目的:探讨基于CFN-100氟多功能模块自动化制备 18F-阿法肽(Alfatide Ⅱ)的方法并进行前列腺癌显像。 方法:通过氟离子分装器分出200～500 μl氟离子至反应管中，与标记前体1，4，7-三氮杂环壬烷-1，4，7-三乙酸-E[(聚乙二醇)] 4-环(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸- D-苯丙氨酸-酪氨酸)] 2{NOTA-E[PEG 4-c(RGDfk)] 2}(冻干药盒)反应，在水相中与 18F经铝介导螯合标记，再经C18柱分离纯化，自动化制备得到 18F-阿法肽，测定其放化产率。对 18F-阿法肽注射液进行质量分析，并对2例前列腺癌患者(72岁和66岁)行 18F-阿法肽PET/CT显像。 结果:采用结合双管路氟离子分装器的CFN-100氟多功能模块成功自动化制备 18F-阿法肽，合成时间约30 min，放化产率为(28±3)% (非衰变校正， n＝6)，放化纯>98%，比活度为2.8×10 7 MBq/mmol，核素纯度大于99%。2例患者PET/CT显像示 18F-阿法肽高度浓聚于前列腺癌病灶，最大标准摄取值(SUV max)分别为35.6和5.0。 结论:利用改进的CFN-100氟多功能模块成功自动化制备 18F-阿法肽，产物合成方法稳定，合成时间短，放化产率高，可高度浓聚于前列腺癌病灶。

目的:采用预定位技术在表皮生长因子受体(EGFR)阳性/阴性荷瘤鼠中探索西妥昔单克隆抗体(简称单抗；Cetuximab)靶向EGFR免疫PET显像的可行性。方法:以反式环辛烯(TCO)- N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)修饰Cetuximab获得Cetuximab-TCO。以2，2′-((6-氨基-1-(4，7-双(羧甲基)-1，4，7-三氮烷-1-基)己烷-2-基)氮杂二酰基)二乙酸(L-NETA)为螯合剂，制备 68Ga-L-NETA-四嗪(Tz)分子探针，测定其标记率、稳定性。体外培养基底样乳腺癌细胞MDA-MB-468(EGFR+)和MDA-MB-231(EGFR-)，进行细胞摄取及阻断实验。用Balb/c-nu小鼠建立MDA-MB-468和MDA-MB-231皮下荷瘤鼠模型；将50 μg Cetuximab-TCO注入荷瘤鼠体内，经过不同时间(48、36、24和12 h)后再注射 68Ga-L-NETA-Tz，利用"TCO-Tz"反应(点击化学特异性结合)实现 68Ga-L-NETA-Tz与Cetuximab-TCO的体内连接；进行小动物PET显像及生物分布实验。数据比较采用单因素方差分析。 结果:成功制备 68Ga-L-NETA-Tz分子探针，标记率>95%，2 h放化纯>95%。体外细胞摄取实验证实了预定位技术的可行性：先后加入Cetuximab-TCO与 68Ga-L-NETA-Tz后，1 h时MDA-MB-468细胞摄取率可达(0.69±0.04)%。体内PET显像及生物分布实验结果示，提前36 h注射Cetuximab-TCO，MDA-MB-468荷瘤鼠有最高的肿瘤摄取值[(0.77±0.05)每克组织百分注射剂量率(%ID/g)，1 h]及最佳的靶/非靶比值(肿瘤/肌肉：4.67±0.46)；给予过量Cetuximab的阻断组、未提前注入Cetuximab-TCO组及MDA-MB-231组肿瘤未见明显摄取[(0.35±0.01)、(0.39±0.05)、(0.45±0.10) %ID/g； F＝15.50， P＝0.002]。 结论:采用预定位技术，通过先后注射Cetuximab-TCO和 68Ga-L-NETA-Tz，在荷瘤鼠模型中成功进行了靶向EGFR免疫PET显像，为单抗免疫PET显像提供了一种有效的方法。

目的:制备相对分子质量1.8×10 4转位蛋白(TSPO)靶向分子探针2-(8-氨基-2-(4-氯苯基)咪唑[1，2-a]吡啶-3-基)- N， N-二丙基乙酰胺(CB86)-二乙撑三胺五乙酸(DTPA)-Gd，探究其在类风湿关节炎(RA)模型的MRI效果。 方法:通过偶联双功能螯合剂制备CB86-DTPA，再与Gd螯合获得MRI靶向造影剂CB86-DTPA-Gd，测定其细胞毒性、MR弛豫率和体外稳定性。采用弗氏佐剂建立小鼠右踝RA模型，进行生物分布研究及MRI，以右踝关节炎性反应部位及其周围正常组织作为感兴趣区(ROI)计算信噪比(SNR)。采用两独立样本 t检验分析数据。 结果:CB86-DTPA-Gd的MR纵向弛豫率 r1为11.05 mmol·L -1·s -1。在Gd 3＋最大浓度(20 μmol/L)时，小鼠巨噬细胞RAW264.7和小鼠乳腺癌4T1细胞的存活率均大于90%。室温下，CB86-DTPA-Gd在人血清和磷酸盐缓冲溶液(PBS；pH＝7.4)中的稳定性良好。体内生物分布研究表明，CB86-DTPA-Gd具有较好的炎性反应靶向性，注射后120 min踝关节炎性反应部位摄取仍达(2.33±0.29)每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。MicroMRI结果显示，右踝关节炎性反应部位在注射CB86-DTPA-Gd和Gd-DTPA后均表现为明显强化，CB86-DTPA-Gd组SNR最高可达23.21±1.44，最大强化时间为注射后90 min，且各时间点均能被CB86-DTPA所抑制( t值：6.083～12.451，均 P<0.05)，而Gd-DTPA组强化时间为注射后30 min，SNR为16.12±1.24。 结论:CB86-DTPA-Gd显示了良好的巨噬细胞靶向性，在关节炎性反应部位有良好的摄取，有望成为一种用于外周炎性反应显像的新型MRI分子探针。

目的:采用 177Lu标记超支化聚合物(HG)修饰的液态金属纳米液滴(LMND)@HG，探索其在乳腺癌治疗中的放疗增敏效应。 方法:使用超声破碎法制备LMND@HG，再通过合金化作用进行 177Lu标记，得到 177Lu－LMND@HG，检测其标记率、血浆稳定性和细胞毒性。构建小鼠乳腺癌移植瘤模型，瘤体注射 177Lu－LMND@HG进行肿瘤抑制实验，采用小动物活体光学成像系统观察肿瘤生长情况。使用免疫组织化学与免疫荧光实验对其抑瘤机制进行初步验证。采用单因素方差分析、重复测量方差分析、最小显著差异 t检验分析数据。 结果:成功采用 177Lu标记LMND@HG，标记率95%以上，产物不需后续纯化，且5 d后血浆中放化纯仍>95%。细胞毒性实验显示888 kBq (40 mg/L) 177Lu－LMND@HG对4T1细胞具有明显的毒性，细胞存活率[(16.48±7.81)%]明显低于相同剂量 177LuCl 3[(85.77±8.87)%； F＝77.81， t＝11.73， P<0.001]与40 mg/L LMND@HG[(46.53±5.75)%； t＝6.20， P<0.001]处理后的细胞存活率。生物分布实验表明，瘤体注射后5 d 177Lu－LMND@HG仍主要分布于肿瘤组织。肿瘤抑制实验结果表明，1.48 MBq 177Lu－LMND@HG较 177LuCl 3可明显抑制肿瘤生长[肿瘤体积：(222.66±97.70)与(789.13±245.04) mm 3； F＝18.55， t＝4.29， P＝0.005]。小动物活体光学成像显示，1.48 MBq与3.70 MBq 177Lu－LMND@HG均明显抑制肿瘤生长。免疫荧光与免疫组织化学实验表明 177Lu－LMND@HG可造成双链DNA的断裂，同时通过抑制肿瘤细胞增殖能力与血管新生能力达到抑制肿瘤的效果。 结论:本研究成功制备了一种新型的 177Lu－液态金属基活性氧(ROS)放疗增敏剂，制备方法高效便捷，产物稳定性高、在小鼠乳腺癌移植瘤模型中显示出明显的放疗增敏效果。

目的:构建靶向透明质酸(HA)新型动脉粥样硬化(AS)示踪剂 68Ga－1，4，7－三氮杂环壬烷－1，4，7－三乙酸(NOTA)－CD44，并进行生物学评价及分子显像研究。 方法:选取小分子人重组CD44蛋白，在该蛋白羧基末端(C端)通过磺基化修饰后偶联双功能配体NOTA，合成靶向HA的核素标记分子探针 68Ga－NOTA－CD44。研究探针的标记率、体外稳定性等生物学性质，并对3只AS斑块模型小鼠及3只正常C57BL/6小鼠行 68Ga－NOTA－CD44 microPET/CT显像及病理对照研究。 结果:合成的探针 68Ga－NOTA－CD44放化纯大于99%，比活度为62.22 MBq/nmol；探针在PBS中稳定性良好，放置3 h放化纯大于90%；探针经静脉注射后主要经肾代谢，在肝、肺及血液中代谢依次减低。AS模型小鼠microPET/CT显像示，该探针注射后60 min腹主动脉斑块处摄取较高，SUV max与靶/本底比(TBR) max分别为1.14±0.02及4.95±0.93，具有一定的AS侵蚀斑块靶向性，与病理结果一致。 结论:新型分子探针 68Ga－NOTA－CD44的制备简便且标记率高，具有较好的理化性质及体内生物学性质，靶向显示AS侵蚀斑块的灵敏度高，其分子影像在早期无创识别AS侵蚀斑块方面具有良好应用前景。

目的:评价 68Ga－1，4，7，10－四氮杂环十二烷－1，4，7，10－四乙酸(DOTA)－丝氨酸－天冬酰胺－苏氨酸－精氨酸－缬氨酸－丙氨酸－脯氨酸(SNTRVAP，简称VAP)分子探针在体内外靶向葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的特异性以及用于GRP78阳性肿瘤microPET/CT诊断的可行性。 方法:将多肽VAP与双功能螯合剂DOTA偶联后进行 68Ga标记，制备 68Ga－DOTA－VAP分子探针。用蛋白免疫印迹法验证人脑胶质瘤细胞株U87MG、人胰腺癌细胞株BxPC－3、人胚胎肾细胞株293T细胞中GRP78表达情况，并用阻断实验验证 68Ga－DOTA－VAP与上述细胞的特异性结合。建立U87MG与BxPC－3荷瘤裸鼠模型，检测 68Ga－DOTA－VAP在体内的生物学分布；用microPET/CT评价 68Ga－DOTA－VAP在U87MG与BxPC－3荷瘤裸鼠模型的显像效果。采用两独立样本 t检验、单因素方差分析和Dunnett t检验分析数据。 结果:68Ga－DOTA－VAP制备简便，标记率、放化纯均大于98%，体外稳定性好，2 h后放化纯仍为(98.27±0.22)%。GRP78在U87MG、BxPC－3和293T细胞中均有表达(分别为0.78±0.02、0.53±0.05和0.36±0.03)，且在肿瘤细胞中的表达高于正常细胞( F＝102.22， P<0.001； t值：0.43、0.18，均 P<0.01)。U87MG细胞对 68Ga－DOTA－VAP的摄取高于BxPC－3细胞(5 154.00±216.70和4 344.00±60.88； t＝3.10， P＝0.027)，过量VAP多肽可显著降低U87MG、BxPC－3细胞对探针的摄取(3 324.00±54.14、3 270.00±131.10； t值：8.19、7.43，均 P<0.01)。 68Ga－DOTA－VAP经尾静脉注射后，在U87MG肿瘤组织的摄取高于BxPC－3肿瘤组织[(1.98±0.20)和(1.30±0.08)每克组织百分注射剂量率(%ID/g)； t＝5.48， P＝0.005]；注射过量VAP多肽后，肿瘤组织摄取显著降低[(0.99±0.02)和(0.62±0.05) %ID/g； t值：8.32、12.25，均 P<0.05]。MicroPET/CT显像示U87MG、BxPC－3模型鼠肿瘤清晰可见，U87MG模型鼠显影效果更佳；注射过量VAP多肽后，2种模型鼠肿瘤显像均不明显。 结论:68Ga－DOTA－VAP分子探针可与GRP78特异性结合，其可反映体内GRP78表达水平并有希望用于GRP78阳性肿瘤的特异性显像诊断。

植物和土壤中稳定碳同位素(δ13C)可用于指示、示踪和整合碳循环关键过程与功能.双路和连续流气体稳定同位素比值质谱仪(IRMS)是δ13C的两种测试技术,其精度和准确度受分析误差和数据标准化方法影响.分析误差包括记忆效应、时间漂移和信号强度依赖性等.将测定序列按样品δ13C从低到高排列或延长气路冲洗时间消除或降低记忆效应;在测样序列中内插标准物质并建立测定时间与分析误差的函数关系校正时间漂移;信号强度依赖性应先校正样品空白效应,再校正仪器非线性响应.数据标准化包括标准物质和数据标准化方法选择.选择的标准物质δ13C应涵盖待测样品δ13C,且遵循同等处理原则;标准物质数量≥4或每个标准物质重复测定次数≥4;数据标准化体系应长期稳定,并添加监测标准物质.

我国每年产生大量的园林废弃物,外加尿素和菌剂的堆肥方式使其可以被大量处置和循环利用,但该方法存在严重的氮素损失和环境问题.沼液含有一定的氮源和微生物,理论上可以作为尿素和菌剂的替代物从而减少氮素损失.本研究设置了沼液+园林废弃物(GB)、沼液+园林废弃物+尿素(GBU)和沼液+园林废弃物+尿素+菌剂(GBUM)处理,研究堆肥过程的腐熟、氮素转化及损失情况.结果表明:与GBU和GBUM处理相比,GB处理的高温期更长且更稳定,同时具有更适合堆肥的pH和电导率(EC)以及最高的发芽指数(221.8％).GB处理NH3和N2O的排放速率分别为2.59 mg·kg-1·d-1和3.65 μg·kg-1·d-1,比GBU处理分别降低99.0％和50.0％,比GBUM处理分别降低99.4％和40.7％.818O和δ15NsP双同位素图谱技术分析显示,GB和GBU处理以反硝化作用为主,且GB处理反硝化作用贡献高于GBU处理,而GBUM处理以硝化作用为主;GB处理的N2O还原程度(83.7％)大于GBU和GBUM处理.可见,与GBU和GBUM处理相比,GB处理的腐熟度更好、氮素损失更低,并通过增强反硝化作用的N2O还原过程减少了N2O排放.综上,沼液与园林废弃物可以在不受C/N与微生物的限制下直接共堆肥,这种方式既保护了环境,又节约了资源,在实际生产中可以实现废弃物的循环再利用.

建立了LC-MS/MS法同时测定人血浆中福沙匹坦及其代谢物阿瑞匹坦,并应用于中国健康受试者的药动学研究.本法中血浆样品以乙腈沉淀蛋白处理,经Cortex C 18+色谱柱(50 mm×2.1 mm,2.7 μm)分离,以甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵(含0.1 mmol·L-1EDTA)为流动相.采用电喷雾离子源(ESI源),以多反应监测负离子模式检测.以稳定同位素标记内标d4-福沙匹坦和d4-阿瑞匹坦分别作为福沙匹坦和阿瑞匹坦的内标,用于定量分析的离子反应分别为m/z 613.1→78.9(福沙匹坦)、m/z 617.0→78.9(d4-福沙匹坦)、m/z 533.2→275.1(阿瑞匹坦)和m/z 537.2→279.1 (d4-阿瑞匹坦).由于福沙匹坦为阿瑞匹坦的磷酸化前药,在血浆中快速降解,所以实验中采用碱性缓冲液处理血浆以确保其稳定.测定福沙匹坦标准曲线线性范围为15～6 000 ng·mL-1;测定阿瑞匹坦标准曲线线性范围为10～4 000 ng·mL-1.各待测物的日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析相关要求.该方法经验证后,成功应用于12名中国健康受试者静脉滴注150 mg福沙匹坦双葡甲胺后药动学研究.

根据2008年1月—2017年6月在大连海域收集的因搁浅、误捕及救助无效而死亡的斑海豹、江豚、小须鲸等海洋哺乳动物及2016年秋季和2017年春季在该海域进行的渔业资源调查,应用稳定同位素技术,分析了大连海域海洋哺乳动物及主要生物样品的碳、氮稳定同位素比值(δ13C、δ15N),并计算其营养级,进而构建大连海域食物网的连续营养谱.结果表明:大连海域食物网的δ15N值范围为8.0‰～14.7‰,δ13C值范围为-21.1‰～-16.7‰.主要生物种类可划分为初级消费者、次级消费者及顶级捕食者3个营养组群.δ15N值分析显示,主要生物种类的营养级范围为2.63～4.59,其中,小须鲸、江豚、斑海豹的营养级依次为3.16、4.11、4.25,棘皮动物为3.24～3.84,头足类为3.81～3.93,腹足类为3.65～4.13,双壳类为2.63 ～3.15,甲壳类为3.58～4.12,鱼类为3.20～4.59.营养结构特征显示,初级消费者主要为双壳类,次级消费者主要为小须鲸、头足类、棘皮类、腹足类、甲壳类,顶级捕食者主要为江豚、斑海豹、鱼类.随着江豚体长的增加,δ15N值有增大趋势,说明随着江豚生长和摄食能力的增强,其摄食的食物趋向于更高营养层次的生物.研究建立了大连海域食物网的连续营养谱,可以为海洋哺乳动物和渔业资源的保护提供依据.