目的 评价健脾消渴方对2型糖尿病大鼠的药效,并探讨其可能的作用机制.方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、健脾消渴方组及盐酸二甲双胍组,每组10只,STZ+高脂饮食建立2型糖尿病大鼠模型,给予相应药物,持续4周.实验结束后取材,考察大鼠空腹血糖变化情况;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAO)、D-乳酸含量;考察血清血脂四项[甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)]含量;HE染色法观察各组大鼠胰腺及回肠的组织形态学改变;免疫荧光法检测大鼠回肠L细胞的免疫荧光法检测大鼠回肠L细胞的胰高糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)阳性表达;Western blotting法检测大鼠结肠组织中紧密连接蛋白(occludin)、闭锁小带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、黏蛋白2(Muc2)蛋白相对表达.结果 健脾消渴方可有效降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖,下调血清中IL-1β、TNF-α含量,上调IL-10含量,抑制DAO、D-乳酸含量;同时,显著性下调TG、TC、LDL-C含量,但在提高HDL-C含量方面上仅具有趋势性;此外,健脾消渴方可改善大鼠胰腺及回肠损伤,提高GLP-1阳性表达,并有效降低2型糖尿病大鼠结肠occludin、ZO-1、Muc2蛋白相对表达.结论 健脾消渴方对2型糖尿病大鼠具有较好的治疗效果,其作用可能与改善血清炎症、调节血脂,减轻肠道功能损伤,改善肠道屏障通透性与保护肠道屏障生理结构等作用有关.

目的:探讨重症颅脑损伤患者术后血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、趋化素样因子-1(CKLF1)及不规则趋化因子(FKN)水平与预后的关系。方法:回顾性选取2016年1月至2018年1月于荆州市第一人民医院接受手术治疗的100例重症颅脑损伤患者作为研究对象，依据患者术后格拉斯哥预后评分(GOS)分为预后不良组(52例)和预后良好组(48例)。经单因素和多因素logistic回归分析重症颅脑损伤术后预后的危险因素，并作ROC曲线分析血清MIF、CKLF1、FKN水平检测对重症颅脑损伤术后预后的预测价值。结果:入院时GCS评分3~5分、血清MIF水平≥1.1 ng/ml、血清CKLF1水平≥35 pg/ml和血清FKN水平≥100 pg/ml是重症颅脑损伤患者术后预后不良的独立危险因素，且血清MIF、CKLF1及FKN水平联合预测重症颅脑损伤术后患者预后的AUC值显著高于三者单项预测( P<0.01)，截断值分别为0.935 ng/ml、32.897 pg/ml、88.695 pg/ml。Pearson相关分析显示，MIF与CKLF1呈正相关( r＝0.522， P＝0.001)；MIF与FKN呈正相关( r＝0.409， P＝0.028)；CKLF1与FKN呈正相关( r＝0.336， P＝0.038)。 结论:血清MIF、CKLF1及FKN水平可作为重症颅脑损伤术后患者预后的预测指标，且三项指标联合预测重症颅脑损伤术后患者的预后具有更好的评估价值。

关节炎是一类由多种病因引起的关节软骨退化和结缔组织慢性炎性病变，以发病率和致残率高、病因未明为特点，探索其发生、疾病进展机制是广大骨科和风湿免疫科医师面临的重大挑战。趋化素样因子(chemokine like factor，CKLF)1是新近克隆的趋化因子超家族成员，通过与其受体趋化因子C-C域4 (C-C motif chemokine receptor 4，CCR4)结合后激活一系列细胞核内转录因子，越来越多研究证实其信号通路在关节炎发生、进展中发挥重要作用。此外，CKLF1在其他自身免疫相关疾病中也发挥一定作用。

目的:通过分子生物学技术手段实现趋化素样因子1（CKLF1）在肾癌细胞系中的过表达，并探讨CKLF1对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭活性的影响及相关机制。方法:使用购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库的人ACHN细胞系作为研究模型，通过转染CKLF1质粒到细胞中来实现CKLF1的过表达。利用IncuCyte S3活细胞动态成像系统观察细胞增殖。Transwell法评估细胞迁移和侵袭能力，最后进行结晶紫染色和显微镜下计数来评估。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:转染CKLF1质粒后，在0 h时对照组细胞密度（182.93±80.42）与观察组（178.23±68.23）比较，差异无统计学意义（ t＝0.077, P>0.05）；在48 h时，对照组细胞密度（892.52±204.34）明显低于观察组（1 974.23±382.42），差异有统计学意义（ t＝4.314， P<0.05）。Transwell法的结果显示，1 h时对照组迁移细胞百分比[（22±3）%]与观察组[（23±2）%]比较，差异无统计学意义（ t＝0.481， P>0.05）；在8 h时，对照组迁移细胞百分比[（29±3）%]明显低于观察组[（59±5）%]，差异有统计学意义（ t＝8.911， P<0.05）。而通过对侵袭能力进行测定显示，1 h时对照组侵袭细胞百分比[（21±3）%]与观察组[（19±2）%]比较，差异无统计学意义（ t＝0.961， P>0.05）；在8 h时，对照组侵袭细胞百分比[（26±5）%]明显低于观察组[（55±4）%]，差异有统计学意义（ t＝7.845， P<0.05）。 结论:CKLF1在肾癌细胞中具有促进增殖、迁移和侵袭能力的作用。

目的:检测趋化素样因子超家族6(CMTM6)及程序性死亡配体1(PD-L1)在胶质瘤组织中的表达，并分析两种蛋白的表达相关性及其对预后的影响。方法:收集郑州大学第五附属医院神经外科收治的胶质瘤患者76例与同时期脑外伤开颅患者(对照组)40例，留取术中组织标本，通过免疫组织化学法(IHC)和蛋白质印迹法(Western blot)检测组织样本中CMTM6及PD-L1的表达情况，分别采用 χ2检验及独立样本 t检验分析表达是否有差异，并对两者表达做相关性分析。对胶质瘤术后患者随访36个月，并做生存分析。 结果:IHC结果显示CMTM6在胶质瘤组的阳性率明显高于对照组[77.6%(59/76)比22.5%(9/40)， χ2＝32.838， P<0.05]，差异有统计学意义，高级别胶质瘤(HGG)的阳性率明显高于低级别胶质瘤(LGG)[88.1%(37/42)比64.7%(22/34)， χ2＝5.919， P<0.05]，差异有统计学意义，HGG的高表达率明显高于LGG[78.4%(29/37)比40.9%(9/22)， χ2＝8.449， P<0.05]，差异有统计学意义；PD-L1在胶质瘤组的阳性率明显高于对照组[51.3%(39/76)比12.5%(5/40)， χ2＝16.771， P<0.05]，差异有统计学意义，HGG的阳性率明显高于LGG[61.9%(26/42)比38.2%(13/34)， χ2＝4.214， P<0.05]，差异有统计学意义，HGG的高表达率明显高于LGG[50.0%(13/26)比7.7%(1/13)， P<0.05]，差异有统计学意义；CMTM6与PD-L1表达呈现显著相关性( r＝0.535， P<0.05)。蛋白质印迹法(Western blot)结果，CMTM6在胶质瘤中的表达高于对照组(1.04±0.51比0.32±0.06， t＝12.174， P<0.05)，差异有统计学意义，在HGG中的表达高于LGG(1.26±0.46比0.78±0.44， t＝4.641， P<0.05)，差异有统计学意义，PD-L1在胶质瘤中的表达高于对照组(0.68±0.57比0.21±0.11， t＝6.896， P<0.05)，差异有统计学意义，在HGG中的表达高于LGG(0.92±0.61比0.38±0.32， t＝4.963， P<0.05)，差异有统计学意义。Kaplan-Meier生存分析显示，CMTM6/PD-L1表达阳性者预后比阴性者差( χCMTM62＝5.371， χPD-L12＝9.570， P<0.05)，高表达者预后比低表达者差( χCMTM62＝7.282， χPD-L12＝6.777， P<0.05)。 结论:CMTM6/PD-L1在胶质瘤组织中明显表达上调，且两者呈正相关，表达强度与胶质瘤的病理级别紧密相关，表达水平与生存时间呈负相关。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MTUS2-AS2在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测63例膀胱癌组织和癌旁组织、膀胱癌细胞系(BIU-87、J82、T24、5637)和正常膀胱上皮细胞系SV-HUC-1中的MTUS2-AS2表达。以MTUS2-AS2表达最低的J82细胞进行研究，分为对照组(转染载有无意义序列的对照质粒)和实验组(转染载有MTUS2-AS2表达序列的质粒)。qRT-PCR检测转染效率。MTS法和Transwell侵袭实验检测J82细胞的增殖和侵袭能力。qRT-PCR检测J82细胞中趋化素样因子超家族成员5(CMTM5)mRNA的表达，Western blot检测两组细胞中CMTM5、PI3K-AKT信号通路蛋白的表达。结果:膀胱癌组织MTUS2-AS2的表达低于癌旁组织( P<0.01)，膀胱癌细胞系MTUS2-AS2的表达明显低于正常膀胱上皮细胞( P<0.05)，J82细胞中MTUS2-AS2的表达最少( P<0.01)。与对照组相比，实验组J82细胞中MTUS2-AS2的表达明显增加( P<0.01)。与对照组相比，实验组J82细胞增殖活力明显降低( P<0.05)，细胞侵袭能力明显降低( P<0.01)。与对照组相比，实验组J82细胞中CMTM5 mRNA和蛋白表达增加( P<0.01)，PI3K-AKT信号通路蛋白表达降低( P<0.05)。 结论:MTUS2-AS2在膀胱癌组织和细胞系中呈低表达，MTUS2-AS2可通过上调CMTM5基因的表达，抑制J82细胞的增殖和侵袭能力。

目的:本研究旨在利用机器学习和网络药理学探讨小柴胡汤治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的分子机制.方法:基于中药系统药理学数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Plat-form,TCMSP)获取小柴胡汤的化学成分,利用Swiss Target Prediction和HERB数据库预测活性成分靶点.利用R软件包GEO-query获取RA相关数据集GSE93272 的表达谱和临床信息,并筛选差异靶点.通过机器学习算法支持向量机(support vector machine,SVM)进一步筛选疾病靶点基因.疾病靶点与活性成分靶点的交集靶点为小柴胡汤治疗RA的潜在作用靶点.利用clusterProfiler包对潜在靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集分析和WikiPathway通路富集分析.将活性成分和潜在作用靶点导入Cytoscape 3.8.2 软件构建"药物-活性成分-潜在靶点-疾病"网络,拓扑分析获取小柴胡汤治疗RA的核心成分.利用LASSO回归筛选小柴胡汤治疗RA的核心靶点.利用ssGSEA算法对核心靶点进行免疫浸润分析.结果:共筛选出有效活性成分193 个,相关靶点2 719 个.通过limma包差异分析共筛选出1 361 个差异基因.基于SVM进一步筛选得到357 个差异基因,潜在靶点62 个.GO富集分析得到 489 个GO条目,信号通路富集分析得到 70 条Wiki信号通路."药物-活性成分-潜在靶点-疾病"网络分析发现香豆雌酚可能是小柴胡汤治疗RA的核心成分.LASSO回归筛选到趋化素样因子(chemokine like factor,CKLF)和胱抑素 A(cystatin A,CSTA)可能是小柴胡汤治疗RA的核心作用靶点.数据分析显示,与正常样本比较,RA患者中CKLF和CSTA均呈现高表达趋势(P<0.000 1),且具有良好的诊断效能.免疫浸润分析表明,RA的发生发展与多种免疫细胞失调相关,核心靶点CKLF和CSTA可通过调控多种免疫细胞浸润缓解RA的进程.结论:小柴胡汤可能通过抗炎、调节免疫细胞功能等多方面发挥对RA的治疗作用.

目的 探讨人卵泡抑素样蛋白 3(FSTL3)在不同诱因所致的小鼠急性肺损伤中的表达及其意义.方法 采用腹腔注射脂多糖(LPS)构建脓毒血症肺损伤模型,采用左肺门夹闭后开放的方式构建缺血再灌注(IR)损伤模型.检测肺损伤不同时间点小鼠血清中FSTL3的蛋白表达水平,肺组织中FSTL3的蛋白及mRNA表达水平.使用FSTL3 中和抗体(FSTL3-NA)或FSTL3基因敲除小鼠评估FSTL3抑制对两种诱因所致的小鼠肺损伤的影响.使用免疫印记法检测小鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),超氧化物歧化酶(SOD)1 和SOD2 的蛋白表达水平.应用GraphPad Prism 9.2统计软件对数据进行分析.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 小鼠血清中FSTL3的蛋白表达水平于LPS腹腔注射后12h显著升高,18 h达到峰值,后趋于稳定,均显著高于0h(P<0.05);缺血2h,再灌注 2h后小鼠血清中FSTL3 蛋白表达水平显著升高,再灌注 6h达到峰值,8 h后蛋白表达水平仍显著高于 0h(P<0.05).Western blotting和转录实时定量聚合酶链反应显示,LPS 刺激 18h 后小鼠肺组织中 FSTL3 的蛋白和 mRNA 表达水平达到峰值(P<0.05);缺血 2h,再灌注 2h后,小鼠肺组织中FSTL3 的蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05),再灌注 4h后,FSTL3的蛋白和mRNA表达水平均达到峰值(P<0.05).FSTL3-NA处理可明显减轻脓毒血症小鼠肺病理损伤,下调肺组织TNF-α[(1.23±0.11)和(2.45±0.27)]和 MCP-1[(0.34±0.02)和(2.23±0.04)]的蛋白表达水平,上调 SOD1[(3.05±0.16)和(1.87±0.32)]和SOD2[(2.45±0.19)和(1.61±0.24)]的蛋白表达水平(均P<0.05).FSTL3 基因敲除可明显减轻IR小鼠肺病理损伤,下调肺组织TNF-α[(1.22±0.19)和(4.13±0.21)]和MCP-1[(0.88±0.03)和(3.10±0.15)]的蛋白表达水平,上调SOD1[(2.27±0.16)和(0.41±0.06)]和SOD2[(2.04±0.13)和(0.19±0.05)]的蛋白表达水平(均P<0.05).结论 LPS或IR刺激后,小鼠血清及肺组织中的FSTL3 明显升高,FSTL3 抑制或FSTL3 基因敲除可明显减轻小鼠肺组织炎症和氧化应激.

目的 研究慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)患者血清解整合素金属蛋白酶 17(adisintegrin and metalloproteinase-17,ADAM-17)和C-X-C趋化因子配体16(C-X-C chemokine ligand 16,CXCL16)水平及临床价值.方法 选取2018年1月～2020年1月陕西中医药大学附属西电集团医院因腹部不适等症状收治的174例患者,根据病理活检结果分为CAG组(n=94)和非CAG组(n=80).CAG组根据严重程度分为轻度组(n=27)、中度组(n=30)和重度组(n=37).以50例健康体检者为对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清ADAM17和CXCL16水平.多因素Logistic回归分析CAG发生的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清ADAM17和CXCL16对CAG的诊断价值.结果 CAG组血清ADAM17(79.25±9.34ng/L),CXCL16(4.66±0.58μg/L)水平高于非CAG组(73.94±8.26ng/L,4.03±0.55μg/L)和对照组(53.04±7.20ng/L,1.02±0.35μg/L),差异具有统计学意义(t=5.794,24.854;11.053,55.497,均P＜0.05).重度组CAG患者血清ADAM17(87.17±9.30ng/L),CXCL16(5.14±0.51μg/L)水平高于轻度组(79.12±9.52ng/L,4.65±0.57μg/L)和中度组(68.54±7.89ng/L,4.02±0.63μg/L),差异具有统计学意义(t=11.574,5.152;11.065,4.987,均P＜0.05).血清ADAM17(OR=1.851,95%CI:1.350～2.522),CXCL16(OR=1.682,95%CI:1.233～2.296)是影响CAG发生的独立危险因素.血清ADAM17,CXCL16联合诊断CAG的曲线下面积为0.912(95%CI:0.858～0.949),大于单一指标 0.843(95%CI:0.801～0.907),0.785(95%CI:0.722～0.834),差异具有统计学意义(Z=9.357,12.894,均P＜0.05).结论 CAG患者血清ADAM17,CXCL16 升高,两者与CAG疾病程度有关,联合检测对CAG有较高的预测价值.

目的 分析疏血通注射液与依达拉奉右莰醇联合治疗缺血性脑卒中的临床效果.方法 以随机数字表法将信阳市第三人民医院2022年1月—2022年12月接收的100例患者分为对照组、联合组,两组各50例.对照组予以依达拉奉右莰醇治疗,联合组予以疏血通注射液+依达拉奉右莰醇治疗.比较两组疗效、治疗前后神经功能[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)]、生活质量[脑卒中专用生活质量量表(SS-QOL)]、意识状态[格拉斯哥昏迷量表(GCS)]、血流动力学指标[大脑中动脉搏动指数(PI)、收缩期最高血流速率(Vs)、舒张期最低血流速率(Vd)、阻力指数(RI)]、血清趋化因子水平[趋化素样因子-1(CKLF1)、不规则趋化因子(FKN)、CXC趋化因子配体16(CXCL16)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)].结果 联合组总有效率(92.00％)高于对照组(76.00％)(P＜0.05);治疗后联合组NIHSS低于对照组,GCS、SS-QOL高于对照组(P＜0.05);治疗后联合组PI、Vs、Vd高于对照组,RI低于对照组(P＜0.05);治疗后联合组CKLF1、FKN、CXCL16、MIF水平低于对照组(P＜0.05);两组不良反应总发生率相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺血性脑卒中经疏血通注射液与依达拉奉右莰醇联合治疗后疗效显著,可减轻炎性反应,改善血流动力学指标,促进神经功能、意识状态恢复,提高生活质量.