虚、瘀、水、毒在慢性心力衰竭（CHF）的发生发展和病理演变过程中具有重要意义。基于“虚、瘀、水、毒”探讨CHF发展过程中的病机演变及治疗，认为虚是起病之本，瘀、水、毒为疾病发展之标。其中，虚：心气亏虚、心阳不足；瘀：血瘀是中心病理环节，也是加重疾病、造成恶性循环的重要机制；水：痰饮、水湿是根本病理产物；毒：热毒、水毒、瘀毒是病情进展、产物堆积的最终结果。治疗上，CHF可分为早、中、晚、末4期。早期补气调心治本、活血行水治标；中期益气养阴扶正、化瘀泄浊祛邪；晚期化瘀解毒为主、温阳利水为辅；末期救逆固脱敛阳、生津益气补阴。在分期论治的同时要注意坚持整体观念、辨证论治；注重把握时机、灵活用药；采取中西并用、融会贯通。

目的:分析4例不明原因的溶血性贫血患者的基因变异类型。方法:采集4例以溶血性贫血为表型的患者及其家系成员外周静脉血，提取基因组DNA。应用高通量测序方法对4例患者红系相关疾病基因进行筛查，并用Sanger测序验证患者及其家系成员可疑变异位点。结果:4个先证者在 SEC23B基因上均检测到2个复合杂合变异，分别来自其父母，为先天性红细胞生成异常性贫血(congenital dyserythropoietic anemia，CDA)Ⅱ型患者。先证者1携带 SEC23B基因第15外显子c.1727T>C(p.Phe576Ser)和第16外显子c.1831C>T(p.Arg611Trp)复合杂合变异；先证者2携带第2外显子c.74C>A(p.Pro25His)和第14外显子c.1588C>T(p.Arg530Trp)复合杂合变异；先证者3携带第2外显子c.74C>A(p.Pro25His)和第16外显子c.1831C>T(p.Arg611Trp)复合杂合变异；先证者4及其弟携带第14外显子c.1571C>T (p.Ala524Val)和第19外显子c.2149G>T (p.Ala717Ser)复合杂合变异；检出的6个变异中，c.1727T>C(p.Phe576Ser)和c.2149G>T (p.Ala717Ser)为未见报道过的新变异。同时检测到先证者4其 PIEZO1基因上存在c.4608_4615del(p.Gly1537Glufs*82)杂合变异。 结论:高通量测序技术可快速准确地对CDAⅡ型患者进行基因变异分析，是传统诊断方法的有效补充手段，其中新发现的变异位点丰富了 SEC23B基因的变异数据库。

目的:利用数据挖掘技术探讨《医宗金鉴》治疗便秘的核心用药规律，为临床治疗便秘提供思路。方法:整理《医宗金鉴》有关便秘的方剂，采用中医传承云计算平台V1.0对数据集进行频次统计、性味归经及功效统计、关联分析和复杂网络分析，并进行可视化展示。结果:纳入治疗便秘方剂106首，涉及中药169味，总频次894次，高频中药有大黄、甘草、黄芩、当归等，以泻下药、补虚药、清热药为主，药味以辛、甘、苦为主，药性以寒、温为主，归经以肺、脾、胃、肝经为主。根据关联规则支持度，二阶关联分析得出大黄-黄芩、大黄-芒硝等10个药物组合，三阶关联分析得出大黄-当归-甘草，黄芩-黄连-大黄等9个药物组合，社团聚类分析得出12类聚类方。结论:《医宗金鉴》治疗便秘用药遵循“温、清、补”思想，以通降法为主，以温中补虚、清热通便为基本治法，寒温并用，脏腑辨治。临证应以病为纲，辨证施治。

目的:采用基于脑损伤标志物的潜在类别分析，评价老年患者术前脑损伤程度与术后谵妄(POD)的关系。方法:选择拟行单侧全髋关节置换术老年患者131例，年龄65～84岁，BMI 18～28 kg/m 2，ASA分级Ⅰ-Ⅲ级。术前通过简易智力状态检查量表(MMSE)评估认知功能，麻醉前取动脉血样，采用ELISA法检测血浆脑源性神经营养因子(BDNF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、前列腺素E2 (PGE2)、中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)、神经纤维丝轻链(NFL)、基质金属蛋白酶(MMP9)、成纤维细胞生长因子23(FGF-23)、补体3(C3)、补体3a(C3a)、补体5a(C5a)及鸢尾素(Irisin)浓度。术后3 d内采用意识模糊评估法(CAM)评估POD发生情况，将患者分为POD组与非POD组。使用潜在类别分析，根据脑损伤标志物水平将患者分为不同损伤程度亚型，并用logistic多因素回归分析患者POD的独立危险因素。 结果:与非POD组比较，POD组患者血浆NFL、GFAP、S100β和PGE2浓度差异有统计学意义( P<0.05)。应用这4种脑损伤标记物进行潜在类别分析，将患者分为高脑损伤程度(91.51%)和低脑损伤程度(8.49%)。logistic多因素回归结果显示，脑损伤程度亚型( OR＝8.31，95% CI 1.77～38.90， P＝0.007)、年龄( OR＝1.14，95% CI 1.03～1.24， P＝0.007)及血浆Irisin浓度( OR＝0.99，95% CI 0.98～0.99， P＝0.027)是POD的独立危险因素。 结论:术前脑损伤程度较高是老年患者POD的独立危险因素。

目的:探讨miRNA-186-3p（miR-186-3p）对子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭的影响及与转化生长因子β（TGF-β）-Smad信号通路的关系。方法:将载有miR-186-3p抑制基因、miR-186-3p模拟物的质粒分别转染至子宫颈癌CaSki细胞，分别为miR-186-3p-I组、miR-186-3p-M组；另将转染空载质粒的CaSki细胞作为对照，为miR-186-3p-C组。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，采用Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力；采用蛋白质印迹法检测各组细胞TGF-β-Smad信号通路相关蛋白表达水平；采用Starbase软件预测miR-186-3p靶基因，并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果:miR-186-3p-M组细胞凋亡率均低于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[（7.5±3.2）%比（13.9±0.7）%、（12.7±0.6）%，均 P<0.05]。miR-186-3p-M组迁移细胞数[（218±25）个比（168±13）个、（175±13）个，均 P<0.001]和侵袭细胞数均多于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[（165±21）个比（130±11）个、（142±12）个，均 P<0.001]。miR-186-3p-M组TGF-β、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2（p-Smad2）、磷酸化Smad3（p-Smad3）蛋白相对表达量均最低，与另两组比较，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。采用Starbase软件预测miR-186-3p与XIST RNA互补结合；双荧光素酶报告基因实验显示，XIST野生型载体+miR-186-3p模拟物质粒共转染的细胞相对荧光素酶活性低于XIST野生型载体+miR-186-3p空载质粒共转染的细胞（ P<0.001）。 结论:miR-186-3p可能直接与XIST RNA结合而下调TGF-β-Smad信号通路活性，进而增强子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭活性。

目的:探讨在聚己内酯薄膜上将DiI标记的骨髓间充质干细胞（BMSCs）与乳鼠心肌细胞接触共培养制作心肌补片的可能机制。方法:选取5~6周龄SD大鼠2只，分离培养获得SD大鼠BMSCs，流式细胞术鉴定表面抗原。选取乳鼠15只，分离培养获得乳鼠心肌细胞。BMSCs 培养至3代，使用DiI染料标记BMSCs。在聚己内酯薄膜上将DiI标记的BMSCs与心肌细胞接触共培养并设为实验组，对照组中将心肌细胞替换为等量未标记的BMSCs。共培养后24 h在荧光显微镜下观察细胞生长情况，并用扫描电镜观察共培养情况。共培养后7 d对细胞进行免疫荧光染色检测心肌标志物表达，在荧光显微镜下观察聚己内酯薄膜上BMSCs表达心肌标志物的情况。共培养的第1、7天使用流式细胞术分析BMSCs的干细胞分化率。使用钙黄绿素单独对心肌细胞染色，再在聚己内酯薄膜上将其与DiI标记的BMSCs接触共培养，观察细胞间染料转移，并对细胞进行免疫荧光染色，检测缝隙连接蛋白43的表达，观察缝隙连接与接触共培养之间的关系。结果:流式细胞术鉴定示BMSCs表面CD90、CD44H强阳性，CD11b/c、CD45阴性。共培养后24 h，荧光显微镜下观察到细胞依附于聚己内酯薄膜上，DiI标记的BMSCs发红光，未标记的心肌细胞不发光；扫描电镜下观察到聚己内酯薄膜上细胞数量多，细胞状态正常。共培养第7天，部分DiI标记的BMSCs表达心肌肌钙蛋白T、α-心肌肌动蛋白。流式细胞术分析示第7天实验组的干细胞分化率高于对照组［（20.12±0.15）%比（3.49±0.20）%， P<0.05］。共培养后第2天，缝隙连接蛋白43免疫荧光染色结果示部分BMSCs可见明显绿色点状荧光；共培养后第3天，染料转移试验示部分BMSCs发出明显绿色荧光。 结论:DiI标记的BMSCs与心肌细胞在聚己内酯薄膜上接触共培养可以制作心肌补片，并且接触共培养促进分化形成心肌补片的机制可能与缝隙连接以及缝隙连接介导的细胞间信号通路有关。

目的:探讨采用机器人辅助腹腔镜下改良舌黏膜补片修复复杂输尿管狭窄的治疗效果。方法:回顾性分析2022年5月—10月南部战区总医院泌尿外科收治的8例输尿管狭窄患者的临床资料。男性6例，女性2例，年龄（45.1±10.2）岁（范围：34~64岁），体重指数（24.6±2.0）kg/m 2 （范围：20.7~26.6 kg/m 2）。左侧5例，右侧3例，输尿管狭窄长度（3.1±0.7）cm（范围：2.2~4.5 cm）。术前血肌酐（113.8±22.3）μmol/L（范围：96~165 μmol/L）。术中采用后壁黏膜岛状连接输尿管正常两断端预缝合+狭窄段切除+后壁增强吻合+舌黏膜补片输尿管成形术，根据实际狭窄情况取舌黏膜长度2.5~5.0 cm，宽度1.0~1.5 cm，并用大网膜包裹修复段输尿管。记录患者的手术情况、并发症以及近期的随访情况。 结果:本研究8例手术均在机器人辅助腹腔镜下顺利完成，无中转开放手术。手术时间（226.9±22.8）min（范围：210~255 min），术中出血量（93.8±25.9）ml（范围：75~150 ml），术后引流管留置时间（4.8±1.3）d（范围：3~7 d），术后住院时间（11.1±3.6）d（范围：9~14 d）。术后1周患者发音准确、吐字清晰，可正常进食。术后4~8周拔除双J管。随访时间3~9个月，影像学检查见患侧肾积水明显改善，患侧肾盂分离（1.4±0.8）cm（范围：0~2.3 cm）。术后复查血肌酐（100.1±24.9）μmol/L（范围：76~155 μmol/L）。术后3个月行输尿管镜检复查，可见术侧输尿管全程通畅，黏膜正常。结论:机器人辅助腹腔镜下改良舌黏膜补片修复输尿管狭窄，近期效果好，为修复输尿管狭窄提供了一种手术选择。

目的:探究针刺结合补阳还五汤对颈动脉狭窄脑血流低灌注模型大鼠肠道菌群的影响。方法:将40只大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、中药组和针药组，每组10只。除假手术组外，其余各组采用针控线栓法制备脑缺血模型。中药组灌胃补阳还五汤化裁方水煎液100 mg/kg，1次/d，连续干预2周。针药组在中药组治疗基础上，选取“百会”及其左、右侧各旁开2 mm处进行干预，1次/d，连续干预2周。分别于给药后7、14 d进行神经功能评价和行为学功能评分。采用16S rRNA测序对各组大鼠粪便菌群结构和组成进行全面表征分析，采用线性判别效应量分析法（LEfSe）对多组间肠道细菌进行差异分析。结果:给药后第7、14天，与模型组比较，中药组和针药组神经功能评分降低（ P<0.05），行为学功能评分升高（ P<0.05）。与模型组比较，中药组和针药组Shannon指数升高（ P<0.05）；厚壁菌门丰度升高（ P<0.05），拟杆菌门和变形菌门丰度降低（ P<0.05）；梭菌纲丰度升高（ P<0.05），丙型变形菌纲丰度降低（ P<0.05）；大肠杆菌-埃希氏菌和拟杆菌丰度降低（ P<0.05）；针药组乳酸杆菌丰度显著升高（ P<0.05）。 结论:针刺结合补阳还五汤治疗对颈动脉狭窄脑血流低灌注模型大鼠的症状有改善作用，其机制可能与增加益生菌丰度有关。

目的:研究健康体检队列人群γ-谷氨酰转移酶（GGT）的发展轨迹，探讨其与新发2型糖尿病（T2DM）的相关性。方法:本研究为队列研究。回顾性选取于2015年1月1日至2020年1月1日在大连医科大学附属第二医院健康管理中心体检的符合队列入组标准的1 566人作为研究对象。收集一般资料及实验室检查指标，包括性别、年龄、体重指数、收缩压、舒张压、GGT、肌酐、尿酸、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等。构建目标人群4年GGT水平发展的组基轨迹模型，确定其GGT发展轨迹的组数和趋势。采用Kaplan-Meier曲线分析各轨迹组T2DM的累积发病率，并用LogRank检验比较GGT轨迹组T2DM累积发病率的差异。应用Cox比例风险回归模型分析GGT轨迹组T2DM的发病风险，并通过补充失访人群和去除随访第1年发病人群，对主要结果进行敏感性分析。结果:确定3个亚组人群GGT的变化轨迹，分别标记为GGT低水平组（734名，46.87%）、GGT中水平组（657名，41.95%）和GGT高水平组（175名，11.18%），其中GGT低/中水平组人群的GGT均值在4年随访内逐渐上升，而GGT高水平组则呈现先升高再下降又上升的趋势，但始终大于基线均值，总体呈上升态势。随访4年后，该队列T2DM的发病密度为18.32/1 000人年，GGT低、中、高水平组的发病密度分别为13.51/1 000人年、19.12/1 000人年和36.14/1 000人年。各GGT轨迹组T2DM的4年累积发病率随着随访时间的延长而逐渐上升，且GGT高水平组的累积发病率最高（ χ2=15.579， P<0.001）。Cox回归分析结果显示，在调整性别、年龄、体重指数、肌酐、尿酸、收缩压、舒张压、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、HDL-C和LDL-C后，GGT高水平组T2DM的发病风险为GGT低水平组的2.594倍（HR=2.594，95%CI 1.112~6.048， P=0.027）。敏感性分析结果显示，GGT高水平组的发病风险仍高于低水平组（ P<0.05）。 结论:健康体检人群发生T2DM的风险随着GGT水平的快速升高而增加。

探讨CNVPLUS ?微阵列芯片（CNVPLUS ?-array）在 DMD基因诊断中的应用价值。选取2014年1月至2023年3月在上海交通大学医学院附属新华医院儿内分泌遗传科就诊、临床诊断Duchenne/Becker肌营养不良（DMD/BMD）的96例儿童纳入回顾性分析，分别采用CNVPLUS ?-array技术和多重连接探针扩增（MLPA）—二代测序（NGS）—Sanger测序序贯法检测患儿外周血 DMD基因。序贯法中，MLPA检出的单外显子缺失运用聚合酶链式反应（PCR）验证，PCR结果正常的样本再行Sanger测序；MLPA阴性的样本行NGS检测并用Sanger测序验证。结果显示，96例样本中，CNVPLUS ?-array检出 DMD基因致病性变异91例，其中大片段缺失/重复即拷贝数变异（CNV）76例、微小变异即单核苷酸变异/小插入缺失（SNV/Indel）15例，5 d完成所有样本的实验和诊断；序贯法则检出致病性CNV 76例、SNV/Indel 20例，48 d完成全部实验和诊断。5例CNVPLUS ?-array漏诊的SNV/Indel样本优化运算模式后致病位点可以正确聚类。综上，CNVPLUS ?-array由于集CNV和SNV探针为一体，能同步检测 DMD基因的CNV和SNV/Indel，但对CNV的诊断性能优于SNV/Indel，有待优化运算模式必要时需补充其他检测以减少漏诊风险。