目的:探讨Masquelet技术联合组织瓣移植治疗胫骨骨折内固定术后中早期感染性骨软组织复合缺损的临床疗效。方法:2017年10月-2020年11月,中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院骨科对12例13侧胫骨骨折内固定术后中、早期感染性骨软组织缺损患者,采取保留内固定的两阶段治疗。Ⅰ期彻底清除感染病灶,拆除失效螺钉,尽可能保留内植物,将可吸收硫酸钙抗生素链珠植入骨折远、近端髓腔,载抗生素骨水泥填充骨缺损并包裹内植物,同期采用组织瓣覆盖创面,创面缺损面积3.5 cm×5.0 cm~7.5 cm×14.5 cm,组织瓣切取面积为4.0 cm×5.5 cm~8.0 cm×15.0 cm。供区8侧直接拉拢缝合，5侧因无法完全闭合，拉拢缝合之后剩余创面行植皮覆盖。在感染指标和临床体征控制良好的前提下,于Ⅰ期术后6~9周Ⅱ期取出骨水泥,在利用Masquelet技术形成的诱导膜周围充分植入自体松质骨粒或复合同种异体骨,对于骨折不稳定者植入辅助钢板。出院后定期来院门诊复诊，之后采用门诊或微信方式随访，观察皮瓣的质地、颜色和骨愈合情况,末次随访时患肢功能参照Johner-Wruhs评定标准进行评定。结果:Ⅰ期术后12例13侧皮瓣均顺利成活,无血管危象发生,伤口Ⅰ期愈合,仅2例2侧感染复发,经再次清创、取出内固定改换为外固定。Ⅱ期术后所有患者均获得12~26个月随访,平均18个月,13侧肢体骨折愈合良好,骨缺损愈合时间16~25（平均19.5）周,患肢功能参照Johner-Wruhs评定标准,优6侧、良5侧、中2侧。结论:采用Masquelet技术联合组织瓣移植技术,将可吸收硫酸钙抗生素缓释剂链珠作为载体,在保留内植物的前提下,分阶段治疗胫骨内固定术后中、早期感染性骨缺损、骨外露具有可行性和较高的优良率,初步探索出程序化治疗创伤性骨感染复合缺损的方案。

目的:探讨桥式皮瓣联合膜诱导技术修复小腿Gustilo III C型损伤的临床疗效。方法:自2016年6月至2018年6月,应用游离股前外侧皮瓣与健侧胫后血管桥式皮瓣联合膜诱导技术修复小腿Gustilo III C型损伤9例,其中胫前动脉缺损6例,缺损长度6.0～12.6 cm；胫前动脉长段闭塞3例,闭塞长度8.0～16.8 cm,骨缺损长度3.0～6.0 cm,软组织缺损面积15.0 cm×21.5 cm～20.0 cm×30.0 cm,创面严重污染。一期清创后VSD处理5～17 d,控制炎症后应用抗生素骨水泥填充骨缺损,并实施股前外侧皮瓣游离移植与健侧胫后血管桥接修复创面。皮瓣切取面积12.0 cm×23.0 cm～16.0 cm×38.0 cm,外固定支架并行固定双下肢。二期手术：于一期手术后8～12周取出骨水泥后行自体骨植骨,同时对皮瓣进行修整。结果:9例预后良好,术后均得到随访,随访时间13~22个月,平均16个月。移植皮瓣全部成活,创面一期愈合8例,二期愈合1例,愈合时间13～20 d,骨折愈合时间7～10个月,平均8个月,供区无功能障碍。结论:桥式皮瓣联合膜诱导技术是一种有效的修复小腿Gustilo III C型损伤的治疗方法。

目的:探讨卵巢上皮性癌（卵巢癌）患者腹水来源的外泌体对卵巢癌干细胞样细胞（OCS-LC）干性特征及侵袭能力的影响。方法:（1）采用无血清悬浮培养法诱导卵巢癌细胞系A2780细胞生成OCS-LC，并采用成球实验、分化功能实验以及流式细胞仪检测等方法鉴定OCS-LC的成球克隆生长、定向分化潜能、干性标志物CD 133表达等干性特征。（2）采用超速离心法提取卵巢癌来源外泌体（OCDE），包括卵巢癌患者腹水来源及A2780细胞来源的外泌体［即腹水来源外泌体（ADE）及细胞来源外泌体（CDE）］，采用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析（NTA）法测量外泌体粒径、蛋白印迹（western blot）法检测特异性蛋白分子热休克蛋白70（HSP-70）、CD 63、CD 9的表达等方法对外泌体ADE和CDE进行鉴定。（3）将ADE和CDE分别与OCS-LC共培养，即ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组，以磷酸盐缓冲液（PBS）与OCS-LC共培养作为空白对照组。通过观察3组OCS-LC的成球周期、最大球直径及成球率，评估各组OCS-LC的成球能力；采用免疫荧光染色法检测3组OCS-LC的干性标志物CD 133的表达；实时荧光定量PCR技术检测3组OCS-LC中干细胞转录因子八聚体结合转录因子4（Oct-4）和Nanog mRNA的表达；穿膜小室（transwell小室）实验检测3组OCS-LC的侵袭能力。 结果:（1）OCS-LC的鉴定：成球实验显示，OCS-LC单细胞悬液在无血清培养基中可二次成球生长；分化功能实验显示，OCS-LC细胞球在含血清培养基中改变生长方式，分化成呈贴壁生长的A2780细胞；流式细胞仪检测显示，OCS-LC中CD 133阳性（ CD133+）细胞的比例为（18.9±0.9）%，显著高于其对照（即A2780细胞）的（0.6±0.5）%（ t=38.570， P<0.01）。（2）OCDE的鉴定：透射电镜下观察，外泌体ADE和CDE均可见清晰的脂质双层膜结构，一侧呈凹陷的半球形或杯托样；NTA法测量显示，外泌体粒径主要在30~100 nm范围，平均粒径67.2 nm；western blot法检测显示，特异性蛋白分子HSP-70、CD 63、CD 9均呈阳性表达。（3）共培养后，成球实验显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组OCS-LC均可继续成球生长，其中ADE+OCS-LC组细胞呈现两种生长方式，大部分细胞继续维持干性成球生长，小部分细胞出现分化，呈贴壁生长；3组OCS-LC的成球周期分别为（15.3±1.5）、（10.3±0.6）、（6.7±0.6） d，细胞球最大直径分别为（100.3±3.2）、（145.2±5.1）和（170.0±2.1） μm，成球率分别为（1.05±0.20）%、（4.15±0.10）%和（10.45±0.25）%，3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.05），且CDE+OCS-LC组分别与ADE+OCS-LC组比较，差异也均有统计学意义（ P均<0.05）。免疫荧光染色法检测显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组，CDE+OCS-LC组OCS-LC细胞球中呈绿色荧光的 CD133+细胞数依次增多，3组OCS-LC细胞球中 CD133+细胞比例［分别为（26.6±1.5）%、（46.2±2.1）%和（58.4±2.2）%］比较，差异有统计学意义（ F=187.588， P<0.05），且CDE+OCS-LC组较ADE+OCS-LC组更高（ t=6.753， P<0.05）。实时荧光定量PCR技术检测显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组OCS-LC中Oct-4 mRNA的表达水平分别为1.04±0.12、3.46±0.24、4.03±0.31，Nanog mRNA表达水平分别为1.00±0.07、1.57±0.32、2.66±0.15，3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.05），且CDE+OCS-LC组均显著高于ADE+OCS-LC组（ P均<0.05）。transwell小室实验显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组的侵袭细胞数依次增多，分别为（30±5）、（102±4）、（210±7）个，3组比较，差异有统计学意义（ F=820.800， P<0.05），且CDE+OCS-LC组显著高于ADE+OCS-LC组（ t=23.202， P<0.05）。 结论:卵巢癌ADE能够增强和维持OCS-LC的干性特征，促进肿瘤细胞的侵袭转移，但CDE优于ADE。

目的:探讨采用带蒂皮瓣联合膜诱导技术修复糖尿病患者足踝部创面的效果。方法:采用回顾性观察性研究方法。2019年3月—2021年7月，无锡市第九人民医院收治12例符合入选标准的糖尿病足踝部创面患者，其中男7例、女5例，年龄20~92岁。清创前创面面积为4.0 cm×2.5 cm~16.0 cm×12.5 cm。患者均于Ⅰ期行清创+抗生素骨水泥填塞；Ⅱ期根据创面位置，采用腓动脉穿支皮瓣或胫后动脉穿支皮瓣修复创面，皮瓣切取面积为4.5 cm×3.0 cm~18.5 cm×14.0 cm。4例患者供区直接缝合，8例患者供区取腹股沟全厚皮片覆盖。Ⅱ期术后随访皮瓣和皮片的成活情况，皮瓣供受区瘢痕情况以及皮瓣外观，患肢踝关节功能。末次随访时，采用美国足踝外科协会（AOFAS）踝-后足评分系统评估足踝部功能恢复情况并评级。结果:Ⅱ期术后随访4~15个月，皮瓣与皮片均成活，无明显感染复发，皮瓣供受区均遗留线性瘢痕，皮瓣外观良好，患肢踝关节功能接近正常。末次随访时，患者AOFAS评分为79~93分，评级为优者8例、良者4例。结论:带蒂皮瓣联合膜诱导技术修复糖尿病患者足踝部创面具有操作简单、可保全踝关节功能、术后感染复发少的优点，值得在临床上推广应用。

目的:研究不同剂量N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)溶液对小鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的损伤作用，并检测新型长链非编码RNA(lncRNA)Tsix在小鼠视网膜兴奋性毒性模型中的表达水平及其对视网膜和RGCs的保护作用。方法:选取7～8周龄C57B6/J小鼠105只，采用随机数表法将小鼠随机分为正常对照组、2 mmol/L NMDA组、10 mmol/L NMDA组、20 mmol/L NMDA组和40 mmol/L NMDA组，每组21只。正常对照组小鼠右眼玻璃体腔内注入1 μl氯化钠溶液，不同剂量NMDA组分别注射相应剂量的NMDA溶液各1 μl。1周后，分别采用光相干断层扫描(OCT)、苏木精-伊红染色、视网膜铺片和免疫荧光染色法分析不同剂量NMDA组视网膜各层厚度、神经节细胞层(GCL)细胞数量和RGCs数量。采用RNAscope原位杂交技术检测不同剂量NMDA组GCL中lncRNA Tsix的表达。采用实时荧光定量PCR技术检测不同剂量NMDA组 Tsix基因的转录本水平。 结果:OCT结果显示，2、10、20和40 mmol/L NMDA组视网膜全层厚度分别为(255.00±6.63)、(252.40±6.41)、(248.67±6.20)和(229.11±10.37)μm，较正常对照组的(269.60±20.01)μm明显变薄，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示，正常对照组小鼠GCL细胞排列均匀、紧密，呈单层，细胞核大而圆，NMDA注射后细胞出现体积不均和空泡，有核固缩现象。各剂量NMDA组GCL细胞数量随NMDA剂量的增加而显著降低，与正常对照组相比差异均有统计学意义(均 P<0.05)。当NMDA浓度增至20 mmol/L时，GCL的细胞数量减少至正常对照组的一半。视网膜铺片结果提示，β3-微管蛋白阳性RGCs细胞数量随NMDA剂量的增加显著降低，与正常对照组比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)；10 mmol/L NMDA组RGCs数量减少至正常对照组的一半。RNAscope结果显示，lncRNA Tsix主要在GCL细胞的细胞质中表达，且随着NMDA剂量的增加，表达lncRNA Tsix的阳性细胞率显著降低，各组总体比较差异有统计学意义( F＝13.670， P<0.01)。实时荧光定量PCR结果验证Tsix随NMDA剂量的增加表达趋势与RNAscope结果一致。 结论:NMDA对视网膜厚度和RGCs的损伤呈剂量依赖性，小鼠视网膜lncRNA Tsix的表达主要集中在GCL细胞的细胞质，且转录本水平随着NMDA剂量的增加而降低，对RGCs发挥保护作用。

糖尿病足感染（DFI）是导致糖尿病患者病情恶化、截肢和死亡的重要原因之一，也是导致住院和医疗费用增加的常见原因。在治疗方面，主要采用全身应用抗生素、彻底清创、定期换药、局部使用特殊敷料、负压封闭引流、减压治疗等方法治疗，创面较大者还需适时进行植皮或皮瓣移植手术。载抗生素骨水泥在骨科领域广泛应用，利用诱导膜技术修复大段长骨缺损，发挥持久的局部抗感染作用，同时在骨水泥周围形成生物诱导膜，近年来逐渐应用到DFI创面的治疗中，取得了满意的效果。该文采用载抗生素骨水泥治疗DFI创面的临床应用进展进行综述，旨在提高对其产品研发、作用机制及临床疗效的认识，为临床治疗选择提供参考。

目的:探讨氧化损伤在黄芩素改善高脂诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。方法:将体质量18～20 g雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组：正常对照组（C，10%脂肪供能）、高脂组（H，60%脂肪供能）、高脂+黄芩素组（H+B，黄芩素：400 mg/kg体质量）、黄芩素对照组（B，黄芩素：400 mg/kg体质量）。12周后处死小鼠并收集组织样本，HE染色观察肝脏病理改变，超微病理检查线粒体形态，采用试剂盒测定肝脏中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平及线粒体膜电位（MMP）改变，采用蛋白质印迹法检测Sestrin2及蛋白质羰基化（PCOs）水平，小干扰RNA（siRNA）干扰技术敲低HepG2细胞内Sestrin2蛋白表达，荧光染料BODIPY493/503测定HepG2细胞内脂质改变。采用单因素方差分析中LSD两两比较检验统计学差异。结果:与正常对照组相比，高脂喂养导致小鼠肝脏出现明显的脂肪变性及GSH、SOD水平降低（ P值均< 0.05），MDA及蛋白质羰基化水平升高，Sestrin2表达增高（ P值均< 0.05）；线粒体形状改变、肿胀、缺少嵴，MMP下降33.3%（ t = 13.456， P < 0.001）；黄芩素干预有效的抑制高脂喂养导致的小鼠肝脏脂肪变性与氧化损伤，进一步上调Sestrin2的表达，增高MMP（ t = 10.104， P < 0.001），肝脏损伤明显缓解。敲低Hep2细胞内Sestrin2的表达，细胞内脂质沉积进一步增加，PCOs表达上升（ P值均<0.05），黄芩素拮抗脂质沉积及抗氧化能力降低。 结论:黄芩素可能通过调控Sestrin2表达，缓解高脂喂养导致的肝脏氧化损伤，从而减轻非酒精脂肪肝损伤。

目的:探讨膜诱导技术分期治疗成人长骨慢性血源性骨髓炎（CHOM）的疗效。方法:回顾性分析2016年1月至2019年12月解放军联勤保障部队第九二〇医院采用膜诱导技术分期手术治疗的22例四肢长骨CHOM患者资料。男18例，女4例；年龄16~56岁，平均31.8岁；病程0.6~42.0年，平均18.4年；Cierny-Mader解剖学分型：Ⅰ型4例，Ⅲ型6例，Ⅳ型12例。患者一期彻底清创后放置抗生素骨水泥填充骨缺损；感染控制后二期取出骨水泥，植骨修复骨缺损。随访观察骨愈合时间及并发症发生情况，记录和比较一期手术前、二期手术前和末次随访时感染控制情况[包括局部红肿、流脓、疼痛等临床表现及血液白细胞计数、C-反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）]以评估疗效。结果:一期清创后骨缺损的体积为54~176 cm 3（平均90.9 cm 3）。所有患者术后获20~51个月（平均30.1个月）随访。均获骨缺损愈合，骨愈合时间4~11个月（平均6.6个月）。其中3例髂后上棘取骨处感染，1例供区疼痛，经对症处置后缓解。1例术后7个月摔倒，骨缺损部位骨折、钢板断裂，经再次手术后骨愈合。末次随访时所有患者伤口无红肿、流脓等症状，二期手术前及末次随访时的白细胞计数[（5.70±1.57）、（5.65±1.58）×10 9/L]、CRP[（7.56±2.57）、（7.25±3.83）mg/L]、ESR[（9.64±2.90）、（10.55±5.23）mm/h]均较一期术前[（8.24±2.18）×10 9/L、（49.54±19.56）mg/L、（42.68±13.77）mm/h]显著降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；二期术前和末次随访时比较差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:应用膜诱导技术分期治疗成人四肢长骨慢性血源性骨髓炎能够有效控制感染，实现骨缺损修复，减少并发症的发生。

目的:探讨麦克劳林·贝内特·特雷维斯（MBT）直丝弓矫正治疗对上颌第一磨牙龈沟液中骨膜蛋白含量的影响。方法:选取嘉兴市中医医院2021年2-9月治疗的错颌畸形患者90例为研究对象，依据年龄分为A组（年龄范围13~18岁）、B组（年龄范围30~35岁）各45例，患者均给予MBT直丝弓矫正治疗。采用随机数字表法将A组患者分为100 g力组（A1组）22例和150 g力组（A2组）23例，B组分为100 g力组（B1组）22例和150 g力组（B2组）23例。观察年龄对龈沟液中骨膜蛋白含量及咬合力的影响，结合施力后牙齿咬合力的改变及颌骨密度、高度的变化，评价龈沟液中骨膜蛋白对不同矫形力施加过程中的拮抗作用以及并发症发生率。结果:A组骨膜蛋白、咬合力分别为（1 249.38±89.29）pmol/L、（1 038.37±79.54）N，均明显高于B组的（831.54±76.38）pmol/L、（921.45±81.36）N，差异均有统计学意义（ t=23.86、6.89，均 P < 0.05）。治疗1个月、3个月，A2组咬合力、颌骨密度、颌骨高度改善程度均优于A1组（ t=2.92、6.39、0.64、1.30、1.07、2.48，均 P < 0.05）。治疗7 d、14 d后，B1和B2组患者骨膜蛋白含量均升高，B2组高于B1组（ t=0.59、1.89，均 P < 0.05）；治疗1个月时，B1和B2组咬合力、颌骨密度、颌骨高度差异均无统计学意义（均 P > 0.05），治疗3个月后，B2组改善程度均优于B1组（ t=0.27、4.02、3.07、1.52、0.06、1.57，均 P < 0.05）。治疗过程中出现牙齿松动3例、牙髓反应2例、黏膜溃疡1例、继发龋齿2例，并发症发生率为8.89%。 结论:MBT直丝弓矫正技术治疗牙齿畸形患者效果好，安全性高，上颌第一磨牙龈沟液中骨膜蛋白及咬合力随着年龄的增长而降低，矫正力可诱导骨膜蛋白表达的增强和活化，能改善牙周伤口愈合和再生，提高患者的咬合力、颌骨密度和高度。

目的:探讨CXCR4特异性拮抗剂AMD3100影响癫痫发作的分子机制。方法:(1)动物实验：36只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、癫痫组和AMD3100处理组，每组12只。癫痫组大鼠腹腔注射戊四氮(PTZ)构建癫痫模型，剂量为40 mg/kg；AMD3100处理组大鼠侧脑室注射5 μL(5 mg/mL) AMD3100 20 min后腹腔注射同等剂量PTZ；对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水。采用Racine分级评估各组大鼠癫痫发作等级并记录其癫痫发作潜伏期，采用脑电图(EEG)记录各组大鼠脑神经元异常放电情况，采用ELISA试剂盒检测各组大鼠海马组织 γ-氨基丁酸(GABA)含量。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测各组大鼠海马组织神经元γ-氨基丁酸A受体α1亚单位( GABAAR α1) mRNA水平。(2)细胞实验：另取SD大鼠鼠婴(1日龄)培养原代海马神经元，培养7 d后将细胞分为对照组、癫痫组和AMD3100处理组。癫痫组神经元采用无镁外液诱导的方法构建癫痫细胞模型；AMD3100处理组神经元在含有10 nmol/L AMD3100的无镁外液中培养3 h，随后换为Neurobasal继续培养；对照组采用Neurobasal培养基常规培养。采用全细胞膜片钳技术检测各组神经元灌流AMD3100(10 nmol/L)后自发性抑制性突触后电流(sIPSC)。 结果:(1)动物实验：AMD3100处理组大鼠发作潜伏期较癫痫组大鼠明显缩短[分别为(663.30±74.84) s、(164.40±17.20) s]，差异有统计学意义( t=6.490， P<0.001)；AMD3100处理组大鼠4级以上发作次数较癫痫组大鼠明显减少[分别为(3.75±0.39)次、(9.00±0.73)次]，差异有统计学意义( t=4.680， P<0.001)。ELISA实验结果显示，3组大鼠GABA含量差异有统计学意义( F=17.850， P<0.001)，其中癫痫组明显低于对照组，AMD3100处理组大鼠明显高于癫痫组，差异均有统计学意义( P<0.05)。qRT-PCR实验结果显示，3组大鼠 GABAAR α1 mRNA含量差异有统计学意义( F=14.400， P<0.001)，其中癫痫组明显低于对照组，AMD3100处理组大鼠明显高于癫痫组，差异均有统计学意义( P<0.05)。EEG结果显示，与癫痫组大鼠比较，AMD3100处理组大鼠放电频率有所降低。3组大鼠EEG功率差异无统计学意义( F=3.220， P=0.062)，但与癫痫组、对照组大鼠比较，AMD3100处理组大鼠EEG功率有所降低。(2)细胞实验：膜片钳技术检测结果显示，3组神经元sIPSCs的频率和波幅差异均有统计学意义( F=13.670， P<0.001； F=10.920， P<0.001)。与对照组、癫痫组比较，AMD3100处理组神经元sIPSCs的频率和波幅均显著增加，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:CXCR4拮抗剂AMD3100可通过增强抑制性神经传递降低癫痫发作频率。