目的:分析比较重症监护病房(intensive care unit, ICU)内人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染与非HIV感染免疫抑制肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia, PCP)合并急性呼吸衰竭(acute respiratory failure, ARF)患者的临床特点及预后影响因素。方法:收集2018年5月至2020年10月收治于郑州大学第一附属医院和郑州市第六人民医院ICU的PCP合并ARF患者的临床资料，分为HIV感染PCP组和非HIV感染免疫抑制PCP组。分析两组患者的一般特点、基础疾病等资料，并比较两组患者的实验室检查、治疗和预后等情况。统计学分析采用独立样本 t检验、曼-惠特尼 U检验和 χ2检验，预后危险因素分析采用单因素和多因素logistic回归。 结果:129例PCP合并ARF患者中，HIV感染者75例，非HIV感染免疫抑制者54例。HIV感染PCP组仅10.7%(8/75)的患者既往接受抗反转录病毒治疗，两组患者均未行PCP预防用药。HIV感染PCP组患者入ICU的急性生理学和慢性健康状况评价(acute physiology and chronic health evaluation，APACHE)Ⅱ评分为(18.7±6.0)分，高于非HIV感染免疫抑制PCP组的(13.1±4.4)分，差异有统计学意义( t＝－5.45， P<0.001)；两组患者均存在明显低蛋白血症。HIV感染PCP组96.0%(72/75)的患者CD4 ＋T淋巴细胞计数<200/μL，84.0%(63/75)的患者CD4 ＋T淋巴细胞计数<50/μL；非HIV感染免疫抑制PCP患者中CD4 ＋T淋巴细胞计数<200/μL的占比为57.4%(31/54)。HIV感染PCP组的CD4 ＋/CD8 ＋T淋巴细胞比值为0.05(0.02，0.12)，低于非HIV感染免疫抑制PCP组的0.96(0.64，1.44)，差异有统计学意义( Z＝－9.16， P<0.001)。非HIV感染免疫抑制PCP患者在ICU的时间和住院时间分别为10.0(7.0，14.0) d和18.0(11.8，32.5) d，分别长于HIV感染PCP患者的7.0(4.0，9.0) d和13.0(7.0，23.0) d，差异均有统计学意义( Z＝－3.58、－2.73，均 P<0.050)；HIV感染PCP组的病死率为57.3%(43/75)，高于非HIV感染免疫抑制PCP组的38.9%(21/54)，差异有统计学意义( χ2＝4.27， P＝0.039)。多因素logistic回归分析显示，乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)、C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和APACHEⅡ评分是HIV感染PCP患者不良预后的危险因素[比值比(odds ratio， OR)＝1.006、1.015、1.736，均 P<0.050]，氧合指数、LDH和CD4 ＋T淋巴细胞计数是影响非HIV感染免疫抑制PCP患者预后的独立危险因素( OR＝0.970、1.008、0.989，均 P<0.050)。 结论:PCP患者合并ARF后病情重，病死率高。LDH、CRP和APACHEⅡ评分为HIV感染PCP患者不良预后的危险因素，而氧合指数、LDH和CD4 ＋T淋巴细胞计数为影响非HIV感染免疫抑制PCP患者预后的危险因素。

目的:研究白细胞介素-22（IL-22）在牙周炎症环境下对牙龈上皮屏障的调控作用及其可能机制。方法:构建IL-22敲除小鼠，采用混合菌液口腔灌洗法构建牙周炎模型。收集同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠（每组7只）口腔菌斑并提取DNA，建立牙周炎相关风险微生物数据库“PD-RiskMicroDB”并结合16S rRNA测序结果，测定两组小鼠口腔菌群变化和微生物功能的关系。通过改良胰酶消化法培养牙龈上皮细胞（GEC），以100 μg/L IL-22、感染复数为100的牙龈卟啉单胞菌（Pg）分别或联合刺激GEC，实验分组为：对照组（细胞未加刺激）、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组，处理时间为3和12 h；采用细胞免疫荧光、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）及蛋白质印迹法检测各组细胞3 h后上皮屏障蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达；通过异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITC-D）介导的上皮细胞通透性实验明确各组GEC 3和12 h细胞通透性的变化。RT-qPCR检测同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin表达水平。将15只C57BL/6野生型小鼠按随机数字表法随机分为对照组、牙周炎组和牙周炎+IL-22处理组，每组5只。RT-qPCR及免疫组织化学（IHC）染色法检测各组小鼠牙龈上皮E-cadherin的表达水平。结果:16S rRNA测序结果显示，与同窝生野生型牙周炎组小鼠相比，IL-22敲除牙周炎组小鼠口腔菌群组成发生改变，其中与牙周组织侵袭相关的菌属丰度显著增高（线性判别分析得分为2.22， P=0.009）。体外细胞实验显示，Pg感染GEC 3 h后，Pg组GEC的细胞连接中断，Pg组E-cadherin荧光强度较对照组减弱，E-cadherin的mRNA（0.69±0.12）和蛋白（0.60±0.12）表达水平均显著低于对照组（分别为1.00±0.00、1.04±0.08）（ P=0.043， P=0.003）；而Pg+IL-22组的E-cadherin荧光强度较Pg组稍增强，Pg+IL-22组E-cadherin的mRNA（1.16±0.10）和蛋白（0.98±0.07）表达水平均显著高于Pg组（分别为0.69±0.12、0.60±0.12）（ P=0.005， P=0.007）；上皮通透性实验结果显示，Pg处理GEC 3 h后，对照组、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组各组间总体比较上皮屏障通透性差异无统计学意义（ F=0.20， P=0.893）；处理12 h后，相较于对照组（1.00±0.00），Pg组GEC上皮屏障通透性（1.39±0.15）显著增加（ P=0.027），而Pg+IL-22组上皮屏障通透性（1.02±0.18）显著低于Pg组（ P=0.034）；体内RT-qPCR结果显示，IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin的mRNA表达水平（0.32±0.21）显著低于同窝生野生型牙周炎组（1.01±0.01）（ t=5.70， P=0.005）。RT-qPCR及IHC染色结果显示，牙周炎组小鼠牙龈上皮组织E-cadherin的mRNA表达水平（0.40±0.07）和E-cadherin阳性表达吸光度值（0.02±0.00）均显著低于对照组（分别为1.00±0.00、0.04±0.01）（ P=0.005， P=0.006）；牙周炎+ IL-22处理组E-cadherin的mRNA表达水平（1.06±0.24）和E-cadherin阳性表达吸光度值（0.03±0.01）均显著高于牙周炎组（ P=0.003， P=0.039）。 结论:IL-22可能通过调节口腔菌群的侵袭性以及宿主屏障蛋白表达，发挥其对炎症环境下牙龈上皮屏障的保护作用。

目的:探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells，hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)途径抑制CD4 ＋IFN-γ ＋T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病(graft versus-host disease，GVHD)小鼠肝损伤的作用机制。 方法:流式细胞术分析GVHD小鼠外周血和肝组织中Th1细胞对TNF-α的表达以及CD4 ＋IFN-γ ＋TNF-α ＋T(TNF-α ＋Th1)细胞上PD-1的表达水平。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色、马松(Masson)染色和免疫荧光染色观察各组GVHD小鼠肝组织病理变化，并进一步用HE染色观察各组GVHD小鼠皮肤和肺组织病理变化。体外建立非条件性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)向Th1细胞诱导方案，检测TNF-α ＋Th1细胞比例以及其Nrf2和磷酸化细胞核内核因子-κB(phosphorylated nuclear factor-kappa B，p-NF-κB)的平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)。 结果:与正常对照组相比，GVHD发病高峰组小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞比例和TNF-α ＋Th1细胞对PD-1的表达明显升高( P<0.01)；hPMSCs干预可降低小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞比例( P<0.001)，促进小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞对PD-1的表达( P<0.01， P<0.001)，然而shCD73对小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞的干预效果明显减弱( P<0.05， P<0.01)。肝组织病理学分析结果显示，肝脏中TNF-α ＋Th1细胞比例分别与Suzuki′s评分、胶原面积和α-SMA的MFI呈正相关( P<0.001)。同样，皮肤和肺组织病理学分析结果也显示，外周血中TNF-α ＋Th1细胞比例分别与皮肤的Cetkovic-Cvrlje评分和肺的Qiao Shukai评分呈正相关( P<0.001)。PBMCs活化实验也显示hPMSCs能下调TNF-α ＋Th1细胞比例( P<0.01)，上调TNF-α ＋Th1细胞对PD-1的表达( P<0.05)；进一步分析发现hPMSCs可增强TNF-α ＋Th1细胞中Nrf2的MFI( P<0.05)，减弱p-NF-κB的MFI( P<0.01)。 结论:hPMSCs可能通过CD73/Nrf2途径上调PD1的表达，抑制TNF-α ＋Th1细胞形成，进而减轻GVHD小鼠肝损伤。

目的:探讨血清1，3-β-D-葡聚糖(BDG)在非人类免疫缺陷病毒(HIV)感染合并肺孢子菌肺炎(PCP)患者中的诊断价值。方法:本研究为病例对照研究。采用非随机抽样方法，分析北京协和医院2015年1月至2019年12月收治的非HIV感染免疫功能低下合并肺炎患者的临床资料，根据支气管肺泡灌洗液肺孢子菌聚合酶链反应(PCR)结果将其分为肺孢子菌PCR阳性组和肺孢子菌PCR阴性组，对其血清BDG结果进行统计分析。结果:共纳入非HIV感染免疫功能低下合并肺炎患者132例，其中肺孢子菌PCR阳性37例，肺孢子菌PCR阴性95例，肺孢子菌PCR阳性组的BDG水平高于肺孢子菌PCR阴性组[377.4(174.0，913.2) ng/L比28.3(14.6，74.3) ng/L， Z＝7.73， P<0.001]，BDG诊断非HIV感染者合并PCP的受试者工作特征曲线的曲线下面积为0.933，以BDG的诊断临界值为95 ng/L时，其敏感度为86.5%，特异度为86.3%，阳性预测值为71.1%，阴性预测值为94.3%。恶性肿瘤患者中，其敏感度为88.9%，特异度为93.1%，阳性预测值为80.0%，阴性预测值为96.4%。 结论:血清BDG在非HIV感染免疫功能低下(尤其是恶性肿瘤)合并PCP患者中具有一定的辅助诊断和较高的排除诊断价值。

目的:探讨幽门螺杆菌代谢物拮抗宿主先天免疫的潜在机制.方法:RNA测序及通路富集分析测定仅LPS刺激的胃黏膜细胞GES-1、LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理的GES-1细胞及未经处理的GES-1细胞.3KD超滤管过滤幽门螺杆菌培养上清,并以过滤的滤液(代谢物部分)和截留的溶液(蛋白部分)处理LPS刺激的GES-1细胞,检测NF-κB通路活性、NF-κB的磷酸化水平、NF-κB通路效应因子TNF-α、IL-6和IL-8的分泌水平.非靶向代谢质谱鉴定关键代谢物.结果:相较于仅LPS刺激的GES-1细胞,LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理后,多种基因的表达水平受到调控,并趋于未处理的GES-1细胞水平,主要存在于NF-κB通路.LPS与幽门螺杆菌培养上清共同处理后,NF-κB通路活性受到抑制(P<0.05).幽门螺杆菌代谢物能够抑制NF-κB通路活性,抑制NF-κB磷酸化,抑制NF-κB通路效应因子TNF-α、IL-6和IL-8的分泌(P<0.05).1、5和25 μmol/L的幽门螺杆菌代谢物2-D-Glucopyranose(2DG)处理后,胃黏膜细胞GES-1中NF-κB通路活性均受到抑制,NF-κB磷酸化受到抑制,NF-κB通路效应因子TNF-α、IL-6和IL-8的分泌受到抑制(P<0.05).2DG处理后,TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10敲除的GES-1细胞中NF-κB活性显著降低(P<0.05);而TLR1和TLR2敲除的GES-1细胞中NF-κB活性无显著变化.2DG处理后,GES-1细胞中TLR1和TLR2的相互作用均减弱.分子对接发现2DG能够与TLR2氨基酸残基R321、K347、F349结合,结合能为-12 kcal/mol.构建TLR2野生型和突变型质粒(R321K、K347R、F349A),并分别转染TLR2敲除的GES-1细胞,发现2DG处理并不能减少转染了TLR2突变型的GES-1细胞的NF-κB活性.结论:幽门螺杆菌代谢物2DG能够与TLR2相互作用,减少TLR2与TLR1异源二聚体的形成,抑制先天免疫NF-κB通路活性.

本研究旨在探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)I226R 蛋白(I226R protein,pI226R)抑制 cGAS-STING信号通路的作用机制.利用双荧光素酶报告系统和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)证明pI226R显著抑制cGAS-STING通路介导的I型干扰素及干扰素刺激相关基因的产生.免疫共沉淀及激光共聚焦显微镜试验发现pI226R与cGAS蛋白相互作用.免疫印迹分析证明 pI226R 通过自噬-溶酶体途径促进 cGAS 蛋白的降解.同时,pI226R阻碍了cGAS与E3 泛素连接酶三基序蛋白 56(tripartite motif protein 56,TRIM56)的结合,导致cGAS的单泛素化减弱,从而抑制了cGAS的活化和cGAS-STING通路的激活.总之,本研究证明ASFV pI226R通过拮抗cGAS进而抑制宿主的抗病毒天然免疫反应,进一步增加了对研究ASFV免疫逃逸机制的理解,为疫苗的研发提供了理论基础.

目的:研究长链非编码RNA mir-100-let-7a-2-mir-125b-1簇宿主基因(long non-coding RNA mir-100-let-7a-2-mir-125b-1 cluster host gene,LncRNA MIR100HG)调控miR-142-5p/SRY相关的高迁移率族盒蛋白5(SRY-related high mobility group box 5,SOX5)轴对口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、侵袭能力的影响.方法:采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测体外培养的人口腔上皮细胞和人OSCC细胞CAL27、SAS、SCC-25中LncRNA MIR100HG、miR-142-5p与SOX5表达.体外培养CAL27细胞,随机分为对照组、LncRNA MIR100HG敲低组(转染LncRNA MIR100HG siRNA质粒)、miR-142-5p mimics组(转染miR-142-5p mimics)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-142-5p阴性对照)、LncRNA MIR100HG敲低+miR-142-5p inhibitor组(转染LncRNA MIR100HG siRNA质粒和miR-142-5p inhibitor),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞LncRNA MIR100HG、miR-142-5p及SOX5表达;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷染色及集落形成实验检测各组细胞增殖;采用Transwell侵袭实验检测各组CAL27细胞侵袭;采用免疫印迹检测各组CAL27细胞上皮间质转化相关蛋白表达.将各组细胞接种在裸鼠背部右侧腋窝附近皮下构建OSCC移植瘤模型,饲养3周后检测各组移植瘤裸鼠肿瘤体积及重量.采用双荧光素酶报告实验检测CAL27细胞LncRNA MIR100HG对miR-142-5p、miR-142-5p对SOX5的靶向调控.结果:与人口腔上皮细胞相比,CAL27、SAS、SCC-25中LncRNA MIR100HG、SOX5蛋白与mRNA表达升高,miR-142-5p表达降低.与对照组相比,LncRNA MIR100HG敲低组、miR-142-5p mimics组细胞SOX5蛋白与mRNA表达、细胞活力、增殖率、集落形成比例、移植瘤裸鼠肿瘤体积及重量、侵袭数、N-cadherin蛋白表达降低,miR-142-5p表达、E-cadherin蛋白表达升高.下调miR-142-5p可减弱LncRNA MIR100HG敲低对CAL27细胞各指标的作用.CAL27细胞中LncRNA MIR100HG靶向下调miR-142-5p、miR-142-5p靶向下调SOX5.结论:敲低LncRNA MIR100HG可通过调控miR-142-5p/SOX5轴而抑制OSCC细胞增殖、上皮间质转化及侵袭,并可延缓其体内肿瘤生长.

新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)Omicron变异株首次在博茨瓦纳被检出,随后造成了全世界范围内的感染人数激增.截至目前,Omicron是需要关注的SARS-CoV-2 变异株中突变数量最多的毒株,已在整个基因组中发生至少50 次突变.Omicron基因组发生的突变赋予病毒一定的适应性优势,如受体结合域与人类血管紧张素转换酶2 受体亲和力增强导致病毒传播能力增强;与先前变异株相比,病毒复制能力减弱导致在COVID-19 患者中引起的症状相对较轻.此外,该变异株具有较高的环境稳定性,部分逃脱了来自疫苗接种或先前感染诱导的宿主免疫反应,且对大多数治疗性抗体具有较高的耐药性.本文对Omicron变异株的关键突变、病毒学特征、致病性和免疫逃逸能力进行总结,以期为完善疫情防控策略和公共卫生举措提供科学参考.

抗生素的过度使用导致了"超级细菌"的出现,铜绿假单胞菌是引起医疗相关感染的机会致病菌之一.铜绿假单胞菌临床分离株对常用抗菌药物的耐药性已成为严重的公共卫生问题.铜绿假单胞菌的致病性和耐药性被一种称为"群体感应"的复杂机制调节,其调节毒力因子的产生、生物膜形成、细菌对抗生素的耐药性、细菌运动等等,并可减弱宿主的免疫应答.群体感应抑制剂(quorum sensing inhibitors,QSIs)可以在不影响细菌生长的情况下降低细菌毒性,并可抑制和消除生物膜,增加抗生素对细菌的敏感性.这些特性使QSIs成为目前研发抗感染和辅助抗感染药物的热点,本文就铜绿假单胞菌的群体感应系统和铜绿假单胞菌QSIs的研究进展进行了综述.

CD4+ T淋巴细胞是一类在免疫反应中发挥重要作用的细胞,它在激活后可分化为辅助性T细胞1(T helper cells,Th 细胞)、Th2细胞、辅助性滤泡T细胞(Follicular T helper cells)、Th17细胞和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞).不同类型CD4+ T淋巴细胞有不同的功能,如激活细胞免疫和非细胞免疫、直接溶细胞活性和抑制免疫反应等[1].以前人们认为分化前初始CD4+ T细胞能分化为各种特定的细胞亚型,然而,现在有证据表明CD4+ T细胞的各种亚型有显著可塑性;并且最近的研究显示Treg细胞和Th17细胞间存在很灵活的可塑性[2].Th17细胞是一类CD4+效应T细胞,并在宿主防御各种病原体和炎症发病机制中起重要作用;Treg细胞能减弱Th1和Th2反应,但是对Th17细胞的作用尚不明确.Th17细胞与Treg细胞间密切相关,本文就Treg细胞与Th17细胞的分化、发育及在各种疾病中的作用作一综述.