目的:探讨血清可溶性程序性细胞死亡蛋白1（sPD-1）、可溶性B7同源体5（sB7-H5）和三叶因子2（TFF2）对急性胰腺炎（AP）患者病情程度和死亡风险的评估价值。方法:采用前瞻性研究的方法，选取襄阳市中心医院2020年2月至2021年2月AP患者328例（AP组），其中轻症AP（MAP）124例，中度重症AP（MSAP）106例，重症AP（SAP）98例。应用酶联免疫吸附实验法检测血清sPD-1、sB7-H5和TFF2水平，并与60例健康体检者（健康对照组）进行比较。AP患者随访90 d，生存284例，死亡44例；比较两者的淀粉酶、C-反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHE Ⅱ）、序贯器官衰竭评分（SOFA）、改良CT严重指数（MCTSI）、sPD-1、sB7-H5和TFF2等。采用Pearson法进行相关性分析；采用多因素Logistic回归分析影响AP患者死亡的独立危险因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线评估sPD-1、sB7-H5和TFF2预测AP患者死亡的效能。结果:AP组sPD-1、sB7-H5和TFF2明显高于健康对照组[（177.99 ± 17.81）ng/L比（50.20 ± 10.81）ng/L、（2.69 ± 0.72）μg/L比（1.40 ± 0.35）μg/L和（569.97 ± 38.91）μg/L比（94.59 ± 11.98）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。MSAP和SAP患者淀粉酶、sPD-1、sB7-H5和TFF2明显高于MAP患者[（639.36 ± 91.67）和（835.24 ± 109.30）U/L比（575.24 ± 89.78）U/L、（180.13 ± 20.61）和（221.17 ± 15.70）ng/L比（142.03 ± 16.76）ng/L、（2.85 ± 0.74）和（3.34 ± 0.82）μg/L比（2.05 ± 0.52）μg/L、（539.66 ± 36.58）和（763.55 ± 40.08）μg/L比（442.90 ± 35.79）μg/L]，SAP患者明显高于MSAP患者，差异均有统计学意义（ P<0.01）。Pearson相关分析结果显示，AP患者sPD-1与sB7-H5、TFF2呈正相关（ r = 0.552和0.641， P<0.01），sB7-H5与TFF2呈正相关（ r = 0.610， P<0.01）。死亡患者淀粉酶、CRP、PCT、APACHE Ⅱ、SOFA、MCTSI、sPD-1、sB7-H5和TFF2明显高于生存患者[（1 098 ± 105）U/L比（641 ± 93）U/L、（235.60 ± 40.17）mg/L比（118.04 ± 32.90）mg/L、（4.32 ± 0.52）μg/L比（3.14 ± 0.44）μg/L、（19.39 ± 3.14）分比（11.18 ± 2.53）分、（12.13 ± 2.78）分比（7.40 ± 2.15）分、（7.12 ± 1.73）分比（4.31 ± 1.52）分、（222.23 ± 22.30）ng/L比（171.14 ± 18.50）ng/L、（3.37 ± 0.89）μg/L比（2.59 ± 0.59）μg/L和（629.27 ± 39.63）μg/L比（560.78 ± 30.45）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，CRP、PCT、APACHE Ⅱ、SOFA、sPD-1、sB7-H5和TFF2是影响AP患者死亡的独立危险因素（ OR = 1.339、1.416、1.285、1.327、1.092、1.171和1.080，95% CI 1.145~1.566、1.146~1.751、1.132~1.460、1.150~1.531、1.024~1.164、1.072~1.280和1.031~1.131， P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，sPD-1、sB7-H5、TFF2联合检测预测AP患者死亡的曲线下面积明显大于sPD-1、sB7-H5和TFF2单独检测（0.870比0.771、0.734和0.685）。 结论:AP患者血清sPD-1、sB7-H5和TFF2水平明显升高，且与患者病情程度有关，三者联合检测能够辅助评估AP患者的死亡风险。

目的:探讨抗程序性死亡受体-1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)免疫疗法联合同步放化疗治疗局部晚期宫颈癌(LACC)的临床效果。方法:回顾性选取2018年11月至2019年10月在秦皇岛市第一医院接受抗PD-1/PD-L1免疫疗法(帕博利珠单抗)联合同步放化疗[调强放疗(IMRT)+TP(紫杉醇+卡铂)化疗]治疗的LACC患者51例作为观察组，选取同期接受同步放化疗治疗的51例LACC患者作为对照组。比较两组客观缓解率、疾病控制率、肿瘤标志物[鳞状细胞癌抗原(SCCAg)、可溶性细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)]、增殖凋亡指标[存活素(Survivin)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞凋亡促进物质(Bax)]、PD-1/PD-L1[可溶性PD-L1(sPD-L1)、CD4 + T细胞表面PD-1表达(PD-1 CD4 + T细胞)、CD8 + T细胞表面PD-1表达(PD-1 CD8 + T细胞)及CD14 +单核细胞表面PD-L1表达(PD-L1 CD14 +单核细胞)]、安全性及1年内生存率。 结果:(1)疾病控制及安全性：观察组客观缓解率、疾病控制率分别为80.39%(41/51)、92.16%(47/51)，高于对照组的39.22%(20/51)、70.59%(36/51)(均 P<0.05)，但组间各毒副反应发生率差异均无统计学意义(均 P>0.05)；(2)肿瘤标志物及增殖凋亡指标：与治疗前比较，治疗后两组血清SCCAg、CYFRA21-1、CEA、CA125水平及Survivin、Bcl-2水平均显著降低，Caspase-3、Bax水平显著升高，且治疗后观察组以上指标均优于对照组(均 P<0.05)；(3)PD-1/PD-L1：治疗后，观察组sPD-L1、PD-1 CD4 + T细胞、PD-1 CD8 + T细胞、PD-L1 CD14 +单核细胞较治疗前显著降低(均 P<0.05)，且观察组sPD-L1、PD-1 CD4 + T细胞、PD-1 CD8 + T细胞、PD-L1 CD14 +单核细胞均低于对照组(均 P<0.05)；(4)生存情况：观察组1年内生存率高于对照组( P<0.05)。 结论:抗PD-1/PD-L1免疫疗法联合同步放化疗治疗LACC临床效果显著，可通过调控肿瘤标志物、增殖凋亡指标及PD-1/PD-L1表达来有效抑制病情进展，且不增加治疗风险，对提升患者生存率具有积极作用。

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是肝脏最常见的原发性肿瘤，免疫疗法的诞生为晚期HCC患者治疗带来新的希望。在各种免疫治疗方法当中，程序性细胞死亡蛋白-1(programmed cell death- 1，PD-1)及其配体程序性死亡受体配体-1(programmed cell death-ligand 1，PD-L1)成为近期研究热点，PD-1/PD-L1信号通路降低了免疫应答中的效应T细胞活性从而发生肿瘤免疫逃逸，其可溶性程序性细胞死亡蛋白-1(soluble programmed cell death-1；SPD-1)及其配体程序性死亡受体配体-1(soluble programmed cell death-ligand 1；SPD-L1)也增加了PD-1/PD-L1信号通路组成和功能的复杂性及多样性，本文就SPD-1/ SPD-L1在HCC中的研究作系统性综述。

目的:观察脓毒症及脓毒症休克患者可溶性程序性细胞死亡蛋白1（soluble programmed cell death protein 1, sPD-1）与细胞免疫和体液免疫的动态变化，探索sPD-1与脓毒症免疫抑制的关系。方法:本研究为前瞻性队列研究，纳入2018年6月至2018年12月入住宁夏医科大学总医院ICU的脓毒症和脓毒症休克患者为研究对象，同期入住ICU的普通术后患者为非脓毒症组，并纳入年龄、性别与其他三组匹配的健康志愿者为健康对照组。检测患者入ICU后第1天、第3天和第7天外周血sPD-1、淋巴细胞计数、血清免疫球蛋白水平及淋巴细胞亚群分析，比较各组sPD-1及各项免疫指标变化，并进行相关分析。健康对照组和非脓毒症组仅取入组当日血标本。结果:本研究共纳入研究对象90例，年龄（58.36±17.46）岁，男性58例，女性32例。其中脓毒症29例，脓毒症休克31例，非脓毒症15例，另招募志愿者15名作为健康对照组。脓毒症和脓毒症休克组患者28 d病死率为28.3%。患者入ICU第1天，sPD-1水平（pg/mL）脓毒症休克组和脓毒症组显著高于非脓毒症组和健康对照组[512.64（216.85, 1 039.41） vs. 261.90（191.96, 421.99） vs. 191.56（151.26, 232.66） vs. 200.51（162.14, 241.26），均 P<0.05]，脓毒症休克组sPD-1高于脓毒症组，且一周内持续处于高水平（均 P<0.05）。脓毒症和脓毒症休克组淋巴细胞计数第1天显著低于健康对照组和非脓毒症组（均 P<0.05），且脓毒症休克组淋巴细胞计数减低持续至第7天（均 P<0.05）。淋巴细胞百分比和总T淋巴细胞，脓毒症和脓毒症休克组显著低于健康对照组和非脓毒症组（均 P<0.05），而总B淋巴细胞差异无统计学意义（均 P>0.05）。脓毒症休克组第7天CD8 +T淋巴细胞仍显著低于脓毒症组[（18.36±2.23）% vs. （28.28±2.97）%， P<0.05]。血清免疫球蛋白IgG、IgM水平，脓毒症和脓毒症休克组显著低于健康对照组和非脓毒症组（均 P<0.05），第7天恢复。ROC曲线分析评估sPD-1对预后不良的预测价值，结果显示第7天的sPD-1对脓毒症及脓毒症休克患者28 d预后有预测价值，最佳截断值为286.52 pg/mL，其敏感度为100.00%，特异度为56.25%。 结论:脓毒症和脓毒症休克患者早期即出现免疫抑制，脓毒症休克患者免疫抑制时间长，早期以体液免疫抑制为主，后期以细胞免疫抑制为主。

目的 观察扶正方药治疗三线及以上晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的疗效及对血清可溶性免疫检查点表达的影响.方法 根据治疗情况将211例三线及以上晚期NSCLC患者分为暴露组(106例)、非暴露组(105例),非暴露组给予标准西医治疗方案,暴露组在标准西医治疗方案的基础上加用中医扶正方药.观察无进展生存期(PFS),绘制Kaplan-Meier生存曲线,对临床因素及预后指标进行Cox多因素分析;治疗4个周期后计算疾病控制率,比较生活质量量表[癌症患者生活质量核心问卷量表(QLQ-C30)、肺癌特异性量表(QLQ-LC13)]评分、血清可溶性免疫检查点[包括可溶性CD137(sCD137)、可溶性程序性细胞死亡配体1(sPD-L1)、可溶性程序性细胞死亡配体2(sPD-L2)、可溶性程序性死亡分子-1(sPD-1)、可溶性淋巴细胞激活基因-3蛋白(sLAG-3)、可溶性半乳糖凝集素-9(sGal-9)等]表达水平的变化情况.结果 ①暴露组脱落2例、非暴露组脱落1例,最终完成试验者208例,暴露组、非暴露组各104例.②暴露组、非暴露组的中位PFS分别为7.5个月、6.3个月,暴露组PFS长于非暴露组(x2=4.656,P＜0.05);与非暴露组相比,暴露组PFS缩短的风险降低了22.8%.③暴露组、非暴露组疾病控制率分别为85.6%、79.8%;两组疾病控制率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).④治疗前后组内比较,暴露组QLQ-C30量表中躯体功能、情绪功能、认知功能和总健康状况、疲倦、疼痛、气促、失眠、食欲、便秘、腹泻评分差异有统计学意义(P＜0.05),QLQ-LC13量表中气促、咳嗽、口腔溃疡、其他部位痛评分降低(P＜0.05);非暴露组QLQ-C30量表中躯体功能、社会功能、疼痛、气促、便秘、腹泻评分差异有统计学意义(P＜0.05),QLQ-LC13量表中气促、咳嗽评分降低(P＜0.05),其他部位痛评分升高(P＜0.05).组间治疗后比较,QLQ-C30量表中躯体功能、总健康状况、疲倦、疼痛、气促、食欲、便秘评分差异有统计学意义(P＜0.05),QLQ-LC13量表中气促、咳嗽、口腔溃疡及其他部位痛评分差异有统计学意义(P＜0.05).⑤治疗前后组内比较,暴露组血清sPD-L1、sPD-L2水平降低,sPD-1、sGal-9水平升高(P＜0.05);组间治疗后比较,sCD137、sPD-L1、sPD-L2、sLAG-3水平差异有统计学意义(P＜0.05).结论 与单纯使用西医治疗相比,加用扶正方药治疗三线及以上晚期NSCLC患者具有延长PFS、改善生活质量、调节免疫微环境等作用.

目的 探索可溶性CD83(sCD83)发挥免疫抑制活性的分子机制.方法 分离6～8周龄C57B/6小鼠骨髓祖细胞培养骨髓衍生树突细胞(DCs)和脾脏内CD4+T细胞.分别向细胞培养物中加入10μl PBS处理(Control组)或10μl 10μg/ml的可溶性CD83处理(sCD83组).流式细胞术测定DCs中的非成熟DCs(imDCs)和CD4+T细胞中的CD4+CD25+FOXP3+T细胞,即调节性T(Treg)细胞的细胞计数所占百分比.Western blot测定imDCs胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平及Treg细胞内磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、细胞核和细胞质核因子-κB亚基RelB和程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)的表达水平.ELISA测定DCs培养上清液中犬尿酸的水平以及imDCs和CD4+T细胞共培养系统中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-12的水平.结果 与Control组相比,sCD83组表达表面标志物CD40、CD83、CD86、Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHC Ⅱ)的DCs细胞计数所占百分比降低(P<0.05);DCs培养上清液中犬尿酸的水平上升(P<0.05).与Control组相比,sCD83组Treg细胞计数所占百分比升高(P<0.05);胞内PTEN和细胞质RelB的表达增强(P<0.05),而p-Akt、细胞核RelB和PD-1的表达降低(P<0.05);Akt的表达水平差异无统计学意义.在imDCs与CD4+T细胞共培养物上清液中,与Control组相比,sCD83组IL-10和TGF-β 的水平升高(P<0.05),IL-12的水平降低(P<0.05).结论 sCD83能够抑制CD4+T细胞核内RelB的水平调节相关细胞因子的分泌,影响DCs和Treg细胞的细胞间通讯,促进耐受性imDCs和Treg细胞的增殖.

目的 探讨可溶性共刺激分子[可溶性程序性细胞死亡蛋白配体 1(sPD-L1)、可溶性B7 同源体 3(sB7-H3)、可溶性B7 同源体 4(sB7-H4)]在结直肠癌患者血清中的表达情况,及其与患者临床病理参数的关系及预后评估价值.方法 酶联免疫吸附试验法检测 68 例结直肠癌组血清 sPD-L1、sB7-H3、sB7-H4 表达水平,并与良性病变组及健康对照组进行比较,同时分析其与患者病理参数的关系.结果 结直肠癌组 sB7-H3 表达水平为(9.128±0.509)ng/mL,良性病变组和健康对照组 sB7-H3 表达水平分别为(7.029±0.293)、(6.701±0.373)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05).受试者工作特征曲线分析显示 sB7-H3 曲线下面积为 0.6805(95%CI:0.5848～0.7761),P=0.0010.与肿瘤最大径<5 cm、TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、无淋巴结转移患者比较,肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移患者血清 sB7-H3 表达水平显著增高.sB7-H4 水平则与患者TNM分期及有无淋巴结转移显著相关(P=0.0372、0.0078);与 TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、无淋巴结转移患者比较,TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移的患者血清sB7-H4 表达水平明显增加.结论 结直肠癌患者血清 sB7-H3 表达水平显著升高,在结直肠癌疾病诊断中具有潜在的临床应用价值;患者血清 sB7-H3 与sB7-H4 水平与患者的TNM分期及是否淋巴结转移有显著相关,可作为结直肠癌进展与预后判断的潜在分子标志.

目的 探索艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者血浆中可溶性程序性细胞死亡受体1(sPD-1)表达水平增高的原因.方法 采用流式微球阵列多重蛋白定量检测技术,检测HIV-1感染者(HIV组)和健康人(HD组)外周血13种炎症性细胞因子的含量,分析其与血浆sPD-1水平的相关性;体外分析相关细胞因子对外周血单个核细胞sPD-1表达水平的影响.结果 HIV组(n=31)血浆sPD-1蛋白含量平均(295.21±167.7) pg/mL,显著高于HD组(n=30)的(104.69±72.04)pg/mL(P＜0.000 1);此外,HIV组血浆γ干扰素(IFN-γ)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)、人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10、IL-12、IL-33等7种炎症性细胞因子含量显著高于HD组,且MCP 1(P＜0.000 1,r=0.581 2)和IL-6(P=0.006 1,r=0.350 1)含量与血清sPD-1水平呈正相关,而重组人IL-6可显著增强健康人外周血单个核细胞表达sPD-1(P=0.000 3).结论 HIV-1可能通过诱导炎症性细胞因子IL-6的分泌,进而促进sPD-1的表达.

BAK1是富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶,参与调控植物先天免疫反应过程中的程序性细胞死亡过程.实验室已有的花生铝胁迫转录组数据揭示AhBAK1为铝胁迫响应基因.为研究其在花生抗铝机制中的作用,该文分析了铝胁迫下AhBAK1在花生耐铝品种'99-1507'和铝敏感品种'中花2号'('ZH2')根尖中的转录变化,采用RT-PCR技术进行扩增AhBAK1的完整CDS序列,并对序列特征进行了分析.结果表明:AhBAK1显著响应铝处理,且在'99-1507'中有着更强的诱导表达;AhBAK1包括625个氨基酸残基,属富亮氨酸重复区类受体激酶,具跨膜域和蛋白激酶催化结构域,不存在信号肽,预测定位于细胞质膜;我们进一步构建了含有AhBAK1激酶域的pGEX-6p-1-AhBAK1-CD重组质粒,体外诱导表达出约70 kD可溶性蛋白,经凝胶亲和层析纯化,最终得到基于蛋白印迹实验(Western Blot)验证正确的重组蛋白.为进一步研究AhBAK1的生物学功能和生化功能奠定了基础.

目的 探讨免疫调节分子T细胞免疫球蛋白及黏蛋白3(T cell immunoglobulin-and mucin-domain-containing molecule-3,Tim-3)、程序性细胞死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)在水痘患者血清中的表达,并分析水痘患者血常规变化规律.方法 回顾性分析所有入组标本的血常规资料,并收集47例水痘患者发病期血清及35例健康体检者血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Tim-3及PD-1在血清中表达水平.结果 血常规结果分析发现水痘患者外周血白细胞计数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞百分比及血小板均显著低于对照组(P＜0.05),而单核细胞百分比、单核与淋巴细胞比值及超敏C-反应蛋白显著高于对照组(P＜0.05).水痘患者血清中Tim-3表达水平显著高于对照组(P＜0.01),而PD-1的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 水痘患者血常规变化符合感染性疾病规律.免疫调节分子Tim-3高表达于水痘患者,可能是患者机体低免疫状态的重要原因,可作为水痘患者诊治潜在指标.