利用高通量测序平台,对贮存于贵阳库(GY)、坛厂库(TC)和紫云库(ZY)的云南保山C3F (2013)烟叶样品进行宏基因组水平的ITS1基因测序分析,以期揭示陈化烟叶表面真菌群落组成、分布格局及功能分组,探讨化学因子对其结构的影响.结果显示,从15个样品中共检测到了1 173 560条有效序列,包括4个门、140个属;贵阳库优势属为耐干霉菌属Xeromyces,坛厂库优势属为红酵母属Rhodotorula,紫云库优势属为耐干霉菌属Xeromyces;坛厂库优势菌群及变化趋势与贵阳库和紫云库存在差异;真菌群落以腐生营养型和病理营养型为主,分布有潜在人体病原真菌;有机碳、总磷、总钾对真菌群落变化影响显著(P＜0.05).真菌群落组成和格局分布受存储环境、陈化时间及烟叶化学元素的共同影响.

背景:无定形磷酸钙可作为生物矿化过程中纳米羟磷灰石的前导相及钙和磷酸盐的储备库,但其稳定性受合成环境影响,容易发生相变.目的:采用钙螯合剂羧甲基壳聚糖(carboxymethyl chitosan,CMCS)稳定无定形磷酸钙,分析稳定无定形磷酸钙的羧甲基壳聚糖最低阈值及陈化时间对无定形磷酸钙稳定期的影响.方法:4℃低温下,在含不同CMCS与Ca摩尔比比值(1:1,1:2,1:3,1:4,1:5)的溶液中制备CMCS-无定形磷酸钙沉淀,采用扫描电镜观察沉淀的微观结构,X射线衍射和红外光谱检测沉淀的化学成分,求得合成稳定CMCS-无定形磷酸钙的最低CMCS/Ca比值,并用热重量及差热分析得此比值下复合物中的无定形磷酸钙含量.再以此比值经不同陈化时间(10,30,60,90 min)获得CMCS-无定形磷酸钙复合物,将其溶于模拟体液中,采用X射线衍射和扫描电镜监测无定形磷酸钙的相变,探讨陈化时间对无定形磷酸钙稳定期的影响.结果与结论:①X射线衍射与红外光谱图谱显示,当CMCS/Ca≥1:3时,CMCS-无定形磷酸钙沉淀物为非晶体相;②扫描电镜显示,当CMCS/Ca≥1:3时,沉淀物中可见大量分布均匀的无定形磷酸钙颗粒;③通过以上实验得出,低温条件下合成稳定CMCS-无定形磷酸钙复合物的CMCS/Ca最低比值为1:3,在此比值下复合物中无定形磷酸钙的实际量为63.63%;④X射线衍射与扫描电镜显示,当陈化时间为10-60 min时,CMCS-无定形磷酸钙复合物的模拟体液浸泡产物为非晶体态,相位转化时间分别为2,6,8 h;当陈化时间为90 min时浸泡产物为晶体态;⑤结果表明,低温条件下合成稳定CMCS-无定形磷酸钙复合物的CMCS/Ca最低比值为1:3,在该比值下复合物的稳定期随陈化时间延长而延长,在2-8 h范围内变化.

仓储生态因子和烟叶化学成分的改变直接影响烟叶微生物群落结构和功能.以储存在贵阳库(GY)、坛厂库(TC)及紫云库(ZY)的云南保山C3F烟叶为研究对象,对不同陈化时间(0、6、12、18、24个月)的烟叶样品提取微生物总DNA,利用Illumina HiSeq平台对细菌的16S rRNA V4区进行高通量测序,并结合主要化学成分分析,以期揭示烟叶陈化过程中细菌群落演替规律及其与烟叶化学成分间的作用关系.研究结果表明,烟叶细菌群落以假单胞菌属、鞘氨醇单胞菌属、寡养单胞菌属、芽孢杆菌属为优势属;随陈化时间的增加,细菌优势群落呈现出变形菌门和厚壁菌门间消长变化的趋势,陈化后期芽孢杆菌(厚壁菌门)优势度明显增强;烟叶陈化过程中,细菌优势功能群变化与化学成分逐级降解间呈显著的相关关系,主要表现为由降解糖类菌群向降解淀粉类菌群,再向降解纤维素类菌群变化的趋势;其中,影响菌群演替的关键因素是水溶性总糖和纤维素.研究结果揭示了在烟叶陈化过程中存在显著的细菌群落演替特征,加深了对烟叶陈化机制的理解,为微生物调控烟叶陈化过程提供了科学依据.

目的 建立新会陈皮质量控制方法.方法 高效液相色谱法(HPLC)色谱条件为Atlantis T3-C18色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.5％醋酸水系统,以流速1.0 mL/min进行梯度洗脱.检测波长为283 nm和330 nm,测定46批次不同产地、不同采收时间、不同陈化时间新会陈皮的橙皮苷、川陈皮素、橘皮素含量.计算比值范围,并对陈化年份和3种化合物含量进行Pearson相关性分析.结果 橙皮苷含量≥2.56％,川陈皮素含量≥0.27％,橘皮素含量≥0.18％,3种黄酮类化合物含量的比值范围为100∶(7.58～22.09)∶(4.89～14.55).陈化年份和橙皮苷、川陈皮素之间没有相关性,陈化年份和橘皮素呈负相关(r=-0.345,P＜0.05);橙皮苷、川陈皮素、橘皮素三者含量之间存在正相关性(r=0.544、0.581、0.873,均P＜0.01).结论 这3种化合物的限量标准及比值范围能有效地控制新会陈皮的质量.

艾叶挥发油为临床常用中药艾叶的主要活性部位群,化学成分复杂,受提取方法、产地、采收时间、陈化、存储条件等多种因素的影响.艾叶挥发油具有抗病毒和抑菌、平喘、抗炎、镇痛镇静等药理活性.本文对艾叶挥发油的提取工艺、化学成分、药理作用、临床应用及安全性等方面综述,为艾叶挥发油深度开发和高效综合利用提供参考.

[背景]烟叶陈化涉及多方面因素的相互作用.[目的]研究烟叶表面可培养微生物群落结构、功能和化学成分之间的联系.[方法]以储存于贵阳库、坛厂库、茅台库的烟叶为研究对象,分别对不同陈化时间的烟叶样品进行微生物分离,采用rDNA条形码技术对微生物优势菌株进行物种鉴定,利用FAPROTAX和FUNGuild数据库分别对细菌和真菌进行功能注释,并结合主要化学成分进行相关分析.[结果]243个烟叶样品中共分离到189株优势细菌菌株和229株优势真菌菌株,其中细菌以芽孢杆菌属(Bacillus)为优势种群,真菌以曲霉属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium)为优势种群.随着陈化时间的延长,优势种群和优势功能类群比例逐渐降低,主要化学成分与微生物群落变化呈显著相关关系.[结论]微生物功能群通过结构变化推动烟叶陈化进程,同时陈化过程中主要化学成分的变化影响了微生物群落的组成与功能.

目的 以羟丙基甲基纤维素(HPMC)为主料,添加凝胶剂、助凝剂及增塑剂,改变配方和工艺,研制高透明性HPMC空心胶囊.方法 通过控制不同结冷胶用量、钾盐种类、添加剂和养胶温度、陈化时间、干燥方式及干燥温度等因素,优化高透明性HPMC植物胶囊的最适配方和制备工艺参数.结果 制备高透明性HPMC植物胶囊的最佳配方和工艺为:HPMC 1000份,结冷胶13份,枸橼酸钾10.5份,聚乙烯醇5份,枸橼酸三乙酯1.2份,蒸馏水4 500份,5 200 r·min-1均质2 min,87℃陈化1～2h,蘸胶后10℃冷藏45～ 50 min后,40℃鼓风干燥.结论 对产物透明性影响最大的因素为胶囊干燥的方式和温度,蘸胶完成后低温环境的冷藏能促进HPMC在湿胶囊中的溶解,可有效提高胶囊的透明性.

目的:考察黑曲霉对不同陈化年份广陈皮黄酮类成分的影响.方法:将黑曲霉反接至无菌广陈皮,恒温恒湿培养,于不同时间点进行取样,采用超高效液相色谱法(UPLC)和紫外分光光度计法测定广陈皮黄酮类成分.结果:黑曲霉反接后,不同陈化年份广陈皮总黄酮、橙皮苷、川陈皮素及橘皮素含量均有提升,且UPLC指纹图谱显示有新成分增加.其中陈化2年黄酮类成分变化较大,除橘皮素含量变化不明显外,其总黄酮、橙皮苷和川陈皮素含量各增长了72.24％、69.93％和72.34％.结论:黑曲霉对不同陈化年份广陈皮的黄酮类成分均有一定影响,影响最大的是陈化2年广陈皮,其中具体的转化机制还有待深究.

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术分析不同陈化时间广陈皮中的黄酮类成分.方法:采用Agilent Extend-C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8 μm),流动相0.1％乙酸水溶液(A)-0.1％乙酸甲醇溶液(B)梯度洗脱(0～25 min,5％～95％B;25～30 min,95％B;30～30.1 min,95％～5％B;30.1～35 min,5％B),流速0.4 mL· min-1,柱温30℃.高分辨质谱采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子切换模式扫描,扫描方式为全扫描/数据依赖二级扫描(FullM S/dd-MS2).通过多级离子碎片信息结合mzCloud网络数据库,中药成分高分辨质谱数据库(OTCML),对照品比对及文献数据进行准确定性.结果:共鉴定43种黄酮类成分,其中黄酮类24种,黄酮醇类5种,二氢黄酮类13种,查尔酮类1种.不同陈化时间广陈皮的黄酮类成分在物质种类上较为一致,但峰面积存在差异.依据峰面积比较相对含量,发现30种黄酮类成分的相对含量随陈化时间增加总体呈增加趋势,其中橙皮苷,diosmin,6-去甲氧基橘皮素,川陈皮素,橘皮素等24种黄酮类成分相对含量增加明显;柚皮素、新橙皮苷等其他13种黄酮类成分相对含量随陈化时间增加总体无明显变化.结论:该方法可全面、准确、高效地测定不同陈化时间广陈皮的黄酮类成分及其相对含量变化,可为广陈皮药效物质基础、质量控制研究提供方法学参考,并为阐释陈皮"陈久者良"提供实验依据.

为探究生物炭陈化对农田土壤水肥的作用效果,设置2种陈化时间的生物炭Y1、Y5(新施入土壤的生物炭、田间自然陈化第5年的生物炭)和3个生物炭施用量C0、C6和C12(0、6和12 t·hm-2)的田间双因素随机区组试验,研究生物炭陈化对玉米产量、不同土层含水率和土壤肥力的影响.结果表明:相同施炭量下,陈化第5年的生物炭较新鲜生物炭对玉米产量及土壤水肥效应所表现出的正向效应均降低.Y1C12处理玉米产量提升最高(28.3％),Y5C6处理玉米产量提升最低(6.9％);相同施炭量下,陈化第5年生物炭的玉米增产效应小于新鲜生物炭.除Y5C6处理外,其余生物炭处理与Y1C0(Y5C0)处理相比均显著提高了玉米的水分利用效率(P＜0.05),提升幅度为5.4％～16.7％.施用生物炭对土壤含水率的影响主要集中在表层土壤,陈化生物炭处理的土壤含水率较新鲜生物炭处理的土壤含水率显著降低,5年低量生物炭Y5C6处理下的土壤含水率与Y1C0(Y5C0)处理无显著差异.施用生物炭显著增加了土壤硝态氮、铵态氮、碱解氮、全氮、有效磷、速效钾含量,进而提升土壤综合肥力,但陈化第5年的生物炭对土壤养分提升效果低于新鲜生物炭,各处理土壤综合肥力表现为Y1C12＞Y5C12＞Y1C6＞Y5C6＞Y1C0(Y5C0).本研究结果可为合理利用生物炭提供科学依据.