目的:探究内质网应激对棕色脂肪组织(BAT)脂质组成的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠腹腔注射衣霉素溶液(2.5 mg/kg)18 h后取肩胛区BAT，采用超高效液相色谱(UPLC)仪串联SCIEX QTRAP 6500 PLUS质谱仪进行UPLC-MS/MS高覆盖率靶向脂质组学检测和分析。结果:内质网应激导致BAT脂质组成发生显著改变，其中溶血磷脂二酸(LBPA)总含量升高最显著，此外，17种脂质亚类也显著升高，1种脂质亚类显著降低。结论:内质网应激对BAT脂质组学整体有明显影响，其差异脂质代谢物有望为代谢性疾病的诊断与治疗提供潜在的靶点。

目的:分析纯母乳喂养婴儿不同排便频次与乳汁中3种功能性低聚糖水平的关系，为合理母乳喂养和研发添加母乳低聚糖的相关食品提供参考依据。方法:根据0~6月龄纯母乳喂养婴儿排便频次不同分为A组、B组和C组，即3天以内(含3天)排便1次或排便每日少于3次(含3次)者为A组；排便每天多于3次者为B组；4天以上或需辅助才排便者为C组。同时收集3组纯母乳喂养婴儿母亲的乳汁，采用手挤奶方法收集婴儿母亲的成熟乳，收集后立即存置于－80 ℃冰箱内，待用超高效液相色谱串联质谱仪检测功能性低聚糖的含量。结果:成熟母乳中母乳低聚糖α1-3、β1-4、α1-3半乳四糖(四糖)在A组(5.863 μg/ml)、B组(6.112 μg/ml)和C组(3.522 μg/ml)间比较差异有统计学意义( H＝13.519， P＝0.001)，B组中的含量最高，C组中最低；α1-3、β1-4半乳三糖(三糖)在三组间比较差异无统计学意义( H＝5.408， P＝0.067)。成熟乳汁中母乳低聚糖2′-岩藻糖半乳糖(2′-FL)在A组(0.046±0.296)g/L、B组(0.079±0.046)g/L和C组(0.051±0.028)g/L间比较差异有统计学意义( H＝10.393， P＝0.006)，B组母乳中的2′-FL含量高于A组和C组。 结论:成熟乳汁中母乳低聚糖α1-3、β1-4、α1-3半乳四糖(四糖)和2′-岩藻糖半乳糖含量高与0~6月龄婴儿排便频次增多有关；母乳低聚糖α1-3、β1-4、α1-3半乳四糖(四糖)含量低与0~6月龄婴儿排便频次减少有关。

目的 建立消核糖浆的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其中10个有效成分的含量.方法 以12批消核糖浆为对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以Athena C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm.色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)》建立消核糖浆指纹图谱并进行相似度评价.采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.01%甲酸乙腈-0.01%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,结合高分辨质谱仪,以电喷雾离子源进行正负离子扫描,测定12批消核糖浆中各主要成分的含量.结果 12批样品共标定33个共有峰,相似度均大于0.97;确认其中10个色谱峰,分别为王不留行黄酮苷、芍药苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸、新橙皮苷、丹酚酸B、延胡索乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D;含量测定结果显示,上述10个成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(R 2＞0.999),其含量分别为0.35～0.64、3.15～5.61、0.11～0.17、1.68～3.17、1.59～1.90、1.15～1.64、0.78～1.48、0.11～0.26、0.06～0.13、0.33～0.61 mg/mL.结论 12批消核糖浆的主要成分相似但含量有所差异;本研究建立的HPLC指纹图谱和UPLC-MS/MS含量测定方法可用于消核糖浆的全面质量评价.

目的:采用质谱分析与网络药理学和分子对接技术探究酒煎瓜蒌薤白半夏汤治疗冠心病(CHD)的作用机制.方法:使用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱仪(UPLC-Q-TOF/MS)对酒煎瓜蒌薤白半夏汤的成分进行鉴别,根据Gene Cards数据库、DisGeNET数据库寻找CHD疾病作用靶点,并通过Metascape在线分析网站聚类分析基因靶点、通路,构建中药-活性成分-靶点相互作用机制网络图,使用AutoDockTools软件完成靶基因与关键活性成分的分子对接.结果:酒煎瓜蒌薤白半夏汤通过质谱分析共鉴别出 76 个化学成分,数据库筛选获得药物相关靶点 751 个,疾病相关靶点 1249 个,药物相关靶点与疾病相关靶点取交集后获得潜在作用靶点 190 个.基因本体(GO)富集分析显示,生物过程结果主要涉及激素反应、对炎症反应的调节作用、细胞迁移的正向调控等;细胞组成结果主要集中于膜筏、膜侧等;分子功能结果主要涉及丝氨酸水解酶活性、脂质结合、血红素结合等.京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析结果主要涉及脂质与动脉粥样硬化、流体剪应力与动脉粥样硬化、cGMP-PKG通路、钙信号通路、PPAR信号通路.分子对接结果显示,在共同调控激素反应与脂质结合的靶点基因中过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARD)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、血小板活化因子受体(PTAFR)、雌激素受体 2(ESR2)、雄激素受体(AR)、维甲酸X受体α(RXRA)所代表的蛋白与美迪紫檀素、肉叶芸香碱、环(亮氨酸-酪氨酸)显示出了良好的结合能力.结论:酒煎瓜蒌薤白半夏汤可能通过激活PPARA、PPARG、PPARD、ESR2、AR、RXRA靶点与脂质与动脉粥样硬化、流体剪应力与动脉粥样硬化、cGMP-PKG通路、钙信号通路、PPAR信号通路实现对CHD的治疗作用.

为研究多次蒸晒西洋参中皂苷成分变化及其在组织中的空间分布特征,采用超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱仪(ultra performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对西洋参提取液进行检测和鉴定.采用基质辅助激光解吸电离质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging,MALDI-MSI)对西洋参中原型皂苷及其代谢产物的空间分布和时空变化进行可视化分析.UPLC结果显示从 0～9 次蒸制西洋参中共鉴定出 90 种主要人参皂苷,在西洋参的反复蒸晒过程中,极性人参皂苷转化成低极性或非极性人参皂苷,原型皂苷含量减少,稀有皂苷含量增加,主要为人参皂苷 20(S/R)-Rg3、20(S/R)-Rh2、Rk1、Rg5、Rs5、Rs4 等.MALDI-MSI组织分布结果表明生西洋参中皂苷主要分布于表皮及韧皮部,蒸晒过程导致皂苷成分发生转化,木质部和髓质中的分布增加.该研究为西洋参蒸制引起的生物活性和药理作用的变化提供了基础信息,为扩大西洋参的药用范围提供了参考.

目的 分析北苍术与朝鲜苍术干预后,脾虚大鼠血浆生物标志物及代谢通路的差异,从非靶向代谢组学的角度讨论两者的健脾机制.方法 将SD大鼠采用饮食不节、疲劳过度加苦寒泻下的复合因素法,造成脾虚症模型.测定胃肠道和免疫学指标的水平;采用超高效液相色谱串联Q Exac-tive 质谱仪(UHPLC-QE-MS)技术,联合主成分分析(PCA)与正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法,寻找脾虚大鼠血浆中生物标志物;利用Pathway数据库归纳代谢通路.结果 经北苍术与朝鲜苍术给药后,脾虚大鼠血浆中各指标均有不同程度回调.代谢组学分析表明,北苍术与朝鲜苍术分别回调了70个和82个血浆差异代谢物,北苍术主要调节"甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢"与"硫胺素代谢"2个代谢通路,朝鲜苍术主要调节"甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢"、"硫胺素代谢"、"嘧啶代谢"、"丁酸代谢"与"核黄素代谢"5个代谢通路.结论 北苍术与朝鲜苍术对脾虚大鼠均具有一定的调节作用,其作用机制可能与调节"甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢"、"硫胺素代谢"等代谢通路有关.

[背景]动物实验表明砷暴露会导致肝脏脂肪堆积,但流行病学研究结果并不一致.此外,砷代谢模式在其中的作用也并不明确.[目的]探讨砷代谢模式与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的因果关联.[方法]以东风-同济队列 2018年随访中完成尿砷代谢物水平检测和基因分型的 1020名居民为研究对象(NAFLD组n=529,非NAFLD组n=491),通过问卷调查获得流行病学资料,体格检查获得肝脏B超资料,高效液相色谱串联电感耦合等离子体质谱仪检测尿液中的砷代谢物水平,并提取白细胞中的DNA进行全基因组芯片检测.NAFLD的诊断标准为:(1)肝脏B超提示脂肪肝;(2)排除过量饮酒史(男性≥30 g·d-1;女性≥20 g·d-1)和其他原因所导致的脂肪肝.选择既往研究报道与砷代谢相关的单核苷酸多态性位点(SNP)构建遗传风险评分(GRS)和加权遗传风险评分(w-GRS)估计个体的砷代谢模式.采用logistic回归模型分析砷代谢模式与NAFLD的关联,采用线性回归模型分析GRS和w-GRS与砷代谢模式的关联,采用GRS法、逆方差加权法、Egger回归法及加权中位数法进行孟德尔随机化分析.[结果]1020名研究对象的年龄为(68.14±7.45)岁,其中 64.0%为女性,529名(51.9%)NAFLD病例.尿总砷浓度的M(P25,P75)为 18.34(11.93,27.14)μg·L-1,几何均数±标准差为(15.86±1.81)μg·L-1.无机砷、一甲基砷、二甲基砷在总砷中的占比(iAs%、MMA%、DMA%)分别为13.90%±9.90%、9.49%±4.97%、76.60%±11.00%.校正混杂因素后,iAs%和MMA%每增加一个标准差,NAFLD患病风险的OR(95%CI)分别为1.21(1.06～1.38)和0.62(0.51～0.74).选取77个SNPs构建的GRS每增加一个单位,MMA%增加 0.16%,DMA%减少 0.19%;w-GRS每增加一个单位,MMA%增加 0.17%,DMA%减少 0.14%.进一步排除连锁不平衡(r2>0.3)和多效性位点后,共有25个SNPs纳入孟德尔随机化分析,GRS法显示,MMA%期望值每增加1%,NAFLD患病风险的OR(95%CI)为 0.95(0.90～0.99);逆方差加权法显示,MMA%与NAFLD患病风险关联的OR(95%CI)为0.91(0.84～0.99).[结论]砷代谢模式中MMA%与NAFLD之间存在负向因果关联.

目的 探究孕妇新烟碱类杀虫剂暴露对雌激素稳态的影响.方法 选取上海市某一行政区151名孕妇作为研究对象,对孕妇进行问卷调查和随机尿液收集.采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱仪测定尿液中8种新烟碱类杀虫剂(噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒、噻虫啉、烯啶虫胺、氯噻啉和呋虫胺)、4种代谢物(去甲基噻虫嗪、去甲基噻虫胺、5-羟基-吡虫啉和去甲基啶虫脒)和3种雌激素(雌酮、雌二醇、雌三醇).采用方差分析和多元线性回归分析孕妇新烟碱类杀虫剂暴露对雌激素水平的影响.结果 孕妇尿液中新烟碱类杀虫剂及其代谢物总检出率为93.38％,总浓度中位数为2.66 μg/g.啶虫脒及N-去甲基-啶虫脒检出率最高(78.15％),吡虫啉及5-羟基-吡虫啉检出率最低(12.58％).方差分析发现尿液中检出噻虫嗪及N-去甲基-噻虫嗪的孕妇雌酮水平更高,而尿液中检出噻虫胺及N-去甲基-噻虫胺的孕妇雌二醇和雌三醇水平更低.多元线性回归分析发现,尿液中全部新烟碱类杀虫剂水平与雌酮水平呈正相关(β=0.137,95％CI:0.019～0.256).尿液中噻虫嗪及N-去甲基-噻虫嗪水平和啶虫脒及N-去甲基-啶虫脒水平与雌酮水平呈正相关(β=0.154,95％CI:0.032～0.275;β=0.157,95％CI:0.028～0.286).结论 上海市孕妇可能普遍暴露于新烟碱类杀虫剂,且孕期新烟碱类杀虫剂暴露可能影响雌激素稳态.

目的 建立高胆碱饮食小鼠模型,探究高胆碱饮食对小鼠血清氨基酸代谢的影响.方法 选取20只SPF级4周龄小鼠随机分为2组:对照组给予普通鼠粮及实验室饮用水,高胆碱饮食组小鼠给予3％胆碱水溶液代替日常饮用水,饲养8周后采集小鼠血清,应用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪(UPLC-MS/MS)定量检测血清氨基酸水平.采用主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析判断高胆碱饮食组和对照组氨基酸组成相似性.结果 高胆碱饮食组与对照组相比,胱氨酸、丝氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、苏氨酸、脯氨酸、反式4-羟基脯氨酸和支链氨基酸水平显著升高,赖氨酸、瓜氨酸水平显著降低,组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05).支链氨基酸中异亮氨酸水平由34.20±2.71升高至72.59±10.42 μmol/L;亮氨酸水平由68.59±4.06升高至113.04± 14.64μmol/L;缬氨酸水平由129.86±10.54升高至161.95±16.54 μmol/L.结论 高胆碱饮食引起小鼠血清氨基酸代谢发生显著变化,其中精氨酸、脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸可作为高胆碱饮食引起氨基酸代谢异常的生物标志物.

目的 建立超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer detector quadrupole time of flight,UPLC-Q-TOF)定性定量检测毒蘑菇中鹅膏肽类毒素的分析方法.方法 样品加入甲醇后均质,超声离心提取,待测液采用ACQUITY UPLC? HSS T3 1.8 μm色谱柱(2.1×50 mm)进行分离,以0.1％氨水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱 0 min,2％B;0～0.5 min,2％B;0.5～6.0 min,95％B;6.0～7.0 min,95％B;7.0～8.0 min,2％B,流速0.3 mL/min,柱温40℃,进样量2.0 μL.采用超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱仪对毒蘑菇进行分离、鉴定鹅膏菌中的毒素成分.结果 毒蘑菇样品中1、2、3、5、6、7、8号样品均未检出鹅膏肽类毒素;4号样品共检出6种组分,经鉴定为已知的鹅膏肽类毒素,分别是α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鹅膏毒肽酰胺.进一步建立鹅膏肽类毒素快速定量方法,5种鹅膏肽类毒素在25～1 000μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.991 2～0.998 9,平均加标回收率为89.5％～110.5％,相对标准偏差为3.80％～7.80％.其中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽的含量分别是(19.701±0.175)、(0.098±0.014)、(1.548±0.001)、(0.331±0.002)及(0.108± 0.060)mg/kg,二羟鹅膏毒肽酰胺与羧基二羟鬼笔毒肽相对含量为0.754 mg/kg.结论 该方法用于测定毒蘑菇中多种鹅膏肽类毒素,方法简单、快速、可靠,为进食毒蘑菇突发中毒患者的快速临床诊断和及时治疗提供了有效的科学依据.