1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠体质量比较差异均无统计学意义(P>0.05).与空白组比较,模型组、1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组小鼠肺系数显著增高(P<0.05);与模型组比较,丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺系数显著降低(P<0.05);与1,25(OH)2D3组比较,丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺系数显著降低(P<0.05);1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺系数与丹参通络解毒汤组比较差异无统计学意义(P>0.05).与空白组比较,模型组、1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组小鼠BALF中IL-1β、TNF-α、IL-4水平显著升高(P<0.05),丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠BALF中IL-1β水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠BALF中IL-1β、TNF-α、IL-4水平显著降低(P<0.05);与1,25(OH)2D3组比较,丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠BALF中IL-1β、IL-4水平显著降低(P<0.05);与丹参通络解毒汤组比较,丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠BALF中IL-1β、IL-4水平显著降低(P<0.05).与空白组比较,模型组小鼠肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1 mRNA相对表达量及1,25(OH)2D3组小鼠肺组织TWEAK mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,丹参通络解毒汤组小鼠肺组织Fn14 mRNA相对表达量及丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05).1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1 mRNA相对表达量各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).与空白组比较,模型组小鼠肺组织TNF-α、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1蛋白相对表达量及1,25(OH)2D3组、丹参通络解毒汤组小鼠肺组织TNF-α、IL-1β蛋白相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织TNF-α、IL-1β蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);与1,25(OH)2D3组比较,丹参通络解毒汤组和丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织IL-1β蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);与丹参通络解毒汤组比较,丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织IL-1β 蛋白相对表达量显著降低(P<0.05).与空白组比较,模型组小鼠肺组织中TWEAK、Fn14、TGF-β1、α-SMA、p-Smad3、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),1,25(OH)2D3组小鼠肺组织中TWEAK、TGF-β1、α-SMA、p-Smad3、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织中TWEAK、α-SMA、p-Smad3、STAT3蛋白相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,1,25(OH)2D3组小鼠肺组织p-Smad3蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织TWEAK、Fn14、TGF-β1、α-SMA、p-Smad3、STAT3蛋白相对表达量显著降低(P<0.05).丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织Fn14、TGF-β1、α-SMA、Smad3、p-Smad3、p-STAT3蛋白相对表达量及丹参通络解毒汤小鼠肺组织TWEAK、STAT3蛋白相对表达量与1,25(OH)2D3组比较差异无统计学意义(P>0.05);丹参通络解毒汤+PDL192组小鼠肺组织中TWEAK、STAT3蛋白相对表达量与1,25(OH)2D3组比较显著降低(P<0.05).结论 丹参通络解毒汤能够减轻博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制肺组织炎症和TWEAK/Fn14信号通路有关.

目的:探讨miR-429是否通过靶向肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)减轻免疫球蛋白A肾病(IgAN)肾病炎症反应.方法:采用IgA-人肾小球系膜细胞(HMC)条件培养基培养HK2细胞,根据脂质体转染说明转染miR-429 mimic和阴性对照.采用qRT-PCR检测miR-429、TWEAK、MCP-1、IL-6和RANTES mRNA表达;ELISA检测细胞MCP-1、IL-6和RANTES的浓度;双荧光素酶报告实验验证miR-429与TWEAK之间的靶向关系;Western blot检测TWEAK、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达.结果:与对照培养基培养的HK2细胞相比,在IgA-HMC条件培养基培养的HK2细胞miR-429表达降低(P<0.05),双荧光素酶报告实验证实TWEAK是miR-429的下游靶向调控分子;转染miR-429 mimic后TWEAK、MCP-1、IL-6、RANTES mRNA表达,MCP-1、IL-6、RANTES含量及TWEAK、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα 蛋白表达均降低(P<0.05).结论:miR-429过表达可能通过阻止TWAKE介导的NF-κB途径活化来减少IgAN中炎性细胞因子的释放,miR-429可能是IgAN一种新的治疗靶点.