目的:探讨中国汉族人群腓骨肌萎缩症（CMT）致病基因的分布特点，并与2013年北京大学第三医院总结的CMT基因分布数据进行比较，分析8年来CMT基因分布比例的异同。方法:收集2007年1月至2021年3月于北京大学第三医院和中日友好医院诊治的CMT及其相关疾病家系520个，采用多重连接探针扩增技术检测外周髓鞘蛋白22（PMP22）基因重复和缺失突变后，采用二代基因测序包或全外显子组测序技术对上述家系的先证者进行基因检测，对阳性结果采用Sanger一代测序的方法验证。结果:在520个家系中，确定了336个CMT家系的基因诊断，确诊比例从2013年的48.6%（51/105）增加到2021年的64.6%（336/520；χ 2=9.54， P=0.003），其中PMP22基因重复占26.7%（139/520）、缝隙连接蛋白B1（GJB1）基因突变占8.8%（46/520）、线粒体融合蛋白2（MFN2）基因突变占5.0%（26/520）、髓鞘蛋白零（MPZ）基因突变占2.3%（12/520）、PMP22基因点突变占2.1%（11/520）、热休克蛋白B1基因突变占1.9%（10/520）、神经节苷脂诱导分化相关蛋白1（GDAP1）基因突变占1.9%（10/520）、SH3结构域和四三肽重复序列2（SH3TC2）基因突变占1.5%（8/520）、免疫球蛋白mu-DNA结合蛋白2（IGHMBP2）基因突变占1.3%（7/520）、MORC家族CW型锌指2（MORC2）基因突变占1.2%（6/520）、山梨醇脱氢酶（SORD）基因突变占1.0%（5/520），其余非常少见的基因突变家系有16个（16/520，3.1%），未确诊家系184个（184/520，35.4%）。 结论:与2013年相比，影响CMT最常见的3种基因仍然为PMP22、GJB1和MFN2基因，但MPZ基因突变患者的比例与其他基因如SH3TC2、GDAP1基因的差距越来越小。近年新发现的CMT致病基因如MORC2及SORD基因所占比例与IGHMBP2基因接近，应予以重视。二代测序技术提高了CMT的诊断效率，尤其是对于常染色体隐性突变导致的CMT诊断价值很大。

目的:探讨胶质瘤干细胞(GSCs)微环境中恶变巨噬细胞(tMΦ)的脂代谢特征及其相关分子调控机制，为靶向tMΦ的精准治疗提供实验依据。方法:实验采用巨噬细胞(MΦ)、tMΦ细胞株(包括tMΦ 1、tMΦ 2)，通过检测细胞内的三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的水平分析tMΦ的脂代谢特征，采用蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测调控脂代谢的关键分子钙调蛋白(CaM)、载脂蛋白E(ApoE)、激素敏感性三酰甘油脂肪酶(HSL)、肝X受体(LXR)的表达水平。构建tMΦ的差异表达长链非编码RNA(lncRNA)表达谱，选择HOXC-AS3为研究对象。建立HOXC-AS3过表达和低表达的tMΦ细胞株。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测上调、沉默HOXC-AS3后tMΦ内CaM的表达水平。通过克隆形成实验观察HOXC-AS3沉默后tMΦ的集落形成能力，以Transwell实验检测其侵袭能力，通过建立在体移植瘤小鼠模型观察其致瘤能力。对与HOXC-AS3脂代谢相关的结合蛋白进行蛋白组学分析，应用RNA免疫共沉淀实验验证二者是否可形成复合体，进一步通过qRT-PCR、Western blot实验分析HOXC-AS3对其结合蛋白的调控作用。 结果:tMΦ中的TC、TG含量及CaM、ApoE、HSL、LXR蛋白的表达水平均高于正常MΦ(均 P<0.01)。LncRNA表达谱结果提示，与正常MΦ相比，HOXC-AS3在tMΦ 1、tMΦ 2中均呈高表达。克隆形成实验结果表明，沉默HOXC-AS3后的tMΦ 1、tMΦ 2(sh-HOXC-AS3组)的克隆数目明显少于空转染对照组(sh-NC组)(均 P<0.01)；Transwell实验结果表明，sh-HOXC-AS3组tMΦ 1、tMΦ 2的穿膜细胞数少于sh-NC组(均 P<0.01)；致瘤实验结果表明，sh-HOXC-AS3组小鼠的移植瘤体积均小于sh-NC组(均 P<0.01)。qRT-PCR结果提示，过表达HOXC-AS3可上调tMΦ中CaM的表达，而沉默HOXC-AS3可下调tMΦ中CaM的表达(均 P<0.01)。蛋白组学分析结果提示，与HOXC-AS3相关性最高的脂代谢相关蛋白为hnRNPA1。RNA免疫共沉淀结果证实，hnRNPA1与HOXC-AS3可形成复合体，沉默hnRNPA1后tMΦ内的CaM表达下调(均 P<0.01)，而沉默tMΦ内的HOXC-AS3后，hnRNPA1基因和蛋白水平的变化均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:tMΦ中的脂代谢合成水平高于正常MΦ，其机制可能为HOXC-AS3通过与hnRNPA1的结合，从而影响脂代谢分子CaM的表达，进而调控tMΦ的脂代谢重塑。靶向HOXC-AS3可抑制tMΦ在GSCs微环境的增殖和侵袭，HOXC-AS3可能为提高脑胶质瘤免疫治疗效果的潜在靶点。

本文回顾分析周围神经髓鞘蛋白22(PMP22)基因缺失突变的遗传性压力易感性周围神经病(HNPP)1个家系的临床特点.先证者为女性,10岁,因"突发左足下垂12 d"入院.肌电图检测示四肢周围神经运动及感觉传导功能均受损,易卡压部位明显.其父的肌电图有类似改变.该先证者存在PMP22基因缺失突变和SH3TC2基因错义突变(c.302G＞A),均来自父亲.根据基因功能与临床表型分析,考虑PMP22基因缺失突变为致病性,而SH3TC2基因错义突变可能为非致病性变异.该患儿经治疗后左足无力缓解,随访3年未再发肢体麻木及乏力.

Background:SH3TC2,PMP2,and BSCL2 genes are related to autosomal recessive (AR) Charcot-Marie-Tooth (CMT) disease type 1,autosomal dominant (AD)-CMT1,and AD-CMT2,respectively.Pathogenic variants in these three genes were not well documented in Chinese CMT patients.Therefore,this study aims to detect SH3TC2,PMP2,and BSCL2 pathogenic variants in a cohort of 315 unrelated Chinese CMT families.Methods:A total of 315 probands from 315 unrelated Chinese CMT families were recruited from the Department of Neurology of Third Xiangya Hospital and Xiangya Hospital.We screened for SH3TC2 pathogenic variants in 84 AR or sporadic CMT probands,PMP2 pathogenic variants in 39 AD or sporadic CMT1 probands,and BSCL2 pathogenic variants in 50 AD or sporadic CMT2 probands,using polymerase chain reaction and Sanger sequencing.All these patients were out of 315 unrelated Chinese CMT families and genetically undiagnosed after exclusion of pathogenic variants of PMP22,MFN2,MPZ,GJB 1,GDAP1,HSPB 1,HSPB8,EGR2,NEFL,and RAB7.Candidate variants were analyzed based on the standards and guidelines of American College of Medical Genetics and Genomics (ACMG).Clinical features were reevaluated.Results:We identified three novel heterozygous variants such as p.L95V (c.283C＞G),p.L 1048P (c.3143T＞C),and p.V1105M (c.3313G＞A)of SH3TC2 gene and no pathogenic variants of PMP2 and BSCL2 genes.Although evaluation in silico and screening in the healthy control revealed that the three SH3TC2 variants were likely pathogenic,no second allele variants were discovered.According to the standards and guidelines of ACMG,the heterozygous SH3TC2 variants such as p.L95V,p.L1048P,and p.V1105M were considered to be of uncertain significance.Conclusions:SH3TC2,PMP2,and BSCL2 pathogenic variants might be rare in Chinese CMT patients.Further studies to confirm our findings are needed.

目的:探索痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)患者临床特征与生化水平之间的相关性,为临床治疗提供依据.方法:对161例PCOS患者分为痰湿组99例,非痰湿组62例,对所有PCOS患者进行年龄、身高、体重、腰围、臀围及多毛、痤疮、黑棘皮的记录,并计算体重指数(BMI)和腰臀比(WHR).于自然月经周期或孕激素撤退出血的第3～5天空腹采血,测定性激素五项、雄激素三项、血脂四项及空腹血糖、空腹胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果:(1)在体重、BMI、腰围、臀围、WHR比较中痰湿组均高于非痰湿组,痤疮及多毛评分均低于非痰湿组,且差异具有统计学意义.(2)痰湿组患者FSH、LH、PRL、SHBG水平均低于非痰湿组,TC、TG、LDL、FPG、FINS、HOMA-IR水平痰湿组均高于非痰湿组(P＜0.05).(3)年龄与FSH呈负相关,与FPG呈正相关;体重与LH、FSH、SH3G水平呈负相关,与TG、TC、LDL、FINS、HOMA-IR均呈正相关;BMI与LH、SHBG呈负相关,与TG、TC、LDL、FINS呈正相关;腰围与T、TG、LDL、FPG、FINS和HOMA-IR呈正相关;臀围与TG、LDL、FINS和HOMA-IR呈正相关;WHR与E2、T、DHEAS、TG、LDL、FPG和HOMA-IR呈正相关;痤疮评分与FSH呈正相关,与E.和TC呈负相关;多毛评分与E.、PRL、DHEAS、FPG、FINS和HOMA-IR呈正相关,与SHBG呈负相关;黑棘皮评分与T、DHEAS、TC呈正相关,与AND呈负相关.(4)E.与HDL呈负相关;T与HDL呈负相关,与LDL呈正相关;PRL与TG呈正相关;AND与TG、FPG、HOMA-IR呈正相关,与HDL呈负相关;DHEAS与FPG、FINS呈正相关,与HDL呈负相关;SHBG水平与HDL、FPG、HOMA-IR呈负相关,与FINS呈正相关.结论:痰湿型较非痰湿型PCOS患者有明显临床特征,性激素和糖脂代谢水平紊乱,并且各个指标之间存在一定的相关性.

目的 探讨达英-35联合利拉鲁肽多囊卵巢综合征(PCOS)患者体质量、性激素水平、糖脂代谢的影响.方法 选取2017年8月-2018年3月就诊于湖北民族学院附属民大医院及恩施州妇幼保健院内分泌科和妇科门诊的PCOS患者60例,均符合2003年鹿特丹会议推荐的诊断标准,采用随机数字表法分为研究组和对照组,每组各30例.对照组使用达英-35治疗,研究组给予达英-35联合利拉鲁肽治疗.所有患者均测量身高、体质量,测定血清各种激素、性激素结合球蛋白(SH-BG)及糖脂代谢水平,并行卵巢超声检查;计算游离雄激素指数(FAI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛分泌功能(HOMA-β).比较两组患者治疗3个月前后的临床疗效、性激素水平、糖脂代谢相关指标的变化.结果 共有53例(88％)患者完成3个月的治疗,其中对照组28例(93％),研究组25例(83％).治疗后研究组与对照组相比,BMI、空腹胰岛素(FINS)、总睾酮(T)水平均明显减低(P＜0.05);但两组在空腹血糖(FPG)、2h血糖、HOMA-β3、HOMA-IR、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、黄体生成素(LH)、LH/FSH比值、泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)、性激素结合球蛋白(SHBG)、FAI、改善痤疮、恢复月经等方面差异无统计学意义(P＞0.05).结论 短期达英-35单用或联合利拉鲁肽都能够改善PCOS患者内分泌激素及糖代谢水平、恢复患者月经周期;达英-35联合利拉鲁肽在减轻体质量、改善胰岛素抵抗及改善高雄方面明显优于单用达英-35组,临床疗效显著快速.

目的 通过高通量测序技术探讨非典型子宫内膜增生(AEH)患者和正常女性子宫内膜组织中微小RNA(miRNA)的差异表达及意义.方法 收集2016年1月～2017年1月在首都医科大学附属北京妇产医院就诊的3例AEH患者(实验组)及3名正常女性(对照组)的子宫内膜组织标本,采用二代高通量测序技术筛选差异表达的miRNAs,通过数据库预测其靶基因及生物功能,了解联系密切的miRNAs及其共同调控的靶基因.结果 两组中,差异表达的miRNA共18个,其中上调17个,下调1个.差异miRNA的靶基因大部分富集在与癌症或机体代谢相关的信号传导通路上,其中miR-4286、miR-577、miR-182-5p之间有着密切关系,共同调节CACNA1C、MECP2、FOXK1、LPP、SH3TC2、Smad、MDM4等靶基因.结论 AEH与正常子宫内膜组织中miRNAs表达存在显著差异,这些差异miRNAs可能通过调节不同靶基因来调控相关信号通路参与AEH的发生和发展.

目的 分析微小RNA-155(microRNA,miR-155)-155/含有SH2结构的5肌醇磷酸酶-1(SHIP-1)与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者发生心血管事件的相关性.方法 选取2018年3月-2019年7月云南省第一人民医院收治的NAFLD患者104例,以及同期接受健康体检志愿者110例作为对照组.检测两组受试者BMI、血压及空腹血糖(FPG)、TC、TG、LDL-C、HDL-C、ALT、AST、GGT、TBil等指标,采用荧光定量PCR法检测两组受试者外周血miR-155及SHIP-1 mRNA表达.计量资料2组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ2检验;等级资料组间比较采用Kruskal-Wallis H秩和检验.相关性检验采用Pearson分析.采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析miR-155/SHIP-1值对患者心血管事件的预测价值.结果 NAFLD组患者BMI、FPG、TC、TG、LDL-C、ALT、AST、GGT、TBil水平均明显高于对照组,HDL-C水平明显低于对照组,miR-155 mRNA相对表达量明显高于对照组,SHIP-1 mRNA相对表达量明显低于对照组,且miR-155/SHIP-1值、心血管事件发生率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为6.617、9.323、6.668、8.633、4.285、22.099、24.093、20.438、12.366、6.515、18.893、18.411、29.967,χ2=10.476,P值均<0.01).根据患者miR-155/SHIP-1值将患者分为3组,3组间BMI、FPG、TC、TG、LDL-C、HDL-C、ALT、AST、GGT、TBil以及心血管事件发生率比较,差异均有统计学意义(H值分别为20.923、7.936、6.256、16.181、21.572、8.435、18.912、22.869、7.665、18.657、9.701,P值均<0.05).miR-155/SHIP-1值与BMI、FPG、TC、TG、LDL-C、ALT、AST、GGT、TBil呈显著正相关(r值分别0.297、0.317、0.332、0.327、0.286、0.334、0.352、0.342、0.350,P值均<0.001),与HDL-C呈显著负相关(r=-0.279,P<0.001).发生心血管事件患者miR-155/SHIP-1值(3.642±1.082)明显高于未发生心血管事件患者(2.237±0.703),差异有统计学意义(t=11.104,P<0.05);miR-155/SHIP-1值预测NAFLD患者发生心血管事件的ROC曲线下面积为0.902.结论 NAFLD患者糖脂代谢及肝功能异常与miR-155/SHIP-1表达密切相关,且miR-155/SHIP-1值对NAFLD患者发生心血管事件具有一定的预测价值.

目的 筛查妊娠期糖尿病(GDM)患者SH2B1基因突变的发生情况,以及研究该基因突变对产后糖代谢转归的影响.方法 选择2017年1月至12月期间海南省妇女儿童医学中心收治的36例GDM患者作为观察组,并选择40例糖耐量正常孕妇作为对照组.应用PCR直接测序法筛查SH2B1基因突变情况,比较两组受试者突变位点、基因型分布频率等差异.根据GDM患者的突变情况分为突变组、未突变组.比较两组患者的临床资料、产后3年2型糖尿病(T2DM)的逐年发病率,并进行单因素、Logistic模型多因素分析GDM产后转归的影响因素.结果 观察组患者SH2B1基因突变率为27.78％(10/36),对照组参与者SH2B1基因突变率为10.00％(4/40),观察组患者SH2B1基因突变率显著高于对照组,差异有统计学意义(χ2=3.985,P<0.05).SH2B1基因突变的GDM患者FPG、TG水平显著高于未突变组,而瘦素(Leptin)水平显著低于未突变组,差异均有统计学意义(t值分别为2.478、3.465、5.592,均P<0.05),但两组患者GCT、TC、HDL-C、LDL-C、FINS水平比较差异均无统计学意义(t值分别为0.427、0.183、0.352、0.158、0.545,均P>0.05).GDM患者不良预后组SH2B1基因突变率为62.50％,预后良好为17.86％,不良预后组SH2B1基因突变率显著高于预后良好组(χ2=6.181,P<0.05).多因素回归分析结果显示SH2B1基因突变、FPG和Leptin是影响GDM患者产后T2DM发生的危险因素(OR值分别为1.811、1.828、1.853,均P<0.05).结论 GDM患者易发生SH2B1(rs4788102)基因突变,该基因突变与产后糖代谢转归情况密切关联,是影响患者发生T2DM的危险因素.

为了研究腓骨肌萎缩症(CMT)的临床、电生理以及基因突变的特点,该研究收集2个家系先证者以及发病亲属的临床资料、电生理资料、全血和DNA,进行家系分析及CMT相关基因检测.结果发现家系1为常染色体显性遗传,患者MLPA检测提示PMP22基因的重复扩增.基因测序未发现患者携带CMT其他相关基因的突变.进一步在患者的3个患病的亲属中发现携带PMP22基因的重复扩增,并且未发现其未患病的叔叔携带该突变.家系2为常染色体隐性遗传,先证者携带SH3TC2基因的c.730C＞T p.Q244X和c.432C＞G p.Y144X两个杂合突变.患者的父母,则分别携带上述两个突变.因此,家系1诊断为CMT1A型,家系2诊断为CMT4C型,临床实践中应注意基因和表型的联系.