目的:构建老龄小鼠非清髓性单倍体外周血造血干细胞移植（haplo-PSCT）后的急性移植物抗宿主病（aGVHD）模型。方法:选用6~8周龄C57BL/6（H-2 b）雄性小鼠作为供鼠，14~16月龄CB6F1（H-2 b×d）雌性老龄鼠作为受鼠。供鼠于移植前5 d皮下注射人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）进行造血干细胞动员；将受鼠按随机数字表法分为对照组（CG）、脾细胞低剂量组（SL）、脾细胞中剂量组（SM）、脾细胞高剂量组（SH），每组各16只，均接受总剂量为6 Gy的直线加速器X射线全身照射（TBI），照射后4 h内经尾静脉输注外周血单个核细胞（PBMC）和不同剂量的脾细胞（SL组、SM组和SH组分别为0.5×10 7/只、1.0×10 7/只和2.0×10 7/只），CG组仅输注等量生理盐水。移植后观察各组受鼠的生存情况及体重变化，观察期为30 d，并定期监测小鼠血常规变化。移植后21 d取小鼠外周血检测供体嵌合率。移植后21 d取小鼠颈背部皮肤、肝脏、结肠组织行苏木精-伊红染色，分析aGVHD靶器官的组织病理学变化情况。 结果:各组小鼠均移植成功。各组小鼠TBI后体重、活动度均下降，并出现骨髓抑制现象。观察期内CG组和SL组小鼠全部存活，SM组死亡3只，生存时间为（26.0±5.8）d，SH组小鼠死亡6只，生存时间为（20.9±7.3）d。SH组小鼠体重呈持续下降的趋势，移植后21 d体重低于CG组、SL组和SM组［分别为（25.0±0.7）、（25.5±0.4）、（25.0±1.4）比（20.8±0.8）g，均 P<0.05］。移植后21 d，与CG组、SL组和SM组相比，SH组小鼠白细胞、红细胞、血红蛋白及血小板水平降低（均 P<0.05）。SL组、SM组和SH组供体嵌合率差异无统计学意义［分别为（95.8%±0.8%）、（95.5%±1.4%）和（95.1%±1.3%），均 P>0.05］。与CG组、SL组、SM组相比，SH组aGVHD靶器官组织结构破坏严重，大量炎性细胞浸润，且组织病理学评分高于SL组、SM组（均 P<0.05）。 结论:对于老龄CB6F1小鼠，给予直线加速器X线6 Gy TBI预处理之后，输注PBMC（1×10 7/只）、脾细胞（2.0×10 7/只）能成功诱导出非清髓性haplo-PSCT后aGVHD模型。

目的:探讨单倍体造血干细胞(haplo-HSC)联合第三方脐血(tpCB)移植治疗儿童骨髓衰竭性疾病(BMFs)的疗效。方法:回顾性分析2012年7月至2019年7月解放军总医院第六医学中心收治的78例BMFs患儿，包括遗传性BMFs 4例和获得性BMFs 74例；男41例，女37例；首次移植73例，二次移植5例，采用haplo-HSC联合tpCB移植治疗，中位年龄5.6岁，预处理采用白消安为基础方案，74例获得性BMFs采用非清髓性，4例遗传性BMFs采用清髓性。预防急性移植物抗宿主病(aGVHD)采用环孢素、霉酚酸酯和甲氨蝶呤，01 d分别输注单倍体骨髓造血干细胞和tpCB，02 d输注单倍体外周造血干细胞，回输单倍体总有核细胞中位数为12.19×10 8/kg，CD 34+细胞中位数为6.13×10 6/kg。 结果:中性粒细胞≥0.5×10 9/L和血小板≥20×10 9/L的中位天数分别为+13 d和+17 d。+30 d为供者型完全嵌合，无一例原发性植入失败，2例发生继发性植入失败。Ⅱ～Ⅳ度和Ⅲ～Ⅳ度aGVHD发生率分别为39.0%和13.9%，慢性GVHD的局限型发生率为7.8%(95% CI：7.1%～8.5%)，全身型为2.6%(95% CI：2.1%～3.1%)。随访1 550 d，存活76例，均为无病存活，移植相关死亡率为2.8%，5年的无失败生存率和整体生存率均为97.2%(95% CI：96.8%～97.6%)。 结论:单倍体和脐血可以快速提供造血干细胞，haplo-HSC联合tpCB治疗儿童BMFs疗效明确。

随着干细胞治疗炎症性肠病研究的不断深入,其安全性问题日益受到重视.干细胞治疗炎症性肠病的过程,根据预处理方案的强度,可以分为清髓性和非清髓性两种.本文梳理了现有国内外临床研究数据,综述了干细胞治疗炎症性肠病短期及长期研究的安全性.已有文献显示,目前研究均未观察到致瘤性风险,清髓性方案易合并感染,非清髓性方案严重不良反应少见.脐带血单个核细胞免疫原性低,不用HLA配型,解决了清髓性干细胞移植需要长期服用抗排斥药物的问题,在安全性方面优势突出.希望为进一步的前瞻性研究提供参考.

造血干细胞移植(HSCT)是治疗各种血液系统疾病的有效方法.移植前预处理是HSCT的首个步骤,关系到HSCT的成败,而不同的预处理方案各有利弊.笔者拟就清髓性预处理(MAC)方案、非清髓性预处理(NMAC)方案、减低剂量预处理(RIC)方案及其他特殊HSCT前预处理方案的研究进展进行综述,以指导临床进行个体化的HSCT预处理方案的选择.

目的 探讨恶性血液病患者行挽救性二次造血干细胞移植后巨细胞病毒(CMV)及EB病毒(EBV)感染的状况.方法 选择2009年9月至2016年10月行二次造血干细胞移植的25例患者为研究对象,用实时定量PCR方法定期检测移植后外周血CMV及EBV DNA,分析二次造血干细胞移植后病毒感染的情况及影响因素.结果 二次造血干细胞移植后CMV总的感染率为52.0％(13/25),其中干细胞来源于骨髓组CMV感染的发生率为100％ (2/2),外周血干细胞组为33.3％(5/15),混合组(骨髓+外周血干细胞)为75％ (6/8),三组比较差异有统计学意义(P=0.038),各组两两相互比较差异无统计学意义(P＞0.05).分析不同移植方式各组CMV感染的发生率,差异无统计学意义(P＞0.05).对采用清髓/非清髓预处理方案组、不同GVHD预防方案组、不同急性GVHD严重程度组,各自比较移植后CMV感染的发生率,差异无统计学意义(P＞0.05).二次造血干细胞移植后EBV总的感染率为24.0％(6/25),其中干细胞来源于骨髓组EBV感染的发生率为100％ (2/2),外周血干细胞组为6.7％(1/15),骨髓+外周血干细胞组为37.5％(3/8),三组比较,差异有统计学意义(P=0.008),骨髓组EBV感染率高于外周血干细胞组(P=0.022),骨髓组与混合组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),外周血干细胞组与混合组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).分析不同移植方式各组EBV感染的发生率,差异有统计学意义(P=0.007).单倍体组EBV感染率为71.4％,高于同胞全相合组(0％)和自体组(0％),差异有统计学意义(P=0.021和P=0.028),余下各组两两相互比较,差异无统计学意义(P＞0.05).对采用清髓/非清髓预处理方案组、不同GVHD预防方案组、不同急性GVHD严重程度组,各自比较移植后EBV感染的发生率,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 二次造血干细胞移植后CMV及EB病毒感染发生率较高,移植方式及干细胞的来源与二次造血干细胞移植后CMV及EBV感染相关.

目的 探讨化疗药非清髓预处理与人脐带血造血干细胞移植(HSCT)对小鼠生精功能的影响.方法 将30只Balb/c小鼠按照随机数字表法分为三组,每组10只,分别为对照组、白消安(BU)联合环磷酰胺(CY)非清髓预处理(BU+CY)组、HSCT组.除对照组外,BU+CY组和HSCT组使用BU 10 mg/kg和CY 120 mg/kg预处理造成睾丸损伤,HSCT组进行人脐带血HSCT.HSCT移植3周后,称重法计算睾丸指数,进行小鼠精液质量常规分析及睾丸、附睾的病理组织学检查.结果 与对照组比较,BU+CY组小鼠睾丸指数、精子密度和精子活力均显著降低,而精子畸形率升高(P＜0.01).HSCT组小鼠移植物抗宿主病(GVHD)评分较高,睾丸指数、精子密度和活力均高于BU+CY组(P＜ 0.05),精子畸形率低于BU+CY组(P＜0.01).病理学检查发现,BU+CY组小鼠睾丸体积较小,生精小管破坏明显,生精细胞肿胀、排列紊乱,生精上皮变薄,生精小管与附睾管内精子数目大大减少;与BU+CY组比较,HSCT组睾丸体积增大,生精小管完整性较好,生精小管内精子数量较高,但生精上皮层数和精母细胞数量仍较少.结论 BU+CY非清髓预处理可造成明显睾丸损伤,轻度急性GVHD情况下,脐带血HSCT可一定程度促进睾丸生精功能的恢复.

背景:异基因造血干细胞移植对结肠癌术后肝转移的预防和治疗在临床以及动物实验中鲜有研究报道,结肠癌术后肿瘤负荷较小,此时建立混合型嵌合体可望取得一定疗效.目的:探讨异基因造血干细胞移植对结肠癌肝转移的抑制作用及其对嵌合体和移植物抗宿主病的影响,并对其抑瘤机制进行研究.方法:BALB/c×C57BL/6杂交一代CB6F1小鼠保脾注射CT-26大肠癌细胞建立结肠癌肝转移模型,随机分为4组:对照组、环磷酰胺组、全相合脾细胞加骨髓细胞移植+环磷酰胺组(全相合移植组)、半相合脾细胞加骨髓细胞移植+环磷酰胺组(半相合移植组),每组8只.取自C57BL/6小鼠和CB6F1小鼠骨髓及脾细胞混合后行尾静脉注射,之后接受腹腔注射环磷酰胺进行非清髓性预处理,再输注供鼠淋巴细胞.观察各组小鼠生存时间、肿瘤肝转移以及移植物抗宿主病发生情况;流式细胞仪进行嵌合体分析,ELISA方法测定血浆白细胞介素2、γ-干扰素、白细胞介素4、转化生长因子β水平.结果与结论:①半相合移植组小鼠生存期明显延长,结肠癌肝转移抑制率明显增高,抑瘤率明显增加,与环磷酰胺组及全相合移植组相比,差异有显著性意义;②半相合移植组小鼠混合细胞移植7 d后,供鼠细胞嵌合率逐渐增加;至移植后28 d,供鼠细胞基本取代受鼠细胞,嵌合率达99%以上;③半相合移植组小鼠的移植物抗肿瘤效应明显增强,但未出现严重的移植物抗宿主病症状,且小鼠血浆白细胞介素2、γ-干扰素水平较其他组明显升高,转化生长因子β水平明显降低,而白细胞介素4水平无明显差异;④结果表明,小鼠经环磷酰胺非清髓处理的异基因骨髓细胞联合淋巴细胞移植后嵌合率明显增加,伴随产生了明显的移植物抗肿瘤效应,其对结肠癌肝转移具有抑制作用.血浆白细胞介素2、γ-干扰素、转化生长因子β水平变化与肿瘤生长抑制是有关联的.

背景:异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血的发生导致患者红系造血恢复延迟、血型转换时间延长,从而产生一系列并发症.因此,应重视异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血预防和诊断后的治疗对策,以加快移植后红系植入.目前纯红细胞再生障碍性贫血的发生率、高危因素尚无定论,诊疗尚无规范指南.目的:探讨异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血发病的高危因素和治疗对策.方法:2例患者,诊断为急性白血病,接受同胞供者的清髓性外周血干细胞移植,供受者血型均为A供O,分别于+44 d、+58 d出现纯红细胞再生障碍性贫血,复习诊治过程和相关文献.结果与结论:①1例经美罗华、大剂量甲强龙、血浆置换治疗后痊愈;另1例经大剂量甲强龙、美罗华和硼替佐米治疗后血象于5个月后逐渐恢复;②总结文献报道的93例发生移植后纯红细胞再生障碍性贫血病例,所有患者均为供受者ABO血型不合,明确血型的患者中A供O者占66％(47/71),同胞供者、非清髓预处理、病毒感染等是发生纯红细胞再生障碍性贫血的高危因素,主要治疗方法有血浆置换、激素、利妥昔单抗等;③异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血是少见的并发症,多种因素可促进其发生,目前尚无一致的治疗共识,部分患者可以自愈,对难治性患者,硼替佐米和艾曲波帕可作为新的靶向治疗药物.

血液肿瘤是严重威胁人类健康的疾病.目前,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)仍是有效治愈血液肿瘤的方法之一.allo-HSCT发展迅速,清髓性移植或非清髓移植采用致死性或亚致死性预处理,清除受者的免疫功能,使供体细胞稳定地植入,诱导了较强的GVL作用,降低白血病的复发率,但伴随着严重的移植物抗宿主病(graft-versus-leukemia,GVHD)和感染等致死性移植并发症,移植相关死亡率高,限制了allo-HSCT的临床广泛使用.近年来,随着“微移植”(microtransplantation,MST)概念的提出,以及其在老年急性髓性白血病的突出的治疗效果,MST越来越多的被临床所应用.在肿瘤免疫治疗时代的来临,本文就MST在血液肿瘤治疗应用的进展进行文献复习与综述.

目的 探讨ABO血型不合的异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的发病机制和治疗对策.方法 报道1例极重型再生障碍性贫血患儿行同胞HSCT后发生PRCA的病例及成功治疗经过,并复习相关文献.结果 13岁女性患儿,接受ABO血型主要不合的同胞HSCT后不能脱离红细胞输注,并发PRCA,经调整免疫抑制剂、DLI、应用利妥昔单抗、血浆置换等治疗后,PRCA得到纠正,血常规恢复正常.结论 HSCT后PRCA的发生与ABO血型抗体、非清髓预处理带来的免疫紊乱有关.主要治疗方法有使用单克隆抗体、血浆置换等,对于难治性患者,达雷木单抗、硼替佐米和艾曲波帕可作为新的靶向治疗药物.