目的:评估羧化多糖可吸收止血纱(其编号为NWL-K)对兔肝、脾创面的止血效果。方法:60只新西兰兔按随机数字表法分为两组，每组30只，分别建立肝和脾创面出血模型；两组模型再根据使用止血材料的品种，分成普通纱布组、速即纱组和NWL-K组，每组10只。采用造模出血量和切除肝组织重量评估模型稳定性。脾脏出血模型按压3 min后每隔(30±5)s以及肝脏出血模型按压30 s后每隔(20±5)s分析各组止血时间和止血评分，观察创口与纱布的黏合情况。结果:各肝脏、脾模型组造模时出血量比较，差异无统计学意义( P>0.05)，造模时肝脏组织切除重量比较，差异均无统计学意义( P>0.05)，说明模型造模稳定，对之后的止血实验不产生影响。在脾脏创面出血模型止血时间上，NWL-K组[210(180，248)s]、速即纱组[255(233，300)s]分别与普通纱布组[465(383，660)s]比较差异有统计学意义( P<0.05)，NWL-K组相较于速即纱组止血时间更短( P<0.05)。在肝脏创面出血模型止血时间上，NWL-K组[70(70，95)s]、速即纱组[90(85，110)s]分别与普通纱布组[250(225，290)s]比较差异有统计学意义( P<0.05)。脾脏模型各观察时间点速即纱组、NWL-K组止血评分下降快于普通纱布组差异有统计学意义( P<0.05)，180 s时NWL-K组和速即纱组比较，差异有统计学意义( P<0.05)。肝脏模型50，70，90 s时速即纱组、NWL-K组止血评分下降快于普通纱布组差异有统计学意义( P<0.05)。30，110，130 s时普通纱布组与NWL-K组比较，差异有统计学意义( P<0.05)。NWL-K吸水性和周围组织黏合性均优于普通纱布和速即纱。 结论:对于肝、脾出血创面，与其他类型纱布比较，应用NWL-K能有效缩短止血时间，减少出血量；NWL-K吸水性强，与创口黏合稳固。

为挖掘古树大理茶优势内生真菌间座壳属菌株Diaporthe tectonigena的化学成分,该研究采用硅胶、大孔吸附树脂Diaion HP20、葡聚糖凝胶LH-20 等柱层析方法,对该菌株的大米固态发酵提取物进行分离纯化,并通过HRMS、1H-NMR、13 C-NMR、HSQC、HMBC和COSY等波谱分析,对所得化合物进行结构鉴定.结果表明:(1)从该菌株大米固态发酵提取物中分离得到 4 个化合物,其中新化合物 1 鉴定为四氢-β-咔啉二酮哌嗪类生物碱,命名为tectonicgenazine A.(2)3 个已知化合物分别鉴定为trans-cyclo-(D-tryptophanyl-L-tyrosyl)(2)、1H-吲哚-3-羧酸-2,3-二羟基丙酯(3)和N-羟乙基-2-乙酰基吡咯(4),其中化合物 3 为首次从自然界中分离所得.

采用薄膜分散-硫酸铵梯度法制备了紫杉醇-阿霉素复方脂质体,并以N-十二烷基-O-羟乙基两亲性壳聚糖衍生物锚定修饰,透射电镜观察脂质体形态,动态光散射法测定粒径及表面电荷,数字酸度计及渗透压测定仪检测其pH及渗透压,HPLC法测定并计算两种药物包封率、渗漏稳定性、血浆稳定性及体外释放行为.所制备的多糖锚定修饰复方脂质体呈球形,粒径分布均匀,在150 nm左右,pH为5.3～6.1,渗透压为820～870 mOsm/kg,对两种药物皆具有较高的包封率(均大于90％),且和非多糖锚定修饰脂质体相比,药物泄漏率显著降低,血浆稳定性显著提高,缓释能力增强,且在肿瘤模拟pH环境比血液pH环境具有更快的释药速度.本研究制备的多糖修饰复方脂质体具有优良的药物负载、稳定性及缓释能力,在临床联合化疗具有一定的应用前景.

背景:壳聚糖水凝胶修复软骨缺损生物相容性好,但目前尚不明确壳聚糖水凝胶在软骨缺损修复过程中的降解性能变化.目的:探讨壳聚糖水凝胶在软骨缺损修复过程中的降解性能变化.方法:采用羟乙基脱乙酰壳多糖(glycol chitosan,GC)与二醛基聚乙二醇(OHC-PEG-CHO)通过席夫碱反应交联,形成可注射水凝胶.考察不同浓度的水凝胶(GC/OHC-PEG-CHO:2 wt％/2 wt％和2 wt％/1 wt％)在体外降解中的pH值、质量和体积变化.结果:水凝胶在降解过程中,pH值基本维持在7左右;水凝胶(GC/OHC-PEG-CHO:2 wt％/1 wt％)在6周时全部降解,而水凝胶(GC/OHC-PEG-CHO:2 wt％/2 wt％)在8周时质量为初始质量的44.30％±5.51％,体积为初始体积的50.64％±9.81％,该降解速度与软骨修复速率一致.选取水凝胶(GC/OHC-PEG-CHO:2 wt％/2 wt％)植入新西兰大白兔皮下,组织学切片分析结果表明,3周时水凝胶明显变小,但无明显的炎症反应.结论:初步降解实验表明GC/OHC-PEG-CHO水凝胶可用于软骨缺损修复.

目的 制备脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)与温敏氯化壳聚糖(chitosan chloride,CSCl)凝胶复合物,研究其生物相容性及对大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复的可行性.方法 取SPF级6周龄雄性SD大鼠皮下脂肪组织,采用酶原消化并差速贴壁法制备ADSCs.将CSC1、β-甘油磷酸钠和羟乙基纤维素按8∶2∶2.5比例混合,制作温敏CSCl凝胶;采用Live/Dead染色和细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法观察ADSCs在其中的存活和增殖情况.取SPF级8周龄雄性SD大鼠72只,采用开水接触烫伤法制备深Ⅱ度烫伤创面模型,随机分为3组,每组24只,A组为空白对照组,B组用温敏CSC1凝胶涂抹创面,C组用ADSCs/温敏CSCl凝胶复合物涂抹创面.术后3、7、14、21 d观察创面闭合情况并计算创面闭合率;术后7d行HE染色观察炎性细胞数,21 d行HE染色观察新生表皮厚度;同时于术后7d行CD31免疫组织化学染色观察新生微血管情况.结果 CSC1有温度敏感性,4℃为液态,37℃时成凝胶.Live/Dead染色和CCK-8法结果 显示ADSCs在温敏CSCl凝胶中存活并持续增殖.大体观察示,术后各时间点C组创面闭合率均高于A、B组(P＜0.05).HE染色示,术后7d,3组大鼠创面修复进入纤维增生期,各组可见胶原沉积,真皮层可见炎性细胞浸润,C组炎性细胞数显著小于A、B组,B组小于A组(P＜0.01).术后21d,B、C组新生上皮及真皮层纤维结缔组织排列整齐,可见成纤维细胞及新生毛细血管;A组亦可见新生表皮覆盖,但真皮层纤维结缔组织排列较紊乱,见零星毛细血管.C组新生表皮厚度显著大于A、B组,B组大于A组(P＜0.01).术后7d,CD31免疫组织化学染色示各组均可见新生微血管,C组大鼠创面新生微血管数显著高于A、B组,B组高于A组(P＜0.05).结论 ADSCs/温敏CSC1凝胶复合物具有良好的组织相容性,并且能加快大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复.

目的:制备负载2-甲基-α-卡波林-3-甲酰胺(2MAC3C)的两亲性壳聚糖纳米胶束,以改善其水溶性,并研究该载药胶束对大鼠心肌细胞(H9c2)缺氧/复氧(H/R)损伤活性的影响.方法:以天然高分子材料壳聚糖为骨架,衍生化为羟乙基壳聚糖.辛酸偶联物(OHC);采用1H.NMR、红外分光光度法确证OHC的结构;透析法制备2MAC3C-OHC纳米胶束;芘荧光光谱法测定纳米胶束的临界胶束浓度(CMC);透射电镜观察纳米胶柬形态;粒度测定仪考察其粒径及电位;离心法考察制剂的包封率及载药量;运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察2MAC3C-OHC对H9c2心肌细胞毒性及H/R损伤活性的影响.结果:2MAC3C-OHC的CMC为0.250 g/L;形态为球形;平均粒径为(227.7±3.0)nm;Zeta电位为(9.84±0.72)mV;包封率为(68.00±3.67)％;载药量为(19.32±0.11)％;与2MAC3C溶液组相比.2MAC3C.OHC对H9c2心肌细胞的毒性减弱;2MAC3C.OHC能显著提高损伤后H9c2心肌细胞存活率(P＜0.001).结论:所制备的2MAC3C.OHC粒径小,载药量高,提高了2MAC3C对H/R损伤后H9c2心肌细胞存活率,同时改善了较高浓度时2MAC3C对H9c2心肌细胞毒性.研究结果对2MAC3C-OHC在缺氧/复氧(H/R)损伤或心肌缺血再灌注损伤(MIRI)治疗中的应用奠定了基础.

目的:制备羟乙基壳聚糖(glycol-chitosan,GC)基单/双网络水凝胶,比较人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在水凝胶内三维培养增殖和分化情况,探究GC基单/双网络水凝胶及其理化性能对hDPCs生物学行为的影响.方法:制备不同组成配比的GC基单网络水凝胶(GC31)和GC基双网络水凝胶(DN3131、DN6262).用双联注射器在恒力下推注GC基单/双网络水凝胶,测定其可注射性能.用失重法测定水凝胶的体外耐降解性能,并用万能力学试验机测定材料断裂应力.在水凝胶内包封hDPCs进行三维培养,用CCK-8法和Calcein-AM/PI活死细胞染色法测定hDPCs的增殖情况.成牙本质向诱导培养14 d后,用实时荧光定量PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,RT-PCR)测定各组成牙本质向分化相关基因牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白(dentin matrix protein-1,DMP-1)和矿化相关基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达变化,用Von Kossa染色法观察矿化结节的形成.结果:3组水凝胶均具有良好的可注射性能,GC31推注时间最短,DN6262推注时间较DN3131长(P＜0.05).GC31水凝胶在体外降解速率高于双网络水凝胶组(P＜0.05),DN3131和DN6262的降解速率差异无统计学意义(P＞0.05).GC31断裂应力为1.10 kPa,DN3131和DN6262断裂应力分别为7.33 kPa和43.30 kPa,双网络水凝胶的抗压缩性能较单网络水凝胶有明显增强.hDPCs在3种水凝胶内均处于良好的增殖状态,GC31组的增殖能力高于DN3131和DN6262组(P＜0.05),DN3131组的增殖能力高于DN6262组(P＜0.05).在成牙本质向诱导培养14 d后,DN3131和DN6262组的DSPP、DMP-1、ALP表达水平较GC31组升高(P＜0.05),DN3131和DN6262组的DMP-1和ALP表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).DN3131和DN6262组体外培养2周后均可见明显生成棕黑色的团块状矿化结节,而GC31组仅观察到浅棕色钙沉积染色,为零星颗粒状散在分布.结论:不同组成配比的GC基单/双网络水凝胶均满足可注射需求,GC单网络水凝胶力学性能较低,hDPCs在其中表现出更好的增殖能力;而双网络水凝胶具备更好的耐降解性能和更高的力学性能,hDPCs在其中表现出更好的成牙本质向分化潜力和矿化潜力.

目的:制备复方双氯芬酸钠成膜凝胶并建立其质量控制方法.方法:选择乙基纤维素、尤特奇E100、壳聚糖盐酸盐、羟丙基纤维素为成膜材料,以柠檬酸三乙酯为增塑剂,乙醇和水为溶剂,制备复方双氯芬酸钠成膜凝胶.考察该成膜凝胶的成膜性和可揭性、成膜时间、防水性、释放度等;采用HPLC法同时测定双氯芬酸钠和葡萄糖酸氯己定的含量.结果:复方双氯芬酸钠成膜凝胶成膜性良好,可揭性良好,成膜快,防水性良好,释放度符合规定.结论:该制剂制备工艺简单、质量可控.建立的HPLC法专属性、重复性、稳定性均较好,回收率高,可用于复方双氯芬酸钠成膜凝胶的质量控制.

在临床手术过程中,安全有效的止血方式非常重要,优良的止血材料可以保障患者的生命安全,提高手术效率[1].可吸收止血材料作为一种可被人体吸收的医疗器械产品,主要适用于手术过程中无法使用常规止血技术的情况,其通过促进局部伤口的血液凝固来实现止血[2].常见的止血产品依据其材质可以分为纤维素类、胶原蛋白/明胶类、淀粉类、壳聚糖类、纤维蛋白类.材料不同,止血机制也有差异.其中,纤维素类止血产品在市场中占有的比重最大[3].纤维素是 D-葡萄糖残基通过 β-1,4 连接形成的多糖聚合物.纤维素链的线性结构能够满足各种生化需求.纤维素对人体组织具有天然的生物相容性,可以改性成多种形式,如氧化纤维素、氧化再生纤维素、醋酸纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素等,它们的理化性质各有差异.纤维素在其改性后能够表现出优秀的生物效应.

目的 比较不同材质、不同形态可吸收止血材料的体外抑菌和止血效果差异.方法 选取9款市售的可吸收止血材料,根据国家医保医用耗材分类与代码目录,先按形态分为纱布类、非织布类及纤丝类;同形态下再按材质分为再生氧化纤维素(Oxidized Regenerated Cellulose,ORC)类、羧甲基纤维素(Carboxymethyl Cellulose,CMC)类、羟乙基纤维素(Hydroxyethyl Cellulose,HEC)类和壳聚糖(Chitosan,CTS)类.采用抑菌环实验评价止血材料的抑菌性,体外倒置凝血和体外动态凝血实验评价止血材料的凝血功能.计算体外凝血指数(Blood Clotting Index,BCI),BCI越低,表明凝血效果越好.结果 仅ORC类材料形成了抑菌环,直径均>7 mm.与纱布类材料相比,纤丝类和非织布类材料产生了更明显的凝血现象;ORC材质的纱布产生的凝血现象较CMC和HEC材质更显著.纤丝类材料的BCI显著低于纱布类和非织布类(P<0.05);纱布类和非织布类材料中,ORC材质的BCI显著低于CMC、HEC和CTS材质(P<0.05).结论 不同材质的止血材料中,ORC类具有抑菌效果.不同形态材料的止血效果不同,纤丝类的止血效果优于非织布类和纱布类;非织布类和纱布类材料中,不同材质的止血效果也有显著差异,相同形态下ORC材质的止血效果优于CMC、HEC和CTS材质.本研究使用的实验方法为建立可吸收止血材料评价体系以及行业标准提供了一定的基础.