目的:探讨miRNA-153-5p调控巨噬细胞极化在病毒性心肌炎(VM)中的作用.方法:建立VM小鼠模型,提取心脏,RT-qPCR检测心肌组织miRNA-153-5p的表达,HE染色观察心脏炎症程度,ELISA检测小鼠血清肌钙蛋白cTnI的水平,流式细胞术检测心脏浸润巨噬细胞表型.体外分离BMDMs诱导为M1/M2 型巨噬细胞,过表达和抑制miR-153-5p,RT-qPCR检测M1/M2 标志物iNOS、IL-12、TNF-α、Arg1、YM-1、FIZZ1 的表达.生物信息学软件预测结合双荧光素酶实验验证miR-153-5p与转铁蛋白受体(TFRC)的靶向关系.结果:miR-153-5p在CVB3 感染7d的VM小鼠心脏组织中表达明显增加(P<0.05).体内实验中抑制miR-153-5p表达能减轻VM小鼠心脏的病变程度,改善心脏功能(P<0.01).抑制miR-153-5p表达能够促进小鼠心脏浸润的巨噬细胞向M2 极化(P<0.01).体外实验中,较之M2,miR-153-5p在M1 巨噬细胞中表达升高(P<0.01).过表达miR-153-5p促进巨噬细胞向M1 极化,抑制miR-153-5p表达则促进巨噬细胞向M2 极化(P<0.01).TFRC是miR-153-5p的靶基因,抑制miR-153-5p表达可上调TFRC的mRNA和蛋白水平(P<0.01).结论:miRNA-153-5p通过靶向TFRC调控VM小鼠心脏浸润巨噬细胞的极化.

目的:评价海马miR-153在电针预处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠150只，8～12周龄，体重200～250 g，采用随机数字表法分为5组( n＝30)：对照组(C组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、假电针组(S组)、电针百会穴预处理组(E组)和miR-153激活剂组(A组)。I/R组采用线栓法栓塞大脑中动脉2 h后恢复灌注制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，S组电针刺激百会穴旁2 mm处30 min，持续5 d，然后制备模型；E组电针刺激百会穴30 min，选取疏密波，强度1 mA，频率2/15 Hz，1次/d，连续5 d，然后制备模型。A组首先尾静脉注射miR-153激活剂50 μg/kg，其他处理同E组。C组不做任何处理。分别于再灌注24和48 h时行神经行为学评分，随后处死大鼠取海马组织，HE染色后观察海马CA1区病理学结果，采用Western blot和RT-PCR法分别检测海马核蛋白Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)及其mRNA的表达，采用RT-PCR法检测海马miR-153的表达。 结果:与C组相比，I/R组、S组、E组和A组神经行为学评分升高，再灌注各时点海马核蛋白Nrf2、HO-1、NQO1及其mRNA表达下调，miR-153表达上调( P<0.05)；与I/R组和S组相比，E组和A组神经行为学评分降低，E组再灌注各时点海马核蛋白Nrf2、HO-1、NQO1及其mRNA表达上调，miR-153表达下调，A组再灌注各时点海马核蛋白Nrf2、HO-1和NQO1及其mRNA表达下调，miR-153表达上调( P<0.05)；与E组相比，A组神经行为学评分升高，再灌注各时点海马核蛋白Nrf2及HO-1、NQO1及其mRNA表达下调，miR-153表达上调( P<0.05)。A组海马病理学损伤程度较E组加重。 结论:海马miR-153参与了电针预处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的过程，与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。

目的:探究高压氧(HBO)调控miR-153-3p/Bcl-2轴缓解大鼠脑梗死的作用及其机制。方法:将32只Sprague-Dawley大鼠按照数字表法随机分为假手术组、模型组、HBO组和HBO+mimic组，每组8只。采用大脑中动脉闭塞(MCAO)方法构建大鼠脑梗死模型。再灌注48 h后，将大鼠安乐死，并收集海马和大脑皮质组织。评估大鼠脑水肿和神经功能损伤，TUNEL实验观察大鼠海马和皮质组织中细胞凋亡情况，RT-PCR实验检测大鼠脑组织中miR-153-3p表达水平，Western blotting实验检测大鼠脑组织蛋白表达水平，ELISA法检测大鼠脑组织炎症因子水平，荧光素酶报告基因实验检测Bcl-2的转录活性，RT-PCR实验检测PC-12细胞中Bcl-2 mRNA的表达水平。结果:与假手术组相比，MCAO处理后大鼠脑组织中miR-153-3p表达水平明显升高，HBO处理后降低了MCAO诱导的miR-153-3p表达，但mimic-miR-153-3p处理后明显逆转了该趋势，差异均有统计学意义( P<0.05)。与假手术组相比，模型组神经功能损伤评分与脑组织水含量提高，HBO处理后脑组织水含量与神经功能损伤评分降低，但miR-153-5p过表达后HBO的这种作用显著削弱，差异均有统计学意义( P<0.05)。与模型组比较，HBO组大鼠脑组织中白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量明显降低，而miR-153-3p上调后提高了IL-6、CRP及TNF-α的表达水平，差异均有统计学意义( P<0.05)。在大鼠PC-12细胞中上调miR-153-3p的表达可显著降低Bcl-2的荧光及转录活性，降低Bcl-2 mRNA的表达水平，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:HBO可通过调控miR-153-3p/Bcl-2轴改善MCAO诱导的脑细胞凋亡和炎性反应，从而改善脑水肿。

目的:探讨长链非编码RNA FMO4-AS5调控miRNA-620（miR-620）表达对肾癌细胞增殖能力、细胞周期和免疫逃逸的影响。方法:通过cBioPortal在线数据库（数据更新至2022年1月）分析FMO4-AS5在肾癌组织（323例）和正常肾组织（153例）中的表达水平。采用LncBook预测软件分析FMO4-AS5直接靶向结合的微小RNA（miRNA）。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测正常肾小管上皮细胞HK-2和肾癌细胞株ACHN、CAKI1、786-P、A498中FMO4-AS5的相对表达水平，选择FMO4-AS5相对表达水平最高的786-P细胞进行后续实验。将786-P细胞分为对照组和si-FMO4-AS5组，分别转染0.4 μg pcDNA-si-NC质粒和0.4 μg pcDNA-si-FMO4-AS5质粒。采用平板克隆实验检测两组786-P细胞的增殖能力，流式细胞术检测786-P细胞周期，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素1β（IL-1β）、干扰素γ（IFN-γ）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证FMO4-AS5和miR-620的靶向关系。蛋白质印迹法检测786-P细胞中JAK1-STAT3信号通路相关蛋白和细胞周期蛋白CDK9、cyclin T1的表达。结果:cBioPortal在线数据库中，肾癌组织中FMO4-AS5相对表达水平高于正常肾脏组织（ P<0.01）。肾癌细胞株ACHN、CAKI1、786-P、A498中FMO4-AS5相对表达水平分别为2.79±0.30、4.47±0.41、7.26±0.52、3.65±0.74，均较肾小管上皮细胞HK-2细胞高（1.03 ± 0.22）（均 P<0.01）。对照组和si-FMO4-AS5组细胞克隆形成数分别为（226±17）个和（54±16）个，si-FMO4-AS5组细胞克隆形成数低于对照组（ t＝7.15， P<0.01）。与对照组比较，si-FMO4-AS5组G 0/G 1期细胞比例增高（ t＝5.25， P<0.01），G 2/M期、S期细胞比例均降低（ t＝3.32， P<0.05； t＝5.35， P<0.01）。对照组和si-FMO4-AS5组MCP-1分别为（2.01±0.17）pg/ml和（5.54±0.52）pg/ml，IFN-γ分别为（1.51±0.49）pg/ml和（3.71±0.29）pg/ml，IL-1β分别为（1.28±0.19）pg/ml和（3.21±0.38）pg/ml，si-FMO4-AS5组MCP-1、IFN-γ、IL-1β水平均较对照组增高（均 P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验显示，FMO4-AS5与miR-620存在靶向关系。si-FMO4-AS5组786-P细胞中JAK1、STAT3、CDK9、cyclin T1蛋白表达水平均低于对照组。 结论:FMO4-AS5在肾癌中高表达，沉默FMO4-AS5通过上调miR-620表达降低JAK1-STAT3信号通路活性，抑制肾癌786-P细胞的增殖、细胞周期和免疫逃逸。

目的:探讨异黏蛋白(metadherin,MTDH)干扰是否通过提高胶质瘤替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药株的药物敏感性促进细胞凋亡.方法:基于培养的U251人神经胶质瘤细胞和U251MG/TMZ人星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞,通过qRT-PCR检测细胞中MTDH、miR-1471和miR-153-3p的表达.根据人MTDH的序列合成siRNA/NC,并转染至U251MG/TMZ细胞中.通过CCK8检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡,Western blot法检测耐药相关基因的表达.采用不同浓度的替莫唑胺(2.5、5、10、20、40、80、160 μmol/L)作用于转染si-MTDH/NC的U251MG/TMZ细胞,48 h后通过CCK8法检测细胞增殖.结果:U251MG/TMZ细胞中具有高表达的MTDH和低表达的miR-1471、miR-153-3p.与Control组比较,U251MG/TMZ组细胞的增殖能力显著增加,凋亡率显著降低,MTDH、ABCG2、MGMT和Pgp的mRNA表达显著增加,MTDH、ABCB1、MGMT、ABCG2和p-AKT1的蛋白表达显著增加.与NC组比较,si-MTDH组细胞的增殖能力显著降低,凋亡率显著增加,MTDH、ABCG2、MGMT和Pgp的mRNA表达显著降低,MTDH、ABCB1、MGMT、ABCG2和p-AKT1的蛋白表达显著降低.结论:MTDH干扰通过提高胶质瘤替莫唑胺耐药株的药物敏感性促进细胞凋亡,其机制可能与AKT1通路有关.

目的:研究甲状腺乳头状癌(PTC)组织微小核糖核酸-93-5p(miR-93-5p)、微小RNA-98-5p(miR-98-5p)表达与临床病理特征和增殖、侵袭基因表达的关系.方法:选取2020年10月到2023年10月在广东省中医院行手术切除的PTC患者153例作为研究对象,收集术中切除的癌组织以及癌旁组织.检测并比较癌组织与癌旁组织miR-93-5p、miR-98-5p及增殖基因、侵袭基因mRNA表达水平,分析miR-93-5p及miR-98-5p表达与PTC患者临床病理特征的关系.利用Pearson法分析miR-93-5p、miR-98-5p表达水平与增殖基因、侵袭基因mRNA表达的相关性.结果:癌组织的miR-93-5p表达水平较癌旁组织更高,miR-98-5p表达水平较癌旁组织更低(P＜0.05).miR-93-5p高表达PTC患者TNM分期Ⅲ～IV期、有淋巴结转移及低分化的比例较miR-93-5p低表达PTC患者更高(P＜0.05).miR-98-5p低表达PTC患者TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移及低分化的比例较miR-98-5p高表达PTC患者更高(P＜0.05).癌组织的增殖基因程序性细胞死亡因子4(PDCD4)及蛋白磷酸酶4调节亚基(PP4R1)水平较癌旁组织更低(P＜0.05),侵袭基因金属蛋白酶解离素9(ADAM9)及Bcl-6共抑制因子样蛋白(BCORL1)水平较癌旁组织更高(P＜0.05).Pearson法分析结果显示,miR-93-5p表达与增殖基因PDCD4及PP4R1表达水平呈负相关,与侵袭基因ADAM9及BCORL1表达水平呈正相关.miR-98-5p表达水平与增殖基因PDCD4及PP4R1水平呈正相关,与侵袭基因ADAM9及BCORL1表达水平呈负相关.结论:PTC患者癌组织miR-93-5p表达升高,miR-98-5p表达降低,与TNM分期、淋巴结转移及分化程度等临床病理特征有关,还可促进PTC癌细胞增殖、侵袭.

目的 探讨子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211 水平变化及对术后生存情况的影响.方法 选取2016 年5 月至2018 年5 月我院收治的子宫颈癌患者102 例为观察组,同期健康体检的正常女性58 例为对照组.比较两组血清miR-153、miR-211 水平,分析子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211 水平与病理特征的相关性,Cox回归分析子宫颈癌患者术后生存的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-153、miR-211 水平对子宫颈癌患者术后生存情况的预测价值.结果 观察组患者血清miR-153、miR-211 水平低于对照组(P<0.05).不同临床分期、淋巴结转移、深肌层浸润、分化程度、宫旁浸润、脉管浸润子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211 水平比较,差异有统计学意义(P<0.05).Cox回归分析显示,将深肌层浸润、分化程度、宫旁浸润、脉管浸润控制后,临床分期、淋巴结转移及血清miR-153、miR-211 低水平均为影响子宫颈癌患者术后生存的独立危险因素(P<0.05).ROC曲线显示,miR-153、miR-211 联合预测子宫颈癌患者术后生存情况的AUC值最大,为0.853,对应敏感度为88.48%,特异度为 67.90%.结论 子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211 水平与术后生存情况关系密切,检测血清miR-153、miR-211 水平对临床评估子宫颈癌患者术后生存情况具有积极意义.

[目的]分析乳腺癌患者龙贝逍遥散治疗后血清微小RNA-145(miR-145)表达量变化及与血清肿瘤标志物的关系.[方法]选取北京航天总医院普外科2016年1月至2021年1月接诊的100例乳腺癌肝郁气滞型患者展开回顾性研究,根据治疗方法的不同将其分为对照组和观察组,每组各50例.对照组给予新辅助CAF化疗(C:环磷酰胺;A:多柔比星;F:氟尿嘧啶)治疗,观察组在对照组的基础上联合龙贝逍遥散治疗,每疗程为21 d,共治疗3个疗程.比较2组患者的疾病控制率、血清miR-145表达量、血清肿瘤标志物、不良反应总发生率.Pearson分析血清miR-145与血清肿瘤标志物的关系,比较观察组中有效组与无效组血清miR-145表达量、血清肿瘤标志物水平,绘制受试者工作曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析血清miR-145、肿瘤标志物对新辅助CAF化疗联合龙贝逍遥散临床疗效的预测价值.[结果](1)治疗3个疗程后,观察组的疾病控制率为86.00%(43/50),明显高于对照组的54.00%(47/50),组间比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)治疗后,2组患者的血清miR-145表达量均较治疗前明显升高(P＜0.05),且观察组的升高幅度明显优于对照组(P＜0.01).(3)治疗后,2组患者的血清糖类抗原153(CA153)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)水平均较治疗前明显降低(P＜0.05),且观察组的降低幅度均明显优于对照组(P＜0.01).(4)观察组的不良反应总发生率为20.00%(10/50),对照组为16.00%(8/50),组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(5)Pearson分析,血清miR-145与血清CA153、CA125、CEA均呈负相关性(P＜0.001),r值分别为-4.014、-3.986、-4.086.(6)有效组血清miR-145表达量高于无效组(P＜0.01),血清CA153、CA125、CEA水平低于无效组(P＜0.01).(7)血清miR-145、肿瘤标志物联合检测预测新辅助CAF化疗联合龙贝逍遥散临床疗效的AUC是0.799(95%CI:0.716-0.963),灵敏度、特异度均高于单独检测(P＜0.001).[结论]龙贝逍遥散可提高对乳腺癌的疾病控制率,上调血清miR-145表达量,降低血清肿瘤标志物水平,且不增加不良反应,具有一定的安全性;乳腺癌患者血清miR-145与肿瘤标志物存在一定的相关性,联合检测可提高对治疗方案的预测效能,具有一定的参考价值.

目的 探讨循环microRNA(miRNA)-27a-3p水平与新发皮质下小梗死(RSSI)严重程度及患者短期神经功能预后的相关性.方法 选取2018年5月至2021年6月海南省东方市人民医院收治的153例RSSI患者作为RSSI组,另外纳入头部磁共振成像(MRI)检查无异常的健康志愿者150例作为对照组.采用实时荧光定量PCR检测循环miR-27a-3p表达水平.结果 RSSI组患者循环miR-27a-3p水平显著高于健康对照组(P＜0.05).经Spearman秩相关系数和多元线性回归分析,RSSI患者循环miR-27a-3p水平与梗死体积、MRI总负荷、白质高信号(WMH)、血管周围间隙增大(EPVS)呈正相关(P＜0.05).RSSI患者循环miR-27a-3p水平与发病14 d时美国国立卫生研究院卒中量表评分变化(ANIHSS)、NIHSS改善率也呈正相关(P＜0.05),而与基线NIHSS无相关性(P＞0.05).结论 循环miR-27a-3p反映了 RSSI的严重程度,可作为短期神经功能预后的预测因子.在脑小血管病影像学特征上,它可以反映WMH和EPVS的严重程度,对脑血管疾病的诊断和治疗具有一定指导意义.

目的 观察长链非编码RNA(lncRNA,ANRIL)、微小RNA(miR)-191 在非小细胞肺癌(NSCLC)病人血浆中的表达及与临床意义.方法 2015 年 5 月～2017 年 8 月我院首次确诊非小细胞肺癌(NSCLC)病人 153 例,健康体检者 75 例.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血浆ANRIL、miR-191 水平,分析ANRIL、miR-191 表达水平与临床病理特征的关系.Kaplan-Meier分析ANRIL、miR-191 表达水平与预后的关系,Cox回归分析影响NSCLC病人预后不良的危险因素.结果 NSCLC病人血浆ANRIL水平为(3.09±0.53)、miR-191 水平为(2.82±0.47),正常人群分别为(0.64±0.04)、(0.42±0.07),差异有统计学意义(P＜0.05).中低分化、Ⅲ+Ⅳ分期、有淋巴结转移病人血浆ANRIL、miR-191 含量高于高分化、Ⅰ+Ⅱ分期、无淋巴结转移病人,差异有统计学意义(P＜0.05).ANRIL高表达组病人 5 年总体生存率(OS)为 44.58%,ANRIL低表达组为73.85%;miR-191 高表达组病人5 年OS为 50.63%,miR-191 低表达组为 71.01%,差异有统计学意义(P＜0.05).Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移、血浆 ANRIL 高表达及血浆 miR-191 高表达是影响NSCLC病人预后不良的独立危险因素(均P＜0.05).结论 NSCLC病人血浆ANRIL、miR-191 高表达,与分期、淋巴结转移、分化程度及预后相关.