目的:探讨冬凌草甲素(Ori)调节Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路对骨质疏松(OP)大鼠成骨细胞凋亡的影响.方法:随机选取10只大鼠为假手术组仅分离但不切除卵巢,其余大鼠通过切除双侧卵巢建立OP模型,将造模成功的大鼠随机分为OP组、不同剂量Ori(5mg/kg Ori、10mg/kg Ori、20mg/kg Ori)组、20mg/kg Ori+Hippo/YAP 激活剂-Verteporfin(10mg/kg)组.干预后,收集腹主动脉血液,ELISA检测血清中骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)水平;分离股骨组织,双能X射线骨密度仪检测股骨矿含量、骨密度;HE检测股骨组织形态学变化;TUNEL检测成骨细胞凋亡变化;Western blot检测YAP、转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)蛋白表达.结果:假手术组大鼠股骨结构变化不明显,与假手术组相比,OP组股骨组织形态发生明 显改变,BGP、ALP水平、股骨组织矿含量、骨 密度、YAP、TAZ蛋白表达显著降低(P＜0.05),成骨细胞凋亡率显著增加(P＜0.05);与OP组相比,5mg/kg Ori组、10mg/kg Ori组、20mg/kg Ori组股骨组织形态得到改善,BGP、ALP水平、股骨组织矿含量、骨密度、YAP、TAZ蛋白表达显著增加(P＜0.05),成骨细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),不同剂量Ori间具有统计差异(P＜0.05);与20mg/kg Ori组相比,20mg/kg Ori+V erteporfin组股骨组织形态变化加重,BGP、ALP水平、股骨组织矿含量、骨密度、YAP、TAZ蛋白表达显著降低(P＜0.05),成骨细胞凋亡率显著增加(P＜0.05).结论:Ori调节Hippo/YAP信号通路减少OP大鼠成骨细胞凋亡,减轻OP大鼠症状.

目的 初步探讨汉黄芩素(Wogonin,Wog)调节河马(Hippo)/Yes-相关蛋白(Yes associated protein,YAP)信号通路对肝硬化大鼠肝纤维化的影响.方法 将大鼠分为空白对照组(腹腔注射等量生理盐水+灌胃等量生理盐水)、模型组(腹腔注射等量生理盐水+灌胃等量生理盐水)、阳性对照组(0.8 g/kg复方鳖甲软肝片溶液灌胃)和Wog低、中、高剂量组(7、14、28 mg/kg Wog腹腔注射),每组 12只.除空白对照组外,其余各组腹腔注射四氯化碳溶液构建肝硬化模型.所有大鼠造模后给药干预,连续4周.检测大鼠血清肝功能指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,AST)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,ALT);ELISA法检测血清纤维化指标Ⅲ型前胶原(typeⅢprocollagen,PCⅢ)、透明质酸(hyaluronic acid hyaluronan,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN);HE、Masson及免疫组织化学染色法观察肝硬化大鼠肝纤维化程度;Ishak评分判断肝组织纤维化程度,分析胶原体积分数(collagen volume fraction,CVF)及Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(collagen-Ⅲ,COL-Ⅲ)阳性表达;Western blot检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Hippo/YAP信号通路蛋白表达水平.结果 与空白对照组比较,模型组AST、ALT、PCⅢ、HA、LN、Ishak评分、CVF、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1表达升高(P<0.05),p-大肿瘤抑制因子 1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)/LATS1、p-YAP/YAP表达降低(P<0.05);与模型组比较,Wog低、中、高剂量组及阳性对照组AST、ALT、PCⅢ、HA、LN、Ishak评分、CVF、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1表达降低(P<0.05),p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP表达升高(P<0.05).Wog各剂量组AST、ALT、PCⅢ、HA、LN、Ishak评分、CVF、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1水平均随剂量升高而降低(P<0.05);p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP水平随剂量升高而升高(P<0.05).结论 Wog可能通过抑制Hippo/YAP信号通路的激活,改善肝硬化大鼠肝纤维化.

目的:分析结直肠癌患者循环微小RNA(miR-375)和组织Yes相关蛋白1(YAP1)表达的相关性，探讨两者与临床病理特征的关系。方法:以嘉兴学院附属第二医院2016年6月至2017年12月收治的87例结直肠癌患者[男45例，女42例，年龄(64.5±11.4)岁]为研究对象，以80例健康志愿者为对照，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验测定外周血miR-375表达水平，采用免疫组织化学实验测定结直肠癌病理组织和癌旁健康组织YAP1表达水平，分析两项指标与临床病理特征及预后的关系，进一步根据miR-375和YAP1的表达情况将研究组分为低miR-375且高YAP1组(A组， n＝21)，中间组(B组， n＝32，包含低miR-375且低YAP1，高YAP1且高miR-375两种情况)，高miR-375且低YAP1组(C组， n＝34)，分析两项指标与患者预后的关系。应用SPSS 22.0统计软件分析。 结果:结直肠癌患者循环miR-375表达水平为0.132±0.085，低于对照组(0.521±0.186)，癌组织YAP1表达水平为2.201±0.856，明显高于癌旁健康组织(0.814±0.262)，差异有统计学意义( t＝51.826、51.175， P<0.05)。miR-375表达和YAP1表达之间呈负相关( r＝－0.691， P<0.05)，双荧光素酶实验报告证实两者具有相互作用，差异有统计学意义( t＝9.564， P<0.05)。miR-375和YAP1表达与Dukes分期明显相关，C期患者miR-375表达低于A和B期，YAP1表达高于A和B期，差异有统计学意义( F＝4.347、3.724， P<0.05)。miR-375联合YAP1检查有助于预测结直肠癌复发/转移和死亡(AUC＝0.739、0.699， P<0.05)，差异有统计学意义，其中低miR-375且高YAP1者中位生存期最短，高miR-375且低YAP1者中位生存期最长，组间差异有统计学意义( χ2＝4.685， P<0.05)。 结论:miR-375和YAP1存在交互作用，两者共同参与结直肠癌的发生与发展。

目前，在临床中仅应用自体骨已不能满足骨缺损治疗的需求。β-磷酸三钙（beta-tricalcium phosphate，β-TCP）类骨移植替代物因具有良好的修复效果和一定的骨诱导能力而受到广泛关注。可降解β-TCP植入人体后可有效调控炎症，促进血管再生，并以膜内成骨的方式形成新骨，实现骨缺损的愈合。对β-TCP诱导间质干细胞分化为成骨细胞机制的探索也从未停止，最初将骨诱导性归功于被释放钙磷离子和被吸附蛋白的功能，最近的研究热点是材料表面结构对细胞的影响（即整合素与细胞骨架被改变），以及调节信号通路的传导，包括丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK/extracellular regulated protein kinases，ERK）通路、WNT家族分泌蛋白通路、Hippo-Yes相关蛋白/转录共激活因子（Yes-associated protein，YAP/transcriptional coactivator with PDZ-binding motif，TAZ）通路等。目前，β-TCP产品的基础结构日趋成熟，宏观与微观设计也被不断创新，相关骨移植替代物广泛用于临床，经临床研究证实具有长期的安全性和有效性。

目的:探讨G蛋白耦联受体30(GPR30)与Hippo-Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路在甲状腺乳头状癌发生、发展中的影响。方法:收集福建医科大学附属第二医院2019年9月至2020年4月之间40例甲状腺乳头状癌及癌旁组织标本，分析GPR30、YAP、TAZ mRNA及蛋白表达，并分析三者mRNA表达量与甲状腺乳头状癌病理资料之间的关系。采用GPR30特异性激动剂G1及抑制剂G15处理人甲状腺乳头状癌细胞系(TPC-1)，分析GPR30、YAP、TAZ表达变化。采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪等检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡，细胞衰老的检测应用β-半乳糖苷酶染色法，细胞迁移侵袭采用Transwell实验。采用配对 t检验分析各组数据差异。用 t检验评估GPR30、YAP、TAZ表达与具体病理资料之间的关系。用皮尔森(Person)相关分析评估GPR30表达量与YAP、TAZ表达量的关系。 结果:40例甲状腺乳头状癌组织中GPR30、YAP、TAZ的表达在转录及翻译水平均明显高于癌旁组织(癌与癌旁mRNA相对表达量分别为3.438±0.123比2.463±0.747， t＝7.786， P<0.01；3.325±0.111比2.638±0.541， t＝8.285， P<0.01；2.581±0.089比2.041±0.418， t＝8.068， P<0.01；癌及癌旁蛋白相对表达量分别为1.838±0.074比1.172±0.211， t＝13.333， P<0.01、1.735±0.152比1.200±0.321， t＝7.641， P<0.01、2.265±0.024比1.310±0.301， t＝13.915， P<0.01)，差异均有统计学意义。GPR30的mRNA表达与淋巴结转移(3.519±0.094比3.328±0.096， t＝3.786， P<0.01)和肿瘤大小(<2 cm为3.424±0.116，≥2 cm为3.600±0.099， t＝2.553， P<0.05)明显相关，与年龄、性别、腺外侵犯、病灶数量无明显相关。YAP、TAZmRNA表达与淋巴结转移(3.395±0.105比3.283±0.093， t＝3.519， P<0.01；2.627±0.117比2.554±0.053， t＝2.686， P<0.05)明显相关，与年龄、性别、肿瘤大小、腺外侵犯、病灶数量无明显相关。GPR30特异性激动剂G1处理TPC-1细胞后，GPR30 mRNA表达量高于对照组(1.224±0.067比0.976±0.048， t＝5.212， P<0.01)，YAP、TAZ表达量高于对照组(分别为1.359±0.096比0.995±0.004， t＝6.562， P<0.01；1.311±0.024比0.985±0.066， t＝8.040， P<0.01)，促进细胞的增殖(0.381±0.002、0.523±0.003、0.754±0.004比0.359±0.004、0.476±0.003、0.665±0.003， t＝8.521、19.190、30.830， P<0.01)、侵袭(422.33±7.23比210.00±3.61， t＝45.510， P<0.01)、迁移(550.67±10.69比229.67±8.33， t＝41.030， P<0.01)，抑制细胞的衰老(0.052±0.001比0.094±0.001， t＝51.440， P<0.01)、凋亡[(1.8±0.2)%比(5.8±0.3)%， t＝19.220， P<0.01]，差异均有统计学意义。 结论:GPR30、YAP、TAZ的的高表达可能与甲状腺乳头状癌淋巴结转移以及预后相关，GPR30可能通过Hippo-TAZ/YAP通路促进甲状腺乳头状癌的发生、发展。

目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌多药耐药(MDR)中的作用及机制。方法:采用24孔板体外培养胃癌MGC-803细胞株，设空白对照组、MDR组、空载质粒组、lncRNA ZNRD1-AS1过表达组、微小核糖核酸-375模拟物(miR-375 mimic)组及联合干预组。除空白对照组以外，均采用阿霉素梯度浓度法建立MDR株。建立成功以后，lncRNA ZNRD1-AS1过表达组和miR-375 mimic组分别采用慢病毒转染法转染lncRNA ZNRD1-AS1过表达质粒和miR-375 mimic，空载质粒组转染空载质粒与模拟物对照(mimic NC)。共培养48 h，采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA ZNRD1-AS1和miR-375表达，采用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测Yes相关蛋白1(YAP1)、哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)、大肿瘤抑制基因-1(Lats1)的蛋白表达，采用噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞实验检测细胞的增殖活力与凋亡率，Transwell实验检测MGC-803细胞侵袭能力。结果:各组之间的lncRNA ZNRD1-AS1、miR-375、YAP1表达水平差异均有统计学意义( F＝60.465、75.695、63.441，均 P<0.05)；细胞增殖活力、凋亡率与侵袭数目差异也有统计学意义( F＝ 26.818、63.854、16.323，均 P<0.05)。MDR组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为1.736±0.084和0.825±0.135，高于对照组(1.025±0.036和0.155±0.02)，miR-375表达为0.054±0.018，低于对照组(0.128±0.028)；细胞增殖活力和迁移数目分别为0.855±0.026和152.5±20.5，高于对照组(0.652±0.015和85.0±15.5)，凋亡率为(3.85±1.02)%，低于对照组[(6.55±1.05)%， P<0.05]。lncRNA ZNRD1-AS1过表达组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为6.582±1.035和1.256±0.185，均高于MDR组，miR-375表达水平为0.015±0.011，低于MDR组；细胞增殖活力和迁移数目分别为0.987±0.030和(202.5±32.5)个，高于MDR组，凋亡率为(2.03±0.62)%，低于MDRMDR组( P<0.05)。miR-375 mimic组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为0.225±0.086和0.056±0.035，均低于MDR组，miR-375表达水平为32.524±5.254，高于MDR组；细胞增殖活力和迁移能力为0.562±0.085和(80.5±14.6)个，低于MDR组，凋亡率为(18.25±2.10)%，高于MDR组( P<0.05)。共干预组各个指标的变化水平介于lncRNA ZNRD1-AS1过表达组与miR-375 mimic组之间，与两组比较差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:lncRNA ZNRD1-AS1能够通过miR-375调节胃癌细胞的行为学特征，从而促进MDR，其机制可能与YAP1介导的Hippo信号通路有关。

目的:探究和厚朴酚对CNE1鼻咽癌细胞周期和凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度的和厚朴酚处理CNE1细胞，噻唑蓝（methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide，MTT）法测定细胞的活性；将CNE1细胞分为空白对照组，10、20、40 μmol/L和厚朴酚处理组和10 μg/ml顺铂组。流式细胞术检测细胞周期分布，线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞线粒体膜电位，原位末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling，TUNEL）法检测细胞凋亡，免疫印迹检测细胞中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）和细胞周期蛋白D1（G 1/S specific cyclin D1，cyclin D1）蛋白表达；体外培养CNE1细胞，和厚朴酚处理后进行转录组测序，实时荧光定量反转录聚合酶链反应（quantitative reverse transcription polymerase chain reaction，RT-qPCR）检测Yes激酶相关蛋白（yes-associated protein delta，YAP）mRNA表达，免疫印迹检测磷酸化YAP蛋白（phospho-YAP，p-YAP）以及细胞核中YAP蛋白表达水平，免疫荧光检测YAP蛋白核分布；将细胞分为对照组、哺乳动物STE20样激酶1/2（mammalian STE20-like kinase 1/2 inhibitor，MST1/2）抑制剂（XMU-MP-1）组、和厚朴酚组、XMU-MP-1+和厚朴酚组，利用免疫印迹、流式细胞术和TUNEL法观察Hippo通路在和厚朴酚影响CNE1细胞周期与凋亡中的作用。采用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析。 结果:与对照组比较，和厚朴酚处理组CNE1细胞活力、线粒体膜电位、PCNA与cyclin D1蛋白表达水平显著降低（ P值均<0.05），G 0/G 1期细胞比例和TUNEL阳性细胞率显著增加（ P值均<0.05）。转录组分析结果发现，差异基因主要富集在Wnt信号通路、肿瘤坏死因子通路和Hippo信号通路等。和厚朴酚处理后，细胞中YAP mRNA表达和细胞核中YAP蛋白表达水平降低，p-YAP蛋白水平升高，较对照组差异有统计学意义（ P值均<0.05）。与和厚朴酚组比较，XMU-MP-1+和厚朴酚组细胞中的p-YAP蛋白表达水平降低（1.157±0.076比0.479±0.038， t=37.120， P<0.05），细胞核中YAP的蛋白表达水平升高（0.143±0.012比0.425±0.031， t=29.181， P<0.05），G 0/G 1期细胞比例降低［（72.494±3.309）%比（58.747±2.865）%， t=17.265， P<0.05］、细胞凋亡水平减少［（53.158±3.376）%比（29.621±2.713）%， t=28.584， P<0.05］。 结论:和厚朴酚能够引起CNE1鼻咽癌细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡，这可能是通过调控Hippo/YAP信号通路来实现的。

目的:探讨紫草素在大鼠肝移植缺血再灌注损伤的作用机制。方法:采用随机数字表法将36只健康雄性SD大鼠随机分为4组：对照组(CTRL)、假手术组(SH)、肝移植组(LT)、紫草素组(SKLT)。CTRL和SH每组6只大鼠，LT和SKLT供、受体各6只大鼠。采用二袖套法建立大鼠原位肝移植模型，SKLT术后给予紫草素15 mg/kg灌胃。于术后24 h获取大鼠血清和肝脏组织。免疫组织化学法检测肝脏组织中B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测肝脏组织中大肿瘤抑制因子1(LATS1)、丝氨酸苏氨酸激酶3(MST1)和Yes相关蛋白(YAP)的蛋白表达。组间比较采用独立样本 t检验。 结果:免疫组织化学显示，SKLT的bax和Caspase-3阳性面积比例显著低于LT组(bax：0.061±0.002比0.084±0.005， t＝11.470， P<0.05；Caspase-3：0.148±0.008比0.210±0.029， t＝7.328， P<0.05)，而bcl-2阳性面积比例显著高于LT组(0.127±0.036比0.069±0.014， t＝3.752， P<0.05)。Western blot结果显示，SKLT的LATS1和MST1蛋白的表达显著高于LT组(LATS1：1.56±0.14比1.11±0.30， t＝5.715， P<0.05；MST1：1.80±0.38比1.32±0.31， t＝4.190， P<0.05)，而YAP蛋白的表达显著低于LT组(1.42±0.10比1.80±0.07， t＝11.580， P<0.05)。 结论:紫草素可能通过激活Hippo信号通路来减少大鼠肝移植缺血再灌注损伤中的肝细胞凋亡。

目的:通过观察红藤方对子宫腺肌症（ADS）小鼠子宫组织上皮细胞间充质转化（EMT）、成纤维细胞向肌成纤维细胞转化（FMT）及Hippo通路中关键蛋白的影响，探讨红藤方抑制ADS纤维化的作用机制。方法:将小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、红藤方组、维替泊芬组，每组8只。小鼠出生当日为第0天，从第1天开始，模型组、红藤方组、维替泊芬组小鼠灌胃1 mg/kg他莫昔芬溶剂，连续给药 5 d。造模后第42天，经HE染色验证造模成功。第43天开始，红藤方组小鼠每日灌胃红藤方水煎液16.5 g/kg，每3日腹腔注射0.9%NaCl溶液（100 μl/10 g）；维替泊芬组小鼠每3日腹腔注射维替泊芬溶液100 mg/kg，同时每日灌胃蒸馏水100 μl/10 g；空白组及模型组小鼠每日灌胃等体积蒸馏水及每3日腹腔注射等体积0.9%NaCl溶液，共给药60 d。采用Masson染色法评估各组小鼠子宫组织纤维化程度；采用免疫组化染色及Western blot法检测各组小鼠子宫组织中E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Yes相关蛋白（YAP）、锌指转录因子（Snail）表达情况。结果:与模型组比较，红藤方组Masson染色蓝染面积与总染色面积比值降低（ P<0.05）；免疫组化和Western blot检测显示，与模型组比较，红藤方组小鼠子宫组织E-cadherin表达升高（ P<0.05），Vimentin、α-SMA、YAP表达降低（ P<0.01或 P<0.05）。 结论:红藤方可抑制ADS发生EMT、FMT，从而抑制纤维化，其作用机制与调控Hipoo/YAP通路相关。

目的:探讨五味子甲素对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:培养人前列腺癌DU145细胞并分为DU145组(正常培养)、五味子甲素L组(加入50 μmol/L五味子甲素)、五味子甲素M组(加入100 μmol/L五味子甲素)、五味子甲素H组(加入150 μmol/L五味子甲素)和辛伐他汀组(加入50 μmol/L辛伐他汀)。显微镜下观察各组细胞形态，CCK8法检测细胞增殖能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blotting法检测磷酸化(p)-哺乳动物STE20样蛋白激酶1(MST1)、MST1、p-大肿瘤抑制因子1(LATS1)、LATS1、p-Yes相关蛋白(YAP)及YAP蛋白表达。计量资料以均数±标准差( ± s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用 t检验。 结果:与DU145组对比，五味子甲素L、M、H组及辛伐他汀组细胞数量减少且细胞逐渐皱缩、间距变大，细胞存活率[(100.00±0.00)%、(88.41±9.36)%、(62.34±7.31)%、(42.57±5.01)%、(45.47±5.65)%]、迁移[(90.11±13.43)%、(74.16±8.08)%、(57.53±7.34)%、(41.34±6.79)%、(43.44±5.26)%]和侵袭能力[(89.01±10.31)%、(73.11±9.23)%、(55.62±7.67)%、(41.13±6.35)%、(40.36±5.68)%]及p-YAP/YAP蛋白表达水平(0.98±0.08、0.83±0.11、0.69±0.07、0.55±0.07、0.53±0.05)显著下降，凋亡率[(2.88±0.34)%、(5.20±0.57)%、(8.37±0.94)%、(12.71±1.58)%、(12.03±2.21)%]和p-MST1/MST1(0.41±0.04、0.53±0.07、0.75±0.07、0.89±0.08、0.88±0.07)、p-LATS1/LATS1蛋白表达水平(0.40±0.04、0.52±0.06、0.64±0.06、0.77±0.08、0.79±0.08)显著提高，差异均具有统计学意义( P<0.05)。 结论:五味子甲素可能通过抑制Hippo-YAP信号通路抑制前列腺癌细胞增殖，促进细胞凋亡。