目的:研究不同剂量N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)溶液对小鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的损伤作用，并检测新型长链非编码RNA(lncRNA)Tsix在小鼠视网膜兴奋性毒性模型中的表达水平及其对视网膜和RGCs的保护作用。方法:选取7～8周龄C57B6/J小鼠105只，采用随机数表法将小鼠随机分为正常对照组、2 mmol/L NMDA组、10 mmol/L NMDA组、20 mmol/L NMDA组和40 mmol/L NMDA组，每组21只。正常对照组小鼠右眼玻璃体腔内注入1 μl氯化钠溶液，不同剂量NMDA组分别注射相应剂量的NMDA溶液各1 μl。1周后，分别采用光相干断层扫描(OCT)、苏木精-伊红染色、视网膜铺片和免疫荧光染色法分析不同剂量NMDA组视网膜各层厚度、神经节细胞层(GCL)细胞数量和RGCs数量。采用RNAscope原位杂交技术检测不同剂量NMDA组GCL中lncRNA Tsix的表达。采用实时荧光定量PCR技术检测不同剂量NMDA组 Tsix基因的转录本水平。 结果:OCT结果显示，2、10、20和40 mmol/L NMDA组视网膜全层厚度分别为(255.00±6.63)、(252.40±6.41)、(248.67±6.20)和(229.11±10.37)μm，较正常对照组的(269.60±20.01)μm明显变薄，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示，正常对照组小鼠GCL细胞排列均匀、紧密，呈单层，细胞核大而圆，NMDA注射后细胞出现体积不均和空泡，有核固缩现象。各剂量NMDA组GCL细胞数量随NMDA剂量的增加而显著降低，与正常对照组相比差异均有统计学意义(均 P<0.05)。当NMDA浓度增至20 mmol/L时，GCL的细胞数量减少至正常对照组的一半。视网膜铺片结果提示，β3-微管蛋白阳性RGCs细胞数量随NMDA剂量的增加显著降低，与正常对照组比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)；10 mmol/L NMDA组RGCs数量减少至正常对照组的一半。RNAscope结果显示，lncRNA Tsix主要在GCL细胞的细胞质中表达，且随着NMDA剂量的增加，表达lncRNA Tsix的阳性细胞率显著降低，各组总体比较差异有统计学意义( F＝13.670， P<0.01)。实时荧光定量PCR结果验证Tsix随NMDA剂量的增加表达趋势与RNAscope结果一致。 结论:NMDA对视网膜厚度和RGCs的损伤呈剂量依赖性，小鼠视网膜lncRNA Tsix的表达主要集中在GCL细胞的细胞质，且转录本水平随着NMDA剂量的增加而降低，对RGCs发挥保护作用。

目的:探讨氧化损伤在黄芩素改善高脂诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。方法:将体质量18～20 g雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组：正常对照组（C，10%脂肪供能）、高脂组（H，60%脂肪供能）、高脂+黄芩素组（H+B，黄芩素：400 mg/kg体质量）、黄芩素对照组（B，黄芩素：400 mg/kg体质量）。12周后处死小鼠并收集组织样本，HE染色观察肝脏病理改变，超微病理检查线粒体形态，采用试剂盒测定肝脏中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平及线粒体膜电位（MMP）改变，采用蛋白质印迹法检测Sestrin2及蛋白质羰基化（PCOs）水平，小干扰RNA（siRNA）干扰技术敲低HepG2细胞内Sestrin2蛋白表达，荧光染料BODIPY493/503测定HepG2细胞内脂质改变。采用单因素方差分析中LSD两两比较检验统计学差异。结果:与正常对照组相比，高脂喂养导致小鼠肝脏出现明显的脂肪变性及GSH、SOD水平降低（ P值均< 0.05），MDA及蛋白质羰基化水平升高，Sestrin2表达增高（ P值均< 0.05）；线粒体形状改变、肿胀、缺少嵴，MMP下降33.3%（ t = 13.456， P < 0.001）；黄芩素干预有效的抑制高脂喂养导致的小鼠肝脏脂肪变性与氧化损伤，进一步上调Sestrin2的表达，增高MMP（ t = 10.104， P < 0.001），肝脏损伤明显缓解。敲低Hep2细胞内Sestrin2的表达，细胞内脂质沉积进一步增加，PCOs表达上升（ P值均<0.05），黄芩素拮抗脂质沉积及抗氧化能力降低。 结论:黄芩素可能通过调控Sestrin2表达，缓解高脂喂养导致的肝脏氧化损伤，从而减轻非酒精脂肪肝损伤。

目的:初步探讨在静息状态下，组织多普勒（TDI）联合二维斑点追踪技术（2D-STI）评价冠状动脉非阻塞性心绞痛（ANOCA）患者微循环功能障碍（CMD）及左心功能损伤的应用价值。方法:本研究为单中心回顾性研究。选取2019年8月至2021年7月在辽宁省人民医院就诊的78例ANOCA患者，所有受试者均行常规超声心动图检查，使用TDI检查、2D-STI检查评价左心功能，使用经胸腺苷负荷超声心动图（SE）测定冠状动脉血流速度储备（CFVR）评价微循环功能。根据CFVR将ANOCA患者分为CMD组（CFVR<2）和对照组（CFVR≥2），收集两组患者的临床资料、常规超声心动图参数。TDI参数包括等容收缩时间（IVCT）、等容舒张时间（IVRT）、射血时间（ET）以及Tei指数，2D-STI参数包括左心室整体纵向应变（GLS）、达峰时间（TTP）、达峰时间离散度（PSD）。采用二元logistic回归分析TDI和2D-STI参数对CMD的预测价值，并采用受试者工作特征（ROC）曲线构建CMD的联合预测模型。结果:共纳入78例患者，年龄（55.5±11.2）岁，女性43例（55%），CMD组38例（49%），对照组40例（51%）。与对照组相比，CMD组年龄、高血压、糖尿病、血脂异常、吸烟比例高，Tei指数高、IVCT长、TTP长、PSD高、ET短、GLS绝对值低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。logistic回归分析结果显示，IVCT延长、Tei指数增高、PSD增高、GLS绝对值降低是CMD的正相关因素。ROC曲线显示，联合以上预测因子对CMD有较高的诊断价值， AUC=0.884，敏感度为82%，特异度为80%。 结论:TDI联合2D-STI在评价ANOCA患者CMD及左心功能损伤中有较好的应用价值，有助于此类患者诊断、预测以及进一步危险分层。

高光谱成像是一种新的非接触式测量方法。该研究借助高光谱成像可清楚评估创面灌注的特性，利用数据处理来计算成年人烧伤创面三维灌注参数，可估算6种(1、2、3A、3B、4、5)不同损伤皮肤层面的血红蛋白的体积分数和氧合参数，描述热损伤后72 h内烧伤创面的微循环情况，反映烧伤皮肤的损伤深度。研究通过比较不同程度的创面测量结果，分析不同深度创面的特征和差异，形成了用于烧伤创面深度诊断的三维灌注分析方法。综上，该研究基于对这种灌注特性的分析，开发出了一种新的、更可靠的烧伤深度诊断技术，有助于指导外科医师尽早选择最佳创面治疗方案。

目的:比较两种伤指两侧指动脉供血吻合方法（双动静脉吻合与单动静脉吻合）在静脉动脉化断指再植术中的应用价值。方法:回顾性队列研究。纳入2016年1月—2021年10月丹阳市人民医院骨科收治的拇指近节或第2~5指中节离断患者37例（40指），其中男27例、女13例，年龄29~45（37±7）岁。37例40指均因断指动脉损伤严重、动脉吻合通血失败≥2次、动脉缺损不能直接吻合且血管移植困难，而采用伤指两侧指动脉供血的静脉动脉化技术进行断指再植术。按照动静脉血管吻合方式的不同将患者分为2组：双动静脉吻合口组18例20指，分别将伤指两侧指动脉近端与远端静脉端端吻合和端侧吻合；单动静脉吻合口组19例20指，先将非优势侧指动脉近端端侧吻合于优势侧指动脉上，再将优势侧动脉的近端与远端静脉端端吻合。对比观察2组患者术中血管吻合时间、术后血管危象发生情况，以及术后伤指指甲生长速度、两点辨别觉、感觉功能分级和手指关节总主动活动度（TAM）等。结果:2组患者性别、年龄、伤指指别、手术时机等基线资料比较，差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。2组患者手术顺利完成，术后每组有3例发生动脉血管危象，经解痉、抗凝治疗均好转；37例（40指）伤口均甲级愈合。术中双动静脉吻合口组动静脉吻合时间为（45±7）min，单动静脉吻合口组为（48±9）min，差异无统计学意义（ t=0.09， P=0.927）。术后33例（34指）获随访，随访时间6～12个月。双动静脉吻合口组16例（17指）和单动静脉吻合口组17例（17指）术后指甲生长速度分别为每个月（5.1±0.7）mm和（4.8±0.8）mm、伤指各关节TAM优良率均为15/17、指感觉测定平均值分别为S2~S3 +级和S2~S4级、两点辨别觉分别为（6.8±1.4）mm和（6.6±0.8）mm，2组间比较差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。 结论:双动静脉吻合与单动静脉吻合两种伤指两侧指动脉供血的静脉动脉化方法临床疗效无明显差别，均能够挽救部分血管损伤严重的断指，且再植指成活后外观及功能恢复良好，为常规方法断指再植失败后提供了一种有效的备选方法。

目的:观察3xTg-AD小鼠海马突触可塑性与钙离子跨膜流动特征。方法:根据基因型不同，将6月龄小鼠分为APP/PS1/tau三转基因AD(3xTg-AD)模型小鼠和野生型(WT)对照组小鼠两组，每组13只。每组随机选取6只小鼠进行在体电生理记录，给予测试刺激记录其海马CA1区场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential，fEPSP)、配对脉冲刺激记录双脉冲易化(paired-pulse facilitation，PPF)、高频刺激(high frequency stimulation，HFS)诱导长时程增强(long-term potentiation，LTP)。每组剩余的7只小鼠采用非损伤微测技术(non-invasive micro-test technology，NMT)，检测海马CA1区脑片神经元的跨膜钙内流和钙外排情况。3xTg-AD小鼠在电生理和NMT实验中各损失1只，最终入组电生理实验5只，NMT实验6只。采用SPSS 18.0对所有数据进行统计学分析，两组间比较使用两独立样本 t检验。 结果:(1)在体电生理实验中，给予测试刺激后30 min内，3xTg-AD小鼠和WT小鼠的fEPSP斜率均比较稳定，其平均fEPSP斜率分别为[(97.8±2.3)%]和[(92.6±12.6)%]，两组之间差异无统计学意义( t＝0.91， P>0.05)；给予配对脉冲刺激后，3xTg-AD小鼠和WT小鼠的PPF值分别为(1.58±0.69)和(1.74±0.17)，两组间差异无统计学意义( t＝0.50， P>0.05)；给予HFS后30 min和60 min，3xTg-AD小鼠的LTP值分别为[(104.9±10.9)%]和[(98.0±10.8)%]，明显低于WT小鼠的[(156.5±21.3)%]( t＝4.43， P<0.01)和[(162.5±19.7)%]( t＝5.92， P<0.01)。(2)在NMT实验中，3xTg-AD小鼠海马CA1区神经元谷氨酸诱导的标准化跨膜Ca 2＋内流平均流速和峰值流速分别为[(-2 166.0±425.0)%]和[(-3 539.6±1 270.9)%]，远高于WT小鼠的[(-735.3±262.9)%]( t＝6.81， P<0.01)和[(-917.3±271.7)%]( t＝4.89， P<0.01)；而低钙溶液引起的3xTg-AD小鼠标准化Ca 2＋外排平均流速和峰值流速分别为[(1 451.6±297.1)%]和[(1 968.7±227.3)%]，显著低于WT对照组小鼠的[(2 579.3±810.9)%]( t＝2.92， P<0.05)和[(3 420.4±954.8)%]( t＝3.31， P<0.01)。 结论:6月龄3xTg-AD小鼠出现的海马突触可塑性损伤可能与钙内流增加和钙外排减少所导致的海马神经元胞内Ca 2＋超载密切相关。

目的：:利用高分辨率光学相干断层扫描血管成像技术（OCTA）探究系统性红斑狼疮（SLE）患者黄斑区视网膜微血管形态的早期变化特征。方法：:系列病例研究。收集2018年5─11月在温州医科大学附属第二医院风湿免疫科门诊就诊的SLE患者31例（62眼），分为狼疮性视网膜病（LR）组10例（17眼）和非狼疮性视网膜病（NLR）组24例（45眼）。同时招募与疾病组年龄、性别匹配的正常成年人35例（35眼）作为正常对照组。应用OCTA对所有受检者黄斑区视网膜行3 mm×3 mm模式扫描，获得黄斑区浅层及深层视网膜微血管图像，并用本实验室自行编写的分析程序将视网膜血流灌注图进行骨架化分析，获得去除中央无血管区（FAZ，0.6 mm）的总环区域（TAZ）以及进一步4分区（S、T、I、N）的浅层及深层视网膜骨架化毛细血管密度（RCD）。此外，以系统性红斑狼疮疾病活动度评分（SLEDAI）对疾病组进行评分。采用独立样本 t检验和方差分析等进行数据分析。 结果：:在浅层视网膜TAZ区域以及S、T、I、N各分区，NLR组和LR组的RCD值均低于正常对照组，且LR组相较于NLR组更低，这些差异均有统计学意义（ P<0.05）。在深层视网膜，3组之间的差异不如浅层明显，仅发现LR组在N区域的RCD值较NLR组明显下降（ P=0.022），且LR组在除T外其他3个分区的RCD值均较正常对照组明显下降（ P<0.05）。此外，LR组的SLEDAI评分显著高于NLR组（ P=0.006），且LR组的SLE并发症，如狼疮性肾炎和神经精神性狼疮的发生率均更高（分别为50% vs. 25%，10% vs. 4%）。 结论：:OCTA能有效检测SLE患者黄斑区视网膜微血管形态的早期改变。SLE患者无明显眼底及视力损伤时，浅层视网膜RCD即发生显著性改变，推测其可能可以作为监测SLE视网膜损害的早期生物学特征。

目的:观察并分析贮袋炎患者的肠屏障功能，探索核苷酸寡聚化结构域2(NOD2)蛋白在回肠贮袋炎中的作用，为研究UC并发贮袋炎的发病机制提供新的思路。方法:回顾性分析2011年1月至2016年12月在天津医科大学总医院内镜中心行贮袋黏膜活组织检查的回肠贮袋肛管吻合术后患者的临床病理资料，根据贮袋炎疾病活动度指数将患者分为贮袋炎组(20例)和非贮袋炎组(30例)。另选择未行手术治疗的UC患者为对照组(10例)。使用透射电子显微镜观察贮袋炎组和非贮袋炎组患者的肠腔结构，采用免疫组织化学技术检测并计算对照组、非贮袋炎组和贮袋炎组患者的闭合蛋白、α人防御素和NOD2的阳性表达率。统计学方法采用Levene检验、独立样本 t检验和Spearman相关分析。 结果:透射电子显微镜下见贮袋炎组患者的肠黏膜上皮紧密连接结构和腔面微线毛损伤严重。免疫组织化学结果显示，贮袋炎组患者肠黏膜中闭合蛋白、α人防御素和NOD2的阳性表达率均低于对照组和非贮袋炎组[分别为(19.3±0.4)%比(84.0±0.3)%和(77.9±0.5)%，(60.0±1.3)%比(85.0±0.1)%和(77.3±0.4)%，(46.1±1.6)%比(72.0±0.7)%和(60.7±0.5)%]，差异均有统计学意义( t＝-8.451、-7.514，-3.943、-2.970，-5.115、-2.982； P均<0.05)。相关性分析显示，NOD2的表达水平与闭合蛋白、α人防御素呈正相关( r＝0.671、0.628， P均<0.01)。 结论:回肠贮袋炎患者肠屏障功能受损，NOD2相关的肠屏障损伤可能在回肠贮袋炎发病机制中处于重要地位。

脊髓是由灰质和白质构成，被硬脊膜、蛛网膜、软脊膜、齿状韧带和脑脊液所环绕。脊髓及其周围不同解剖结构的生物力学特性相关研究已证实脊髓属于非线性黏弹性介质，灰质和白质均具有超弹性材料的特性，在单轴拉伸和机械压缩实验方面的力学性能各异。人体脊髓在全长上呈粗细不均匀的状态，而各节段的硬脊膜表现出明显的异向性，其弹性模量自颈髓至腰髓逐渐减小。尽管对蛛网膜生物力学行为的研究较少，但其对提升脊柱有限元模型的预测准确性具有非常大的潜力。关于人软脊膜生物力学行为的研究尚无文献报道。脊髓浸润在脑脊液中，脑脊液可作为脊髓的震动缓冲器，因此在讨论脊髓的生物力学行为时不应忽视脑脊液的重要作用。当脑脊液压力升高时，脊髓的应力也会升高，反之亦然。齿状韧带的强度自上至下逐渐减弱。脊髓组织柔软，在受损时常发生拉伸、压缩和扭转等混合力学变化。脊髓的测量方法包括磁共振弹性成像（magnetic resonance elastography，MRE）、原子力显微镜、微压痕技术和脊髓造影等。MRE在脊髓形态学研究方面具有一定的优势。脊髓变形损伤时准确测量其力学参数难度大，通过应用影像学技术显示脊髓的动态病理变化，可以为临床治疗与预防提供宝贵的参考信息。有限元分析在研究脊髓损伤方面具有重要的价值，但目前的建模方法存在一定的简化，在脊柱有限元模型中脊髓通常被建模为均质材料，这种建模仍然需要进一步的实验证实其有效性。通过深入研究脊髓的生物力学特性及测量方法的研究进展，能更加深入地理解脊髓损伤机制，并为脊髓损伤的治疗和预防提供重要的理论指导和支持。

目的:研究db/db小鼠远端大脑中动脉闭塞（dMCAO）后焦虑行为加重的机制。方法:选择db/db小鼠作为2型糖尿病模型，选择同窝杂合子小鼠（db/+）和C57野生型（WT）小鼠作为双对照组。采用dMCAO模型作为急性脑缺血模型。测量假手术组和dMCAO前后各品系小鼠的血糖水平。通过免疫荧光染色检测微管相关蛋白-2表达，评估dMCAO后35 d时各品系小鼠的脑组织缺损体积。选择旷场测试评估小鼠的焦虑行为。选择免疫荧光染色检测非磷酸化神经丝蛋白4（SMI32）和髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达以评估小鼠dMCAO术后35 d时脑白质损伤情况，并将SMI32和MBP的免疫荧光强度比值与旷场测试的中心停留时间和角落停留时间进行相关性分析以评估脑白质损伤程度与焦虑行为的相关性。选择流式细胞技术检测小鼠缺血侧脑组织中T细胞，包括调节性T细胞（Tregs）和B细胞的数量。结果:假手术组和dMCAO组中db/db小鼠术前和术后血糖水平明显高于db/+小鼠和WT小鼠（均 P<0.01）。db/db小鼠dMCAO后35 d时3个品系小鼠脑组织缺损体积比较差异无统计学意义（ P>0.05）。旷场测试结果：假手术组和dMCAO组db/db小鼠在旷场行走总路径距离均明显少于db/+小鼠、WT小鼠（ P<0.05或<0.01）。db/+小鼠在旷场行走总路径距离少于WT小鼠（ P<0.05）。假手术组db/db小鼠在旷场中心停留时间明显少于db/+小鼠、WT小鼠（ P<0.05或<0.01）。dMCAO组db/db小鼠在旷场中心停留时间明显少于db/+、WT小鼠（ P<0.05或<0.01），db/+小鼠少于WT小鼠（ P<0.01）。假手术组db/db、db/+小鼠在旷场角落停留时间明显多于WT小鼠（db/db小鼠比WT小鼠， P<0.01；db/+小鼠比WT小鼠， P<0.05）。dMCAO组db/db小鼠在旷场角落停留时间明显多于db/+、WT小鼠（ P<0.05或<0.01），db/+小鼠多于WT小鼠（ P<0.05）。免疫荧光染色检测小鼠脑梗死周边皮层和外囊区SMI32和MBP表达结果。dMCAO组db/db小鼠脑梗死周边外囊区SMI32/MBP荧光强度比值明显高于db/+小鼠和WT小鼠（4.24 ± 0.37比1.96 ± 0.37、1.80 ± 0.36），差异有统计学意义（均 P<0.01），而脑梗死周边皮层区SMI32/MBP荧光强度比值，三个品系小鼠间比较差异无统计学意义（ P>0.05）。dMCAO组db/db小鼠和WT小鼠脑梗死周边外囊区SMI32/MBP荧光强度比值与旷场中心停留时间呈负相关（ r = -0.67， P = 0.02）；dMCAO组db/db小鼠和WT小鼠脑梗死周边外囊区SMI32/MBP荧光强度比值与旷场角落停留时间呈正相关（ r = 0.62， P = 0.03）。dMCAO后3 d，db/db小鼠梗死侧脑组织中总T细胞、CD 8+T细胞以及CD 4+CD 25+Foxp3 +Treg细胞数量均明显少于WT小鼠（4 079 ± 1 345比70 055 ± 3 374、141.30 ± 28.36比2 714.00 ± 463.20、148.00 ± 61.15比3 007.00 ± 639.90）（ P<0.01）。但是，db/db小鼠与WT小鼠脑组织中B细胞数量比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:通过对比分析db/db小鼠dMCAO后焦虑行为严重程度，脑白质脱髓鞘损伤程度及梗死侧脑组织中T细胞数量，尤其是CD 4+CD 25+Foxp3 +Treg细胞数量，推测卒中后免疫介导的脑白质损伤可能参与加重db/db小鼠dMCAO后焦虑行为。因存在基因剂量效应，db/+小鼠在涉及焦虑行为评估的动物实验中可能不适宜作为db/db小鼠的对照组使用。