目的 探讨伴有色素分化的Xp11易位性肿瘤/"伴有黑色素分化的TFE3基因重排的软组织肿瘤"的临床病理特征、免疫表型、分子特征及预后.方法 收集5例伴有色素分化的Xp11易位性肿瘤/"伴有黑色素分化的TFE3基因重排的软组织肿瘤"的临床病理资料,行免疫组化EnVision法、组织化学染色、FISH、二代测序(NGS)及随访,并进行文献复习.结果 5例患者中男性1例,女性4例.发病年龄16～59岁,平均28.2岁.肿瘤最大径3.0～6.0 cm(平均4.7 cm).发病部位:右侧肾脏3例(其中 1例发生胸椎转移),左侧输卵管间质与圆韧带之间1例,盆腔部位1例.组织学上,肿瘤由丰富的纤维血管网分隔成巢状、腺泡状结构,胞质透亮或嗜酸性、颗粒样,胞质内不同程度的出现黑色素聚集;间质内可见淋巴细胞浸润;4例检出肿瘤性坏死;核分裂象＜3个/10 HPF;2例检出个别脉管内瘤栓,其余3例均未检出脉管内瘤栓及神经侵犯.免疫表型:5例TFE3 均弥漫强阳性,HMB45 及 Melan A 不同程度阳性;CK(AE1/AE3)、CK7、EMA、PAX8、TFEB、S-100、SOX10、SMA、desmin 均阴性;Ki67增殖指数＜20％.FISH检测:TFE3分离探针显示4例存在明确的TFE3分离信号,1例因信号不典型判读为阴性,经NGS检测证实为RBM10-TFE3基因融合.5例均获得随访:随访时间2～60个月,患者均存活,4例无瘤生存,1例胸椎转移患者情况稳定且未进展.结论 伴有色素分化的Xp11易位性肿瘤/"伴有黑色素分化的TFE3基因重排的软组织肿瘤"具有独特的形态学特征、免疫表型及分子遗传学改变,建议作为一种独立的恶性间叶性肿瘤实体进行分类.

目的:探索低氧诱导乳腺癌细胞RNA结合蛋白15(RBM15)表达上调促进癌侵袭的作用及机制。方法:分析基因型-组织表达(GTEx)和癌症基因图谱(TCGA)数据库中乳腺癌组织甲基转移酶RBM15和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平及患者预后。使用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot比较常氧(20%O 2)和低氧(1%O 2)培养乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231、BT20和HCC1143的RBM15、AGAP2反义RNA 1(AGAP2-AS1)表达，采用甲基化转录组RNA免疫共沉淀结合qPCR(MeRIP-qPCR)检测AGAP2-AS1的RNA甲基化修饰；采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。后用小干扰RNA(siRNA)或质粒敲低或过表达RBM15，在敲低RBM15的细胞中同时过表达AGAP2-AS1，检测AGAP2-AS1甲基化修饰水平和表达水平变化，采用Transwell检测各组细胞侵袭能力变化。两样本间的比较采用 t检验。 结果:GTEx和TCGA数据库乳腺癌组织RBM15呈过表达( P<0.05)，且与不良预后——无病生存期(DFS)降低相关[风险比( HR)＝0.91]，RBM15和HIF-1α的表达水平呈正相关( R＝0.3)。低氧组MCF7、MDA-MB-231、BT20和HCC1143细胞中RBM15的mRNA和蛋白表达水平均高于对应常氧组细胞( t＝3.042、7.103、4.977、3.227， P<0.05)，低氧组AGAP2-AS1的表达水平均升高( t＝9.830、3.497、22.780、7.140， P<0.05)；低氧组BT20细胞AGAP2-AS1的m6A甲基化修饰水平升高( t＝10.460， P<0.05)。低氧培养促进了MDA-MB-231、BT20细胞的侵袭，敲低MDA-MB-231、BT20细胞RBM15表达后细胞侵袭能力下降，在敲低RBM15的BT20细胞中同时过表达AGAP2-AS1后细胞侵袭能力恢复。在低氧培养的BT20细胞中敲低RBM15表达后AGAP2-AS1的m6A甲基化修饰水平(si-RBM15#1组 t＝6.815，si-RBM15#2组 t＝34.350)和表达水平(si-RBM15#1组 t＝16.660，si-RBM15#2组 t＝7.323)均显著下调( P<0.05)。在常氧培养的BT20细胞中过表达RBM15后AGAP2-AS1甲基化水平(Lv-RBM15#1组 t＝16.270，Lv-RBM15#2组 t＝9.340)和表达水平(Lv-RBM15#1组 t＝14.040，Lv-RBM15#2组 t＝9.949)均上调( P<0.05)。 结论:乳腺癌的低氧压力诱导RBM15上调，通过调控AGAP2-AS1的m6A甲基化修饰和表达水平，促进细胞侵袭。

扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)是心力衰竭重要的原因之一,任何阶段均可出现严重的心血管事件,导致猝死.RNA结合基序蛋白20(RNA-binding motif protein 20,RBM20)基因突变是引起DCM的原因之一,呈家族性聚集,可合并心律失常,具有易猝死、早死亡的特点.该文介绍RBM20基因及其调节TTN基因、CAMK2基因的剪接,总结RBM20基因突变相关DCM的治疗,旨在提高临床工作者对RBM20基因的认识,为精准医学治疗提供新思路.

目的 探讨RNA结合基序蛋白5(RBM5)在脑胶质瘤组织中的表达及其与肿瘤临床病理分级之间的关系.方法 采用Western blot法检测2015年6月至2016年12月于武汉大学人民医院神经外科手术切除的正常脑组织及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级脑胶质瘤各1例、每例组织3份标本中RBM5蛋白表达水平,并利用免疫组织化学法检测20例脑胶质瘤组织及4例正常脑组织中RBM5蛋白的表达,检测结果采用SPSS 21.0软件进行统计分析.结果 Western blot 检测发现,RBM5蛋白在不同等级的肿瘤组织中表达水平差异均有统计学意义(F=11.85,P＜0.001),在正常脑组织及Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级肿瘤组织中相对表达量分别为8.34±1.25、6.72±1.34、4.20±0.83、2.24±0.58.Ⅰ～Ⅱ级肿瘤组织相对表达量高于Ⅲ级(t=3.317,P=0.029),Ⅲ级肿瘤组织相对表达量高于Ⅳ级(t=4.914,P=0.008).免疫组织化学结果显示恶 性程度高的脑胶质瘤组织RBM5蛋白表达水平低,且不同病理分级间RBM5蛋白阳性患者比例差异具有统计学意义(χ2=22.6,P=0.007).结论 RBM5蛋白在脑胶质瘤组织中表达显著低于正常组织,且表达水平与脑胶质瘤病理级别相关.

目的:通过miRNA Array芯片技术,了解扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)患者血浆miRNA表达谱的差异,探索这种差异与左室舒张末内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDd)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)及N末端脑钠肽前体(N-terminal of the prohormone brain natriuretic peptide,NT-proBNP)等心衰指标的关系,并预测其作用靶基因.方法:入选南京胸科医院心脏科收住的8例明确诊断的DCM患者,抽提血浆总RNA,采用Agilent Human miRNAs Array(V 19.0)芯片技术,与4例健康对照进行表达谱的差异筛选,对改变最明显的miRNA进行30例患者的进一步验证.检测两组受检者生化指标、NT-proBNP,测量LVEDd、LVEF,并进行变量间的相关分析.TargetScan和miRBD数据库预测靶基因.结果:与对照组相比,病例组中共发现36个有意义的miRNAs表达差异,其中25个上调的miRNA中,miR-5196-5p上调最明显,下调的miRNA中,miR-652-5p下调最明显.该结果在后续30例DCM患者的验证中也得到证实.Pearson线性相关分析显示,miR-5196-5p上调水平与LVEDd呈正相关,miR-652-5p水平与LVEDd、NT-proBNP呈负相关,与LVEF呈正相关.靶基因分别预测到DCM相关基因VCL、RBM20等.结论:DCM患者血浆中miR-5196-5p表达明显上调,miR-652-5p表达下调,并与左室功能、心室重构相关.进一步研究有可能揭示miR-5196-5p、miR-652-5p在心衰致病中的机制,并有可能成为评估疾病疗效及预后的新指标或潜在治疗靶点.

1 临床资料患者男性,53岁.10余年前确诊甲状腺功能亢进症(甲亢)行 131Ⅰ治疗,次年查甲状腺功能正常,后未再服药和复查;2年前开始出现乏力、气促伴有心悸,劳累时明显,无胸闷、胸痛;3月前上述症状加重,查促甲状腺激素(TSH)<0.005 μIU/ml,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)10.26 pg/ml,游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)2.51 ng/dl,心电图示心房颤动,超声心动图示全心大、左心室射血分数(LVEF)20%,考虑为甲亢、甲亢性心脏病、心房颤动,再次行 131Ⅰ并加用甲硫咪唑及营养心肌、利尿等对症治疗,患者症状好转.2天前因受凉症状再次加重,伴腹胀,夜间不能平卧入睡.既往无高血压、糖尿病、冠心病等病史,无吸烟、饮酒史,否认遗传性疾病等家族史.查体:体温36.2℃,脉搏105次/min,呼吸频率20次/min,血压92/70 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),甲状腺Ⅱ°肿大,未触及明显结节,颈静脉充盈,双肺呼吸音粗,心律130次/min,律不齐,第一心音强弱不等,二尖瓣可闻及3/6级收缩期杂音.腹稍膨隆,无压痛及反跳痛,肝脾肋下未及,双下肢轻度水肿.查TSH 0.011 μIU/ml,FT31.73 pg/ml,FT40.80 ng/dl,甲状腺球蛋白237.60 ng/ml,甲状腺球蛋白抗体<10.00 IU/ml,甲状腺过氧化物酶抗体290.80 IU/ml,促甲状腺素受体抗体6.97 IU/L,N末端B型利钠肽原14 818 pg/ml.X线胸片示双肺纹理增强;左上肺及右肺支气管扩张可能,心影增大.超声心动图示全心增大,左心室内径69 mm,左心房增大(53 mm×65 mm×72 mm),右心房增大(50 mm×59 mm),右心室增大(49 mm),室间隔与左心室后壁10 mm,左心室弥漫性室壁运动减低,LVEF为21%,二尖瓣、三尖瓣中度关闭不全,中度肺动脉压力增高.心电图示心房颤动.初步诊断:甲亢、131Ⅰ治疗后、心房颤动;心功能不全原因待查:甲亢性心肌病?扩张型心肌病?.经利尿、强心、抗凝、营养心肌、改善心室重构等治疗后,患者情况好转.查心肌病基因示:扩张型心肌病相关的RBM20基因存在c.1922G>A杂合型突变导致该基因编码蛋白发生 p.Arg641Gln 错义突变(图1).出院后3个月复查超声心动图较前无明显变化,目前患者病情尚稳定.

目的 探讨儿童扩张性心肌病的临床特点及基因特征.方法 分析1例儿童扩张性心肌病患儿的临床资料和基因检测结果,并复习相关文献.结果 男性患儿,11岁,活动后气促、心悸,心脏彩超提示左心室、左心房明显扩大,左室射血分数35％,左室短缩分数20％.基因检测结果显示,患儿及母亲RBM20基因9号外显子出现杂合突变c.2264G>A,p.Arg755His,11号外显子也出现杂合突变c.3014A>G,p.Asp1005Gly,均为错义突变,以前均未见报道.结论 儿童家族性扩张性心肌病诊断主要通过临床和基因检测.

目的 探讨RNA结合蛋白6(RBM6)对喉癌发生发展的调节作用及机制.方法 收集15例原位喉癌患者在术中的喉癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western Blot检测RBM6、表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)的表达.将携带RBM6基因(Lv-RBM6,RBM6组)或空质粒(Lv-Ctrl,对照组)的重组慢病毒载体转染入人喉癌细胞系LCC构建RBM6过表达喉癌细胞及对照细胞,采用CCK-8法和Transwell法分别检测细胞增殖、迁移和侵袭,并检测MMP-2、MMP-9、EGFR、ERK和p-ERK的表达.将稳定表达Lv-RBM6或Lv-Ctrl的LCC细胞注射于裸小鼠右侧颈背部皮下组织,建立Lv-RBM6过表达人喉癌裸小鼠移植瘤模型,每2天计算移植瘤体积.结果 与癌旁组织对比,RBM6在喉癌组织中的表达显著降低(P<0.05),EGFR和p-ERK的表达显著增加(P<0.05),ERK无显著变化.RBM6在3/4期患者喉癌组织中的表达显著低于其在1/2期患者中的表达(P<0.05).体外实验显示,与对照组相比,RBM6组细胞在12 h、24 h、48 h、72 h的细胞增殖活性均显著降低(P<0.05),迁移细胞数及侵袭细胞数均显著降低(P<0.05),MMP-2、MMP-9、EGFR和p-ERK的表达显著降低(P<0.05),ERK无显著变化.异种移植瘤实验显示,与Lv-Ctrl组相比,Lv-RBM6组裸小鼠接种后12 d、14 d、16 d、20 d、24 d、28 d肿瘤体积显著降低(P<0.05),EGFR和p-ERK的表达显著降低(P<0.05),ERK无显著变化.结论 RBM6可抑制喉癌的生长和进展,作为肿瘤抑制因子抑制喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡,其机制可能与抑制EGFR相关信号传导途径的活性有关.

心肌病是异质性的心肌病变,表现为心肌结构和功能的异常,心肌病最终会导致心力衰竭甚至死亡.RNA结合基序蛋白20(RBM 20)在心肌中高度表达,是富含丝氨酸/精氨酸蛋白家族的一种,对RNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程起着重要作用,参与心肌病的发生、发展.RBM 20调控Titin、RyR 2、LDB 3、CaMKIIδ、CACNA1C等多种基因的选择性剪接,这些基因与心脏舒张功能、肌节组装、离子转运密切相关.该文将对RBM 20在心肌病中的作用和RBM 20调控机制进行综述,为心肌病的防治提供相应的理论参考.

背景与目的:甲状腺癌发病率逐年升高,但其发病机制仍不清楚,阐述甲状腺癌的发病机制对改善甲状腺癌患者的预后至关重要.研究表明,m6A甲基化调控因子高度参与癌症发生发展,具有良好的潜在预后价值.因此,本研究通过生物信息学方法分析甲状腺癌中m6A甲基化调控因子的表达并构建基于m6A甲基化调控因子的甲状腺癌预后模型.方法:从TCGA数据库下载甲状腺癌m6A甲基化调控因子的表达数据和相应的临床病理资料,通过Wilcoxon检验分析20个m6A甲基化调控因子在肿瘤和正常组织的差异表达;用一致性聚类分析将甲状腺癌患者分为两个聚类,比较两个聚类患者临床病理因素和总体生存率的差异;Lasso Cox回归分析构建风险预测模型并用ROC曲线下面积(AUC)评估模型的预测能力.结果:19个m6A甲基化调控因子在甲状腺癌和正常组织表达具有统计学差异(均P＜0.05),其中HNRNPC、IGF2BP2、FMRl在甲状腺癌组织中明显高表达,而其余表达下调.聚类分析示,cluster 1生存期低于cluster 2(P＜0.05),颈淋巴结转移发生率明显高于cluster 2(P＜0.01) 基于Lasso Cox回归分析筛选的4个基因(IGF2BP2、RBM15、YTHDF1、YTHDF3)构建风险评估模型,相比低风险组患者,高风险患者生存期明显缩短(P=0.007);ROC曲线示,该模型可以预测甲状腺癌患者的预后(AUC=0.731).结论:m6A甲基化调控因子在甲状腺癌中存在差异表达,基于甲状腺癌中关键m6A甲基化调控因子所构建的预后风险模型具有较好的预测能力,可为临床决策提供一定的依据.