目的:探讨双氢睾酮(DHT)浓度波动对前列腺上皮细胞(RWPE-2细胞系)中错配修复基因MutL同源物(MLH1)表达的影响及其机制。方法:将RWPE-2细胞分为空白组，恒定组(DHT浓度为1、10 nmol/L)以及波动组(DHT浓度为1、10 nmol/L，每24 h波动1次)，以不同浓度的DHT干预不同的时间(0、24、48、72 h)，观察细胞的形态、生长状态及细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力；应用蛋白质印迹法(Western blot)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测雄激素受体(AR)信号通路靶基因[前列腺特异抗原(PSA)、FK506结合蛋白(FKBP5)]、苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路靶基因[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)]和MLH1基因表达的改变；免疫荧光法检测基因分布位置的变化。应用Graph Pad 7.0统计软件分析，组间差异采用 t检验分析。 结果:恒定组与波动组中RWPE-2细胞形态学变化与DHT作用具有浓度(1～10 nmol/L)依赖性；CCK-8结果提示，72 h后，与空白组(6.904±0.143)比较，恒定组(7.073±0.103)、(8.508±0.187)与波动组(8.662±0.327)、(9.239±0.167)相对吸光度( A)值均增加，提示DHT干预增强细胞增殖，呈时间浓度依赖性(1～10 nmol/L)，差异有统计学意义( t＝6.805、4.922、10.6， P<0.01)；Western blot结果提示，与空白组比较，波动组与恒定组中各靶基因的mRNA及蛋白表达水平均上调，波动组较恒定组中上述基因表达进一步上调，波动组FKBP5基因较恒定组表达下调，差异有统计学意义( t＝5.488、15.730、7.976、3.695、3.952、2.830， P<0.05)；免疫荧光结果显示，与空白组比较，波动组和恒定组中各靶基因核内分布增多，且波动组上述基因分布差异更显著。 结论:DHT能上调RWPE-2细胞中错配修复基因MLH1的表达，而DHT波动会使这种趋势增加，通过AR和Akt信号通路介导的细胞增殖是其可能机制之一。

目的 研究泛素特异性蛋白酶49(USP49)和FK506结合蛋白51(FKBP51)在糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓背角中的表达及作用. 方法 SD雄性大鼠通过高糖高脂饮食饲养和腹腔注射1％链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型并按照随机数字表法分为DNP组、对照短发夹RNA(shRNA)组和USP49沉默组,每组10只.3组大鼠分别鞘内注射生理盐水、Ad-scrambledshRNA(3×108 PFU/mL)、Ad-USP49-shRNA(3× 108 PFU/mL).另取10只正常大鼠作为对照组,不做任何处理.分别于造模前1d、造模后1d、7d、鞘内注射后1、3、7d测定大鼠热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足反应阈(MWT),并检测背角神经元USP49、FKBP51、糖皮质激素受体α(GRα)mRNA和蛋白的表达水平. 结果 (1)造模前1d,4组大鼠TWL差异无统计学意义(P＞0.05).鞘内注射后3d、7d,USP49沉默组TWL明显长于DNP组,短于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)造模前1d,4组大鼠MWT差异无统计学意义(P＞0.05).鞘内注射3d、7d后,USP49沉默组MWT明显高于DNP组,低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)与DNP组比较,USP49沉默组USP49mRNA、FKBP51 mRNA表达显著下降,GRα mRNA表达显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)与DNP组比较,USP49沉默组USP49蛋白、FKBP51蛋白表达明显降低,GRα蛋白明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 特异性沉默脊髓背角神经元USP49表达可改善DNP大鼠热痛敏反应和机械痛敏反应,其机制可能与USP49介导的FKBP51蛋白去泛素化有关.

双相障碍(bipolar disorder,BD)是心境障碍的一个主要亚型,心境障碍的另外一个重要亚型是重性抑郁障碍(majordepressive disorder,MDD),也称单相抑郁.BD具有躁狂和抑郁两大症候群,并呈现周期性循环.和MDD一样,BD也是严重损害人类精神健康的重大疾病.体内应激反应系统例如下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrnal,HPA)轴活性紊乱已经大量研究证实是心境障碍的重要发病机制.但是,目前还缺乏系统地针对BD患者HPA轴活性的研究.现有的大部分研究仅仅关注BD患者血浆水平或者唾液皮质醇水平的改变,并且研究结果存在很大差异.但是,地塞米松/促肾上腺皮质激素释放激素(DEX/CRH)抑制试验的结果却比较一致:皮质醇抑制显著减弱,这个结论表明BD患者中HPA轴的负反馈调节功能发生异常.HPA轴的负反馈调节中,糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)和免疫亲和素家族蛋白之一,FK506结合蛋白51(FK 506 binding protein 51,FKBP51)是2个重要的分子.一方面,GR基因单核苷酸多态性被认为与BD发病相关.另一方面,童年期创伤经历导致BD发病风险增加的机制被推测是通过影响HPA轴敏感性实现的,而在这一过程中,GR和FKBP51参与了对HPA轴敏感性的调节.本综述将对近年来针对BD患者HPA轴活性异常的研究及其和GR和FKBP51导致的HPA轴负反馈调节紊乱的研究总结分析,旨在为BD与应激反应相关的发病机制研究提供新的思路.

骨性关节炎(osteoarthritis,OA)多表现为关节疼痛、关节畸形及功能障碍,发病率高,是制约经济和社会发展的主要疾病之一.RhoA/ROCK信号通路是细胞骨架调节的经典信号通路,RhoA蛋白(Ras homolog gene family member A,RhoA)在被瘦素、FKBP51(FK506-binding protein 51,FKBP51)、过度的机械刺激、透明质酸与CD44(cluster of differentiation 44,CD44)结合、TGF-α(transforming growth factor alpha,TGF-α)等多种因素激活后磷酸化激活Rho相关蛋白激酶(Rho-associated protein kinase,ROCK),调节细胞骨架重组,最终引起软骨退变,导致OA发生和发展.此外,RhoA/ROCK信号通路还参与调节炎性/非炎性疼痛和神经病理性疼痛,对OA产生的疼痛具有重要的调节作用.RhoA/ROCK信号通路与OA密切相关,但国内研究相对较匮乏.本文综述了RhoA/ROCK信号通路在OA中的研究进展.

目的:初步探讨FK506结合蛋白51(FKBPS1)在雌激素受体阳性(ER+)乳腺癌他莫昔芬耐药中的作用及分子机制.方法:采用ER+人乳腺癌MCF-7细胞建立对他莫昔芬耐药的MCF-7/TAMR细胞,MTT法检测他莫昔芬对MCF-7和MCF-7/TAMR细胞增殖的影响.Western blot检测FKBP51和蛋白激酶B(AKT)信号通路中相关蛋白在MCF-7和MCF-7/TAMR细胞中的表达情况.通过敲低或者过表达FKBP51,观察FKBP51对ER+乳腺癌细胞耐药性及AKT信号通路的影响.在ER+人乳腺癌组织标本中验证FKBP51表达情况.结果:成功建立MCF-7/TAMR细胞株.他莫昔芬对MCF-7和MCF-7/TAMR细胞增殖的抑制率均呈剂量依赖性,且对MCF-7细胞增殖的抑制率高于MCF-7/TAMR细胞(P＜0.05).Western blot结果显示,FKBP51在MCF-7/TAMR细胞中的表达低于MCF-7细胞,并且其表达水平的降低激活AKT信号通路的活性,促进乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药.同时,FKBP51在ER+他莫昔芬耐药人乳腺癌组织中表达水平低于他莫昔芬敏感人乳腺癌组织.结论:FKBP51表达水平降低促进ER+乳腺癌患者对他莫昔芬耐药,可能与激活细胞内AKT信号通路有关.

目的 探讨胶质母细胞瘤(GBM)类血管动蛋白-2(AMOTL2)与FK506结合蛋白51(FKBP51)表达变化及临床意义.方法 收集2016年6月～2019年6月手术切除的GBM标本92例,以取同期颅脑损伤内减压术切除的非肿瘤脑组织48例为对照.采用免疫组化染色法检测AMOTL2、FKBP51表达.GBM病人术后随访2年,记录无进展生存期和总生存期.结果 GBM组织AMOTL2低表达率、FKBP51高表达率均明显高于对照组(P＜0.05).GBM组织AMOTL2表达水平与P53、EGFR呈明显负相关(P＜0.05),FKBP51表达水平与P53、EGFR呈明显正相关(P＜0.05).Cox比例回归风险模型分析显示,AMOTL2低表达、FKBP51高表达是GBM生存预后不良的独立危险因素(P＜0.05).生存曲线分析显示,AMOTL2高表达组病人无进展生存期、总生存期较低表达组均明显延长(P＜0.05),FKBP51高表达组无进展生存期、总生存期较低表达组均明显缩短(P＜0.05).结论 GBM组织AMOTL2呈低表达,而FKBP51呈高表达,二者均与P53、EGFR表达相关,与病人预后密切相关.

目的 探究阿尔茨海默病(AD)患者血清中Apelin13和FK506结合蛋白51(FKBP5)的表达水平及意义.方法 选取93例AD患者(AD组),同时选取同年龄层体检的90例健康者(对照组).比较2组血清Apelin13、FKBP5 mRNA水平差异.Pearson相关分析Apelin13、FKBP5 mRNA与简易精神状态量表(MMSE)评分的相关性.采用受试者工作特征(ROC)曲线评估Apelin13、FKBP5 mRNA对AD患者重度认知功能障碍的诊断价值.结果 AD组患者MMSE评分、血清Apelin13水平较对照组降低,而FKBP5 mRNA水平较对照组升高(均P<0.01).轻、中及重度组AD患者血清中Apelin13水平依次降低,而FKBP5 mRNA水平依次升高(均P<0.05).二元Logistic回归分析显示,较高的MMSE评分、Apelin13是AD发生的保护因素,而较高的FKBP5 mRNA是AD发生的危险因素(均P<0.05).AD患者MMSE评分与血清FKBP5 mRNA水平呈负相关,而与Apelin13水平呈正相关(均P<0.05).ROC曲线显示,Apelin13联合FKBP5 mRNA诊断重度认知功能障碍的曲线下面积(AUC)及95％CI[0.884(0.808～0.961)]明显高于单一Apelin13[0.776(0.673～0.879)]或FKBP5 mRNA[0.801(0.699～0.902)],其敏感度和特异度分别为81.25％和86.89％(均P<0.05).结论 AD患者血清中Apelin13水平降低,而FKBP5 mRNA水平升高,Apelin13联合FKBP5 mRNA对AD患者重度认知功能障碍具有良好的诊断效能.