目的:观察促肾上腺皮质激素(ACTH)对小鼠骨髓间充质干细胞(D1细胞系)成骨分化的影响。方法:将D1细胞分成6组，对照组、对照组+低浓度ACTH组、对照组+高浓度ACTH组、成骨组、成骨组+低浓度ACTH组、成骨组+高浓度ACTH组；各组孵育细胞6 d后通过茜素红染色法评价成骨分化；分别孵育细胞1、3、6 d后，采用聚合酶链反应(PCR)技术定量分析核心结合蛋白因子-2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、黑皮质素受体-3(MC3R)和血管内皮生长因子a(VEGFa)成骨相关基因的表达水平；孵育细胞3、6 d后，采取蛋白质印迹法(Western blot)技术分析成骨分化相关基因Runx2和骨涎蛋白(BSP)表达水平。两样本均数比较采用独立样本 t检验，多样本均数比较采用单因素方差分析。 结果:RT-PCR检测结果发现，第3天成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组黑色素3蛋白受体(MC3R)表达(1.33±0.01)低于成骨组(1.82±0.11)，差异有统计学意义( t＝5.039， P<0.05)；第6天成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组Runx2表达(0.72±0.01)低于成骨组(1.16±0.08)，差异有统计学意义( t＝5.542， P<0.05)；成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组血管内皮生长因子(VEGFa)表达(0.58±0.02)显著低于成骨组(2.23±0.06)，差异有统计学意义( t＝7.238， P<0.05)；成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组茜素红染色吸光度( A)值(0.270±0.012)显著低于成骨组(0.361±0.015)，差异有统计学意义( t＝4.435， P<0.05)；在蛋白水平，Runx2、BSP基因蛋白表达都有下降的趋势；成骨组+低浓度ACTH(1×10 -9 mol/L)组茜素红染色 A值(0.363±0.013)同成骨组(0.360±0.016)比较差异无统计学意义( t＝1.345， P>0.05)，且对成骨基因和蛋白表达作用差异无统计学意义。 结论:高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化有抑制作用，而且在基因和蛋白水平对成骨特异性转录因子Runx2有明显的抑制作用。

目的:提高临床医师对黑皮质素2受体( MC2R)基因变异导致的家族性糖皮质激素缺乏症1型(FGD1)的认识，减少漏诊与误诊。 方法:回顾性分析2019年至2021年于河南省儿童医院收治的2例FGD1患儿的临床资料、基因检测结果、治疗和随访结果。结果:全外显子组测序结果提示患儿1携带 MC2R基因c.433C>T(p.R145C)与c.710T>C(p.L237P)复合杂合变异，患儿2携带 MC2R基因c.145delG(p.V49Cfs*35)和c.307G>A(p.D103N)复合杂合变异，其中c.710T>C(p.L237P)与c.145delG(p.V49Cfs*35)变异为新发现的变异位点。 结论:FGD1临床罕见，基因检测是确诊的关键。新变异位点的检出丰富了 MC2R基因的变异谱。

目的 婴儿痉挛症是婴幼儿期起病的年龄依赖性癫痫性脑病,促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)是治疗婴儿痉挛症的一线用药,对绝大多数患者治疗有效.ACTH受体又称黑皮质素2受体(MC2R),MC2R基因启动子区单核苷酸多态性与婴儿痉挛症的发病及其耐药相关.调查中国汉族婴儿痉挛症儿童MC2R基因多态性的分布情况.方法 符合婴儿痉挛症纳入条件的患儿共334例,各采集其静脉血3 ml,对其MC2R非编码区基因进行提取,聚合酶链式反应和一代测序,之后进行数据整理和分析.结果 中国汉族婴儿痉挛症儿童MC2R基因启动子区TCCT单体型非携带者(0/0)占总人数的9.9％,杂合携带者(TCCT/0)占60.8％,纯合携带者(TCCT/TCCT)占20.3％.3种MC2R多态性基因型性别分布差异有统计学意义(P ＜ 0.05),TCCT/TCCT基因型中男性多,0/0基因型中女性多.结论 调查了中国汉族婴儿痉挛症儿童MC2R基因多态性TCCT单体型的分布,对ACTH治疗效果差的TCCT非携带基因(0/0)占总人数少,约占总人群10％.

Nesfatin-1是核连蛋白2经激素原转化酶裂解所得蛋白质,在中枢和外周组织均有表达,目前尚未发现在皮肤组织有表达.Nesfatin-1与摄食、肥胖、糖尿病、心血管系统、应激和精神疾病、炎症等相关.其信号通路可能与黑皮质素系统相关,包括黑皮质素3/4受体、促肾上腺皮质激素释放激素、黑素细胞凝集素、阿黑皮素原、神经肽及促炎细胞因子.而这些激素、神经肽及细胞因子在银屑病、白癜风、痤疮及斑秃等应激相关皮肤病中均有表达,且与疾病的发生进展密切相关.故推测 Nesfatin-1可能与应激相关皮肤疾病的诱发或进展有直接或间接关系.

目的:研究我国北方汉族肥胖症患者黑皮质寨受体4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因的rs17782313位点基因多态性对腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术(1aparoscopic Roux-en-Y gastric bypass,LRYGB)减重效果的影响.方法:回顾性分析中国医科大学附属盛京医院2011年1月至2013年12月收治的81例病态性肥胖接受LRYGB治疗的患者临床资料,提取患者外周血DNA,PCR扩增目的基因后应用直接测序法,对rs17782313位点基因型进行检测.根据基因型分组:风险基因携带组和非携带组,比较分析2组代谢指标、体质指数(body mass index,BMI),多余体质量减少率(excess weight loss,EWL)等术后变化,评价该基因对减重效果的影响.结果:①rs17782313位点的3种基因型TT、TC、CC,基因频率分别为50.62％(41例)、35.80％(29例)、13.58％(11例).②不同基因型的各组间,体质量、BMI、血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白等指标无明显差异.③风险基因携带者术后BMI、EWL下降少于非携带者,但未达到统计学差异(女性患者BMI术后6个月P=0.296,12个月P=0.179;EWL P=0.139,0.094.男性患者BMI术后6个月P=0.295,12个月P=0.072;EWL P=0.106,0.077).结论:MC4R基因rs17792313位点C等位基因(风险基因)携带者与非携带者的减重效果相似.

目的 研究室旁核(PVN)黑皮质素受体4(MC4R)调控瘦素(LPN)对T2DM大鼠交感神经活性(SNA)和压力感受性反射功能的影响.方法 选取SD大鼠予高糖高脂饲料联合STZ(30 mg/kg)腹腔注射制备糖尿病模型,最终造模成功T2DM大鼠20只.依据双侧PVN显微注射人工脑脊液(aCSF)和MC4R抑制剂SHU9119,随机分为PVN-aCSF组和PVN-SHU9119组,每组各10只.两组于麻醉下行1 h侧脑室LPN输注,并测定大鼠的SNA、平均动脉压(MAP)、心率(HR),绘制压力感受性反射曲线.继续输注LPN的同时在PVN注射aCSF或SHU9119,并绘制压力感受性反射曲线.结果 与各自Con压力感受性反射曲线相比,PVN-aCSF、PVN-SHU9119组输注1 h LPN后的SNA、MAP、HR升高(P＜0.05),PVN注射SHU9119后的SNA、MAP及HR低于PVN-aCSF组(P＜0.05);PVN-SHU9119组的交感神经压力反射功能参数 Max、Min 低于 PVN-aCSF 组(P＜0.05).结论T2DM大鼠MC4R在PVN参与LPN增加SNA和调节压力感受性反射功能.

肥胖及其引起的2型糖尿病、心脑血管疾病、癌症等并发症已迅速发展成全球范围内的主要问题.虽然肥胖症在全球流行可以归因于生活方式的改变,但是又离不开遗传因素的影响,特别是一些肥胖相关基因在决定一个人的体质量中发挥着至关重要的作用.缺血性脑卒中是一种常见的缺血性脑血管病,它同样受遗传因素影响,并且是肥胖的主要并发疾病之一.因此,现对肥胖相关基因多态性与缺血性脑卒中的相关性研究进展进行综述,详细地介绍肥胖相关基因FTO、MC4R、APOE和PPARG的基因多态性与缺血性脑卒中及其危险因素的关系,这将为更有效的预防和治疗缺血性脑卒中提供新的策略.

黑素皮质素家族包括促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、α-,β-和γ-黑素细胞刺激激素(α-,β- and γ-melanocyte-stimulating hormones,α-,β- and γ-MSH)、β-促脂解素(β-lipotropin,β-LPH) 和 β- 内 啡 肽(β-endorphinj,β-END),均来源于阿黑皮素原(pro-opiomelanocortin,POMC),由激素原转化酶(prohormone convertase,PC)裂解而来.在POMC基因测序后近20年,人们测出了第一个黑色素皮质素受体(melanocortin-1 receptor,MC1R)基因序列.随后两年内又陆续测出MC2R-MC5R的基因序列.不同受体在机体的表达部位不同,内源性激动剂对其亲和力也不尽相同,这就导致其生理作用也不相同(见表1).Caruso等 [1]研究表明,关于黑色素皮质激素潜在治疗用途的证据均来自于受体水平的生理学研究,由于α-MSH对5种受体亚型选择性差,且对单一受体作用广泛,故直接给予α-MSH势必会对机体产生不利影响,这就促使人们发现更加高效的外源性受体激动剂(见表2).本综述通过对中枢黑皮质素系统不同生理功能机制做一总结,进而介绍根据这些机制新发现的外源性激动剂,为今后临床用药提供依据.

目的 探讨Nle4-D-Phe7-α-MSH(NDP-MSH)激活黑皮质素受体-3(Mc3r)在小鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后氧化应激和神经元凋亡中的作用.方法 170只小鼠按随机数字表法分为3组:Sham组(n=22)、ICH组(n=46)、ICH+NDP-MSH组(n=102),建立小鼠ICH模型.ICH后24h进行改良Garcia评分、Beam balance评分和脑含水量测定,双标免疫荧光检测小鼠脑血肿周围组织中Mc3r和Neun共定位,ELISA检测ICH小鼠血肿周围组织的MDA、SOD、CAT含量,Western blot检测脑组织中Mc3r、PKC、ERK1/2、Bcl-2、caspase-3的表达.结果 Mc3r在术后24h达到表达高峰,在神经元中广泛分布.NDP-MSH治疗后,改良的Garicia评分和Beam balance评分显著提高(P＜0.05),同侧基底神经节和皮层中的水肿显著降低(P＜0.05),ROS活性明显降低(P＜0.05).下调脑组织中Mc3r和PKC的表达后p-PKC,p-ERK1/2,Bcl-2的表达明显降低,c-caspase-3升高(P＜0.05).结论 NDP-MSH激活黑皮质素-3受体通过PKC/ERK信号通路改善小鼠脑出血后的氧化应激和神经元凋亡.

随着我国对创新药物研发的重视与投入,首创性(first-in-class)药物的研发逐渐成为各大药企和科研机构争相追求的目标.首创性药物的研制需要深厚的基础研究积累、大量的资金投入和创新的研究方法,往往是新药研究中的风向标.2020年,美国食品药品监督管理局(FDA)共批准上市了53个全新药物,小分子药物依旧以38项获批占据着研究的主流.其中包括多个首创性的小分子药物,例如首个通过靶向表观遗传靶标EZH2治疗肉瘤的药物他泽司他(tazemetostat)、首个通过新型附着机制起效的HIV-1药物磷坦姆沙韦(fostemsavir)、首个通过抑制异戊二烯化治疗早衰症的药物氯那法尼(lonafarnib)和首个通过激动黑皮质素4受体(MC4R)治疗罕见肥胖症的药物司美诺肽(setmelanotide)等.以上首创性药物的研究过程具有很强的代表性,其研究思路也各具特点,本文通过浅析其中3例首创性药物的研发背景、研发过程和治疗应用,以期为更多的首创性药物研究提供借鉴.