目的:采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨组合质谱技术(ultra-performance liquid chromatography-linear ion trap/orbitraphigh resolution mass spectrometry, UHPLC-LTQ-Orbitrap)分析异类叶升麻苷在大鼠尿液中的代谢产物，并归纳其代谢途径。方法:将大鼠按随机数字表法分为给药组、空白组。给药组大鼠灌胃异类叶升麻苷生理盐水溶液100 mg/kg，空白组灌胃等体积生理盐水。连续收集大鼠尿液12 h，经纯化处理后，采用Thermo Scientific BDS Hypersil C18色谱柱(2.1 mm×150 mm，2.4 μm)，以0.1%甲酸水-乙腈为流动相，梯度洗脱，流速0.3 ml/min，柱温30 ℃。在负离子检测模式下对给药组及空白组尿液进行分析。结果:通过分析高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子信息，结合对照品与文献报道结果，从给药组大鼠尿液样品中共鉴定得到8个代谢产物，主要代谢途径为葡萄糖醛酸化、水解、甲基化、磺酸化。结论:应用UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液质联用技术可分析异类叶升麻苷在大鼠体内主要的代谢产物和代谢途径，为其进一步的药效及药理机制研究提供参考。

目的 建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)法同时测定牛黄上清片中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、3α-羟基-7-氧代-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸的含量.方法 分析采用 Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9 μm);流动相0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温 40℃;加热电喷雾离子源;负离子扫描;平行反应监测模式.再进行化学模式识别.结果 18 种胆汁酸在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率 96.73%～104.07%,RSD 2.10%～4.07%.不同厂家样品中各胆汁酸在种类和含量上存在一定差异.结论 该方法灵敏可靠,专属性好,可用于牛黄上清片的质量控制.

目的 分析协日嘎-4味散成分组成,并测定黄柏碱、绿原酸、栀子苷、小檗碱、芦丁、姜黄素的含量.方法 高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)定性分析采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量 0.35 mL/min;柱温 35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描.高效液相色谱串联三重四级杆质谱(HPLC-MS/MS)定量分析采用 Shim-pack GIST-HP C18 色谱柱(2.1 mm×100 mm,3 μm);流动相甲醇-0.1%甲酸;体积流量0.25 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式.结果 共鉴定出 65 种成分,包括 19 种生物碱、13 种有机酸、13 种黄酮、7 种姜黄素、6 种环烯醚萜、4 种脂肪酸、2 种醛、1 种氨基酸.6 种成分在各自范围线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率96.44%～102.37%,RSD 2.05%～3.74%.结论 本研究可为协日嘎-4味散的质量控制提供参考.

目的:建立超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS)法同时测定当归配方颗粒中12种成分的含量.方法:采用ACQUITY UPLC? BEH C18(2.1 mm× 100 mm,1.7 μm)色谱柱;以甲醇(A)-0.1％甲酸水溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱;流速为0.3 mL·min-1;柱温为45 ℃;进样量为2 μL.质谱采用电喷雾离子源,正负离子全扫描(Full MS/SIM)模式.对当归配方颗粒中的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、丁烯基苯酞、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、藁本内酯和欧当归内酯A共12种成分进行含量测定,并对含量测定结果进行化学计量学分析.结果:12种成分在各自范围内线性关系良好(r2≥0.997 9),精密度、重复性及稳定性良好(RSD≤9.22％);加样回收率在88.01％～108.77％,RSD均小于10％.聚类分析将18批当归配方颗粒聚为4类,主成分分析共筛选出6个差异标志物.结论:该方法可快速、灵敏测定当归配方颗粒中12种成分的含量,为当归配方颗粒质量评价提供部分新的科学依据和参考.

目的 基于超高效液相色谱-线性离子阱串联静电场轨道高分辨质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS/MS)技术、网络药理学和分子对接探究蒲公英改善高脂血症的有效成分及其作用机制.方法 根据质谱信息结合对照品裂解规律并参考文献指认蒲公英中化学成分;利用STITCH、SwissTargetPredection、TCMSP数据库构建蒲公英的潜在药效成分靶点数据库,通过GeneCards、DrugBank、OMIM、TherapeuticTargetDatabase、PharmGKB获取血脂异常潜在靶点;使用STRING数据库构建关键靶点蛋白相互作用(PPI)网络;通过Metascape数据库对关键靶点进行基因本体论(GO)功能与京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析;借助Cytoscape软件构建"活性成分-靶点-通路"网络;采用分子对接技术进行虚拟验证.结果 从蒲公英中共鉴别出 126 个化合物,包括黄酮类 58 个,有机酸类 29个,萜类 23 个,苯丙素 8 个,核苷类 3 个和其他类5 个.网络药理学研究表明,蒲公英可能通过槲皮素、异鼠李素、香叶木素、白杨素、芹菜素等成分作用于碳酸酐酶 2(CA2)、碳酸酐酶 7(CA7)、醛糖还原酶(AKR1B1)、基质金属蛋白酶 2(MMP-2)、蛋白激酶1(Akt1)等核心靶点,来调节脂质和动脉粥样硬化、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、流体剪切应力和动脉粥样硬化和晚期糖基化终末产物(AGE)/AGEs受体(RAGE)等信号通路,从而发挥调血脂作用;分子对接验证结果表明,蒲公英改善高脂血症有效成分与疾病靶点蛋白具有较强的结合活性.结论 蒲公英可能通过调控脂质代谢、炎症反应、内质网应激、氧化应激和免疫调节等多方面发挥改善高脂血症的作用.

目的:应用网络药理学方法搜索消瘤藤治疗子宫肌瘤的活性成分、靶基因及信号通路,探讨消瘤藤抗子宫肌瘤的作用机制.方法:采用95％乙醇加热回流提取消瘤藤药材,利用HPLC-LTQ/Orbitrap MS技术对消瘤藤提取物进行检测.通过对照品、分子量和质谱裂解规律对消瘤藤化学成分进行鉴定.运用Swiss Target Prediction、GeneCards在线预测消瘤藤化学成分与"散瘀、消肿"相关的潜在靶点,在DAVID 6.8平台进行基因功能富集和KEGG通路富集分析,Cytoscape 3.6.0软件构建"成分-靶点-通路"网络,Autodock软件对核心成分与关键蛋白进行分子对接验证.结果:从消瘤藤中鉴定了 14个化学成分,通过网络药理学预测出14种成分与"血瘀""子宫肌瘤"相关潜在靶点23个,重要通路7条.结论:消瘤藤的活性成分在蛋白多糖、黏附斑激酶、Rap1及Ras通路具有关键作用,可能通过调节胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)、表皮生长因子受体(EGFR)等靶点,通过多通路的方式共同作用起到"散瘀、消肿"作用.

目的 联合非靶向和靶向代谢组学技术检测创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)差异代谢物,并评估其与病情严重程度及预后的关系.方法 选取徐州医科大学附属医院 2022 年 8 月至 12 月就诊的TBI患者(TBI组)和体检健康者(健康人对照组)各 40 例,应用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱(UPLC/LTQ Orbitrap Velos MS)筛选并验证差异代谢物.记录 40 例TBI患者入院12h内格拉斯哥昏迷评分(glasgow coma scale,GCS)和伤后6 个月格拉斯哥预后评分(glasgow outcome scale,GOS),结合差异代谢物评估疾病严重程度和预后.结果 验证的 4 个差异代谢物(谷氨酸、尿酸、肌酐和乳酸)存在显著分离趋势,TBI组谷氨酸和乳酸水平显著高于健康人对照组,尿酸和肌酐水平显著低于健康人对照组;随着伤情加重,TBI患者谷氨酸和乳酸水平逐渐升高,尿酸和肌酐水平逐渐降低;影响预后不良的 4 种代谢物组ROC曲线下面积(AUCROC)为 0.818,敏感性为 76.9%,特异性为 81.5%(P＜0.05).结论 谷氨酸、乳酸、尿酸和肌酐与TBI患者病情密切相关,四者联合或可用于预测TBI的预后.

目的 采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法对覆盆子Rubus chingii不同部位(小核果和花托)化学成分进行分析鉴定,并建立快速测定覆盆子中9种成分含量的方法.方法 采用Acquity UPLC HSS T3(100mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,以0.1％甲酸水与乙腈为流动相,梯度洗脱;覆盆子化学成分鉴定时采用正负离子Full MS/dd-MS2模式,通过化合物的一级、二级质谱信息,结合对照品比对确认,进行覆盆子不同部位主要化学成分的快速、精准识别.采用ACQUITY BEH C18(50mm×2.1mm,1.7 μm)色谱柱在负离子Full MS/SIM模式,建立快速测定覆盆子不同部位中9种成分(没食子酸、芦丁、鞣花酸、金丝桃苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、椴树苷、槲皮素和山奈酚)含量的UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS方法,并测定其含量.结果 从覆盆子小核果和花托中共鉴定122种化学成分,包括黄酮类66种、有机酸类28种、萜类24种、其他类4种.成功建立一种6 min完成覆盆子中9种成分含量测定的方法,各成分在其线性范围内线性关系良好;精密度、重复性及稳定性良好(RSD≤6.30％);加样回收率在99.45％～105.30％(RSD≤4.43％),并发现小核果中芦丁的含量显著高于花托;而花托中的鞣花酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷和椴树苷的含量显著高于小核果.结论 覆盆子小核果和花托部位的化学成分存在差异性,运用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS建立的定量方法分析时间短、灵敏度高、准确性好,方法学考察结果均符合含量测定的要求,可用于覆盆子中9种成分的快速测定.

目的 探讨高血压前期相关的血浆代谢变化.方法 选取53例高血压前期受试者,所有受试者血压3年内反复测量均在高血压前期范围.将该组受试者与年龄和性别匹配的53例血压正常受试者的血浆代谢谱进行比较.通过超高效液相色谱线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)分析法对代谢谱进行分析.结果 调整体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、吸烟、酗酒、血脂谱、葡萄糖和胰岛素后,高血压前期组受试者表现出更高水平的溶血卵磷脂(lysoPC),其中包含C14∶0、C16∶1、C16∶0、C18∶2、C18∶1、C18∶0、C20∶5、C20∶4、C20∶3及C22∶6,更高的脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)活性、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、白介素6(IL-6)、尿8-异前列腺素F2 α,以及更高臂踝脉搏波传导速度(baPWV).LysoPC(16∶0)是对照组和高血压前期组的血浆代谢物比较,差异有统计学意义(P ＜0.05);LysoPC与收缩压(SBP)和舒张压(DBP)均呈正相关.调整混杂变量后,高血压前期组受试者LysoPC(16∶0)水平与ox-LDL、Lp-PLA2活性、8-异前列腺素F2α、ba-PWV和IL-6呈正相关.结论 与高血压前期相关的LysoPCs、Lp-PLA2活性、ox-LDL、尿8-异前列腺素F2α、IL-6和ba-PWV升高,表明LDL氧化升高过程中,Lp-PLA2催化PC水解,并导致氧化应激升高,从而促进炎症发展和增强动脉僵硬度.

目的 建立基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole/orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的妇可靖胶囊中多成分(没食子酸、丹参素、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B、木犀草素、芹菜素、芦荟大黄素、大黄素、丁烯基苯酞、欧当归内酯A)的定量分析方法.方法液相采用Acquity UPLC(R) BEH C18色谱柱(50 mmX2.1 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.2 mL/min;质谱采用HESI离子源,利用其高分辨的特点采用一级Full mass扫描的方式进行定量;并将定量测定结果导入多元数据处理软件SIMCA14.0中进行质量评价分析.结果 在优化的色谱质谱条件下,没食子酸、丹参素、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B、木犀草素、芹菜素、芦荟大黄素、大黄素、丁烯基苯酞、欧当归内酯A分别在0.15～1.50、0.80～8.00、1.50～15.00、0.04～0.40、0.015～0.150、0.10～1.00、0.004～0.040、0.004～0.040、0.02～0.20、0.01～0.10、0.04～0.40 μg/mL线性关系良好(r≥0.999 5);精密度、重复性及稳定性良好(RSD≤4％);加样回收率在98％～102％,RSD均小于3％:所测成分在各批次样品中的质量分数依次为没食子酸26.36～31.03μg/g、丹参素178.85～210.79.μg/g、阿魏酸320.91～343.16 μg/g、迷迭香酸2.84～3.09 μg/g、丹酚酸B 3.55～4.25 μg/g、木犀草素27.33～32.36 μg/g、芹菜素1.89～2.13μg/g、芦荟大黄素0.47～0.60μg/g、大黄素3.17～3.57 μg/g、丁烯基苯酞1.99～2.54 μg/g、欧当归内酯A7.51～8.53 μg/g;分析结果表明大多数批次药物质量较为稳定,其中丹参素和阿魏酸对药物质量具有较大影响,可对其进行重点监控以保证药物批次质量.结论 建立的定量方法灵敏度高且准确性好,方法学考察结果符合测定要求,可用于妇可靖中多种活性成分的快速测定;并为其质量评价提供新的科学依据和参考.