目的:探讨一种新型的糖尿病视网膜病变（DR）大鼠模型的建立及其病理特点。方法:取褐色挪威（BN）大鼠36只，分为对照组、链脲佐菌素（STZ）组和STZ+亚精胺（SP）组，每组12只。STZ组和STZ+SP组尾静脉注射STZ，STZ+SP组玻璃体注射亚精胺，对照组给与同体积的溶剂。造模后继续饲喂12周，期间监测体重和空腹血糖。利用超声成像系统观察视网膜中央动脉血流供应情况。动物处死后取眼球行苏木精-伊红染色，观察视网膜基本结构，分析各层厚度。视网膜消化铺片行过碘酸雪夫染色和神经胶质抗原2免疫荧光染色，观察微血管和周细胞情况。采用流式细胞术检测视网膜组织活性氧簇（ROS）水平；最后利用分子生物学技术检测紧密连接蛋白闭合蛋白-1（claudin-1）和咬合蛋白（occludin） mRNA和蛋白表达。多组重复测量的计量资料的比较采用重复测量的方差分析，组间两两比较采用LSD- t法。 结果:与对照组比较，STZ组和STZ+SP组大鼠体重下降（ P<0.05），血糖升高（ P<0.05）；与STZ组比较，STZ+SP组大鼠视网膜中央动脉舒张末期血流速度和收缩末期血流速度下降（ P<0.05），搏动指数和阻力指数则升高（ P<0.05）。病理学观察可见，STZ组和STZ+SP组大鼠神经细胞核层区排列疏松、紊乱，视网膜丛区水肿，且STZ+SP组表现的更为严重。与STZ组比较，STZ+SP组视网膜厚度和外丛层厚度/视网膜总厚度增加（ P<0.05），毛细血管无细胞新生毛细血管形成增多和周细胞缺失明显。与对照组和STZ组比较，STZ+SP组视网膜组织ROS水平均升高（ P<0.05）。与对照组比较，STZ+SP组claudin-1和occludin mRNA下降（ P<0.05），相应的蛋白表达亦降低（ P<0.05）。 结论:BN大鼠尾静脉注射STZ联合玻璃体注射SP能建立一种严重的DR动物模型，病变特征主要表现为更严重的视网膜血管顺应性下降，血流供应减少，视网膜水肿，新生无细胞毛细血管大量生成以及视网膜周细胞凋亡增多。

目的:分析血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)联合常温机械灌注(NMP)对肝移植急性排斥反应大鼠肠道屏障功能的影响。方法:无特定病原体4~5周龄、40~60 g雄性Brown Norway(BN)大鼠2只提取BMMSCs，通过腺病毒转导HO-1；24只7~8周龄、200~220 g雄性Lewis大鼠为供体，30只8~9周龄、220~240 g雄性BN大鼠为受体，"二袖套"法建立原位肝移植急性排斥反应模型。BN大鼠随机分为5组：Sham组仅开腹关腹；NMP组供肝NMP 4 h；BMP组供肝NMP 4 h+门静脉灌注BMMSCs；HBP组供肝同BMP组，但灌注HO-1/BMMSCs；FK506组供肝NMP 4 h，肝移植术后灌胃他克莫司，每组6只。术后第14天取材检测并计算排斥活动指数(RAI)，HE染色及透射电镜分别观察肠道病理改变和超微结构，Western印迹检测肠道组织紧密连接蛋白表达，酶联免疫吸附法检测血清脂多糖、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)。结果:HBP组、FK506组RAI为(2.80±0.84)分、(2.20±0.84)分，显著低于NMP组(7.60±1.14)分、BMP组(6.00±1.58)分，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。肠道HE染色NMP组肠绒毛明显稀疏、皱缩，排列杂乱，BMP组、HBP组、FK506组较NMP组肠道损伤程度减轻。电镜观察HBP组肠上皮细胞微绒毛丰富且排列整齐，细胞间紧密连接结构完整。Western印迹检测闭锁小带-1相对表达，HBP组(0.87±0.06)，高于NMP组(0.41±0.12)和FK506组(0.52±0.15)；闭合蛋白相对表达HBP组(1.28±0.26)，高于NMP组(0.27±0.18)和FK506组(0.63±0.22)，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。HBP组血清脂多糖、D-乳酸和DAO浓度均低于NMP组、FK506组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:HO-1/BMMSCs联合NMP可以保护肝移植术后急性排斥反应BN大鼠的肠道屏障功能。

目的:探究汞致肾病综合征大鼠肾损伤与细胞凋亡的关系，分析其可能的发病机制。方法:将48只健康雄性SPF级BN（Brown-Norway）大鼠采用随机数字表法分成对照组和染毒组，染毒组分别于第1、3、5、7、11、13天以1 mg/kg体重腹部皮下注射HgCl 2（1mg/ml）造成肾病综合征模型，对照组注射与染毒组等体积的NaCl。于第14、21、28、35天处死部分大鼠，进行血清肾损伤指标尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）的检测，肾组织汞含量检测；原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡，免疫荧光检测细胞色素C（Cyt C）含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测线粒体通路凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（BAX）、半胱氨酸蛋白酶3（Caspase 3）]、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路相关蛋白[p38MAPK、细胞外调节蛋白激酶（ERK）]的表达。 结果:与对照组比较，染毒组7、21、28 d大鼠血清中BUN含量明显增加，21d CRE含量明显增加，28、35 d CRE含量明显降低，14~35 d脏器系数和肾汞含量明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，染毒组14~35 d大鼠均出现肾小球基质增多、肾小管扩张等病变及明显的肾细胞凋亡，染毒组14、21 d大鼠肾细胞Cyt C表达明显，多位于肾小管。与对照组比较，染毒组21 d大鼠BAX含量明显升高，14、21 d大鼠Caspase 3含量明显升高，35 d大鼠p38 MAPK含量明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:HgCl 2可能通过细胞凋亡的线粒体通路致肾细胞损伤，并引起肾病综合征，而MAPK信号通路可能调控该过程，发挥抑制凋亡作用。

目的:采用单纯大鼠喂药模型及原位肝移植急性排斥模型，观察卡培他滨(CAP)的免疫抑制效应。方法:建立单纯大鼠喂药模型，选取18只成年清洁级雄性BN大鼠，数字随机分为CON组、CAP节拍剂量组(MET组)和CAP足量剂量组(MTD组)。于喂药前、喂药后第7 d、14 d和21 d，流式细胞术(FCM)检测外周血T淋巴细胞及其亚群CD4 ＋和CD8 ＋T淋巴细胞数目，ELISA检测IL-2和IFN-γ浓度。建立20对Lewis→BN大鼠原位肝移植急性排斥模型，数字随机分为模型对照组(A组)、他克莫司单药组(B组)、他克莫司＋节拍剂量CAP组(C组)和他克莫司＋足量剂量CAP组(D组)。术后7 d处死，流式细胞术(FCM)检测外周血T淋巴细胞及其亚群CD4 ＋和CD8 ＋T淋巴细胞数目，ELISA检测IL-2和IFN-γ浓度，HE染色观察移植肝病理变化。 结果:单纯大鼠喂药模型中，与CON组相比，在14 d、21 d时，MET组和MTD组中T淋巴细胞、CD4 ＋和CD8 ＋T淋巴细胞数目均减少，差异具有统计学意义( P<0.05)；IL-2和IFN-γ于给药7 d、14 d和21 d均下降，差异有统计学意义( P<0.05)。移植排斥模型中，与A、B组相比，术后7 d时，C组和D组的大鼠外周血T淋巴细胞、CD4 ＋和CD8 ＋T淋巴细胞数目均降低，RAI指数下降，差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:卡培他滨可降低大鼠外周血T淋巴细胞及其亚群CD4 ＋和CD8 ＋T细胞数目，并抑制IL-2和IFN-γ的分泌，具有免疫抑制效应。卡培他滨联用他克莫司可减轻大鼠肝移植术后急性排斥反应强度，预示卡培他滨可能成为一种具有抗肿瘤效应的免疫抑制剂，值得进一步深入探讨。

目的:在牛乳中添加等同母乳剂量的生长抑素(SST)及胃动素(MTL)，探讨其对食物过敏/不耐受的调节作用。方法:挪威大鼠(BN)幼鼠给予母乳(母乳组)、牛乳(牛乳组)、添加SST的牛乳(SST组)、添加MTL的牛乳(MTL组)、添加SST+MTL的牛乳(SST+MTL组)5种方式喂养4周，并配合皮肤致敏。每周量化评定临床损害。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血总免疫球蛋白E (IgE)及粪钙卫蛋白(FC)水平。葡聚糖蓝法测定胃排空比率及小肠推进比。结果:母乳组、牛乳组、SST组、MTL组及SST+MTL组的总IgE水平分别为(45.75±5.05) μg/L、(580.42±45.24) μg/L、(290.38±22.88) μg/L、(424.26±22.17) μg/L、(209.49±17.59) μg/L；FC水平分别为(149.07±24.78) μg/g、(458.85±33.81) μg/g、(343.63±34.97) μg/g、(407.79±29.62) μg/g、(296.83±28.77) μg/g；第4周临床损害总评分分别为：(0.50±0.61)分、(9.37±1.04)分、(6.83±1.49)分、(7.00±1.14)分、(5.37±1.19)分。与牛乳组比较，SST组、MTL组及SST+MTL组的IgE、FC水平及临床损害评分均显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。牛乳组临床损害最重，SST+MTL组临床损害最轻，SST+MTL组最接近母乳喂养天然状态。MTL组的胃排空比率最接近母乳组[(92.52±6.27)%比(100.00±9.70) %， P<0.05]。牛乳组有明显腹泻及小肠推进比过快，小肠推进比母乳组为(39.32±2.61)%，牛乳组为(71.96±4.43)%，2组比较差异有统计学意义( P<0.01)。SST+MTL组的肠动力有所下降，但这刚好对抗了牛乳过敏产生的腹泻，SST+MTL组小肠推进比为(38.90±2.65)%，母乳组为(39.32±2.61)%，2组比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:牛乳中添加母乳剂量的SST及MTL使牛乳的致敏性及胃肠耐受性更接近母乳，SST有利于抑制过敏免疫损伤，MTL有利于改善牛乳的胃肠耐受性，且SST与MTL有拮抗平衡调节作用，二者同时添加，可协同提高牛乳的胃肠耐受性。

目的:研究骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对大鼠减体积移植肝作用及机制。方法:选取体重210～250 g的健康雄性清洁级Lewis大鼠和Brown Norway (BN)大鼠各40只，分别作为供体和受体建立大鼠50%减体积肝移植免疫排斥模型。模型大鼠分为干细胞组( n＝20)和生理盐水组( n＝20)。以体重80～100 g的健康雄性BN大鼠制备BMMSCs，经阴茎背静脉注射到肝移植受体。于术后即刻、第1天、第3天、第7天分别取5只大鼠肝组织，进行组织病理学观察和移植排斥反应评分，并利用免疫组织化学染色和蛋白质电泳检测移植肝微管相关蛋白1轻链3(LC3)和自噬调控蛋白Beclin-1的表达。 结果:生理盐水组肝移植受体大鼠术后第1、3、7天的急性排斥反应评分分别为(2.33±0.58)分、(4.00±0.00)分、(6.33±0.58)分，干细胞组分别为(2.10±0.58)分、(3.73±0.58)分、(5.67±1.15)分，两组比较呈降低趋势，差异有统计学意义( P<0.05)。与生理盐水组比较，在术后第1、3、7天干细胞组肝组织自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达量增多，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:BMMSCs移植对大鼠减体积肝移植术后的移植肝具有保护作用，自噬在其中发挥一定作用。

目的 筛选出均匀分布在大鼠染色体上的单核苷酸多态性(SNP)位点,建立常用近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别方法.方法 在文献中获得 SNP 共 141 个,利用 Ensembl数据库中获取的信息筛选出在 BN、F344、GK、LEW、SHR和 WKY 6 种大鼠品系中呈现多态性的 SNP 位点,并从中优化出均匀分布各染色体且包含品系特异性SNP 的最佳位点组合.通过 PCR扩增技术和 Sanger测序方法对组合位点用于常用近交系大鼠遗传质量检测和品系鉴别的效果进行验证.结果 优化出了在各品系内表现单态性、品系间呈多态性的 40 个 SNP 标记.其中包含可以用于品系鉴别的特异性位点:4 个 BN大鼠特异性位点,3 个 F344 大鼠特异性位点,2 个 GK大鼠特异性位点,2个 LEW大鼠特异性位点和 1 个SHR大鼠特异性位点.分别利用BN、F344、LEW、SHR和WKY大鼠的DNA混合样本对优化出的 40 个位点进行验证,结果与网站数据一致.结论 成功建立了常用近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别的 SNP 组合.

目的 探讨在肝移植排斥反应中巨噬细胞亚群分类及变化.方法 建立大鼠肝移植模型分为:免疫耐受组(B-B),将BN大鼠供体的肝脏移植至BN大鼠受体;免疫排斥组(L-B),将Lewis大鼠供体的肝脏移植至BN大鼠受体,使用单细胞RNA测序和高通量RNA测序区分大鼠移植肝巨噬细胞亚群,发现排斥反应高度差异的基因,免疫组化确定蛋白表达和细胞亚群的变化和分布.结果 CD68阳性巨噬细胞在排斥组多于耐受组(P<0.05),巨噬细胞可分为9个亚群,排斥反应中巨噬细胞第8群的CXC趋化因子配体9(CXCL9)明显升高,第5群的白细胞分化抗原74(CD74)基因明显升高(P<0.05).排斥反应中巨噬细胞差异基因综合第1位的是CD74,第2位是CXCL9.与耐受组比较,排斥组肝脏汇管区可见大量CD74阳性巨噬细胞浸润,并且在肝血窦CD74阳性巨噬细胞浸润也明显增加(P<0.05),在排斥肝脏汇管区和肝血窦可见大量CXCL9阳性巨噬细胞浸润以汇管区为著(P<0.05),在排斥肝脏汇管区CD14阳性细胞明显增加(P<0.05).结论 在肝移植排斥反应中CD74阳性巨噬细胞亚群和CXCL9阳性巨噬细胞亚群是促进肝移植排斥反应中的关键亚群,完善了巨噬细胞在肝移植排斥反应中作用机制.

目的 比较白化鼠与非白化鼠在长期模拟失重后眼部结构与功能的改变,完善和补充长期微重力暴露所致眼部损伤疾病动物模型构建方法.方法 将正常雄性 Sprague-Dawley(SD)大鼠(白化鼠)和 Brown-Norway(BN)大鼠(非白化鼠)各 12 只随机分为SD正常对照组(NS)、BN正常对照组(NB)、SD模型组(MS)和BN模型组(MB),每组 6 只,模型组采取 30°头低位尾悬吊 8 周模拟长期失重,在造模结束后利用视网膜电流图(ERG)和视觉诱发电位(VEP)检测大鼠的视觉功能,石蜡切片HE染色观察视网膜形态,同时通过小动物眼底成像系统观察大鼠眼底血管改变情况.结果 在 8 周尾吊模拟失重后,MS 组与NS 组相比,暗适应 3.0 ERG反应振幅明显下降(P<0.01),VEP的 P2 波峰时值明显延长(P<0.01),HE染色显示外核层变薄(P<0.01),眼底可见脉络膜血管血流增多,而 MB 组与 NB 组相比,视网膜结构与功能均无明显变化.结论 与非白化大鼠相比,白化大鼠在长期模拟失重情况下更容易出现眼部损伤,视网膜色素上皮细胞中黑色素合成相关蛋白可能是研究对抗模拟长期失重导致视网膜退行性变的重要分子.

目的 使用大黄水煎液灌胃联合视网膜光凝建立湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)脾虚证大鼠模型,并对模型进行评价.方法 将24只10周龄BN大鼠随机分为对照组(CG)、光凝组(PG)、大黄联合光凝组(RPG),每组8只.RPG组大鼠予10 mL/kg灌胃大黄水煎液,行右眼视网膜氪激光光凝诱导脉络膜新生血管(CNV);PG组仅予氪激光光凝和等剂量蒸馏水灌胃;CG组仅灌胃蒸馏水,均连续干预10 d.记录3组大鼠10 d内的一般情况及表观行为情况;光凝后7 d、14 d活体进行眼底照相、荧光素眼底血管造影(FFA)、光学相干断层扫描(OCT)观察CNV病灶.14 d后取材,计算大鼠脾脏及胸腺指数,间苯三酚法检测血清D-木糖表达,测定血清α-淀粉酶活力;分离大鼠眼球视网膜色素上皮(RPE)层—脉络膜—巩膜的复合体,AF488偶联同工凝集素B4法观察CNV病灶;苏木精—伊红(HE)染色观察视网膜形态.结果 (1)一般情况及表观行为:RPG组大鼠毛发色泽、四肢肌肉、行动、精神状态等得分持续下降,体质量、体温低于PG组,差异均有统计学意义(t体质量=6.014,P= 0.000;t体温=3.125,P=0.005).(2)脾脏及胸腺指数:3组间大鼠胸腺及脾脏指数比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)血清D-木糖与α-淀粉酶:PG、RPG组大鼠血清D-木糖水平均低于CG组(tPG=11.270,tRPG=17.990,均P=0.000),且RPG组低于PG组(t=6.720,P=0.000),差异均有统计学意义;而 3 组间血清α-淀粉酶差异无统计学意义(P＞0.05).(4)眼底CNV:RPG组大鼠第7天、第14天CNV渗出面积高于PG组(t7 d=2.217,t14 d=2.210,均P=0.032),且灰度值高于PG组(t7 d=3.448,P=0.001;t14 d=2.215,P=0.032),差异均有统计学意义.(5)视网膜形态结构:CG组大鼠视网膜结构完整清晰,PG、RPG组视网膜结构破坏,伴有出血、水肿以及新生血管生成,且RPG组较PG组更为显著.(6)视网膜病变面积:RPG组平均病灶面积高于PG组,差异有统计学意义(t=4.645,P=0.000).结论 大黄水煎液灌胃联合视网膜激光光凝法可以成功建立脾虚证wAMD病证结合大鼠模型.