为探究七叶一枝花的种子萌发生理机制,该文从种胚形态上对七叶一枝花种子萌发过程的时期进行了划分,并分析了不同时期种子内源激素含量及相关酶活性的变化规律.结果表明:(1)根据种胚形态可将种子萌发过程细分为 8 个时期,即种胚未萌动时期(S1 期)、心形胚时期(S2 期)、种胚膨大时期(S3 期)、胚根未突破种皮时期(S4 期)、子叶柄伸长和胚根突破种皮时期(S5 期)、下胚轴突破种皮时期(S6 期)、上胚轴伸长时期(S7 期)、胚根伸长时期(S8 期).(2)不同萌发时期种子的α-淀粉酶活性均明显高于β-淀粉酶.(3)超氧化物歧化酶(SOD)活性在S5 期最高,S1 期最低;过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性随种子萌发进程总体呈上升趋势,可溶性蛋白含量随种子萌发进程先下降后升高.(4)吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)和水杨酸(SA)含量随种子萌发进程整体呈下降趋势;1-氨基环丙烷羧酸(ACC)、茉莉酸(JA)、油菜素内酯(BRs)随种子萌发进程整体呈上升趋势;细胞分裂素类(CTKs)含量无显著变化;IAA/ABA和GA3/ABA随种子萌发进程呈先下降后上升趋势,而 CTKs/ABA 则不断升高.(5)ABA、IAA、GA3含量与胚率呈负相关,而ACC、JA、BRs、POD、CAT、β-淀粉酶活性与胚率呈正相关.综上认为,七叶一枝花在不同时期种子内源激素含量及相关酶活性各不相同,其中α-淀粉酶活性、POD活性可能与种胚胚根伸长有关,GA3可能影响种胚形成,而ABA则可能抑制种胚的生长发育.

为探究振动对盆栽三角梅苞片脱落和乙烯生成的影响,对盆栽'马尼拉小姐'三角梅(Bougainvillea×buttiana'Miss Manila')在振动、密闭环境和振动+密闭环境下苞片的脱落率及处理后4～24 h的乙烯合成相关指标进行测定.结果表明,振动+密闭环境和振动处理后7 d三角梅苞片脱落率显著高于对照(无处理),苞径长0.5～1.4 cm的苞片(S1)和苞径长1.5～2.4 cm的苞片(S2)的乙烯释放量、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量、ACC合成酶(ACS)和ACC氧化酶(ACO)活性均显著高于对照,随着处理后时间的延长,总体呈先上升后下降的变化趋势.苞片S1 和S2 的BsSAMS、BsACS和BsACO基因相对表达量显著上升,与 ACS 活性和 ACO 活性的变化一致,总体呈先上升后下降的变化趋势.因此,盆栽三角梅在受到振动后苞片的脱落率、乙烯生成、乙烯生物合成关键酶活性、乙烯合成酶基因BsSAMS、BsACS、BsACO的相对表达量均显著上升,且密闭环境对振动的效应具有促进作用.

乙烯在调控水稻(Oryza sativa)生长发育及胁迫响应中具有重要作用.乙烯生物合成的第1步是甲硫氨酸转化为S-腺苷甲硫氨酸(SAM),然后在ACC合酶(ACS)的催化下合成乙烯前体物质ACC,最后通过ACC氧化酶(ACO)生成乙烯.该文综述了水稻乙烯生物合成途径中2个关键酶OsACS和OsACO在转录及翻译后的调控机制,提出了一些未解决的问题,并展望了未来的研究方向,以期加深人们对乙烯生物合成复杂机制的理解.

目的 基于CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢探讨化瘀祛痰方防治血脂异常的机制.方法 32只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只.除空白对照组外,其他各组给予高脂饲料喂饲,建立高脂血症模型.于第13周开始,化瘀祛痰方组给予化瘀祛痰方灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀灌胃,空白对照组、模型组给予相应体积的生理盐水灌胃,每日1次,灌胃4周.采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中总胆固醇(Total cho-lesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平;HE染色观察肝脏组织病理变化;Elisa检测各组大鼠肝脏14,15-环氧二十碳三烯酸(14,15-epoxyeicosatrienoic acid,14,15-EET)水平;Real time RT-PCR 检测肝脏组织细胞色素 P450 表氧化酶 2J3(Cytochrome P450 oxidase 2J3,CYP2J3)、肉毒碱棕榈酰转移酶 1(Carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)mRNA 水平;Western blot 法检测肝脏组织 CYP2J3、腺苷酸 活化蛋 白激酶(AMP-actived protein kinase,AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACC)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、CPT-1蛋白水平.结果 与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著升高(P＜0.01),HDL-C水平显著降低(P＜0.05);肝脏脂质沉积显著,可见大量脂滴;肝脏组织内14,15-EET含量显著降低(P＜0.01);肝脏 CYP2J3、CPT-1 mRNA 和蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC 显著降低(P＜0.01).与模型组比较,经化瘀祛痰方及辛伐他汀干预后,大鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01),HDL-C水平显著升高(P＜0.05);肝脏脂质沉积情况明显改善,脂滴数明显减少;肝脏组织内14,15-EET水平显著升高(P＜0.01);肝脏CYP2J3、CPT-1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P＜0.05或P＜0.01),p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC显著升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 化瘀祛痰方可有效改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏脂质沉积情况,其机制可能与CYP2J3/EETs介导脂肪酸代谢密切相关.

[背景]长期睡眠期噪声可能对代谢系统产生不利影响,肝脏脂质代谢与生物钟基因关系密切.[目的]探讨长期睡眠期噪声暴露对小鼠肝脏生物钟及脂质代谢的影响及相关机制.[方法]20只C57BL/6J 雄性小鼠随机分为噪声暴露组和对照组,每组 10只.噪声暴露组小鼠连续 30 d暴露于白噪声 90 dB声压级(SPL),每天 8 h,从 9:00-17:00.对照组背景噪声≤40 dB SPL.噪声暴露结束后在 14:00(ZT6)和 2:00(ZT18)处死动物,每个时间点处死 5只,收集肝脏组织.采用胆固醇氧化酶法和磷酸甘油氧化酶法测定肝脏总胆固醇、甘油三酯.实时荧光定量PCR法检测肝脏内生物钟基因Clock、Bmal1、Rev-erbα、Rev-erbβ,以及脂质代谢基因Srebp1c、Hmgcr、Fasn、Lxrα、Acc1、Chrebp的表达.[结果]在ZT18时,噪声暴露组小鼠肝脏总胆固醇含量较对照组升高 48%(P<0.05),甘油三酯含量升高 61%(P<0.05).与对照组相比,噪声暴露组小鼠肝脏内的生物钟基因Clock、Bmal1 mRNA的表达在ZT18时升高(P<0.05),在ZT6时降低(P<0.05);Rev-erbα mRNA表达水平在ZT6、ZT18时均降低(P<0.05);Rev-erbβ mRNA表达水平则在ZT6、ZT18时均无明显变化.噪声暴露组小鼠肝脏脂质代谢相关基因Srebp1c、Hmgcr、Chrebp、Lxrα mRNA的表达较对照组在ZT18时均升高(P<0.05);Acc1、Fasn mRNA的表达在ZT6时无明显变化,在ZT18时则均有上升的趋势,但结果差异尚无统计学意义(P>0.05).[结论]长期睡眠期噪声暴露可致小鼠生物钟及脂代谢紊乱.噪声暴露抑制关键生物钟基因Rev-erbα的表达,使脂质合成基因Srebp1c和Chrebp上调,促进肝脏脂质沉积,导致脂质代谢紊乱.

目的:探讨柴胡疏肝散与二甲双胍联合使用对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的作用效果,并探究其可能的作用机制.方法:随机选择10只作为正常对照(control)组,使用普通饲料进行喂养;通过饲喂高糖高脂饲料和静脉注射链脲佐菌素构建了T2DM合并NAFLD(T2DM-NAFLD)大鼠模型;40只T2DM-NAFLD大鼠随机分为模型组(model组)、柴胡疏肝散组(CHSG组)、二甲双胍组(MET组)、联合用药组(MET+CHSG组),每组10只.control组和model组大鼠用等体积生理盐水灌胃,持续14周.采用试剂盒检测血清和肝脏组织中白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血糖、胰岛素、瘦素、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和抗氧化酶(SOD)的水平;采用苏木精—伊红染色和油红O染色检测肝组织病理损伤;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ACC、FAS、SREBP-1c、PPARα基因的表达;采用蛋白质免疫印迹分析检测肝组织中Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白的表达.结果:与control组相比,model组大鼠的体重、血清HDL-C水平、PPARα和LPLmRNA表达、肝脏组织GS和SOD活性、核Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著降低,而肝脏重量,血清空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TC和TG、IL-6、TNF-α水平,以及肝脏组织SREBP-1c、ACC、FAS、IL-6、TNF-α和NF-κB表达,肝脏组织PEPCK和G6Pase活性,肝脏组织ROS和MDA水平均显著升高(P＜0.05).与model组相比,CHSG组、MET组、MET+CHSG组大鼠的体重、血清HDL-C水平、肝脏组织GS和SOD活性、核Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著升高,且MET+ CHSG组显著高于CHSG组和MET组(P＜0.05).与model组相比,CHSG组、MET组、MET+CHSG组大鼠肝脏重量,血清空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TC和TG、IL-6、TNF-α水平,以及肝脏组织SREBP-1c、ACC和FAS、IL-6、TNF-α和NF-κB mRNA表达水平,肝脏组织PEPCK和G6Pase活性,肝脏组织ROS和MDA水平均显著降低(P＜0.05),且MET+CHSG组显著低于CHSG组和MET组(P＜0.05).结论:柴胡疏肝散联合二甲双胍对T2DM-NAFLD大鼠具有护肝作用,其机制可能与Nrf2/HO-1抗氧化信号通路有关.

探讨茶树新品系福茶1号绿茶对高脂血症大鼠的降脂作用及其机制.40只大鼠随机分为正常组(CON)、高脂模型组(HFD)、福茶1号绿茶组(CFT-1,200 mg,/kg·d)和普通绿茶组(Fuyun6,200 mg/kg·d).采用高脂饮食建立高脂血症大鼠模型.绿茶提取物干预8周后,检测大鼠血脂水平、血清和肝脏的抗氧化活性、血清ALT、AST活性,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-10含量.利用HE染色观察肝脏组织病理变化,通过Western blot和qRT-PCR方法检测脂质代谢和氧化损伤相关基因乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、核因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBP-α)、脂肪酸合成酶(FAS)和固醇调节原件结合蛋白-Ic(SREBP-lc)、低密度脂蛋白受体(LDLR)和抗氧化相关基因过氧化物酶增殖激活的受体-a(PPAR-α)、1-氨基环丙烷-1羧酸氧化酶(ACO)和肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPT-1cα)的蛋白和mRNA表达.结果显示,CFT-1的绿茶提取物能显著降低高脂饮食引起的体重增加和血清中TC、TG、LDL-C水平的上升,显著提高血清HDL-C水平;明显减少肝细胞中脂滴的形成,减轻肝小叶炎症脂肪变性和防止肝纤维化;显著提高血清和肝脏的SOD、GSH-Px和CAT活性,降低MDA含量;显著降低血清异常升高的ALT、AST活性和TNF-α、IL-6含量,提高IL-10含量;显著抑制肝组织中ACC、FAS、SREBP-1c和C/EBP-α表达的升高,有效拮抗肝组织中LDLR、CPT-1 α、PPAR-α和ACO表达的降低.并且CFT-1的绿茶提取物的上述作用优于普通绿茶.茶树新品系CFT-1提取物对高脂血症大鼠具有降血脂作用,其机制可能与提高抗氧化和抗炎能力,调节脂肪代谢有关.

目的 检测哇巴因对人乳腺癌MCF7细胞能量代谢的影响,初步探索相关作用机制.方法 联合使用ATP检测系统及海马生化分析仪检测哇巴因作用后细胞内ATP水平及线粒体呼吸作用的变化;使用葡萄糖氧化酶法检测哇巴因对MCF7细胞葡萄糖吸收水平的影响;使用 AMPK 活性检测探针检测 AMPK 活性的变化;通过 Western blot 实验初步检测哇巴因对 MCF7细胞内相关激酶蛋白水平的影响.结果 哇巴因能够时间依赖性地降低 MCF7 细胞内 ATP水平,剂量依赖性地降低线粒体呼吸作用,同时 25 ~50 nmol/L 的哇巴因作用 24 h 后能够促进葡萄糖吸收.该化合物可激活 AMPK 活性,在 12 h 表现出最佳活性.Western blot 实验结果证实哇巴因能够升高 AMPK 和底物蛋白乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)的磷酸化水平,抑制Na+/K+-ATP 酶 α1 亚型(NKAα1)的表达.结论 哇巴因可抑制人乳腺癌 MCF7 细胞的线粒体氧化呼吸作用,促进糖酵解.哇巴因对肿瘤代谢的影响可能与其调控 AMPK 活性有关.

目的 探讨沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症的治疗作用及其对肝脏甘油三酯(TG)合成途径的影响.方法 10周龄雌性SD大鼠,按体重随机区组法分为6组,即假手术组,模型组,雌激素组和TFS高、中、低剂量组,每组10只.双侧卵巢切除手术并连续给予6周高脂饲料复制肾阳虚高脂血症大鼠模型.假手术组和模型组灌胃生理盐水(10 mL/kg),雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg/kg),其余分别灌胃TFS 28.5、57、114 mg/kg,持续给药8周.检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),酶免法检测肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和甘油三磷酸酰基转移酶(GPAT)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1α(CPT-1α)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)水平,免疫组化法检测肝脏固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达.结果 与模型组相比, TFS高剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),血清HDL-C水平显著升高(P<0.05);肝脏ACC活性和GPAT水平显著降低(P<0.01,P<0.01),ACO、CPT-1α水平显著升高(P<0.01,P<0.05);肝细胞膜SREBP-1c蛋白表达量显著降低,肝细胞核PPARα蛋白表达量显著增加.结论 实验结果表明TFS具有良好的调节血脂代谢的作用,其作用机制可能是通过抑制肝脏SREBP-1c表达,降低TG合成途径中限速酶FAS、ACC、GPAT的活性及水平;上调PPARα蛋白表达,提高脂肪酸β氧化途径中ACO、CPT-1α的表达水平,两者共同发挥作用抑制肝脏中TG的合成,达到调脂作用.

目的:探讨Exendin-4 (Ex-4)对胰岛素抵抗(IR)人肝癌HepG2细胞脂代谢相关因子表达的影响,阐明Ex-4改善IR的作用.方法:选取处于对数生长期的人肝癌HepG2细胞,采用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞制备IR模型(HepG2-IR细胞),再将其分为对照组(不含胰岛素的HepG2细胞)、IR组(IR模型,即HepG2-IR细胞)和Ex-4组(IR模型中加入10 nmol·L-1 Ex-4).采用葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)检测细胞中葡萄糖消耗量,采用油红O染色观察细胞形态及胞内脂滴形成情况,应用甘油三酯(TG)试剂盒检测细胞中TG水平,采用荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测细胞中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白1c (SREBP-1c)和载脂蛋白B100 (apoB100)等脂代谢相关因子mRNA表达水平.结果:HepG2细胞建立IR模型后,与对照组比较,IR组HepG2-IR细胞葡萄糖消耗量明显降低(P＜0.01);与IR组比较,Ex-4组HepG2-IR细胞葡萄糖消耗量明显增加(P＜0.05).油红O染色法,与对照组比较,IR组细胞含脂率明显升高(P＜0.05);与IR组比较,Ex-4组细胞中含脂率明显降低(P＜0.05).与对照组比较,IR组细胞中TG水平明显升高(P＜0.01);与IR组比较,Ex-4组细胞中TG水平明显降低(P＜0.05).qRT-PCR检测,与对照组比较,IR组细胞中ACC、FAS和SREBP-1c mRNA表达水平明显升高(P＜0.01),apoB100mRNA表达水平明显降低(P＜0.05);与IR组比较,Ex-4组细胞中ACC、FAS和SREBP-1c mRNA表达水平降低(P＜0.05),apoB100mRNA表达水平升高(P＜0.01).结论:Ex-4可通过调节人肝癌HepG2细胞脂类代谢相关因子的表达进而改善IR.