目的 为了研究西方饮食饲料快速建模及对APOE-/-小鼠生物学指标及组织病理学的影响.方法 用48 ♀ 48 ♂ APOE-/-小鼠、48 ♀ 48♂ C57BL/6J进行了试验,分为8组,分别为APOE-/-普通繁殖料组(24 ♀ 24 ♂)和APOE-/-西方饮食饲料组(24 ♀ 24♂)、C57BL/6J普通繁殖料组(24 ♀ 24 ♂)和C57BL/6J西方饮食饲料组(24 ♀24♂).从3周开始饲喂,直到20周实验结束.实验结束后采集血清检测生化指标,分离主动脉做大体油红O染色及分析,主动脉根部做石蜡切片和HE染色.结果 西方饮食没有显著增加APOE-/-体重,但可以显著提高APOE-/-鼠的血脂指标、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白,促进动脉粥样硬化斑块的形成,雄鼠适合主动脉大体斑块的造模,雌鼠适合主动脉弓根部斑块造模.结论 西方饮食饲料可以促进APOE-/-小鼠动脉粥样硬化造模,增加主动脉斑块面积比,缩短建模时间,提高建模的均一性.

目的:探索钠-葡萄糖共转运蛋白-2抑制剂卡格列净防治动脉粥样硬化（AS）的可能机制。方法:使用西方饮食饲养ApoE -/-小鼠并随机分为模型组（ n=10）和卡格列净组（ n=10）；普通饲料喂养C57BL/6 J小鼠作为对照组（ n=10）。给予卡格列净组小鼠卡格列净每日灌胃。干预周期为14周。留取心脏组织行主动脉根部HE染色和油红O染色以评价造模情况及AS损伤程度；PCR法检测一氧化氮合酶的基因表达。采用RNA-seq和液相-质谱法分别进行小鼠肝脏转录组学分析和氨基酸靶向检测。 结果:主动脉根部HE染色和油红O染色显示西方饮食饲养ApoE -/-小鼠14周可成功构建AS模型；卡格列净可减少小鼠主动脉根部斑块面积（ P=0.012）。肝脏转录组学分析提示卡格列净对ApoE -/-小鼠氨基酸代谢有影响，尤其是精氨酸生物合成途径。氨基酸靶向检测显示，卡格列净可减少肝脏L-丝氨酸、L-天冬氨酸、酪氨酸、L-羟脯氨酸和L-瓜氨酸含量，且增加了L-精氨酸含量（ P均<0.05）；与模型组比较，卡格列净组血清精氨酸、一氧化氮水平及主动脉一氧化氮合酶mRNA相对表达量均较高（ P均<0.05）。 结论:卡格列净可调节动脉粥样硬化小鼠氨基酸代谢，减少生糖氨基酸，并促进精氨酸的生物合成。

目的 探讨不同饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝组织中脂滴包被蛋白(Plin)家族的表达谱及瘦素基因敲除对其的影响.方法 实验选用8周龄雄性C57BL/6小鼠53只,按照随机数字表法分组:CDAA对照组和模型组(9周组和15周组)、WD对照组和模型组(2周组、6周组和30周组),除CDAA9周对照组为5只,其余每组6只.选用4周龄雄性ob/ob小鼠12只,按照随机数字表法分组:对照组和模型组,每组6只.对照组给予正常饮食喂养;分别采用胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料(CDAA)和西方饮食(WD)诱导建立野生型C57BL/6小鼠NAFLD模型;采用WD饮食诱导建立瘦素基因敲除小鼠(ob/ob)NAFLD模型.实时荧光定量PCR法检测肝组织中Plin 2,Plin 3,Plin 4,Plin 5 mRNA的表达,比较不同组之间的差异及瘦素敲除对其的影响.结果 正常野生型C57BL/6小鼠的肝组织中可检测出Plin 2,Plin 3,Plin 4,Plin 5四种亚型mRNA的表达;其中Plin 2是主要的亚型,其次为Plin 3、Plin 5,Plin 4的表达量最低.在CDAA饮食诱导的NAFLD模型中,Plin 2表达无显著变化;Plin 3表达在造模15周降低(P＜0.05);Plin 4表达在造模9周和15周均升高(P＜0.05);Plin 5表达在造模9周和15周均降低(P＜0.05).在WD饮食诱导的NAFLD模型中,野生型小鼠肝组织中Plin 2表达在造模30周增加(P＜0.05);Plin 3、5表达无显著变化;Plin 4表达在造模2周、6周和30周均升高(P＜0.05).与野生型小鼠不同,在WD饮食诱导的(ob/ob)小鼠NAFLD模型中,肝脏中Plin2、Plin3、Plin5表达降低(P＜0.05);而Plin 4表达无显著变化.结论 Plins基因表达谱在不同饮食诱导的NAFLD小鼠肝组织中存在显著差异;瘦素基因敲除抑制NAFLD小鼠肝组织中Plins基因的表达.

目的 模拟西方人群高果糖含量的饮食结构及习惯,本研究以单纯高果糖饲料喂养的方式,尝试构建代谢综合征大鼠模型.方法 选取7周龄健康无特定病原体雄性Wistar大鼠40只,根据体质量随机分为对照组和实验组,每组20只.实验组给予高果糖饲料喂养,对照组给予普通饲料喂养.动态监测大鼠体质量、腹围、血压等一般状况;6周后检测血糖和血脂相关指标,包括空腹血糖、胰岛素、TG、HDL-C、LDL-C和TC;分析胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(IRI);测量内脏脂肪质量,并计算Lee's指数.同时采用多道生物记录仪测量左心室收缩压、左心室内压等.结果 实验组大鼠内脏脂肪质量和内脏脂肪质量/体质量较对照组明显升高[(35.60士3.17)g vs(22.26±7.43)g,(7.26士2.23)％vs (5.16±1.20)％,P＜0.05].实验组大鼠空腹血糖、TG、TC、LDL-C、胰岛素、IRI、左心室收缩压和左心室舒张末期压明显高于对照组,HDL-C和ISI明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用Wistar大鼠单纯高果糖饲料喂养6周,能够成功建立代谢综合征大鼠模型.

背景:载脂蛋白E基因敲除小鼠是广泛应用于动脉粥样硬化研究的理想模型,也有用于其他疾病的相关报道,但是缺乏对其模型应用的总体概括.目的:系统总结载脂蛋白E基因敲除小鼠在疾病模型中的应用情况.方法:将南京大学生物模式中心所引进的SPF级载脂蛋白E基因敲除小鼠雌雄各6只饲养于SPF实验室,按照1:1搭配进行保种繁殖,采用煮沸裂解法以提取鼠尾组织基因组DNA,采用PCR法检测其基因型.将基因鉴定为载脂蛋白E基因敲除雄性小鼠10只普通饲料喂养至8周龄,继而予以西方饮食饲料(北京华阜康公司提供,型号:H10141,脂肪21％,胆固醇0.15％)连续喂养至25周龄,同时选用8周龄C57/6 J野生型雄性小鼠10只普通饲料喂养至25周龄.结果与结论:①基因鉴定:琼脂糖凝胶电泳显示载脂蛋白E基因敲除小鼠PCR产物与预期的目的基因片段的大小一致;②相关指标变化:与野生小鼠相比,载脂蛋白E基因敲除小鼠的体质量、肝脏质量、脾脏质量、腹部脂肪质量、肝指数、血清中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶及谷草转氨酶明显升高(P<0.05);③组织学改变:载脂蛋白E基因敲除小鼠苏木精-伊红染色主动脉弓、主动脉瓣、颈总动脉部位有明显的斑块,野生鼠无斑块;载脂蛋白E基因敲除小鼠肝脏苏木精-伊红染色有大小不等的空泡,细胞核被挤到一边,野生鼠肝脏核大居中,胞浆红染,无空泡现象;④结果证实,实验采用煮沸裂解法以提取DNA,采用PCR法检测成功鉴定了载脂蛋白E基因敲除小鼠的基因型.载脂蛋白E基因敲除小鼠是研究动脉粥样硬化、脂肪肝、高血脂、高胆固醇血症及肥胖等许多疾病的理想模型.

目的·采用西方饮食(Western diet,WD)联合小剂量四氯化碳(CCl4)构建非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠模型,并探究发生典型NASH病理改变的时间节点.方法·雄性8周龄C57BL/6小鼠采用WD饲料喂养联合每周1次腹腔注射CCl4(0.2μL/g)的方法构建NASH模型,在造模后不同时间点检测小鼠空腹血糖、三酰甘油、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平,并于第24周行葡萄糖耐量试验;肝脏取材后计算肝指数,并通过油红O染色、天狼猩红染色、苏木精-伊红染色及TUNEL法等技术评估肝脏病理改变.结果·模型组与对照组相比,小鼠的空腹血糖、葡萄糖耐量试验结果间均无明显差异,但是在造模第8、12、24周2组肝指数间存在显著差异(均P<0.05).第24周时,模型组三酰甘油、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平均显著高于对照组(均P<0.05).油红O染色、天狼猩红染色、苏木精-伊红染色及TUNEL法结果显示,造模第8周,小鼠肝脏组织出现大量小脂滴堆积,肝细胞以凋亡为主;第16周,肝脏组织中出现大脂滴堆积、肝细胞气球样变性和点状坏死灶,肝细胞凋亡仍然较多;第24周,肝组织出现3期纤维化,点状坏死灶数目增多而脂肪变性减弱,肝细胞以增殖为主.结论·采用WD联合小剂量CCl4方法成功建立小鼠NASH模型,该模型能够在较短时间内模拟出NASH的病理特征.

目的 通过构建动脉粥样硬化模型,探讨白细胞介素?38(IL?38)对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的影响及机制.方法 6周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为对照组(腹腔注射磷酸盐缓冲液)和外源重组IL?38组(腹腔注射rIL?38),给予12周西方饮食饲料喂养,建立动脉粥样硬化模型.给药结束后,通过油红O染色观察小鼠动脉粥样硬化程度,检测血清TC、TG水平;利用酶联免疫法检测血浆IFN?γ、IL?17、IL?10及TGF?β水平;利用流式细胞仪检测脾脏Th1、Th17、Treg及M2比例指标;观察斑块的稳定性等指标.结果 与对照组相比,rIL?38组主动脉窦和全主动脉斑块面积显著减少(P<0.01),且斑块内胶原纤维、平滑肌细胞显著增加(P<0.05),而CD4+T细胞、巨噬细胞、MMP?2和MMP?9显著减少(P<0.05).rIL?38组脾脏Th1、Th17细胞比例显著减少,M2、Treg显著增加(P<0.05).血浆IFN?γ、IL?17水平降低,IL?10、TGF?β水平升高(P<0.05).结论 外源重组rIL?38能抑制动脉粥样硬化进程和促进斑块稳定.

目的:探讨补肾抗衰片对高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠肺部炎症反应的干预作用.方法:8只C57BL/6J小鼠作为对照组,32只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、补肾抗衰片组、辛伐他汀组和4-苯基丁酸组,每组8只.除对照组外,其余4组均喂养西方饮食饲料造模12周,同时给药12周.取小鼠肺组织,采用HE染色观察病理形态改变,油红O染色观察脂质浸润情况,免疫组化染色观察IRE1α、TXNIP、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白的表达情况.结果:与模型组比较,补肾抗衰片干预后可减少肺组织病理形态变化及脂质浸润,并降低IRE1α、TXNIP、Caspase-1、IL-18蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:补肾抗衰片能够通过抑制IRE1α、TXNIP、Caspase-1、IL-18表达,改善高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠肺组织损伤.

目的 探讨动脉粥样硬化(AS)动物模型主动脉弓、主动脉根及血清中踝蛋白(Talin)-1的表达及意义.方法 实验组为西方饮食饲料(WTD)喂养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠构建AS模型,对照组为普通饲养的C57BL/6J小鼠.检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量并通过苏木素-伊红(HE)染色观察管腔与斑块结构鉴定AS模型;免疫荧光检测小鼠主动脉弓、主动脉根部Talin-1含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中可溶性Talin-1(sTalin-1)的水平.结果 实验组sTalin-1、TC、TG、LDL-C、HDL-C均高于对照组(P<0.01);血清中sTalin-1与脂质参数存在显著性正相关;实验组Talin-1表达较对照组明显增高(P<0.01).结论 Talin-1在AS模型小鼠的病灶组织和血清中均明显增高,其作为AS诊断标志物具有一定潜在价值.

目的 探讨定心方Ⅲ号方(DXR Ⅲ)调控蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路对肥胖小鼠脂肪组织慢性炎症的影响.方法 32只8周龄雄性ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为模型组,DXR Ⅲ低、中、高剂量组,每组8只,另取8只同龄C57BL/6J雄性小鼠作为正常组.ApoE-/-小鼠连续喂食西方饮食饲料12周建立肥胖模型后,DXRⅢ低、中、高剂量组分别予6.5、13、26 g/kg DXR Ⅲ中药煎剂灌胃,正常组和模型组以等量生理盐水灌胃.各组均每天给药1次,连续给药12周.每周测量小鼠体重.干预结束后,取小鼠内脏脂肪组织称重并计算内脏脂肪指数;采用生化法检测小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;HE染色观察小鼠内脏脂肪组织病理学变化;IL-1 β免疫组化染色分析内脏脂肪组织炎症浸润程度;RT-PCR检测脂肪组织炎症因子IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达,巨噬细胞极化标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA表达;Western Blot检测小鼠脂肪组织JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、iNOS、Arg-1蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠体重、体重增加值、内脏脂肪重量、内脏脂肪指数与血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均升高(P＜0.05,P＜0.01),HE染色显示脂肪细胞肥大,免疫组化染色显示IL-1 β水平上调,脂肪组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、iNOS mRNA 表达增加,iNOS 蛋白、JAK2、STAT3 蛋白磷酸化水平亦增加(P＜0.05,P＜0.01),Arg-1 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05);与模型组比较,DXR Ⅲ各剂量组小鼠体重增加值、内脏脂肪重量、内脏脂肪指数与血清中TC、LDL-C水平均下降(P＜0.05,P＜0.01),HE染色显示脂肪细胞变小,免疫组化染色显示IL-1β水平下调;DXR Ⅲ低、中剂量组小鼠血清TG水平下降(P＜0.05),脂肪组织IL-1 β、IL-6、iNOS mRNA表达下降,iNOS蛋白、JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平亦下降(P＜0.05,P＜0.01),Arg-1 mRNA及蛋白表达增加(P＜0.05,P＜0.01);DXR Ⅲ高剂量组小鼠血清HDL-C水平上升(P＜0.01),脂肪组织MCP-1 mRNA表达及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 DXR Ⅲ可减轻内脏脂肪组织慢性炎症,作用机制可能与其抑制JAK2/STAT3信号通路,改善巨噬细胞极化失衡相关.