目的:探讨子宫颈微生态与宫颈鳞状上皮内病变（squamous intraepithelial lesion，SIL）的关系。方法:选取2019年3月至5月南京医科大学附属无锡第二医院体检中心体检的和妇科就诊的12例子宫颈正常受试者（37~47岁），21例低度鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）患者（39~48岁），5例高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）患者（38~45岁）和3例宫颈鳞癌患者（42~43岁），填写调查问卷、行子宫颈检查，同时使用下一代测序技术（next generation sequencing，NGS）分析子宫颈分泌物的微生态，生物信息学分析NGS结果。根据NGS的人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）检测结果将受试者分为HPV阴性组、低危HPV（low-risk HPV，lrHPV）、16/18型高危HPV（high-risk HPV，hrHPV）和其他hrHPV感染组。分析数据的韦恩图、微生态的多样性、物种的相对丰度和共现性以及受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线。结果:所有受试者子宫颈分泌物共获得种属水平微生态物种909种，各组之间有重叠。在不同宫颈病变受试者中，总HPV感染率、16/18型hrHPV感染率和其他hrHPV感染率差异无统计学意义（ P均>0.05）。按HPV感染分组，16/18型hrHPV和其他hrHPV感染患者的子宫颈微生态多样性升高（ U分别为39.00和43.00， P均<0.05），而各组之间卷曲乳酸杆菌相对丰度无差异（ H=4.37， P=0.213 6）。按子宫颈状况分组，子宫颈病变受试者子宫颈微生态多样性（ H=14.60， P=0.002 2）升高，卷曲乳酸杆菌丰度下降（ H=13.98， P=0.000 8）。在微生态物种中，支原体、衣原体和B族链球菌具有共现性；惰性乳酸杆菌、阴道加德纳菌、阿托波菌和二路普氏菌具有共现性。以卷曲乳酸杆菌相对丰度作为SIL诊断指标，其ROC曲线下面积（area under ROC curve，AUC）为0.874[95%置信区间（confidence interval， CI）：0.732~0.957]，卷曲乳酸杆菌和詹氏乳酸杆菌以及支原体联合诊断SIL的AUC为0.943[95 %CI：0.822~0.991]。 结论:子宫颈卷曲乳酸杆菌相对丰度下降和微生态多样性升高可能与HPV感染和子宫颈病变有关；NGS数据简化后可能有助于SIL诊断。

目的:分离并筛选健康女性阴道中的卷曲乳酸杆菌并评估其体外益生特性，为进一步筛选有效治疗女性生殖系统疾病的微生态制剂提供新型菌株。方法:2023年4月至2023年5月期间采集海军军医大学第二附属医院体检中心10名健康女性阴道分泌物并分离筛选卷曲乳酸杆菌，通过16S rRNA序列鉴定卷曲乳酸杆菌，并测定其生长特性、产酸能力、产H 2O 2能力、抑菌能力。 结果:从10名健康女性阴道内共分离并鉴定出39株卷曲乳酸杆菌。本实验卷曲乳酸杆菌的生长对数期为10~40 h，其中卷曲乳酸杆菌4-5及卷曲乳酸杆菌6-7生长速度较快。本实验卷曲乳酸杆菌的pH在8~24 h内下降速度较快，48 h菌液的pH稳定在3.89~4.05之间，其中卷曲乳酸杆菌6-6、6-7、6-9、6-11的产酸性能较好。筛选的10株卷曲乳酸杆菌均能产H 2O 2，其中卷曲乳酸杆菌4-5、4-11、6-5、6-7产H 2O 2性能较好。卷曲乳酸杆菌6-5、6-7和6-9抑制白假丝酵母菌的效果较好，其抑菌圈直径分别为（20.90±0.31）mm、（20.61±0.70）mm、（21.73±0.37）mm；卷曲乳酸杆菌4-5、6-5和6-7抑制金黄色葡萄球菌的效果较好，其抑菌圈直径分别为（20.95±0.07）mm、（23.52±0.49）mm、（23.49±0.34）mm；卷曲乳酸杆菌6-5、6-6和6-7抑制大肠埃希菌的效果较好，其抑菌圈直径分别为（19.03±0.23）mm、（18.20±0.18）mm、（18.55±0.29）mm。 结论:卷曲乳酸杆菌6-5和卷曲乳杆菌6-7产酸能力、产H 2O 2能力、抑菌活性较好，具有优良的生物学特性，有望成为用于治疗女性生殖系统疾病微生态制剂的备选菌株。

目的:探讨雌激素补充治疗对绝经后高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染女性阴道菌群及局部免疫的影响。方法:2018年6月至2023年6月期间在上海市瑞金康复医院妇科招募体检或因妇科疾病就诊的74例绝经后女性为研究对象。根据HPV检测结果分为高危型HPV阴性女性（正常组， n=14）和高危型HPV阳性女性（ n=60）。采用随机对照试验，将高危型HPV阳性女性利用随机数字表法分为试验组（高危型HPV阳性且口服低剂量雌激素治疗， n=30）和对照组（高危型HPV阳性且未口服低剂量雌激素， n=30）。在入组时（即第0周）、入组后第4周和第8周采用荧光定量PCR仪和酶联免疫吸附实验检测3组的阴道微生物群落结构以及阴道灌洗液中的炎症细胞因子表达情况。 结果:入组时3 组患者年龄、绝经时间、体质量指数、收缩压、舒张压、心率、pH值和阴道细胞成熟指数（vaginal cell maturation index，VMI）差异均无统计学意义（均 P>0.05），基线可比。经雌激素治疗后，试验组第4周（5.27±0.13）和第8周（4.84±0.15）的pH值均显著低于第0周（6.59±0.17，均 P<0.001），而试验组第4周（41.62±2.62）和第8周的VMI（58.28±2.16）均显著高于第0周（25.97±2.60，均 P<0.001）。定量结果表明正常组、试验组、对照组3组间及各自组内（即每组不同检测时间点）的大肠杆菌（ Escherichia coli）丰度差异均无统计学意义（均 P>0.05）。试验组第0周加德纳菌（ Gardnerella）和奇异菌属（ Atopobium）丰度显著高于第4周和第8周（均 P<0.001）。但经雌激素治疗后第4周的试验组阴道 Gardnerella和 Atopobium丰度显著低于对照组（均 P<0.001），和正常组相比差异均无统计学意义（均 P>0.05）。第0、第4、第8周的正常组、试验组和对照组组间的普雷沃氏菌属（ Prevotella）、加氏乳酸杆菌（ L. Gasseri）和惰性乳酸杆菌（ L. Iners）丰度差异均无统计学意义（均 P>0.05）。第0周试验组和对照组卷曲乳酸杆菌（ L. Crispatus）和詹氏乳酸杆菌（ L. Jensenii）丰度均显著低于正常组（均 P<0.001）。第4周和第8周试验组的 L. Crispatus丰度均显著高于对照组（均 P<0.001），和正常组比较差异均无统计学意义（均 P>0.05）。正常组、试验组和对照组女性阴道灌洗液中的白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-8和干扰素（interferon，IFN）-α浓度差异均无统计学意义（均 P>0.05）。试验组和对照组中IL-1β浓度均显著高于正常组（均 P<0.001），试验组和对照组间差异无统计学意义（ P>0.05）。试验组第8周肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）浓度显著低于第0周（ P<0.001），而第4周后TNF-α浓度与第0周差异无统计学意义（ P>0.05）。与试验组第0周相比，经雌激素治疗4周后，趋化因子C-X-C motif 配体14、IFN-β浓度差异无统计学意义（均 P>0.05），而治疗8周后这两个因子水平显著下降（均 P<0.001）。与正常组相比，试验组和对照组IFN-γ诱导蛋白16浓度明显升高（均 P<0.001），试验组和对照组组间差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:HPV感染后会增加绝经后妇女阴道中 Gardnerella和 Atopobium的丰度并降低 L. Crispatus和 L. Jensenii的丰度，进一步破坏阴道微环境中微生物的稳态。雌激素补充治疗对绝经后高危型HPV感染女性的阴道菌群和局部免疫有一定的改善作用。

目的 探讨复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者阴道微生物菌群特征以及地榆炭对临床分离的白色念珠菌的抑制作用.方法 选取2022年9-12月在南京鼓楼医院就诊的15例RVVC患者(RVVC组),并招募10名健康育龄女性(对照组)作为研究对象,采用16SrRNA和内转录间隔区高通量测序技术分析RVVC患者阴道菌群分布特点,并基于FUNGuild数据库对真菌进行功能预测.另外,对临床样本中的白色念珠菌进行分离培养,采用平板计数法评估地榆炭醇提取物的抑菌效果.结果 RVVC患者的细菌菌群以乳酸杆菌属为主,且以惰性乳酸杆菌为优势菌.与对照组相比,RVVC患者阴道真菌菌群α多样性显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05),NMDS显示两组菌群表现出明显分类,LEfSe分析发现念珠菌属和副球菌属相对丰度升高,且以白色念珠菌为优势菌.FUNGuild功能分类预测未定义腐生菌是RVVC组中最丰富的类群,远高于其在对照组中的丰度.此外,与空白对照组相比,随着地榆炭醇提取物浓度的增加(25、50、100、200 μg/mL),白色念珠菌菌落数明显减少,差异均有统计学意义(t=8.350、8.722、9.137、9.144,P均＜0.05),而卷曲乳酸杆菌菌落数显著增多,差异均有统计学意义(t=9.952、6.288、10.440、8.742,P均＜0.05).结论 RVVC患者阴道菌群发生紊乱,主要以惰性乳酸杆菌和白色念珠菌为优势菌.地榆炭醇提取物对临床分离的白色念珠菌具有抑制作用且促进卷曲乳酸杆菌的生长,可为防治RVVC的中药研发提供新的思路和理论依据.

目的 探讨阴道菌群失调与早孕流产风险的关系.方法 选取2021年5月至2022年3月在陕西中医药大学第二附属医院妇科就诊的147名孕妇为研究对象,其中病例组为早孕流产(妊娠12周内确诊)患者(n=64),对照组为健康足月分娩者(n=83).采用基于16S rRNA基因测序,对病例组与对照组研究对象妊娠早期的阴道菌群组成进行比较及分析.结果 病例组与对照组在年龄、体质量指数、吸烟者人数、妊娠情况、既往流产、胎龄、阴道pH值的分布比较差异均无统计学意义(P＞0.05).在总样本队列中鉴定出244种细菌.样本分为5个主要类型,其中菌落状态类型(CST)Ⅰ的特征是卷曲乳酸杆菌占优势,CST Ⅱ的特征是加氏乳酸杆菌占优势,CST Ⅲ的特征是内乳酸杆菌占优势,CST Ⅴ的特征是詹氏乳酸杆菌占优势,而CST Ⅳ的特征是乳酸杆菌属的丰度较低.在CST Ⅳ型群落中观察到了最高的a多样性和丰度.与对照组相比,病例组的阴道菌群组成中乳酸杆菌属消耗的比例显著增加[25.0％(16/64)vs.6.0％(5/83),x2=10.626,P＜0.01].病例组中CST Ⅳ型为主阴道菌群组成的比例明显增加[29.7％(19/64)vs.12.0％(10/83),x2=7.100,P＜0.01].病例组的逆辛普森指数(2.81±1.20 vs.1.41±0.48)和丰度(28.06±15.08 vs.17.13±6.83)均明显高于对照组(t值分别为4.641、3.523,P＜0.05).当从病例组中排除报告阴道出血评分＞1的孕妇时,这种相关性仍然存在.与稽留流产相比,不完全/完全流产的阴道菌群组成中乳酸杆菌属消耗的比例显著增加[19.2％(10/52)vs.75.0％(9/12),x2=14.527,P＜0.01].不完全/完全流产中CST Ⅳ型为主阴道菌群组成的比例显著增加[23.1％(12/52)vs.75.0％(9/12),x2=11.923,P＜0.01].结论 高度多样性的阴道菌群群落和乳酸杆菌减少是早孕流产的危险因素.

目的 分析育龄期细菌性阴道病(BV)伴盆腔炎性疾病(PID)患者阴道菌群和微生态改变情况及意义.方法 选取2020 年9 月至2022 年12 月湖南中医药高等专科学校附属第一医院76 例育龄期BV患者,按照是否伴PID,分为BV组(33 例)与BV伴PID组(43 例),并选取同期50 例育龄期体检健康者作为对照组,比较3 组阴道菌群密集度、阴道菌群多样性及16S rRNA测序结果.结果 BV伴PID组、BV组与对照组阴道菌群密集度分级、阴道菌群多样性分级比较差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,BV组、BV伴PID组厚壁菌门减少,并且放线菌门增多;对照组无加德纳菌,BV组、BV伴PID组加德纳菌较多,且乳酸菌相较于对照组减少,BV组厌氧菌(如加特纳菌、普雷沃氏菌等)增多,BV伴PID组厌氧菌(如G.vaginallis等)存在增加趋势,卷曲乳杆菌存在减少趋势.结论 育龄期BV及BV伴PID患者阴道菌群密集度、阴道菌群多样性增加,微生态平衡发生变化,厌氧菌增多,其检测可为疾病诊治提供指导.

目的:研究宫颈癌疾病中女性阴道菌群的构成变化,探索具有预防宫颈癌发生的阴道益生菌.方法:选取新疆医科大学附属肿瘤医院和社区募集的24例健康女性和43例宫颈癌女性.采用16S rDNA和宏基因组测序技术分析其阴道菌群构成.结果:两组女性阴道菌群在chaol指数和ASVnumber中无统计学差异,提示群落丰度相似,在表示物种多样性的Shannon指数和Simp-son指数中宫颈癌组显著增高,差异具有统计学意义.在微生物分类的门水平,两组阴道微生物均以厚壁菌门为主要物种,但宫颈癌组(45％)较健康组(91％)比例有所下降,其余如变形菌门和放线菌门等所占比例均显著升高.在种水平,宫颈癌组中的乳酸杆菌属(14.2％)较健康组(81％)比例下降明显,在宏基因组测序基础上,利用LEfSe及LDA判别分析得出在健康女性中卷曲乳杆菌具有益生菌特征意义,并可能在ABC转运体功能中发挥益生效应.结论:宫颈癌女性具有阴道微生物多样性增加,乳酸杆菌水平减少的特点,其中,通过宏基因组测序技术探究微生物种水平的差异物种得出卷曲乳杆菌在ABC转运体功能中具有潜在预防宫颈癌发生的益生菌作用,可为今后临床在调节阴道微生态角度预防宫颈癌发生提供理论依据.

目的 研究曲美布汀联合米曲菌胰酶片治疗功能性消化不良(FD)的疗效及对患者肠道菌群和胃肠动力的影响.方法 采用随机数字表法将该院2021年1月至2023年2月收治的84例功能性消化不良患者分为对照组(42例)、研究组(42例).对照组给予曲美布汀治疗,研究组给予曲美布汀联合米曲菌胰酶片治疗.比较两组疗效、不良反应发生率;比较两组治疗前后临床症状、胃肠动力[胃窦收缩次数(FB)、胃体蠕动次数(FA)、胃排空率(GER)]、胃容受性(GA)、肠道菌群数量,以及血清蛋白酶激活受体2蛋白(PAR2)、水通道蛋白3(AQP3)、胃动素(MOT)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)水平差异.结果 研究组临床总有效率(92.86％)高于对照组(73.81％),差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前两组嗳气、食欲不振、腹胀腹痛、早饱症状评分比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);治疗后研究组嗳气、食欲不振、腹胀腹痛、早饱症状评分低于对照组(P＜0.05).治疗前两组FA、FB、GER、GA比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);治疗后研究组FA、FB、GER、GA高于对照组(P＜0.05).治疗前两组肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌数量比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);治疗后研究组肠杆菌、肠球菌数量低于对照组,乳酸杆菌、双歧杆菌数量高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗后研究组MOT水平高于对照组,PAR2、AQP3、SFRP1水平低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).研究组不良反应总发生率(4.76％)与对照组(7.14％)相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 曲美布汀联合米曲菌胰酶片治疗FD效果显著,能提高患者胃肠动力、GA,改善患者肠道菌群及临床症状.

目的:探讨卷曲乳酸杆菌对宫颈癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制.方法:将卷曲乳酸杆菌与宫颈鳞癌SiHa细胞在合适条件下共培养,Transwell实验观察共培养前、后细胞迁移和侵袭能力的变化.分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、western blotting法检测 ABCG2、PCNA、ATM、TDG、LIG1、OGG1、HMGB1基因和蛋白表达.结果:共培养 18 h和24 h后,卷曲乳酸杆菌能有效抑制SiHa细胞的迁移和侵袭(P＜0.001).同时,与宫颈癌相关的致癌基因PCNA、ATM和LIG1表达水平在共培养12 h后开始显著下降(P＜0.05);OGG1和HMGB1表达水平在共培养18 h后开始出现显著下降(P＜0.05);ABCG2和TDG表达水平在共培养前、后未出现明显变化(P＞0.05).另外PCNA、OGG1和HMGB1蛋白表达水平在共培养12 h后开始呈现显著性下降(P＜0.05),ABCG2、LIG1和ATM蛋白表达水平在共培养18 h后开始出现显著下降(P＜0.05),TDG蛋白表达水平在共培养前、后未出现明显变化(P＞0.05).结论:卷曲乳酸杆菌可以有效抑制宫颈癌SiHa细胞的迁移和侵袭,并抑制PCNA、ATM、LIG1、OGG1、HMGB1等致癌基因的表达.

目的 探究高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染老年患者的阴道菌群分布.方法 回顾性分析2015年1月-2017年1月医院收治的98例高危型人乳头状瘤病毒感染老年患者设为病例组,并选取同期医院进行健康检查的98例HPV阴性的老年志愿者为对照组,比较两组患者阴道内环境和阴道内乳酸杆菌种类,分析微生物群落构成.结果 两组患者的阴道清洁度、pH值、菌群、阴道炎差异有统计学意义(P＜0.05);高危型HPV老年患者阴道清洁度为Ⅲ-Ⅳ度、pH值＞4.5、菌群Ⅲ度、有阴道炎的发生率均高于对照组患者;高危型HPV老年患者阴道内微生物群落种类较多,以厚壁菌门和放线菌门为主,对照组阴道内微生物群落86.38％为厚壁菌门(P＜0.05);高危型HPV老年患者阴道内惰性乳酸杆菌、卷曲乳酸杆菌和加氏乳酸杆菌少于对照组(P＜0.05).结论 阴道清洁度、pH值、菌群、阴道炎与高危型HPV的发生有密切相关性,患者阴道菌群失衡,惰性乳酸杆菌、卷曲乳酸杆菌和加氏乳酸杆菌减少.