目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

目的:对自制冷冻片微型载体（Strawtop）法与麦管法冷冻保存人微量精液的冻存效果进行系统评价。方法:采用前瞻性研究分析2018年5月1日至2018年6月30日期间于同济大学附属东方医院生殖医学中心行卵胞质内单精子显微注射（ICSI）助孕治疗的患者捐献的部分精液样本，比较自制Strawtop法与麦管法冷冻人精子复苏后的冷冻复苏率、DNA碎片指数（DNA fragmentation index，DFI）、超显微结构和受精能力与胚胎发育情况。结果:Strawtop法冻存人精子的冷冻复苏率（46.8%±17.1%）显著高于麦管法（23.1%±13.7%， P=0.001）；与冷冻前（18.9%±11.6%）相比，麦管法（33.5%±15.0%）冷冻精子复苏后的DFI显著增加（ P=0.019），而Strawtop法冻融人精子的DFI（23.4%±11.7%）与冷冻前相比差异无统计学意义（ P=0.375）；Strawtop法对冷冻精子超显微结构的损伤低于麦管法；Strawtop法冻融精子、麦管法冻融精子和新鲜精子的正常受精率、卵裂率和受精后48 h（第2日）的优质胚胎率差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:Strawtop法冷冻人微量精液冷冻复苏率高于麦管法，复苏精子的损伤较小，且复苏后无需离心洗涤即可直接用于ICSI，具有较高的临床应用价值。

目的:寻找体外受精（ in vitro fertilization， IVF）过程中合适的精液处理方法。 方法:本研究采用前瞻性随机对照双盲设计，选取300例因女性因素且男性生育力检查未见异常行IVF-胚胎移植（embryo transfer，ET）助孕的不孕夫妇为研究对象，纳入的患者通过计算机产生随机数进行随机化分组，分为浮游组（新型无损伤精子筛选技术，FY组， n=100）、密度梯度组（DG组， n=100）和上游组（SU组， n=100）。收集三组患者受精后剩余的精子观察精子超微结构，并比较三组优选后精子DNA碎片指数（DNA fragment index，DFI）及IVF-ET治疗过程中的受精率、卵裂率、优质胚胎率及妊娠率等指标之间的差异。 结果:FY组精子DFI显著低于DG组和SU组（3.22%±2.73%比8.31%±2.14%比6.43%±2.56%），差异有统计学意义（ P=0.02），FY组的精子头、尾部质膜完整率明显高于其他两组（92.0%±24.2%比80.2%±29.5%比73.2%±30.1%和93.9%±1.2%比80.1%±1.1%比74.9%±1.2%），差异具有统计学意义 （P=0.01， P=0.03）。FY组的优质胚胎率、囊胚形成率明显高于DG组和SU组［44.14%（452/1024）比32.30%（292/904）比32.46%（296/912）和54.40%（396/728）比43.52%（302/694）比46.34%（330/712）］，差异均具有统计学意义（ P均<0.001）。新鲜周期FY组的妊娠率和植入率明显高于DG组和SU组［57.14%（24/42）比33.33%（16/48）比35.56%（16/45）和50.00%（30/60）比27.45%（14/51）比28.26%（13/46）］，差异具有统计学意义（ P=0.04， P=0.02）。复苏周期FY组的妊娠率和植入率明显高于DG组和SU组［52.38%（22/42）比31.25%（10/32）比37.14%（13/35）和52.38%（22/42）比29.41%（10/34）比30.56%（11/36）］，差异具有统计学意义（ P=0.03， P=0.02）。 结论:浮游法可减少对精子造成的物理损伤，提高精子质膜的完整率，降低精子DFI，改善辅助生殖技术结局。

目的:比较精子DNA碎片指数(DFI)对因男方因素行卵胞质内单精子显微注射(ICSI)周期临床和实验室指标的影响，探讨DFI与临床助孕结局的关系。方法:回顾性队列研究分析2016年1月至2017年12月期间于南京医科大学第一附属医院生殖医学科因男方因素进行ICSI助孕的387个周期的临床资料。所有周期均为首次进行ICSI助孕，选用拮抗剂灵活方案促排卵。根据精子DFI的检测结果将所有周期分成3组，A组：精子核DNA完整性良好(DFI≤15%，167个周期)，B组：精子核DNA完整性中等(15%0.05)，C组的男方年龄[(32.56±5.70)岁]高于A组[(30.27±4.04)岁， P=0.002]和B组[(30.22±4.81)岁， P=0.003]。A组ICSI的正常受精率(86.7%)和可移植胚胎率(88.3%)均显著高于B组(83.8%， P=0.024 5；84.9%， P=0.012 1)和C组(82.1%， P=0.005 6；84.4%， P=0.022 7)，但优质胚胎率和流产率组间差异均无统计学意义( P>0.05)。C组的累积活产率(74.7%)较A组和B组下降(82.0%、78.6%)，但差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:精子DFI是评估男性生育力的一个重要指标，男方年龄增高可能会导致DFI升高。精子DNA损伤可能会影响胚胎发育及辅助生殖的结局，DFI≥30%可能降低ICSI周期的累积活产率，但还需更大样本的研究。

目的:探讨精子DNA碎片指数(DFI)与精子形态、精子运动参数的相关性。方法:选取2020年5月至2021年7月在本院治疗的475例男性精液样本，根据不同DIF将患者分为DFI<15%组(178例)、15%≤DFI≤30%组(155例)和DFI>30%组(142例)，比较三组的精子形态、精子运动参数，采用Pearson相关分析DFI与精液常规指标、精子形态与精子运动参数的相关性。结果:DFI<15%组的前向运动精子百分率(PR)、非前向运动精子率(NP)、PR＋NP、前向运动精子浓度、非前向运动精子浓度、前向运动精子总数、非前向运动精子总数大于15%≤DFI≤30%组和DFI>30%组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)；DFI>30%组的不动精子率(IM)、不动精子浓度、不动精子总数大于DFI<15%组和15%≤DFI≤30%组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。DFI<15%组的正常精子形态率、精子运动曲线速度、精子运动直线速度、路径速度、头部侧摆幅度大于15%≤DFI≤30%组和DFI>30%组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)；DFI>30%组的直线性、前向性、鞭打频率大于DFI<15%组和15%≤DFI≤30%组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。精子DFI与不动精子率、不动精子浓度、不动精子总数呈正相关，与PR、NP、PR＋NP、前向运动精子浓度、非前向运动精子浓度、前向运动精子总数、非前向运动精子总数呈负相关( P<0.05)。DFI与正常精子形态率呈负相关( P<0.05)；DIF与精子运动直线性、精子运动前向性、鞭打频率呈正相关，与精子运动曲线速度、直线速度、路径速度及头部侧摆幅度呈负相关(均 P<0.05)。 结论:精子DFI与部分精液常规参数、精子正常形态率、精子运动参数存在相关性，可作为精子质量的参考指标。

患者，男，8岁，吉林长春人。患儿出生后新生儿期黄疸消退延迟，11月龄出现无明显诱因发热伴尿色加深，血常规：HGB 67 g/L，平均红细胞体积（MCV）92.7 fl，平均血红蛋白含量（MCH）29.0 pg，平均血红蛋白浓度（MCHC）313 g/L，网织红细胞比值13.91%，网织红细胞计数0.037×10 12/L；肝功能：总胆红素（TBIL）19.8 μmol/L，直接胆红素（DBIL）12 μmol/L，间接胆红素（IBIL）7.8 μmol/L。外周血涂片：杆状核粒细胞2%，分叶核粒细胞26%，淋巴细胞62%，单核细胞6%，嗜酸分叶核粒细胞2%，异型淋巴细胞2%，已成熟红细胞大小不一，球形红细胞13%，易见泪滴状、盔甲状、棒状等异形红细胞碎片。血红蛋白电泳：HbA 69.9%，HbA 2 2%，HbF 18.4%，HbE 6.6%，Hb-S/D 3.1%，中国人常见17种β珠蛋白基因点突变检测提示β N/β N。自身免疫性抗体：IgM 14.9 U/ml，抗核抗体弱阳性，其余抗体阴性。骨髓涂片：增生活跃，红系增生旺盛，有核红细胞形态大致正常，偶见双核中幼红细胞，分裂红细胞易见，部分成熟红细胞中心淡染区缩小，部分成熟红细胞中空明显，可见变形，可见H-J小体，点彩红细胞易见。输注洗涤红细胞维持HGB为90~100 g/L，患儿尿色加深症状无改善。患儿4岁时出现肝脾肿大症状，腹部B超：肝右锁骨中线肋缘下2.4 cm，脾左肋缘下2.9 cm；尿常规：尿胆红素（++）。为明确诊断，患儿前来本实验室。签署知情同意书后抽取患儿及其父母外周血进行表型及基因型分析。检测结果提示患儿表现为大细胞性贫血，血常规：HGB 76 g/L，MCV 105.57 fl，MCH 30.08 pg，MCHC 276 g/L；高效液相色谱法行血红蛋白电泳：HbF 18.4%，HbA 2 2.0%，HbS 9.7%，利用本实验室建立的毛细管区带快速电泳法测定α和β珠蛋白链提示患儿有异常血红蛋白。患儿常规的地中海贫血基因检测阴性（3种中国人群常见的缺失型α地贫基因、3种中国人群常见的非缺失型α地贫基因和17种中国人群常见的β地贫基因），为了检测患儿是否存在未知突变，对整个β珠蛋白基因进行了DNA测序，测序结果提示患儿携带β珠蛋白基因的罕见错义突变CD88（T>C）。而患儿父母表现出正常的血液学表型：患儿父亲HGB 161 g/L、HbF 1.1%、HbA 2 3.0%，患儿母亲HGB 136 g/L、HbF 1.0%、HbA 2 2.5%；常规地中海贫血基因检测也均为阴性，且测序发现父母双方都没有携带患儿所携带的罕见的错义突变CD88（T>C）。考虑患儿是由于自发突变引起的HBB基因突变，经查询数据库该突变引起异常血红蛋白Hb Santa Ana，该异常血红蛋白案例在国外有过报道，该突变携带患者多表现出大细胞性贫血伴随异常血红蛋白。对患儿进行随访，目前血红蛋白维持在90~100 g/L，肝脾肿大未有改善。

探讨男性精液参数和精子DNA碎片指数与年龄之间的关系。采用横断面抽样调查设计，选取2019年1月至2021年6月在郑州大学第三附属医院生殖男科就诊的3 203例男性患者作为研究对象，年龄范围18~57岁、中位年龄为30岁，通过分位数回归分析，呈现年龄与男性精液参数及DNA碎片指数（DFI）的相关关系。将研究人群分为≤30岁组和>30岁组，并分别比较两组的年龄与精液体积、精子浓度、精子总数、前向运动精子活力、总活力、正常形态精子百分率及DFI水平之间的相关性。结果显示，不同年龄组间前向运动精子活力、总活力及DFI水平差异有统计学意义（ χ 2=- 4.608、-4.604、-7.719， P均<0.05）；精液体积、精子浓度、精子总数及正常形态精子百分率差异无统计学意义（ χ 2=-1.712、-1.203、-0.149、-0.175， P均>0.05）。>30岁年龄组中，男性年龄与精液体积、前向运动精子活力及总活力呈极弱负相关（ r=-0.137、-0.101、-0.056， P均<0.05），男性年龄与精子浓度及精子DFI水平呈极弱正相关（ r=0.061、0.190， P均<0.05），而男性年龄与精子总数及正常形态精子百分率无相关性（ r=-0.018、-0.016， P均>0.05）。综上，随着年龄增长，特别是30岁以后，精液体积、前向运动精子活力及总活力降低，而精子浓度及DFI水平则升高，精液质量下降。

[目的]本研究旨在改进生殖男科领域现有的精液处理方法,特别是针对双层密度梯度法中的300×g 20 min处理条件,以提高受精结局.[方法]收集2020年7月和9月以及2022年3月和5月在中山大学附属第六医院生殖医学中心进行辅助生殖助孕的1623例患者的精液标本进行实验.预实验中,比较四种不同的双层密度梯度方法(200×g 10 min、200×g 20 min、300×g 10 min和300×g 20 min)处理后标本的精子DNA碎片率和回收率.然后,筛选出一种最优的方法作为新方法,并与目前在用的旧方法(300×g 20 min双层梯度法)进行对比,检验受精率是否有统计学差异.在新方法的基础上,进一步优化为单层密度梯度法,并与双层密度梯度法进行对比,检验是否存在统计学差异.实验过程中严格控制温度、离心速度和离心时间,同时记录每组样本的数量和处理条件.[结果]在保证足够的精子回收率的基础上,发现四种双层密度梯度法中300×g 10 min的精子DNA碎片率低于300×g 20 min.因此,选择300×g 10 min作为新方法进行试验.结果 表明,新方法300×g 10 min的总受精率、二核体(2pn)受精率均高于300×g 20 min,且差异有统计学意义(P<0.05);300×g 10 min的卵裂率也略高于300×g 20 min,但差异没有统计学意义(P>0.05).单层密度梯度法的总受精率、2pn受精率均高于双层密度梯度法,但差异没有统计学意义(P>0.05);单层密度梯度法的卵裂率高于双层密度梯度法,囊胚形成率低于双层密度梯度法,且差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]相对于现有的300×g 20 min双层梯度法,300×g 10 min双层梯度法成功提高了总受精率、2pn受精率、卵裂率,缩短了精液优化处理的时间;而单层密度梯度法虽提高了卵裂率、节约了试剂成本和操作时间,但其囊胚形成率却出现了下降的情况.这些发现为生殖男科领域的精液处理方法提供了有益的指导和启示.

目的 探讨精子DNA碎片率(DFI)与精液质量的关系以及对IVF周期胚胎质量的影响.方法 回顾性分析2021年6月至2023年4月于我院行IVF助孕的343对不孕不育夫妇的临床资料,按精子DFI分为A组(DFI＜25％,n=294)和B组(DFI≥25％,n=49),分析精子DFI与精液常规参数的关系,以及不同精子DFI组胚胎质量的差异.结果 两组间男女方年龄、不孕年限、女方生殖激素水平、体质量指数(BMI)、获卵数比较均无统计学差异(P＞0.05);A组优质囊胚形成率显著高于B组(P＜0.05),而组间受精率、卵裂率、优质胚胎形成率、囊胚形成率比较均无统计学差异(P＞0.05).相关性分析显示,精子DFI与精子前向运动百分比(r=-0.239,P=0.000)、精子正常形态率(r=-0.254,P=0.000)呈负相关.结论 精子DFI与精液质量相关,并影响到IVF周期中优质囊胚的形成.

目的 探讨精子DNA碎片指数(DFI)对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)胚胎发育与妊娠结局的影响.方法 选取2020年1月-2021年12月在广州市花都区妇幼保健院生殖医学科就诊并接受IVF-ET辅助生殖助孕的夫妇202对,共计240个取卵周期,207个移植周期.采用流式细胞术检测精子DNA碎片的染色质结构.根据DFI分为3组:A组DFI＜15％,B组15％≤DFI≤30％,C组DFI＞30％.比较3组受精及胚胎发育指标和妊娠结局指标.结果 3组处理前的前向运动精子比较差异有统计学意义(P＜0.05).A组受精率、正常受精率分别为84.9％、72.6％,B组受精率、正常受精率分别为83.5％、69.4％,C组受精率、正常受精率分别为71.9％、60.2％,3组受精率、正常受精率比较差异均有统计学意义(x2=21.98,13.60,均P＜0.05).3组总卵裂率、正常卵裂率、第3天优胚率(D3优胚率)、囊胚形成率、优质囊胚率、可利用囊胚率比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).A组、B组、C组流产率分别为22.7％、13.5％、47.1％,3组流产率比较,差异有统计学意义(x2=9.62,P＜0.05).结论 DFI升高会影响受精率和正常受精率,提高流产风险.与传统精液常规检查相比,DFI更能预测IVF-ET的妊娠结局.检测DFI对常规IVF-ET具有重要的临床参考意义.