病毒是一种只含有一种核酸和蛋白质外壳的结构简单的非细胞结构微生物。随着分子生物学的发展，作为重要生物资源，微生物菌(毒)种的保藏价值逐渐得到人们的关注。相对于容易污染微生物的传代法和容易失活的干燥法，低温保藏作为一种便宜、简单、省时的方法，已广泛应用于微生物的保藏当中。但是关于病毒低温保藏的现有研究较少且不深入。基于此，本文根据病毒侵染特定细胞的特性，将病毒分为动物病毒、植物病毒和细菌病毒(噬菌体)，综述保藏温度、低温保护剂以及其它因素对不同种类病毒的低温保藏效果的影响，分析其病毒保藏技术问题及发展趋势，为进一步完善微生物低温保藏的现状研究提供参考。

目的:探讨不同浓度的甲基丙烯酸酯（GelMA）水凝胶支架的性能，以及对大鼠髓核干细胞（NPSCs）体外增殖、分化及细胞外基质相关蛋白表达的影响。方法:（1）配置浓度为5%、10%、15% GelMA水凝胶溶液，经紫外光照射固化、冷冻干燥、喷金处理，制备相应浓度的GelMA水凝胶支架。用扫描电镜观察支架并测量孔径，使用科学表面分析仪测量支架静态水接触角，使用机械测试仪测量支架压缩模量，使用精密天平测量在37 ℃恒温箱中放置0、2、4、6、8、10、12 h时支架的含水量。（2）取6周龄雄性清洁级SD大鼠8只，体质量为80~100 g，切开椎间盘取髓核组织，分离培养NPSCs。取第3代NPSCs分别进行成骨、成软骨及成脂分化培养，分别用茜素红、阿利新蓝及油红O对三系细胞进行染色，观察NPSCs的三系分化潜能。（3）取第3代NPSCs分为无支架的对照组和5%、10%、15% GelMA水凝胶支架组，对照组加入培养基培养3 d，不同浓度GelMA水凝胶支架组紫外光照射固化后接种NPSCs，加入培养基培养7 d。各组细胞采用免疫荧光染色，观察细胞形态的变化。（4）取第3代NPSCs分别接种于紫外光照射固化后的5%、10%、15% GelMA凝胶支架中，采用细胞计数（CCK）-8试剂盒检测细胞增殖能力，采用活细胞/死细胞双染试剂盒检测细胞活力，采用免疫荧光染色检测Agg和Col Ⅱ蛋白的表达情况。结果:（1）5%、10%、15%GelMA水凝胶支架的孔径分别为（94.00±1.00）、（77.33±5.69）、（52.33±2.31）μm，水接触角分别为28.00°±2.65°、39.00°±2.65°、46.00°±1.00°，压缩模量分别为（45.77±8.66）、（64.63±3.06）、（86.07±10.73）kPa。不同浓度GelMA水凝胶支架随浓度的增高，支架的孔径减小，水接触角、压缩模量增大，差异均有统计学意义（ F=102.40、49.40、21.51， P值均<0.05）。不同浓度GelMA水凝胶支架的含水量均随时间的增加而下降；而同一时间不同浓度GelMA水凝胶支架的含水量随浓度的增高而减少，3者间含水量比较差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（2）NPSCs三系分化结果显示，培养的NPSCs成功分化为成骨细胞、成软骨细胞、成脂细胞，有多向分化的潜能，具备干细胞的特性。（3）水凝胶支架上NPSCs随着GelMA浓度的增加，细胞形态由正常的梭形逐渐变椭圆，细胞突伸展逐渐减弱，细胞质和细胞核比例逐渐减小，细胞聚集的集落逐渐变小。（4）NPSCs增殖实验显示：培养第1天时，不同浓度的GelMA水凝胶支架上NPSCs的光密度（OD）值差异无统计学意义（ F=1.63， P=0.272）；培养第4、7天时，随GelMA水凝胶支架浓度的增高，NPSCs的OD值均呈下降趋势，差异均有统计学意义（ F=61.48、203.20， P值均<0.001）。NPSCs活力实验显示：培养第4天时，不同浓度的GelMA水凝胶支架上NPSCs活细胞占比差异无统计学意义（ F=0.15， P=0.860）；培养第7天时，随GelMA水凝胶支架浓度的增高，NPSCs活细胞占比呈下降趋势，差异有统计学意义（ F=68.83， P<0.001）。（5）5%、10%、15%GelMA水凝胶支架中Agg蛋白的免疫荧光值分别为16.79±1.29、13.35±0.70、10.475±0.54，Col Ⅱ蛋白的免疫荧光值分别为17.17±1.49、13.32±1.65、9.53±1.01。随着GelMA水凝胶浓度的增高，Agg、ColⅡ蛋白的表达均呈下降趋势，差异均有统计学意义（ F=22.10、36.64， P值均<0.001）。 结论:5%GelMA水凝胶支架具有较好的物理特性，适合NPSCs的生长、存活，能较好地促进细胞外基质相关蛋白的表达。

目的:通过离体猪肾模型初步探讨使用猪源纤维蛋白粘合剂辅助清除肾结石碎片的可行性。方法:在离体猪肾结石模型（含100 mg干燥的、≤ 1 mm人结石组分的猪肾6个，含100 mg干燥的、≤3 mm人结石组分的猪肾6个）中检验输尿管软镜配合12/14Fr输尿管导引鞘。实验组使用网篮-粘合剂取石（≤1 mm结石， n=3；≤3 mm结石， n=3）；对照组仅使用网篮取石（≤1 mm结石， n=3；≤3 mm结石， n=3），对比两组的取石效果、结石清除率和操作时长等。收集健康人尿液，将猪源纤维蛋白粘合剂形成的凝胶放入其中，观察其特性。 结果:猪源纤维蛋白粘合剂能在生理盐水和尿液中形成凝胶并黏附包裹结石碎片。≤1 mm结石者实验组与对照组的操作时长分别为（14.0±4.2）和（29.0±0.7）min，（ P<0.05），结石清除率分别为（90.9±1.4）%和（48.4±15.7）%（ P<0.05）；≤3 mm结石者实验组与对照组的操作时长分别为（12.8±4.0）和（30.0±0）min（ P<0.05），结石清除率分别为（91.1±5.0）%和（20.7±8.0）%，（ P<0.05）。凝胶在健康人尿液和生理盐水中37 ℃静置24 h自行溶解。 结论:浓度适宜的猪源纤维蛋白粘合剂可用于辅助软镜碎石术中清除小结石碎片。

目的:结合3D打印技术与可降解复合材料，探讨可用于中耳听力重建的组织工程听骨支架的制备方法。方法:选择国产高分子聚合物聚乳酸-羟基乙酸共聚物（polylactic acid-glycolic acid copolymer, PLGA）和可降解陶瓷β-磷酸三钙（β-tricalcium phosphate,β-TCP），按设计配比应用低温沉积方法制备打印原料。采用自主研发的低温沉积打印装置，根据所需支架的外形设计编程代码，选择合适的打印程序文件，低温环境下制备组织工程听骨支架。支架打印成型后冷冻干燥，灭菌备用。分别用光镜、扫描电镜观察支架表观特征与内部结构，检测其孔径、孔隙率以及力学特性。结果:3D打印后可获得所需降解支架，呈小柱状，直径1.5 mm，长度6.0 mm，光学显微镜下可见其表面有微孔。扫描电镜下构成支架的单丝呈横竖交织的经纬结构，间距1.2 mm，单丝间有交联孔道互相连接。支架表面可见直径100~400 μm类圆形或四边形孔隙，其间的交联孔道直径约50 μm，周边圆形微孔直径约10~40 μm。在PLGA材料表面附着粒径约700 nm的β-TCP微粒。整体支架的平均孔隙率为（83.43±0.01）%，负载重组人骨形态发生蛋白-2（recombinant human bone morphogenetic protein-2，rhBMP-2）含量约0.7 μg/mm 3。经冻干处理后支架机械强度适中，拉伸及挤压后无明显变形，符合组织工程骨力学要求。 结论:运用低温沉积打印法，通过严格控制的流程与条件，可制备供植入实验的高分子聚合物-可降解陶瓷听骨组织工程支架。该复合材料具有合适的孔隙率及力学特性，可负载成骨诱导因子。

象思维来源于《周易》,是通过将自然界万物相似或者相近的事物,相互联系并进行整理归纳总结,从而得出事物的客观规律及其本质.象思维是中国古代哲学的主要思维方式,也是中医学的核心思维方式.对于中药大枣的认识更是离不开象思维的指导.大枣作为鼠李科植物枣的干燥成熟果实,可入脾、肺、心三经,具有补中益气,养血安神等作用.基于对象思维的认识,从大枣的生理特性、作用功效、临床应用三个方面对大枣的药用价值进行重新梳理解读,希望在临床发挥更多作用.

在我国,商陆属植物商陆Phytolacca acinosa或垂序商陆P.americana的干燥根被列为中药商陆.商陆属植物含有三萜类、三萜皂苷类、多糖类、抗病毒蛋白类、黄酮类等多种化学成分,其中最主要的是三萜类及三萜皂苷类化合物.商陆属植物具有抗炎、抗肿瘤、抗细菌、抗真菌、抗疟、驱虫等活性.该文对近年来商陆属植物的化学成分、药理作用、毒性及重金属富集特性进行了归纳整理,以期为商陆属植物的活性成分研究和药物开发提供理论依据.

目前，大面积烧伤患者创面封闭广泛使用的方法是自体刃厚皮或自异体混合邮票状皮片移植术，以应对大面积烧伤后自体皮源匮乏的问题。移植皮片后，多采用网眼纱布作为内层覆盖物，以充分引流植皮后创面渗液。如何提高植皮后皮片存活率、减少术后早期换药过程中皮片损伤是临床应用邮票状皮片移植术时较为关注的问题。本课题组采用一种新型自体表皮膜片载体及应用模式，在改善膜片机械特性、为皮片移植(尤其是邮票状皮片移植)术后提供一种充分引流渗液的覆盖物的同时，充分发挥自体表皮膜片促愈作用，提高植皮后皮片存活率，减少术后早期换药过程中皮片损伤及创面疼痛。该载体可促进表皮细胞黏附、扩增，在保证表皮细胞膜片发挥促进创面愈合的生物效应的同时，充分引流创面渗液，降低积液导致局部炎症、感染的风险。临床纳入大面积烧伤患者25例次，单独应用自体表皮细胞膜片或联合邮票状皮、网状皮植皮术。结果表明，在术后换药期间创面均较为干燥，无明显积液、感染发生；采用自体表皮细胞膜片覆盖的植皮创面皮片存活率更高，具有更加明显的表皮爬行、融合成片及再上皮化表现。本课题组通过前期动物试验和临床试验的探索、总结，所制备自体表皮细胞膜片的应用具有以下特点：(1)适用于采用复合邮票状皮、网状皮移植修复的深Ⅱ度削痂后创面、Ⅲ度创面及烧伤后残余创面等；(2)应用2周前(或尽早，如入院后1～2 d内)取正常皮肤分离获取表皮细胞并冻存，术前2 d种植细胞于载体，2 d后形成亚融合；(3)取皮部位包括会阴部、下腹部、腋窝、四肢、躯干等皮肤松弛部位，可取断层皮、全厚皮；(4)术后1周左右换药，如无异常继续使用至载体与创面分离。目前本研究仍在进一步纳入临床病例并对患者创面愈合持续随访、追踪，以期探究其在改善创面愈合后瘢痕结局等方面的作用。

白及Bletillae Rhizoma为兰科多年生植物白及的干燥块茎,具有较高的药用价值.为了满足市场的需求,我国许多省份加大了对白及的人工种植,而人工种植白及的品质是我国白及产业高质量发展的基本保障.白及的品质主要由白及多糖、白及苷、总酚等有效成分决定.通过对白及块茎中白及多糖、白及苷、总酚在不同省份、种植年限、年龄的分布特征进行综述,讨论白及块茎中主要有效成分的影响因素.并探讨白及地上部分和须根的药用潜力,及对白及地上部分、块茎、须根下一步在品质、种植方面的研究内容进行展望,为白及地上部分、块茎、须根的资源合理开发利用提供参考依据.

蟾酥是一种具活性的蟾蜍提取物,其炮制方法是将中华大蟾蜍皮肤腺和耳后腺分泌的毒液进行酒制或高温干燥而得.作为一种在中国被用来治疗疾病已有上千年历史的天然产物,蟾酥具有强心、镇痛、抗心肌缺血、抗内毒素休克、抗癌等多种药理作用.沙蟾毒精(arenobufagin,ARE)是蟾酥的主要化学成分之一,其抗癌机制也在近十年来被越来越多地阐明.ARE可通过多种途径发挥抗癌作用,如诱导癌细胞凋亡和/或自噬、坏死、细胞周期阻滞,抑制癌细胞迁移和侵袭,抑制血管生成等.目前有关ARE的研究主要关注在其癌细胞选择性毒性和抗癌分子机制方面,多为细胞和动物水平.受限于ARE毒副作用较大、靶点不明确和药代动力特性不清楚等,ARE尚未进入西医临床应用阶段.该文梳理了ARE的抗癌活性、抗癌分子机制以及与其他抗癌药物联合使用的相关研究成果,以期为完善ARE的抗癌机制研究提供新的方向.

象思维是以中国古代哲学为基础的思维模式,同时也是远古时期条件限制下的思维产物,不仅丰富中药理论,亦对中医药学发展起到推动作用.运用取象比类思维建立物象与功用之间的联系,既合理严谨,亦不失其传统文化特性.海螵蛸即乌贼科动物乌贼的干燥内壳,可入肝、肺、肾三经,具有收敛止血、固崩止带、驱翳明目、软坚燥湿之功.该文以海螵蛸为例,从乌贼生长环境、生理特性以及乌贼形态三方面探寻海螵蛸的归经及功效,对海螵蛸之药用价值重新解读,并结合古代医家临床效验与现代药理研究加以佐证,完善海螵蛸之药用内涵.