采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和制备型高效液相色谱法,从八角莲乙醇提取物中分离得到5个双黄酮类化合物.通过波谱数据分析(MS、UV、IR、NMR)与电子圆二色谱(ECD)技术,分别鉴定为(+)-八角莲双黄酮H(1a)、(-)-八角莲双黄酮H(1b)、(+)-八角莲双黄酮Ⅰ(2a)、(-)-八角莲双黄酮Ⅰ(2b)、podoverine F(3),其中,1a与1b、2a与2b为2对新的双黄酮对应异构体.DPPH自由基清除实验结果显示,化合物2、2a、2b对DPPH自由基具有较强的清除能力,IC50值分别为8.87、10.18、11.35 μmol/L,且强于阳性药trolox(14.95 μmol/L).化合物2、2a、2b对DPPH自由基的清除能力分别强于化合物1、1a、1b,进一步的构效关系研究表明,B环上邻二酚羟基是黄酮类化合物具有DPPH自由基清除活性的必需结构基团.

回顾马兜铃酸、雷公藤、八角莲、槟榔、仙灵骨葆胶囊、鱼腥草注射剂、双黄连注射剂等引发的中药安全性事件,旨在探讨影响中药安全性的危险因素,对中药毒性成分、生产工艺、储藏条件、体质差异、给药剂量、风险管控等方面存在的安全性问题进行探讨,提出加强源头控制以确保质量合格、探明配伍机制以增效减毒、提高生产标准以推进质量统一、完善法规政策以加强管控、健全安全性评价体系以确保质量达标等建议,以期为促进临床合理用药、减少中药安全性事件提供帮助.

目的 研究八角莲Dysosma versipellis根茎的化学成分,并采用网络药理学方法对其抗癌活性进行分析.方法 运用硅胶柱层析色谱、凝胶色谱、ODS柱色谱等分离技术,现代波谱技术(NMR、MS、IR、UV)对八角莲的化学成分进行分离纯化及结构鉴定,采用GO、KEGG等方法对分离所得的化学成分可能的作用靶点、通路等信息进行富集分析.结果 分离得到了14个化合物,鉴定为:苦鬼臼脂毒酮(1)、异苦鬼臼酮(2)、苦鬼臼素-4-O-β-D-葡萄糖苷(3)、鬼臼毒酮(4)、苦鬼臼毒素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、苦鬼臼毒素(6)、4'-去甲基去氢鬼臼毒素(7)、4'-去甲去氧鬼臼毒素(8)、4'-去甲基鬼臼毒酮(9)、山荷叶素(10)、4'-去甲基鬼臼毒素(11)、山荷叶-4-O-β-D-葡萄糖苷(12)、鬼臼毒素-4-O-β-D-葡萄糖苷(13)、去氢鬼臼毒素(14).网络药理学研究结果表明上述成分可能通过对激素响应、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、胰岛素样生长因子受体信号通路等生物学过程,作用于AKT1、EGFR、HSP90AA1、MAPK3、MTOR等关键靶点,癌症通路、前列腺癌通路、脂质与动脉粥样硬化通路等发挥抗癌活性.结论 其中化合物1、2、5、7～9和14为首次从八角莲中分离得到;八角莲中的多种成分可以通过多个靶点、多个通路发挥抗癌作用.

目的:建立南方山荷叶及其八角莲的指纹图谱并确定特征峰.方法:对南方山荷叶及其混淆品进行薄层鉴别及含量测定并建立指纹图谱.结果:10批药材中湖北产南方山荷叶含量最高;通过指纹图谱确定了6个特征峰分别为:苦鬼臼毒素、苦鬼臼毒素葡萄糖苷、槲皮素、鬼臼毒素、3-O-甲基槲皮素、山奈酚.结论:该方法简便、专属性强、重现性好,可用于南方山荷叶的质量控制.

为了明确黄耆属裂萼亚属内部类群的关系,该研究采用光学显微镜和扫描电镜,观察了黄耆属裂萼亚属6个组6种植物的叶表皮特征.结果表明:(1)在光学显微镜下,裂萼亚属6种植物的表皮毛密度、长度、臂长比以及气孔频率都存在较大差异:除莲山黄耆和地八角上表皮无毛外,其他种上下表皮都有毛分布并且下表皮毛密度较大;表皮毛臂长比在1.22～2.15之间;表皮毛的长度为104.7～902.0 μm,同一个种的同一叶片上表皮毛长度差异在200～400 μm之间,但上下表皮毛长度没有明显差别,其中短序组地八角的表皮毛长度最短(195.5 μm),剑叶组鸡峰山黄耆的表皮毛长度最长(781.6 μm).(2)在光学显微镜下,裂萼亚属6种植物的表皮细胞形状和垂周壁式样也各不相同,其中灰叶黄耆和地八角垂周壁平直,莲山黄耆和鸡峰山黄耆为明显的波状,而斜茎黄耆和糙叶黄耆的垂周壁介于两者之间,相对应的表皮细胞形状分别为:多边形、不规则形和近多边形,这些特征可以作为物种鉴别的依据.(3)扫描电镜下,裂萼亚属6种植物的微形态特征基本一致,表皮毛均呈圆柱状,表面具有棱状条纹或乳头状突起,其中地八角的棱状条纹最为明显,其他各种之间的毛表面特征差异不明显;表皮细胞的蜡质层纹饰均为薄片状,气孔器外拱盖边缘平滑或微波状,其中地八角的气孔器周围角质层有明显的“T”型加厚.(4)比较不同环境下 6种植物的气孔频率和密度发现,采自水边的地八角气孔频率最大,且上下表皮气孔频率一致,而采自黄土高原干旱地区鸡峰山黄耆的气孔频率却最小,与前人研究结果不一致.

目的:建立可同时测定八角莲根中6种主要毒性成分(鬼臼毒素、4’-去甲鬼臼毒素、鬼臼苦素、鬼臼毒素-4-O-葡萄糖苷、鬼臼毒酮、去氧鬼臼毒素)含量的UPLC-MS/MS法,并应用于大鼠体内药动学研究.方法:采用Waters Acquity UPLC CORTECS C18(1.6 μm,50 mm×2.1 mm)色谱柱,乙腈-5 mmol/L醋酸铵水作为色谱分离流动相,以0.4 mL/min的流速进行梯度洗脱.采用电喷雾离子源(ESI)串联Waters Xevo TQ质谱仪检测,多反应离子监测(MRM)模式进行定量分析.大鼠按0.3 g/kg给药剂量灌胃八角莲提取物后,于0、0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、12、24、36、48 h后取尾尖血,运用DAS 2.2.1软件和非房室模型分析法分析大鼠体内6种分析物的药代动力学参数.结果:每克八角莲根茎干粉中含有鬼臼毒素-4-O-葡萄糖苷17.62 mg、4’-去甲鬼臼毒素14.53 mg、鬼臼苦素6.15 mg、鬼臼毒素91.39 mg、鬼臼毒酮12.30 mg、去氧鬼臼毒素0.03 mg.上述6种物质在0.1～9.7 ng/mL内线性关系良好(r＞0.99).日内和日间精密度和准确度均小于15％,提取回收率高于70.0％,均符合药代动力方法学分析要求.样品在短期、长期和3个冻融循环条件下非常稳定.大鼠灌胃八角莲提取物后,6种待测物在血液中的浓度水平迅速升高,约在0.5 h达到峰值,说明药物可直接在胃部迅速吸收,但药物的分布和代谢过程非常缓慢.结论:本研究建立的UPLC-MS/MS方法操作简便、灵敏、快速、专属性强,可成功甩于生物样品中八角莲根中的6种高毒性化合物的定量分析.

目的 通过分析5种鬼臼类中药材八角莲、南方山荷叶、桃儿七、小八角莲和六角莲的ITS2(internal transcribed spacer2)条形码序列,探讨鬼臼类药材鉴定新方法.方法 共收集26份样品,以ITS2作为条形码序列,对各鬼臼类中药材提取基因组DNA,PCR扩增ITS2序列并进行双向测序.所得序列经CodonCode Aligner拼接并剪切后,采用MEGA5.1软件进行序列对比分析,计算遗传距离,分析比较种内、种间序列差异,并构建系统邻接树.结果 5种药材种间存在明显差异,各个种的种内最大遗传距离均小于种间最小遗传距离;构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起,表现出单系性.结论 ITS2序列作为DNA条形码可较好地用于鬼臼类中药材DNA条形码的鉴定研究.

目的 研究分心木Diaphragma Juglandis Fructus中的木脂素类化学成分及其抗人免疫缺陷病毒(HIV)活性.方法 运用柱色谱方法对分心木的95％甲醇提取物进行分离纯化,结合波谱技术与理化常数鉴定结构,通过LEDGF/p75-IN蛋白复合体ELISA筛选模型对化合物进行抗HIV活性筛选.结果 从分心木95％甲醇提取物中分离得到16个木脂素类化合物,分别鉴定为(-)-丁香脂素(1)、(+)-松脂素(2)、(+)-(7R,7'R,7"S,7"'S,8S,8'S,8"S,8"')-4",4"'-dihydroxy-3,3',3",3"',5,5'-hexamethoxy-7,9';7',9-diepoxy-4,8";4',8"'-bisoxy-8,'-dineolignan-7",7"',9",9"'-tetraol (3)、2,3-二羟基-1-(4'-羟基-3'-甲氧基苯基)-丙-1-酮(4)、3-羟基-1-(4'-羟基-3'-甲氧基苯基)-丙-1-酮(5)、3',4'-二甲氧基苯丙二醇(6)、(2S)-3,3-二-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-丙-1,2-二醇(7)、3-羟基-1-(4'-羟基-3',5'-二甲氧基苯基)-丙-1-酮(8)、(1R,5R,6R)-6-{4'-O-[8"-(7"-(4"-hydroxy-3"-methoxyphenyl)) glyceol]-3',5'-dimethoxyphenyl}-3,7-dioxabicyclo [3.3.0] octan-2-one (9)、curcasinlignanB (10)、evofolin-B(11)、(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol (12)、pinnatifdanin C Ⅰ(13)、(+)-(7S,8S)-4,1'-dihydroxy-3,3',5'-trimethoxy-7,8,9-trinor-8,4'-oxyneolignan-7,9-diol (14)、八角莲醇(15)、1-(4'-羟基-3'-甲氧基苯基)-2-[4"-(3-羟丙基)-2",6"-二甲氧基苯基]-丙-1,3-二醇(16).结论 所有化合物均为首次从分心木中分离得到,其中化合物13具有潜在的抑制HIV-1的活性.

目的:建立同时测定八角莲中木脂素类成分4′-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素和黄酮类成分槲皮素、山柰素含量的方法.方法:采用Dikma C18 plus(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液(50:50);流速为1 mL·min-1;检测波长分别为290、360 nm.结果:4′-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、槲皮素、山柰素分别在进样量0.2944～3.680、0.9616～12.020、0.0863～1.0793、0.1023～1.279μg与峰面积呈现良好的线性关系;4个成分各个水平的方法回收率(n=9)均在97.1～102.1％.结论:该方法简便、准确,重复性良好,适用于八角莲中4′-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、槲皮素、山柰素4种成分的同时测定,能为八角莲药材和饮片的质量控制和临床应用提供依据.

该实验以White为基本培养基,研究了不同浓度外源激素IBA和真菌诱导子对八角莲离体根生长和次生代谢产物鬼臼毒素合成的影响.结果 表明,经过3周的培养,生长激素IBA和内生真菌Zasmidium syzygii诱导子均能提高八角莲离体根中鬼臼毒素的含量;在添加3 mg·L-1 IBA的White培养基中,离体根中鬼臼毒素的质量分数最高为1 830.86 μg.g-1,是对照组的2.07倍;其次是添加1.5 mg.L-1 IBA,Z.syzygii真菌诱导子,1,0.5,4.5 mg· L-1 IBA,鬼臼毒素的含量分别是对照组的1.82,1.71,1.63,1.43,1.1倍.离体根生长与IBA浓度的变化呈一定的正相关性.上述结果初步说明,最适于八角莲离体根代谢产生鬼臼毒素的IBA质量浓度为3 mg·L-1;Z.syzygii真菌诱导子的促进作用效果介于1.5 mg.L-1和1 mg.L-1的IBA之间,是将来生产中诱导八角莲中鬼臼毒素积累的潜在天然诱导子.