目的:探讨五味子甲素对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:培养人前列腺癌DU145细胞并分为DU145组(正常培养)、五味子甲素L组(加入50 μmol/L五味子甲素)、五味子甲素M组(加入100 μmol/L五味子甲素)、五味子甲素H组(加入150 μmol/L五味子甲素)和辛伐他汀组(加入50 μmol/L辛伐他汀)。显微镜下观察各组细胞形态，CCK8法检测细胞增殖能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blotting法检测磷酸化(p)-哺乳动物STE20样蛋白激酶1(MST1)、MST1、p-大肿瘤抑制因子1(LATS1)、LATS1、p-Yes相关蛋白(YAP)及YAP蛋白表达。计量资料以均数±标准差( ± s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用 t检验。 结果:与DU145组对比，五味子甲素L、M、H组及辛伐他汀组细胞数量减少且细胞逐渐皱缩、间距变大，细胞存活率[(100.00±0.00)%、(88.41±9.36)%、(62.34±7.31)%、(42.57±5.01)%、(45.47±5.65)%]、迁移[(90.11±13.43)%、(74.16±8.08)%、(57.53±7.34)%、(41.34±6.79)%、(43.44±5.26)%]和侵袭能力[(89.01±10.31)%、(73.11±9.23)%、(55.62±7.67)%、(41.13±6.35)%、(40.36±5.68)%]及p-YAP/YAP蛋白表达水平(0.98±0.08、0.83±0.11、0.69±0.07、0.55±0.07、0.53±0.05)显著下降，凋亡率[(2.88±0.34)%、(5.20±0.57)%、(8.37±0.94)%、(12.71±1.58)%、(12.03±2.21)%]和p-MST1/MST1(0.41±0.04、0.53±0.07、0.75±0.07、0.89±0.08、0.88±0.07)、p-LATS1/LATS1蛋白表达水平(0.40±0.04、0.52±0.06、0.64±0.06、0.77±0.08、0.79±0.08)显著提高，差异均具有统计学意义( P<0.05)。 结论:五味子甲素可能通过抑制Hippo-YAP信号通路抑制前列腺癌细胞增殖，促进细胞凋亡。

目的:探讨利胆合剂治疗胆汁淤积性肝纤维化患儿的临床效果。方法:采用前瞻性随机对照研究方法，入选华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院中西医结合科和消化内科2021年1月至12月收治的符合婴儿胆汁淤积性肝纤维化诊断标准的患儿，按照随机数字表法分为常规治疗组和利胆合剂组。常规治疗组按照指南给予常规治疗；利胆合剂组在常规治疗组基础上给予自拟中药复方利胆合剂（组方：茵陈、连翘、熟大黄、制首乌、赤芍、桂枝、枳壳、白术、五味子、鳖甲、甘草）口服、灌肠或鼻饲治疗，每日60 mL，分2~3次给予，共治疗28 d，门诊随访4周。记录两组患者治疗前后血清肝纤维化4项〔Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、透明质酸酶（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、层黏连蛋白（LN）〕、肝功能及胆汁淤积相关标志物〔总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、总胆汁酸（TBA）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GGT）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）〕、氧化应激指标〔超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）〕、瞬时弹性成像（TE）检测肝脏硬度值（LSM）、天冬氨酸转氨酶/血小板比值指数（APRI）以及肝脾回缩时间。结果:观察期间共收治40例胆汁淤积性肝纤维化患儿，其中常规治疗组21例，利胆合剂组19例。两组治疗前血清肝纤维化4项、血清肝功能及胆汁淤积相关标志物、氧化应激指标、LSM及APRI比较差异均无统计学意义。两组治疗后肝纤维化4项、肝功能及胆汁淤积相关标志物、LSM、APRI均较治疗前显著下降，且利胆合剂组上述指标明显低于常规治疗组〔HA（ng/L）：165.81±21.57比203.87±25.88，PCⅢ（μg/L）：69.86±9.32比81.82±7.39，Ⅳ-C（μg/L）：204.14±38.97比239.08±24.93，LN（μg/L）：162.40±17.39比190.86±15.97，TBil（μmol/L）：37.58±27.63比53.06±45.09，DBil（μmol/L）：20.55±19.34比30.08±27.39，ALP（U/L）：436.50±217.58比469.60±291.69，γ-GGT（U/L）：66.78±35.84比87.00±32.82，ALT（U/L）：64.75±50.53比75.20±50.19，AST（U/L）：77.25±54.23比96.80±59.77，TBA（μmol/L）：74.35±44.44比85.45±39.50，LSM（kPa）：5.24±0.39比7.53±3.16，APRI：0.52±0.39比0.98±0.29，均 P<0.05〕。两组治疗后MDA均较治疗前显著下降，SOD和GSH均较治疗前显著升高；其中利胆合剂组SOD明显高于常规治疗组（kU/L：64.56±6.69比51.58±5.98， P<0.05）。此外，利胆合剂组肝脏回缩时间（d：20.13±10.97比24.33±13.46）和脾脏回缩时间（d：25.93±13.01比29.14±14.52）均较常规治疗组明显缩短（均 P<0.05）。 结论:采用利胆合剂中药治疗胆汁淤积性肝纤维化能有效改善患儿的胆汁淤积、肝纤维化、氧化应激指标及临床症状。

目的 探究五子衍宗丸(WZYZP)治疗少弱精子症(OAS)的药效与作用机制.方法 应用环磷酰胺(CTX)诱导的SD大鼠作为OAS的体内模型,通过ig0.5、1.5 g·kg-1 WZYZP探究其治疗OAS大鼠的体内药效与作用机制.通过全自动精子分析系统检测大鼠精子参数;应用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中睾酮的量,通过HE染色法观察给药后OAS大鼠睾丸组织形态学改变.采用网络药理学预测WZYZP治疗OAS的具体靶点.应用酶联免疫吸附法测定大鼠睾丸组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;通过TUNEL染色测定大鼠睾丸组织中细胞凋亡情况;免疫组织化学染色检测睾丸组织白细胞介素17(IL-17)表达情况;Western blotting检测Caspase-3、热休克蛋白90AA1(HSP90AA1)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p-p38和p38的表达水平.使用HPLC检测WZYZP中的主要活性成分并与网络药理学所得靶点进行分子对接模拟以探索其具体机制.结果 体内实验结果表明,WZYZP可显著改善CTX诱导的OAS大鼠精子参数、血清睾酮水平(P＜0.001)和睾丸组织形态学.网络药理学结果表明WZYZP与OAS的关键通路为IL-17,关键靶点为Caspase3、p38、NF-κB、HSP90和ERK1/2.TUNEL染色结果表明,1.5 g·kg-1 WZYZP可显著降低OAS大鼠睾丸组织细胞凋亡(P＜0.05).Western Blotting 结果显示,与模型组相比,1.5 g·kg-1WZYZP 组 Caspase-3(P＜0.001)和HSP90AA1(P＜0.01)的表达水平明显降低,NF-κB(P＜0.05)、ERK1/2(P＜0.05)和p38(P＜0.05)磷酸化水平明显降低.分子对接模拟结果发现,8种主要活性成分(槲皮素、五味子醇甲、金丝桃苷、山柰酚、紫云英苷、五味子甲素、异槲皮素和绿原酸)和IL-17通路5种相关靶点(HSP90AA1、ERK、p38、NF-κB和Caspase3)的结合能均小于-20.92 kJ·mol-1,具有较好的结合亲和力.结论 WZYZP可通过下调IL-17通路减少细胞凋亡发挥治疗OAS作用.

目的 考察参松养心胶囊中巴马汀、小檗碱、五味子甲素、丹参酮ⅡA在大鼠血浆中的药动学过程.方法 大鼠以0.43 g-kg-1药物剂量给予参松养心胶囊灌胃,于不同时间点采血.以卡马西平为内标,建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的巴马汀、小檗碱、五味子甲素、丹参酮ⅡA的血药浓度并计算主要药动学参数.结果 巴马汀、小檗碱、五味子甲素、丹参酮ⅡA在各自浓度范围内与峰面积比值线性关系良好,精密度,准确度,提取回收率,基质效应结果均符合测定要求.并根据PKSolver分别计算出以上4种成分药动学参数tmax、Cmax、t1/2、AUC0～t、AUC0～inf值.结论 所建立的LC-MS/MS分析方法,可灵敏、快速、准确地应用于大鼠血浆中参松养心胶囊的主要活性成分,为参松养心胶囊的临床研究和合理用药提供参考.

细胞焦亡可能是引起桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT)发病的主要原因,而中药可通过调节细胞焦亡通路降低细胞损伤、抑制免疫反应和抗氧化应激,从而发挥对甲状腺细胞的保护作用.槲皮素、木犀草素、连翘提取物、五味子素B等为治疗HT的有效中药成分,能够通过多种机制延缓细胞焦亡的进程,部分成分还可减轻由焦亡引发的免疫激活、免疫失衡和氧化应激.此外,中药复方以其多靶点、协同增效、整体调理等优点广泛用于HT的治疗.但现有研究主要聚焦于单一机制,忽略了整体分析与药物制备及临床应用标准的优化,因此将实验和临床实践结合,全面探讨中药在HT防治中的作用机制和临床应用对于深化其治疗潜力至关重要.

目的:比较二色五味子与南、北五味子的抗炎活性,探讨二色五味子作为中药五味子候补资源的可行性.方法:通过角叉菜胶致小鼠足肿胀实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加实验探究三种五味子的抗炎活性.结果:在三种急性小鼠炎症模型中,三种五味子均可减轻小鼠的足肿胀及耳肿胀度,降低腹腔毛细血管通透性增加及炎症部位肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平.超高效液相色谱(UPLC)分析显示,南、北及二色五味子醇提物均含有五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素.结论:二色五味子与南、北五味子均具有抗炎作用,且二色五味子与南五味子抗炎活性相似.

目的:建立护肝解毒汤标准煎液的指纹图谱及多指标成分含量测定方法,为其标准煎液及制剂的质量评价研究提供参考.方法:采用HPLC法结合中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对15批护肝解毒汤标准煎液进行指纹图谱、相似度分析及共有峰的指认,并建立煎液中5种指标性成分的同时检测方法,计算各成分的转移率.结果:15批标准煎液指纹图谱相似度＞0.90,有22个共有峰,对照品比对出绿原酸、葛根素、芍药苷、甘草素、落新妇苷、黄藤苷、盐酸小檗碱、五味子醇甲、黄柏酮、梣酮10个成分,15批标准煎液中绿原酸、葛根素、落新妇苷、盐酸小檗碱、五味子醇甲的转移率分别为48.26％～63.80％、20.30％～31.50％、28.24％～39.11％、2.89％～5.60％、13.51％～21.85％.结论:采用指纹图谱、出膏率及指标性成分含量测定相结合的模式,对护肝解毒汤标准煎液的量值传递过程进行分析,可初步拟定护肝解毒汤标准煎液的质量标准,为其后续新药开发及相关制剂的质量控制提供依据.

目的 鉴定九味肝泰胶囊的化学成分,同时测定制剂中 10 种指标成分的含量.方法 查阅TCMSP、ChemSpider、中国知网、PubMed等数据库中的相关文献,收集制剂的核心化学成分 181 个,采用Agilent"formula-database generator"软件建立化学成分数据库,采用高效液相色谱-飞行时间质谱联用法鉴定制剂的化学成分;采用超高效液相色谱串联质谱法测定制剂中 10种指标成分的含量.结果 共鉴定出 45种化学成分.姜黄素在 1～50 ng/mL,大黄酚、大黄素、吉马酮、五味子醇甲、五味子甲素在 200～10000 ng/mL,尿囊素、黄芩苷、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1 在 1 000～50 000 ng/mL质量浓度范围内与待测成分和内标峰面积比值线性关系良好(r均大于 0.999 0),定量限分别为 0.05,10,0.5,10,0.05,0.05,0.05,0.5,0.5,10 ng/mL,检测限分别为 0.01,1,0.25,1,0.01,0.01,0.01,0.1,0.1,1 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于 5.0%;平均加样回收率为 98.13%～102.64%,RSD为 0.54%～4.10%(n=6).结论 该方法快速简便,可用于九味肝泰胶囊的化学成分鉴定和指标成分含量测定.

目的 分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法.方法 采用Welch Ultimate XB-C18色谱柱(2.1 mm × 50 mm,5 μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40 ℃,梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测离子扫描模式(MRM).分别对该药对单煎液、单煎合并液与合煎液中主要指标成分酸枣仁皂苷A、斯皮诺素、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、芦丁、槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-云香糖苷进行含量测定,并分析药对配伍前后主要指标成分的含量变化差异.结果 以上10种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系;精密度、重复性和稳定性RSD均良好;平均加样回收率在95.0％～102.1％,RSD为0.03％～3.7％.本次实验结果与前期试验认为酸枣仁与五味子在合煎后,主要指标成分降低保持一致性.结论 多指标成分同时测定为该药对配伍质量全面控制提供新的方法并为其药效物质基础的深入研究提供依据.

依据感咳颗粒在大鼠体内的入血成分研究基础,结合网络药理学、分子对接和动物实验验证探究感咳颗粒干预急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的潜在作用机制.将感咳颗粒的大鼠入血成分导入SwissTargetPrediction平台预测药物靶点,从疾病数据库收集ALI相关靶点,取交集并构建蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络筛选核心靶点,随后进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Gnomes,KEGG)通路富集分析.构建"入血成分-靶点-通路-疾病"网络,根据其拓扑参数筛选感咳颗粒干预疾病的核心成分.借助分子对接预测核心成分与关键靶点的结合能力.通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的ALI小鼠模型验证感咳颗粒干预急性肺损伤的关键靶点.PPI拓扑参数分析得到与ALI有关的STAT3、SRC、HSP90AA1、MAPK3、HRAS、MAPK1前6个关键靶点.GO功能分析可知主要与ERK1和ERK2级联、炎症反应、对脂多糖反应等有关;KEGG分析结果显示,主要富集通路显示为MAPK、中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap,NET)形成等.根据"入血成分-靶点-通路-疾病"网络拓扑参数分析筛选出前6个核心成分(五味子酯乙、五味子醇甲、五味子醇乙、哈巴俄苷、异鸢尾黄素、颈花胺).分子对接结果显示6个核心成分和该颗粒含量最高的射干苷与MAPK3、SRC、MAPK1、STAT3关键靶点具有较高的亲和力.体内实验结果表明,与模型组相比,感咳颗粒能有效缓解LPS诱导的小鼠肺组织病理损伤,抑制炎性浸润,降低支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总蛋白含量、一氧化氮(nitric oxide,NO)与髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)水平,以及肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素 γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、血管内皮细胞生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)以及趋化因子(C-X-C 基序)配体 1[chemokine(C-X-C motif)ligand 1,CXCL1]含量,显著下调肺组织中淋巴细胞抗原 6G(lymphocyte antigen 6G,Ly6G)、瓜氨酸化组蛋白 3(citrullinated histones 3,Cit-H3)表达水平及 SRC、ERK1/2、STAT3磷酸化蛋白表达水平.综上,感咳颗粒可有效抑制LPS诱导的急性肺损伤炎症反应,保护肺组织,调节炎性因子释放,抑制中性粒细胞浸润及NET形成,作用机制可能与抑制SRC/ERK1/2/STAT3信号通路激活有关.