目的:探讨阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)转基因小鼠在恐惧记忆活动中峰电位与场电位Gamma节律之间的内在联系。方法:将6月龄APP/PS1/tau三转基因(3xTg)小鼠和野生型(WT)小鼠分为3xTg组和WT组，每组10只。无菌条件下在每组小鼠海马内埋置电极，两周后进行条件恐惧箱的行为学实验。通过小鼠头部埋置的无线遥测装置同步监测分析Gamma节律、Spike和Burst发放频率的变化情况，最后使用熵值计算Gamma节律与Spike的相关性。结果:(1)在行为学实验中，3xTg小鼠因条件刺激引起的僵直比率为[(54.07±2.32)%]，显著低于WT小鼠[(76.21±2.88)%]( t＝4.796， P<0.01)。(2)同步记录到WT小鼠在Pre-CS期Gamma节律的功率为[(11.574±1.147)dB]，给予CS后上升为[(18.108±1.177)dB]( t＝3.386， P<0.01)。3xTg组在给予CS之后Gamma功率[(12.346±1.345)dB]明显低于WT组( t＝3.423， P<0.01)。(3)WT小鼠在Pre-CS阶段Spike发放频率为[(5.667±1.475)次/s]，给予条件刺激后显著升高[(11.008±1.335)次/s]( t＝3.542， P<0.01)。而3xTg小鼠的Spike发放频率在CS之后为[(5.249±1.033)次/s]明显低于WT组( t＝4.788， P<0.01)。(4)WT组在Pre-CS和CS阶段Burst间隔时间分别为[(0.550±0.043)s]和[(1.075±0.034)s]，可见WT组Burst发放频率在给予条件刺激之后显著增加( t＝5.188， P<0.01)。而3xTg组经过条件刺激后发放间隔为[(0.619±0.033)s]，显著低于WT组( t＝3.352， P<0.01)。(5)给予条件刺激后，WT小鼠的Spike-Gamma熵值曲线始终高于3xTg小鼠，其中WT组和3xTg组的相关性最高值分别为(0.403±0.031)和(0.314±0.028)，3xTg组的Spike-Gamma相关性与WT小鼠相比显著下降( t＝3.372， P<0.01)。 结论:AD恐惧记忆的缺陷可能是由于Spike-LFP(Gamma)发放不协调导致的。

白癜风的病因及发病机制均未明确，动物模型是白癜风研究的重要工具。除传统的白癜风小鼠模型外，许多新模型逐渐建立，如表达表皮黑素细胞、黑素细胞反应性T细胞的小鼠模型、K14-SCF/h3TA2/HLA-A2三转基因（Vitesse鼠）小鼠模型、自身免疫诱导的小鼠模型、化学试剂诱导的小鼠模型等，这些模型与人白癜风高度相似，在可重复性和稳定性等方面都有不同程度提高，已成为研究白癜风发病机制、探索治疗靶点和评判疗效的良好模型。本文综述目前白癜风样小鼠脱色模型的研究进展，并分析存在的问题。

目的:观察3xTg-AD小鼠海马突触可塑性与钙离子跨膜流动特征。方法:根据基因型不同，将6月龄小鼠分为APP/PS1/tau三转基因AD(3xTg-AD)模型小鼠和野生型(WT)对照组小鼠两组，每组13只。每组随机选取6只小鼠进行在体电生理记录，给予测试刺激记录其海马CA1区场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential，fEPSP)、配对脉冲刺激记录双脉冲易化(paired-pulse facilitation，PPF)、高频刺激(high frequency stimulation，HFS)诱导长时程增强(long-term potentiation，LTP)。每组剩余的7只小鼠采用非损伤微测技术(non-invasive micro-test technology，NMT)，检测海马CA1区脑片神经元的跨膜钙内流和钙外排情况。3xTg-AD小鼠在电生理和NMT实验中各损失1只，最终入组电生理实验5只，NMT实验6只。采用SPSS 18.0对所有数据进行统计学分析，两组间比较使用两独立样本 t检验。 结果:(1)在体电生理实验中，给予测试刺激后30 min内，3xTg-AD小鼠和WT小鼠的fEPSP斜率均比较稳定，其平均fEPSP斜率分别为[(97.8±2.3)%]和[(92.6±12.6)%]，两组之间差异无统计学意义( t＝0.91， P>0.05)；给予配对脉冲刺激后，3xTg-AD小鼠和WT小鼠的PPF值分别为(1.58±0.69)和(1.74±0.17)，两组间差异无统计学意义( t＝0.50， P>0.05)；给予HFS后30 min和60 min，3xTg-AD小鼠的LTP值分别为[(104.9±10.9)%]和[(98.0±10.8)%]，明显低于WT小鼠的[(156.5±21.3)%]( t＝4.43， P<0.01)和[(162.5±19.7)%]( t＝5.92， P<0.01)。(2)在NMT实验中，3xTg-AD小鼠海马CA1区神经元谷氨酸诱导的标准化跨膜Ca 2＋内流平均流速和峰值流速分别为[(-2 166.0±425.0)%]和[(-3 539.6±1 270.9)%]，远高于WT小鼠的[(-735.3±262.9)%]( t＝6.81， P<0.01)和[(-917.3±271.7)%]( t＝4.89， P<0.01)；而低钙溶液引起的3xTg-AD小鼠标准化Ca 2＋外排平均流速和峰值流速分别为[(1 451.6±297.1)%]和[(1 968.7±227.3)%]，显著低于WT对照组小鼠的[(2 579.3±810.9)%]( t＝2.92， P<0.05)和[(3 420.4±954.8)%]( t＝3.31， P<0.01)。 结论:6月龄3xTg-AD小鼠出现的海马突触可塑性损伤可能与钙内流增加和钙外排减少所导致的海马神经元胞内Ca 2＋超载密切相关。

目的:探讨和比较人CD55(hCD55)转基因猪外周血单个核细胞(PBMC)表面表达的hCD55对兔补体和人补体依赖的细胞毒(CDC)的抑制效果。方法:选择来自同一品系的3头α1，3-半乳糖转移酶基因敲除猪(GTKO)。其中两头猪转入了hCD55基因。根据三头猪PBMC表面hCD55表达水平，分为GTKO、hCD55低表达(GTKO/hCD55 Low)和hCD55高表达(GTKO/hCD55 High)猪。将3头猪的PBMC分别与灭活补体的混合人血清(20例份)孵育后，流式细胞仪检测兔补体或人补体依赖的细胞毒以及猪PBMC的抗体(IgM和IgG)结合水平。 结果:3头猪PBMC与人血清异种抗体的结合无明显差异。兔补体和人补体对GTKO猪PBMC的细胞毒均较高，分别为98.97%±0.50%和82.73%±3.20%。与GTKO组相比，低表达hCD55对兔补体依赖的细胞毒无明显抑制作用97.07%±2.25%比98.9%±0.50%， P＝0.2267)，而高表达hCD55对兔补体依赖的细胞毒有轻度的抑制作用(81.70%±5.86%比98.9%±0.50%， P＝0.0355)。不同的是，低表达hCD55对人补体依赖的细胞毒有显著的抑制作用(23.83%±3.53%比82.73%±3.20%， P<0.0001)；高表达hCD55对人补体依赖的细胞毒较低表达hCD55有进一步抑制作用(2.79%±0.45%比82.73%±3.20%， P＝0.009)，使之达到阴性对照组水平。低表达或高表达hCD55对人补体介导CDC的抑制作用均优于对兔补体介导CDC的抑制作用。 结论:相较于传统使用兔补体的CDC技术，使用商品化标准人补体的CDC技术评价GTKO/hCD55基因工程猪细胞表面hCD55对受者补体激活的调节作用具有明显优势。本研究对在异种移植走向临床后，建立能有效评估hCD55功能的CDC实验体系提供了实验依据。

目的:探讨长期高脂饮食引起的胰岛素抵抗对pR5株系MAPT Tau转基因小鼠的认知功能和大脑Tau蛋白磷酸化的影响。方法:8周龄雌性pR5 MAPT转基因小鼠分为标准饮食(standard diet，STD)组(pR5 STD， n＝8)和高脂饮食(high-fat diet，HFD)组(pR5 HFD， n＝8)，以STD喂养的雌性野生型(wild type，WT)C57BL/6小鼠为对照组(WT STD， n＝8)，连续干预30周，直到小鼠老龄。实验期间小鼠每周测量1次体质量，每2周测量1次空腹血糖。30周后进行葡萄糖耐量实验、胰岛素耐量实验；采用强迫游泳实验和悬尾实验评估小鼠抑郁样行为，高架十字迷宫实验评估焦虑样行为，Morris水迷宫空间探索实验评估记忆行为；Western blot检测大脑组织总Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白H7-tau、p-tau-Ser396和p-tau-Thr231表达水平。采用SPSS 17.0进行统计分析，葡萄糖耐量数据和胰岛素耐量数据采用重复测量方差分析，其他数据多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。 结果:高脂饮食30周时，三组小鼠的体质量和空腹血糖均差异有统计学意义( F＝808.31，1 117.18，均 P<0.01)。pR5 HFD组小鼠的体质量[(54.35±2.52)g]高于pR5 STD组[(24.95±1.15)g]和WT STD组[(23.86±1.10)g](均 P<0.01)，pR5 HFD组小鼠空腹血糖[(8.12±0.24)mmol/L]高于pR5 STD组[(4.64±0.13)mmol/L]和WT STD组[(4.45±0.22)mmol/L] (均 P<0.01)。葡萄糖耐量实验显示，三组小鼠注射葡萄糖后的120 min内，血糖值存在显著时间和组别交互作用( F＝113.30， P<0.01)，pR5 HFD组小鼠注射葡萄糖后血糖升高的峰值延迟，提示pR5 HFD组小鼠葡萄糖耐量受损。胰岛素耐量实验显示，三组小鼠的胰岛素耐量存在显著的时间和组别的交互作用( F＝209.92， P<0.01)。pR5 HFD组小鼠注射胰岛素后，血糖下降较慢，在60 min时即达谷值，之后血糖显著回升，提示pR5 HFD组小鼠对胰岛素的敏感性显著降低。三组小鼠强迫游泳不动时间百分比和悬尾不动时间百分比均差异有统计学意义( F＝37.05，59.29，均 P<0.01)，pR5 STD组和pR5 HFD组的这两个指标均高于WT STD组(均 P<0.01)，且pR5 HFD组高于pR5 STD组( P<0.01)。高架十字迷宫结果显示，三组小鼠在开放臂中的活动距离和活动时间均差异有统计学意义( F＝7.82，10.37，均 P<0.05)。pR5 HFD组小鼠的活动距离[(0.40±0.21)m]和活动时间[(27.38±8.80)s]均低于pR5 STD组[(2.31±1.74)m，(63.56±27.52)s](均 P<0.05)。空间探索实验显示，pR5 HFD组小鼠目标象限停留时间[(15.56±1.16)s]少于pR5 STD组[(19.18±0.64)s]( P<0.01)，pR5 HFD组小鼠进入平台区域时间[(1.43±0.06)s]少于pR5 STD组[(1.66±0.12)s]( P<0.01)。Western blot结果显示，三组小鼠总Tau蛋白、H7-tau、p-tau-Ser396和p-tau-Thr231蛋白表达水平均差异有统计学意义( F＝101.50，80.60，55.47，30.89，均 P<0.05)。两两比较显示，pR5 STD组、pR5 HFD组四种Tau蛋白表达均高于WT STD组(均 P<0.01)，pR5 HFD组均高于pR5 STD组(均 P<0.05)。 结论:长期高脂饮食引起肥胖、高血糖和外周胰岛素抵抗，促进了MAPT小鼠的认知损害，与MAPT小鼠大脑中Tau蛋白磷酸化增加有关。

目的:探讨阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)中，淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)在电压门控性钠离子通道2B (sodium channel-voltage-gated-beta 2B，SCN2B)介导的学习记忆认知功能改善中可能发挥的作用。方法:将SCN2B基因敲除小鼠(SCN2B -/-)与APP基因敲除小鼠(APP -/-)、APP基因杂合子(APP +/-)以及APP基因过表达小鼠(APP +/+)配对杂交，用PCR基因检测技术对同窝小鼠尾组织进行基因分型，分为SCN2B -/-APP -/-组，SCN2B -/-APP +/-组以及SCN2B -/-APP +/+组，C57BL/6野生型小鼠则为野生型(wild type，WT)组，每组9只。并将6月龄、12月龄、18月龄的SCN2B -/-APP -/-、SCN2B -/- APP +/-、SCN2B -/-APP +/+转基因小鼠和同龄野生型小鼠进行Morris水迷宫与Y迷宫行为学实验来检测每组之间的认知功能；取6、12、18月龄SCN2B -/-APP -/-、SCN2B -/- APP +/-、SCN2B -/-APP +/+的三种转基因小鼠和同龄野生型小鼠进行海马CA1区神经元突起的检测，同时对海马CA1区神经元的基底及远端突起数量进行定量分析。采用SPSS 21.0统计软件进行数据统计和分析。两组之间的差异用独立样本 t检验比较分析，多组间比较用单因素方差分析，行为学实验结果使用重复测量方差分析进行统计。 结果:(1)水迷宫实验数据使用重复测量方差分析，数据显示18月龄小鼠中逃避潜伏期的组别和时间交互效应显著( F时间×组别＝3.63， P<0.01)。简单效应分析发现18月龄小鼠中，与SCN2B -/-APP +/-组和SCN2B -/-APP -/-组小鼠比较，SCN2B -/-APP +/+组小鼠第4～6天的逃避潜伏期明显延长[第4天：(47.00±2.00)s，(43.11±1.96) s，(41.89±3.06)s， t＝-4.16，1.00，均 P<0.05；第5天：(45.22±2.54) s，(36.33±2.78) s，(37.00±2.45)s， t＝ -7.08，-0.54，均 P<0.05；第6天：(38.11±2.03)s，(34.11±2.32)s，(33.00±2.91)s， t＝-3.90，0.90，均 P<0.05。]，目标象限停留时间缩短[(18.00±1.73)s，(25.56±1.33)s，(24.33±1.94)s； t＝10.37，1.56，均 P<0.05]。(2)Y-迷宫结果显示，与SCN2B -/-APP -/-组和SCN2B -/-APP +/-组小鼠比较，18月龄SCN2B -/-APP +/+组小鼠新颖臂进入次数减少[(50.22±3.68)次，(57.22±3.74)次，(58.44±5.14)次； t＝3.40，-0.48，均 P<0.05]，在新颖臂内停留时间减少[(10.89±0.62)min，(14.33±0.59)min，(13.89±0.74)min； t＝8.16，0.44，均 P<0.05]、在新颖臂活动距离明显减少[(37.26±2.01)m ，(45.67±2.45)m，(46.11±3.27)m ； t＝7.81，0.91，均 P<0.05]。(3)Golgi染色结果显示，与SCN2B -/- APP -/-组和SCN2B -/-APP +/-组小鼠比较，18月龄SCN2B -/-APP +/+组小鼠海马神经元的顶端树突数量[顶端树突数量：(1.78±0.37)个，(3.67±0.81)个，(3.00±1.21)个； t＝3.36，1.41，均 P<0.05]和基底树突数量[基底树突数量：(1.11±0.50)个，(3.11±0.50)个，(2.56±0.69)个； t＝4.06，1.21，均 P<0.05]均显著减少。 结论:SCN2B敲低可以改善老年小鼠的空间学习记忆能力，而过表达APP可以部分抵消SCN2B敲低引起的小鼠认知功能改善，其机制可能是通过影响小鼠海马CA1区神经元基底及远端的突起数量而发挥作用的。

目的 探究索马鲁肽能否有效改善阿尔茨海默病(AD)转基因APP/PS1/tau小鼠的认知功能.方法 本研究选用的AD模型小鼠是含有PS1M146V、APPSwe和tauP301L 3个基因突变位点的APP/PS1/tau三重转基因AD小鼠(3 × Tg-AD).7月龄的APP/PS1/tau三重转基因小鼠及同窝非转基因野生型(wild type,WT)C57BL/6小鼠分别随机分为:AD模型组(Tg)和索马鲁肽组(Tg+Semaglutide)、正常对照组(WT)和索马鲁肽对照组(WT+Semaglutide).WT+Semaglutide组和Tg+Sema-glutide组腹腔注射索马鲁肽,WT组和Tg组腹腔注射等量生理盐水,小鼠干预30次,每2 d干预一次.干预结束后进行新物体识别实验研究小鼠认知功能的改变,行ELISA实验检测小鼠血清中与认知相关的标志物Aβ1-42的水平,采用Western blot法检测小鼠海马区Ser231位点磷酸化的Tau蛋白表达.结果 新物体识别实验中,与Tg组相比,Tg+Semaglutide组新物体分辨率更高(P＜0.05);与WT组相比,WT+Semaglutide组分辨率更高(P＜0.05).干预结束后(9月龄),各组间小鼠体质量及血糖浓度比较,差异无统计学意义(P＞0.05).蛋白质印迹法实验中,与Tg组相比,Tg+Semaglutide组Tau231磷酸化水平降低(P＜0.05);与WT组相比,WT+Semaglutide组Tau231磷酸化水平也略降低,但组间差异无统计学意义.酶联免疫吸附法实验中,与Tg组相比,Tg+Semaglutide组Aβ1-42浓度降低(P＜0.05);与WT组相比,WT+Semaglutide组Aβ1-42浓度也降低(P＜0.05).结论 索马鲁肽可降低AD小鼠血清中与认知相关的标志物Aβ1-42水平和海马区Ser231位点磷酸化的Tau蛋白表达,能有效改善AD小鼠的认知功能,且索马鲁肽对小鼠体质量及血糖的影响在短时间里未见明显变化,安全性较高.

目前市售的豆制品大多无转基因标识,但其生产原料是否真为非转基因大豆却难以鉴别.本研究选取江苏省内 120 批次豆干为研究对象,以转基因大豆常用的调控元件、标记基因和目的基因等为靶标,运用实时荧光PCR技术分析豆干中是否含有转基因成分.结果表明,120 份豆干中检出转基因成分的有43 份,检出率为35.8%.花椰菜花叶病毒 35S启动子(CaMV35S)是检出率最高的外源基因.耐草甘膦相关基因的检出率高于耐草铵膦基因.从流通环节看,江苏省 13 市中,宿迁的转基因豆干发现率最高,其次为南通;从生产环节看,生产于重庆的豆干转基因成分发现率最高,安徽、湖南分别位列第二、三.本研究为转基因食品的安全监管工作提供了数据支持和技术支撑.

大米镉超标问题严重威胁人体健康.水稻镉吸收转运基因OsNramp5的功能缺失可有效降低镉在稻米中的积累.为了快速创制镉低积累的水稻新种质,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除三系杂交稻优质抗病恢复系川恢491(R491)中的镉吸收转运基因OsNramp5,获得了多种不同突变方式的编辑植株,并筛选出单靶点突变无转基因成份的两种纯合突变株系(KO1和KO2).在镉污染土壤中种植并测定野生型和敲除植株糙米的镉含量,结果显示,相比于野生型R491,敲除株系KO1和KO2糙米中的镉含量显著下降,均降低约90％左右.农艺性状调查结果发现,相比野生型R491,KO1突变株系的农艺性状没有显著差异,但KO2突变株系的株高、结实率和千粒重显著降低.因此,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除镉吸收转运基因OsNramp5可快速创制镉低积累的水稻新种质,本研究创制的新种质为加速培育可在镉污染区种植的安全水稻品种提供了新的遗传资源.

目的 探讨黄连解毒汤对Tau/APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠神经元损伤的影响及机制.方法 将Tau/APP/PS1转基因AD小鼠随机分成模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量组,每组 10 只.选取 10 只相同月龄的雄性C57BL/6J小鼠作为对照组.药物干预4周后,ELISA法检测小鼠海马组织炎症因子及AD相关病理标志物可溶性淀粉酶前体蛋白α(soluble amyloid precursor protein α,sAPPα)、β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)40、Aβ42 和磷酸化Tau 蛋白(phosphorylated tau protein,p-Tau)的水平,免疫荧光双标法检测海马Nod样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体和小胶质细胞特异性标志物离子钙结合衔接分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)的表达,Western blot检测小鼠海马NLRP3 炎性小体信号通路活化情况.结果 与对照组比较,模型组小鼠海马中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-1 和Iba1 表达明显增加(P<0.05),炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平上升(P<0.05),Aβ40、Aβ42 和p-Tau水平及p-Tau/Tau值均升高(P<0.05),sAPPα水平下降(P<0.05).与模型组比较,不同剂量黄连解毒汤治疗组小鼠海马中sAPPα水平上升(P<0.05),Aβ40、Aβ42 及 Tau 蛋白磷酸化水平均明显下降(P<0.05),IL-1β、IL-18、TNF-α 水平降低(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1和Iba1表达减少(P<0.05).结论 黄连解毒汤可能通过下调AD小鼠海马NLRP3炎性小体信号通路活性,抑制小胶质细胞活化,降低Aβ、p-Tau等神经元毒性病理产物的水平,从而改善海马神经元损伤.