目的:通过基于MRI的机器学习模型来预测吸烟者及健康对照者大脑年龄，进一步探讨吸烟与大脑老化的关系。方法:该研究为回顾性研究。数据集1为2014年8月至2017年10月郑州大学第一附属医院募集的男性吸烟者95名［年龄20~50（34±7）岁］和健康对照者49名［年龄20~50（33±7）岁］。数据集2为2010至2015年西南大学成人影像数据库的114名男性健康志愿者［年龄20~50（34±11）岁］。所有受检者均接受高分辨三维 T 1WI。基于数据集1和数据集2健康对照者的结构MR图像构建高斯过程回归（GPR）模型和支持向量机模型预测大脑年龄，并通过交叉验证法验证模型性能，计算预测大脑年龄与实际年龄间的平均绝对误差（MAE）、实际年龄和预测大脑年龄之间的相关性（ r值），最终筛选出最佳模型。将最佳模型应用于吸烟者和健康对照者预测其大脑年龄。最后以年龄、教育年限及颅内总容积为协变量，通过一般线性模型比较吸烟者和健康对照者的大脑年龄差值（PAD）的差异。 结果:GPR模型预测大脑年龄（MAE=5.334， r=0.747）优于支持向量机模型（MAE=6.040， r=0.679）。GPR模型预测数据集1的吸烟者PAD值（2.19±6.64）高于数据集1的健康对照者（?0.80±8.94），差异有统计学意义（ F=8.52， P=0.004）。 结论:基于MRI的GPR模型预测吸烟者及健康对照者大脑年龄性能较好，吸烟者PAD值增加，进一步表明吸烟会加速大脑老化。

髓母细胞瘤是儿童期颅内高发肿瘤之一，分为Wnt亚型、Shh亚型、Group 3和Group 4亚型。手术切除肿瘤后可以辅以放疗和化疗，患者的5年无进展生存率可达50%～70%以上。部分患者伴有一些遗传性疾病，例如Gorlin-Goltz综合征、Li-Fraumeni综合征、家族性腺瘤性息肉病综合征等，不同综合征伴随着不同的胚系基因突变，其治疗方案、临床预后与患者的年龄、病理、分子亚型有密切关系。Shh亚型是合并基因胚系突变的高危亚型，需要常规行基因检测，以排除 TP53、 PTCH1、 SUFU、 GPR161、 ELP1等基因胚系突变，其他亚型的发病率相对较低，但需要排除 APC、 PALB2、 BRCA2等基因胚系突变。

目的:检测中晚期下咽鳞状细胞癌（简称鳞癌）患者TPF（紫杉醇+顺铂+5-氟尿嘧啶）诱导化疗前G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptor，GPR）68的表达水平和肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocytes，TIL）的数量，评估其对化疗疗效及预后的价值。方法:回顾性分析2012年9月至2017年11月首都医科大学附属北京同仁医院收治并进行TPF诱导化疗的31例中晚期下咽鳞癌患者，其中男性28例，女性3例，年龄43~71岁。通过免疫组化染色的方法检测患者化疗前肿瘤中GPR68和CD4 +、CD8 +T细胞的阳性率，利用 t检验分析其与临床特征、化疗疗效、总生存期（overall survival，OS）之间的关系。 结果:31例患者经3个周期化疗后，4例患者达完全缓解（CR），14例部分缓解（PR），10例疾病稳定（SD），3例疾病进展（PD）。有效组（CR+PR）中GPR68及CD8阳性率分别为25%、40%；无效组（SD+PD）中GPR68及CD8阳性率分别为50%、15%，2组相比差异有统计学意义（ t值分别为5.17和12.86， P值均<0.001）；线性回归分析显示GPR68与CD8 +T细胞存在负相关关系（ r=-0.64， P<0.001）；CD4的表达与患者TPF疗效无相关性（ P>0.05）。GPR68高表达和低表达组OS分别为12.5和25.0个月，差异有统计学意义（ HR=0.30， P=0.005）；CD8高浸润和低浸润组OS分别为25.0和14.5个月，差异有统计学意义（ HR=2.58， P=0.019）。Cox回归分析结果显示，GPR68、CD8 +T细胞是有意义的预后因素［ OR（95% CI）分别为3.27（2.46~5.97）和1.53（0.78~1.82）， P值均<0.05］；而CD4对预后无影响（ P>0.05）。 结论:GPR68和CD8 +T细胞有希望成为评估中晚期下咽鳞癌患者TPF诱导化疗疗效和预后的生物标志物。

目的:明确消退素D2(resolvin D2，RvD2)在病毒性心肌炎小鼠体内发挥的抗炎和抗内质网应激作用并初步探究其作用机制。方法:采购50只雄性BALB/c小鼠并给予相应编号，通过随机数表法抽取40只雄性BALB/c小鼠，每组各10只。分别设为正常对照组、RvD2对照组、病毒性心肌炎组和RvD2治疗组。RvD2对照组小鼠给予连续腹腔注射RvD2治疗7 d；病毒性心肌炎组小鼠给予腹腔注射柯萨奇B3病毒(Coxsackievirus B3，CVB3)构建病毒性心肌炎动物模型；RvD2治疗组小鼠在构建病毒性心肌炎动物模型后给予连续腹腔注射RvD2治疗7 d。7 d后处死各组小鼠并留取心脏组织及血清样本。ELISA检测各组小鼠血清中炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)表达水平；HE染色检测各组小鼠心肌组织内炎症细胞浸润情况；Western blot检测各组小鼠心肌组织内炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α以及内质网应激相关蛋白质葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD，GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein，Chop)的表达水平。剩余10只BALB/c小鼠在构建病毒性心肌炎动物模型后给予腹腔注射RvD2和G蛋白偶联受体18(G protein-coupled receptor 18，GPR18)蛋白抑制剂处理，Western blot检测各组小鼠心肌组织内GPR18蛋白、炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α以及内质网应激相关蛋白GRP78、Chop的表达水平。结果:与正常对照组相比，病毒性心肌炎组小鼠血清中炎症因子IL-1β、TNF-α表达水平显著上调；心肌组织内炎症细胞浸润程度显著增加；心肌组织内炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α以及内质网应激相关蛋白GRP78、Chop表达水平显著增加。与病毒性心肌炎组相比，RvD2治疗组小鼠血清炎症因子IL-1β、TNF-α表达水平显著降低；心肌组织内炎症细胞浸润程度显著降低；心肌组织内炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α以及内质网应激相关蛋白GRP78、Chop表达水平显著降低。与RvD2治疗组相比，给予病毒性心肌炎小鼠腹腔注射RvD2和GPR18抑制剂处理后小鼠心肌组织内炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α以及内质网应激相关蛋白GRP78、Chop表达水平显著增加，而GPR18蛋白表达水平显著降低。结论:RvD2可通过结合膜蛋白受体GPR18抑制病毒性心肌炎小鼠炎症反应并改善心肌组织所受的内质网应激损伤，从而在病毒性心肌炎小鼠体内发挥心脏保护作用。

目的:分析总结儿童乙型肝炎患者肝脏病理学特征及其与临床指标间的相关性，进一步探索可用于儿童肝脏纤维化评估的非侵入性指标。方法:回顾性分析2011年至2020年住院的80例行肝活检的未经抗病毒治疗的乙型肝炎患儿资料。分析不同年龄段及不同性别患儿的炎症和纤维化特征，选取与肝纤维化分期相关性较好的变量建立儿童肝纤维化非侵入性诊断评分。采用 t检验或秩和检验比较计量资料，双向有序分组资料采用Mantel-Haenszel χ2检验，等级相关性分析采用Spearman秩相关性检验，采用受试者操作特征曲线(ROC)评估新建立诊断评分对儿童肝纤维化的诊断价值。 结果:患儿中位年龄为6.4岁；HBV DNA水平较高(P50 = 7.6 log 10 IU/ml）;血清丙氨酸转氨酶（ALT）P50 = 171 U/L [<正常值上限（ULN）：5例；1~2 ULN：10例；> 2 ULN：65例]。病理学分析显示肝组织炎症的发生率为97.5%，G≥2者占比为42.5%；S≥2者占比为36.3%，肝纤维化的发生率为81.3%，肝硬化发生率为1.3%。肝组织炎症和纤维化改变随着患儿年龄增加逐渐加重，且男性患儿高等级炎症及纤维化改变的比例高于女性患儿。慢性乙型肝炎儿童的血清γ-谷氨酰转移酶（GGT）水平、γ-谷氨酰转移酶/血小板比值（GPR）及HBeAg水平与纤维化分期具有较好相关性（ rs分别为0.397、0.389、-0.311），将GGT、GPR及HBeAg联合，可建立评估儿童患者肝纤维化的非侵入性诊断评分，当评分< 1.5时，可诊断纤维化S0，1.5≤评分< 3.5时，可诊断纤维化S1；3.5≤评分< 5.5时，诊断纤维化S2；评分≥5.5时，诊断纤维化S≥3。其敏感度分别为80%、83%、86%，特异度分别为53%、55%、67%。 结论:转氨酶升高波动的慢性乙型肝炎患儿肝组织炎症发生率高，且肝组织病理改变随着患儿年龄增长而加重。GGT、GPR及HBeAg与乙型肝炎患儿肝脏纤维化相关性好，联合上述指标建立新的非侵入性诊断评分对慢性乙型肝炎儿童S0~S3期纤维化有一定诊断价值。

目的:通过体外研究探索肠道菌群代谢产物丁酸钠对脂肪变性HepG2细胞增殖与凋亡的影响机制。方法:采用人源性肝细胞系HepG2、游离脂肪酸(FFA；油酸与棕榈酸浓度比为2∶1)建立体外脂肪变性肝细胞模型。设置正常对照组、模型组、丁酸钠不同浓度(1、2、5、10、20、50 mmol/L)干预组，使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测丁酸钠对脂肪变性HepG2细胞增殖的抑制作用；设置正常对照组、模型组和丁酸钠5 mmol/L干预(丁酸钠干预)组，采用流式细胞术检测各组凋亡细胞比例；设置正常对照组、模型组和丁酸钠1、2、5、10 mmol/L干预组、空白小干扰RNA(siRNA)干扰组、G蛋白偶联受体(GPR)43干扰组、GPR109a干扰组、 GPR43/ GPR109 a双敲组，采用蛋白质印迹法检测各组转染前后的磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白质水平变化。统计学方法采用单因素方差分析、SNK- q检验和logistic回归分析。 结果:CCK-8检测结果提示丁酸钠对脂肪变性HepG2细胞增殖的抑制作用有剂量、时间依赖性。流式细胞术检测结果显示，丁酸钠干预组的细胞凋亡比例高于模型组和正常对照组[(3.400±0.100)%比(1.800±0.400)%、(1.067±0.451)%]，差异均有统计学意义( t＝6.721、8.705， P均<0.01)；模型组凋亡细胞比例与正常对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。转染前，模型组的p-AKT、p-mTOR蛋白质水平均高于正常对照组(2.300±0.058比1.000±0.012、2.160±0.125比1.000±0.052)，差异均有统计学意义( t＝22.080、8.575， P均<0.05)；丁酸钠1、2、5、10 mmol/L干预组的p-AKT和p-mTOR蛋白质水平均低于模型组(1.530±0.085、1.407±0.096、1.032±0.035、1.036±0.099比2.300±0.058，1.483±0.073、1.297±0.048、1.067±0.035、0.970±0.072比2.160±0.125)，差异均有统计学意义( t＝7.491、7.997、19.790、11.020，4.683、6.445、8.424、8.245， P均<0.05)。转染后，GPR43干扰组、GPR109a干扰组和 GPR43/ GPR109 a双敲组的p-AKT、p-mTOR蛋白质水平均高于空白siRNA干扰组和丁酸钠5 mmol/L干预组(1.474±0.045、1.471±0.058、2.067±0.120比1.158±0.030和1.139±0.031，1.850±0.082、1.683±0.058、2.160±0.091比1.469±0.037和1.490±0.116)，差异均有统计学意义( tp-AKT＝5.807、4.816、7.322，6.109、5.080、7.463； tp-mTOR＝4.235、3.113、7.044，2.542、1.497、4.562； P均<0.05)。 结论:丁酸钠对脂肪变性HepG2细胞增殖和凋亡的影响与GPR43/GPR109a-p-AKT-mTOR信号通路有关。

目的 以HMT-1 为先导化合物,构建新型丙烯酸类抗 2 型糖尿病药物,并进行构效关系分析.方法 采用基团替换及同系物原则对HMT-1 进行结构衍生化设计合成.采用分子对接考察衍生物与GPR40 的结合作用模式.通过GPR40 激动活性实验评估目标化合物的生物活性.结果 共设计合成了 6 个丙烯酸类新型GPR40 激动剂,体外活性实验发现均具有一定的GPR40 激动活性,其中HMT-5 和HMT-14 的激动活性与HMT-1 及阳性药物TAK-875 接近.其EC50 分别为 1.68 μmol·L-1 和 4.9 μmol·L-1.结论 构效关系分析发现,尾部苯环为对位取代,并在尾部增加氢键供体及连接链为芳香酰胺时可提高活性,可为开发更高效的抗2型糖尿病药物奠定基础.

目的 探讨G蛋白耦联受体(GPR)37在缺血性脑卒中的表达变化,进而探究其通过调控炎症反应对脑损伤恢复作用机制.方法 选取50例缺血性脑卒中(AIS)患者为脑卒中组,同期选取50例健康体检志愿者作为健康对照组,研究患者血清GPR37变化与患者血清炎症因子水平、美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)及神经标志物相关性.构建大鼠模型,分为假手术组、GPR37基因敲除组、模型组及GPR37基因敲除+模型组4组,通过平衡木试验及抓握牵引试验对比4组行走协调能力及肌力,苏木素-伊红(HE)染色对4组脑组织形态学进行比较,甲苯胺蓝染色对比4组脑神经神态,免疫组化检测GPR37在大鼠脑组织表达,原位末端标记法(TUNEL)法检测4组神经细胞凋亡情况.建立细胞模型,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清及细胞上清液内白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平.通过Western检测GPR37蛋白在大鼠脑组织及神经细胞内表达.结果 脑卒中组血清GPR37较健康对照组明显偏低,S100β、NSE、IL-1β、TNF-β明显偏高(P＜0.05),GPR37与S100β、NSE、IL-1β、TNF-β、NIHSS呈显著负相关(P＜0.05).与敲除组比较,模型组、敲除+模型组mNSS显著偏高,且敲除+模型组明显高于模型组(P＜0.05).与假手术组比较,敲除组、模型组、敲除+模型组平衡木测试得分依次显著偏高,肌力测试评分显著偏低,且模型组、敲除+模型组平衡木测试得分显著高于敲除组,肌力测试评分显著低于敲除组(P＜0.05).与假手术组比较,敲除组、模型组、敲除+模型组脑组织及神经细胞明显损伤加重,神经凋亡率显著升高,GPR37蛋白表达显著降低,IL-1β、TNF-α蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 GPR37可能通过对炎症反应的抑制作用实现对卒中后脑损伤的功能恢复,GPR37有望成为脑卒中新的治疗靶点.

目的:探讨维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、γ谷氨酰转肽酶与血小板计数比值(GPR)、γ-谷氨酰转肽酶与淋巴细胞计数比值(GLR)、血小板患者与淋巴细胞计数比值(PLR)在乙型肝炎病毒(HBV)感染后所致不同肝脏疾病患者中的变化情况以及单独和联合检测对乙型肝炎相关性原发性肝癌的诊断价值.方法:回顾性分析2020 年1月至2022 年12 月收治的 241 例HBV相关性肝病患者的临床资料,其中慢性乙型肝炎(CHB)患者 83 例,乙型肝炎相关性肝硬化(HBV-LC)患者82 例,乙型肝炎相关性原发性肝癌(HBV-HCC)患者76 例,另选取同期健康体检人员81 例为正常对照组(NC).统计分析4 组患者的PIVKA-Ⅱ、GGT、GPR、GLR、PLR表达差异以及血清PIVKA-Ⅱ、GGT的阳性率情况;Pearman线性相关分析HBV-HCC组患者的GLR、GPR、PLR指标与血清PIVKA-Ⅱ、GGT的相关性;采用ROC曲线分析PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR单独与联合检测对HBV-HCC的诊断价值.结果:CHB组、HBV-LC组、HBV-HCC组患者的PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR水平依次增加,其中两两组比较,GGT、GLR、GPR水平均差异有统计学意义(P<0.05),HBV-HCC组的PIVKA-Ⅱ表达水平高于CHB组、HBV-LC组(P<0.05).CHB组、HBV-LC 组的 PIVKA-Ⅱ、PLR 水平均低于 NC 组(P<0.05).HBV-HCC 组血清 PIVKA-Ⅱ、GGT 阳性率都大于50%.HBV-HCC组患者的GLR、GPR、PLR与血清PIVKA-Ⅱ、GGT均呈正相关.PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR联合检测的诊断敏感度曲线下面积(AUC)以及约登(Youden)指数均高于PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR单独检测,GGT、GLR、GPR三者联合检测的特异度达到95.06%.结论:PIVKA-Ⅱ、GGT、GPR、GLR、PLR在 HBV 感染所致不同肝脏疾病患者中具有一定的差异,PIVKA-Ⅱ、GGT、GPR、GLR联合检测有助于HBV-HCC的早期诊断.

基于肠道菌群分析探讨葛根对 2 型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)db/db小鼠胰岛素抵抗的作用及可能机制.将 50只db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组以及葛根高、中、低剂量组,另取10 只db/m小鼠为正常组.持续给药8 周,测量小鼠体质量和血糖;酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测糖化血清蛋白(glycosylated serum pro-tein,GSP)、血清空腹胰岛素(fasting serum lisulin,FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色观察胰腺组织病理学变化;免疫组化检测胰腺肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达;16S rRNA技术检测正常组、模型组和葛根中剂量组小鼠粪便肠道菌群结构变化;蛋白免疫印记法检测回肠组织中法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)、G蛋白胆汁酸偶联受体 5(takeda G protein-coupled receptor 5,TGR5),肝组织中胆固醇 7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、甾醇27α-羟化酶(sterol 27α-hydroxylase,CYP27A1)和结肠组织中G蛋白偶联受体41(G protein-coupled receptor 41,GPR41)、G蛋白偶联受体 43(G protein-coupled receptor 43,GPR43)的表达.与正常组比较,模型组小鼠体质量、血糖、血清 GSP、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、FINS显著增加,HOMA-IR指数显著上升;胰岛细胞炎性浸润,大量腺泡细胞坏死变性,胰岛细胞和腺泡细胞边界不清晰;肠道菌群发生紊乱;组织中FXR、TGR5、CYP7A1、CYP27A1、GPR41 和GPR43 蛋白表达显著降低.与模型组比较,二甲双胍组、葛根组小鼠体质量、血糖、血清GSP、FBG、FINS显著降低;胰岛细胞形态完整呈团状边界清晰,少量腺泡细胞坏死,可见较多胰岛细胞;葛根中剂量组肠道菌群从门到属水平均发生了变化,影响肠道菌群代谢物的菌群相对丰度增加;组织中FXR、TGR5、CYP7A1、CYP27A1、GPR41 和GPR43 蛋白表达显著升高.综合实验结果发现,葛根可改善T2DM db/db小鼠胰岛细胞的炎症损伤,减轻胰岛素抵抗,其作用机制可能与增加肠道中放线菌门、双歧杆菌、拟杆菌属丰度和肠道菌群代谢物相关蛋白表达有关.