目的 探究滇黄精Polygonatum kingianum传统炮制过程化学成分变化规律.方法 按照九蒸九晒法进行滇黄精炮制,应用分光光度法和HPLC测定炮制过程中总多糖、总皂苷、总多酚、总黄酮和游离氨基酸的含量.应用UPLC-MS/MS的广泛靶向代谢组学技术检测原料和炮制后的代谢产物.结果 随着炮制次数的增加,颜色逐渐加深,第3次蒸制后为深褐色,第4次至炮制结束缓慢转变为黑色.滇黄精原料具有麻味,第4蒸之后麻味消失,变为酸甜味.炮制过程中多糖和16种游离氨基酸含量降低,总皂苷、总黄酮和总多酚含量增加.广泛靶向代谢组学共检测到419个代谢物,氨基酸及其衍生物66个,脂质65个,酚酸类52个,黄酮类51个,有机酸42个,生物碱41个,核苷酸及其衍生物32个,甾体9个,木脂素和香豆素7个,异黄酮1个,萜类3个,其他类物质50个.结论 系统阐述了滇黄精九蒸九晒炮制过程中化学成分的变化,九蒸九晒对滇黄精中的化学成分影响较大,随着炮制时间的增加,氨基酸及其衍生物和生物碱类化合物的相对丰度降低,有机酸和酚酸类相对丰度增加等.该研究可为炮制滇黄精有效成分的筛选与质量评价提供参考,同时差异性成分的发现为研究滇黄精生熟饮片中差异性物质的分析提供新思路,对滇黄精的扩大开发利用有重要意义.

通过粪便代谢组学方法研究何首乌改善阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)认知障碍的作用机制,并比较不同蒸晒程度何首乌在改善AD模型小鼠认知功能上的作用差异,探讨其炮制原理.选取48只5月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组、阳性组、生品组、三蒸三晒组、六蒸六晒组、九蒸九晒组,另取7只同窝阴性对照小鼠作为空白组.灌胃给药150 d后,采用巴恩斯迷宫和避暗实验评估各组小鼠的学习记忆能力,并采集粪便样本进行广泛靶向代谢组学检测,结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等多元统计方法对小鼠粪便中的代谢物进行分析.通过对比模型组和不同炮制品组的行为学结果显示,六蒸六晒组在巴恩斯迷宫定位航行测试中潜伏期显著缩短(P＜0.05),空间探索实验中错误次数显著减少(P＜0.05);避暗实验中第一次进入暗箱的潜伏期显著延长(P＜0.05),其综合改善AD模型小鼠的学习记忆能力最佳.代谢组学结果显示,与模型组相比,筛选出其他各组差异代谢物的数量排列顺序:六蒸六晒组＞九蒸九晒组＞生品组＞三蒸三晒组,分别包含146、120、95和81种潜在生物标志物.其中,与AD疾病相关的差异代谢物共有16种.基于炮制程度的进一步比较,发现六蒸六晒何首乌组在总代谢通路的调节数量最多,主要回调戊糖和葡萄糖醛酸相互转化和调节氨基酸合成代谢等途径.综上,何首乌经炮制后改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力的作用机制可能与改善氨基酸代谢以及提高机体能量代谢水平有关,以六蒸六晒炮制程度最佳.

目的:探究不同干燥方式的九制何首乌对D-半乳糖诱导衰老小鼠的影响.方法:将50只ICR小鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组、九蒸九晒制首乌组、九蒸九烘制首乌组,每日腹腔注射D-半乳糖(0.5 g·kg-1)构建小鼠衰老模型,造模同时给药,持续12周.应用Morris水迷宫实验方法测定小鼠的空间记忆和学习水平,计算各组小鼠胸腺、脾脏指数,检测小鼠血清及脑、肝、肾匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,检测小鼠肝肾功能水平.结果:与空白对照组相比,模型组空间记忆和学习能力明显降低,体质量、脏器指数明显下降,血清以及全脑、肝、肾匀浆中SOD、GSH-Px水平明显下降,而MDA水平显著上升,血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、肌酐、尿素水平显著性上升;药物干预组与模型组相比,空间记忆和记忆水平明显改善,体质量、脏器系数显著增加,改善D-半乳糖诱导的氧化应激,提高SOD、GSH-Px水平,抑制MDA含量的升高,肝肾功能趋于正常.两种干燥方式的给药组小鼠的指标相当,无明显差异.结论:不同干燥方法的九制何首乌的水煎液对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用,且两种方法的抗衰老作用无显著差异.

为研究多次蒸晒西洋参中皂苷成分变化及其在组织中的空间分布特征,采用超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱仪(ultra performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对西洋参提取液进行检测和鉴定.采用基质辅助激光解吸电离质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging,MALDI-MSI)对西洋参中原型皂苷及其代谢产物的空间分布和时空变化进行可视化分析.UPLC结果显示从 0～9 次蒸制西洋参中共鉴定出 90 种主要人参皂苷,在西洋参的反复蒸晒过程中,极性人参皂苷转化成低极性或非极性人参皂苷,原型皂苷含量减少,稀有皂苷含量增加,主要为人参皂苷 20(S/R)-Rg3、20(S/R)-Rh2、Rk1、Rg5、Rs5、Rs4 等.MALDI-MSI组织分布结果表明生西洋参中皂苷主要分布于表皮及韧皮部,蒸晒过程导致皂苷成分发生转化,木质部和髓质中的分布增加.该研究为西洋参蒸制引起的生物活性和药理作用的变化提供了基础信息,为扩大西洋参的药用范围提供了参考.

目的:针对"九蒸九晒"中的"九"尚不明确的问题,本实验通过探究酒黄精1～9次蒸制过程中浸出物和多糖含量的变化规律,同时考察不同蒸制次数的酒黄精饮片对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,从而优选出最佳的蒸制次数.方法:以外观性状、浸出物含量及多糖为评价指标,采用综合评分法优选出综合评分值前3位的酒黄精饮片;采用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,观察3批酒黄精分别给药后小鼠的体质量变化情况和免疫脏器指数,通过碳粒廓清实验分析吞噬细胞功能,从而优选出酒黄精最优的蒸制次数.结果:综合评分法结果显示四蒸四晒、五蒸五晒、六蒸六晒酒黄精的综合评分值最高,分别是0.72、0.66、0.75;与模型组比较,四蒸四晒、五蒸五晒、六蒸六晒组的体质量变化率显著升高(P＜0.01,0.05),胸腺、脾脏指数显著升高(P＜0.01),吞噬细胞功能有显著改善(P＜0.01,0.05);3批酒黄精组比较,体质量变化率与胸腺指数差异无统计学意义,六蒸六晒组脾脏指数高于四蒸四晒组(P＜0.05),六蒸六晒廓清校正指数显著升高(P＜0.05).结论:六蒸六晒酒黄精性状、浸出物、多糖综合评分值最高;酒黄精按照传统蒸制工艺蒸制四、五、六次均能调节免疫,其中六蒸六晒效果更显著,从而优选出酒黄精最佳蒸制次数为六蒸.酒制黄精以"六蒸六晒"为宜.

目的 探讨何首乌在九蒸九晒和九蒸九烘干燥工艺中,其外观性状、浸出物和化学成分的变化规律.方法 分别采用九蒸九晒和九蒸九烘炮制工艺制备样品,观察外观性状;参考 2020 年版《中国药典(四部)》通则 2201 浸出物测定法测定醇溶性浸出物;建立不同炮制样品的高效液相色谱指纹图谱,以二苯乙烯苷峰为参照峰,导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723 版),鉴定其中的化学成分.结果 何首乌炮制后饮片颜色逐渐加深,显黑褐色或棕褐色,质硬,断面角质样,第 9 次炮制后有明显蜡样光泽,晒干品和烘干品无明显差异;醇溶性浸出物在 2 种炮制过程中均逐渐减少并趋于平稳.生品和炮制品的高效液相色谱图中共检出 22 个峰,其中 7 个共有峰,指认出没食子酸、5-羟甲基糠醛、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚,发现 7 个新成分.3 批炮制品中,第 1 批烘品中 5 种成分的含量比晒品稍高,第 2 批和第 3 批晒品中 5 种成分的含量比烘品稍高.结论 何首乌经上述 2 种工艺炮制后的结果无显著差异,可考虑用九蒸九烘的现代工艺代替传统的九蒸九晒工艺.

何首乌始载于《开宝本草》,是中医常用的一味补益良药.何首乌炮制历史悠久,形式多样,其中以"九蒸九晒"最为经典,现代将其炮制工艺简化为用黑豆汁炖或蒸 1 次,其化学成分主要有蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类、磷脂类等,具有神经保护、抗氧化、抗动脉粥样硬化、降血脂、抗肿瘤、抗炎等药理作用.近年来,临床上服用何首乌及其制剂的患者常出现以肝毒性为主的毒副作用,研究表明,二苯乙烯苷、蒽醌类、鞣质类是何首乌肝毒性主要的物质基础且成分之间不同配比会加重肝损伤.不同炮制方法会改变何首乌的主要化学成分和肝毒性,但经炮制后其肝毒性会不同程度地减弱.本文从何首乌的炮制历史沿革及现代研究现状进行总结梳理,旨在为何首乌炮制机理、药效和毒性物质基础后续研究奠定基础.

目的:探索何首乌经典“九蒸九晒”与“药典”两种炮制方法对主要化学成分的影响规律.方法:采用HPLC法测定两种炮制方法下何首乌二苯乙烯苷、游离蒽醌和结合蒽醌的含量,分析变化规律.结果:“九蒸九晒”炮制品中,二苯乙烯苷的含量从3.021％下降至0.905％;结合蒽醌含量从0.401％下降至0.015％;总蒽醌含量从0.681％下降至0.445％;游离蒽醌含量从0.281％上升至0.432％;“药典”方法炮制何首乌各指标成分含量与经典炮制方法的四蒸四晒品接近.结论:何首乌传统“九蒸九晒”炮制方法与“药典”炮制方法在化学成分方面存在较大区别,成分上的区别是否与肝毒性相关还需进一步探讨.

查阅古代本草古籍及结合当代文献综合分析,考证黄精的名称起源、道地沿革、功效及炮制方法,为促进其产业化开发提供依据.结果表明,本草类古籍中提及的黄精是黄精药材的统称,除滇黄精外,黄精和多花黄精道地性不显著; 药食两用的黄精为古时仙家、道家、佛家推崇的养生佳品,作为商品及礼品始于唐朝时期; 炮制方法多样,明清后以"九蒸九晒"为主.

目的:研究何首乌炮制品(一蒸一晒到九蒸九晒)中6个主要有效成分与抗衰老功效之间的相关性,初步探讨何首乌炮制品抗衰老的作用机制.方法:采用超高效液相测定不同何首乌炮制品中6个主要有效成分的含量,色谱柱为ACQUITY UPLC(R)HSS T3 C18色谱柱(100mm×2.1 mm,1.8 μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸水(梯度洗脱),检测波长为280 nm,进样量1μL,流速0.4 mL· min-1,柱温30℃.通过秀丽线虫实验,验证首乌炮制品抗衰老的功效.最后采用灰度关联分析法,得出各有效成分对抗衰老作用的贡献大小.结果:在一定范围内,2,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷、大黄素等6个主要有效成分的进样浓度与峰面积线性关系良好,且具有良好的精密度、稳定性、重复性以及加样回收率.何首乌炮制品中除大黄素、大黄素甲醚外,其他成分所占比例逐渐减少.通过灰度关联分析法得出,何首乌炮制品中6个主要有效成分对抗衰老贡献大小的顺序:大黄素＞大黄素-8-O-β葡萄糖苷＞大黄素甲醚＞儿茶素＞2,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷＞没食子酸.结论:何首乌炮制品抗衰老的功效是内部众多有效成分共同作用的结果,各有效成分与抗衰老作用关联度虽有所不同,但均发挥着相应的作用.