目的:探究孕妇外周血微小 RNA-152(miR-152)、miR-210 与子痫前期(PE)病情程度及妊娠结局的相关性.方法:选取2018 年7 月至2022 年 5 月我院 200 例PE 患者,根据病情严重程度分为轻度组(轻度PE患者,n=114)和重度组(重度PE患者,n=86),另选同期、同年龄段健康孕妇作为对照组(n=100).比较三组血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、24h 尿蛋白定量(24h Upro)、钙离子(Ca+)、外周血miR-152、miR-210 水平,分析外周血miR-152、miR-210 水平与PE病情程度、血压、24h Upro及Ca+相关性.PE患者随访至妊娠结束,比较不同妊娠结局PE 患者临床资料、外周血 miR-152、miR-210 水平,通过Lasso回归和Logistic回归分析预测因素与不良妊娠结局的关联性,通过受试者工作特征曲线(ROC)、临床决策曲线(DCA)评价外周血miR-152、miR-210 对预测PE患者发生不良妊娠结局的价值及临床效用.结果:重度组、轻度组、对照组SBP、DBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);外周血miR-152、miR-210 水平与PE病情程度、血压、24h Up-ro呈正相关(P<0.05),与 Ca+水平呈负相关(P<0.05);发生不良妊娠结局年龄、流产史、病情程度、SBP、DBP、24h Upro、Ca+、外周血miR-152、miR-210 水平与未发生不良妊娠结局患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);Lasso回归选出5 个预测变量为病情程度、SBP、24h Upro、外周血 miR-152、miR-210水平;Logistic回归显示,外周血miR-152、miR-210 水平是PE 患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05);ROC、DCA 结果显示,外周血 miR-152、miR-210 联合预测 PE 患者发生不良妊娠结局具有良好的预测价值和临床效用.结论:外周血miR-152、miR-210 在PE 患者中表达上调,且与病情程度、妊娠结局显著相关,其联合预测患者发生不良妊娠结局具有一定参考价值和临床效用.

目的 探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白 2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性.方法 选取 2019 年 8 月至 2020 年 8 月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者 48 例为HFpEF组,同期健康体检者 52 例为对照组.以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2 水平.研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值.使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性.结果 HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2 水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05).HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05).HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05).结论 血清miR-152-5p、LTBP-2 水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关.

目的 探讨微小RNA(miR)-152和miR-146b-5p在子宫内膜息肉中的表达,及其对术后复发的预测价值.方法 收集2021年1月至2022年10月在石家庄市第六医院接受宫腔镜息肉切除术的196例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,根据患者术后6个月的复发情况分为复发组(53例)和未复发组(143例),另选取同期因不孕症进行宫腔镜检查的196例患者作为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测子宫内膜息肉组织和正常子宫内膜组织中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平,并进行组间比较;采用多因素Logistic回归分析子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析子宫内膜息肉中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平对子宫内膜息肉患者术后复发的预测价值.结果 复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、孕激素受体(PR)水平明显低于未复发组和对照组(P<0.05),血管内皮生长因子(VEGF)、雌激素受体(ER)水平明显高于未复发组和对照组(P<0.05);未复发组 miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、PR水平明显低于对照组(P<0.05),VEGF、ER水平明显高于对照组(P<0.05).进一步研究显示,miR-152、miR-146b-5p、VEGF、ER、PR是子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素(P<0.05).miR-152、miR-146b-5p二者联合预测子宫内膜息肉患者术后复发的曲线下面积(AUC)为0.949,灵敏度为96.23%,特异度为74.02%,优于二者各自单独预测(Z联合检测-miR-152=4.854、Z联合检测-miR-146b-5p=3.431,P<0.001).结论 子宫内膜息肉组织中miR-152、miR-146b-5p表达明显下调,二者联合对预测子宫内膜息肉患者术后复发有较好的参考价值.

目的 探究叶酸对(folic acid,FA)血小板源生长因子(PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖迁移的影响及其机制.方法 体外用PDGF-BB诱导大鼠血管平滑肌细胞系A7r5增殖迁移,分为对照组、PDGF组、PDGF+FA组、PDGF+FA+ miRNA-152 inhibitor组、PDGF+FA+ miRNA-152 NC组.采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组VSMCs内miR-152的表达水平.采用CCK-8试剂盒检测各组VSMCs增殖水平.采用划痕实验检测各组VSMCs迁移水平.采用蛋白印迹法检测细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平.结果 RT-PCR结果显示PDGF干预降低VSMCs miR-152表达水平,而PDGF+FA组VSMCs miR-152表达水平显著高于PDGF组(P＜0.05).PDGF干预VSMCs的增殖迁移能力显著增强相对于对照组(P＜0.05),而PDGF+FA组的VSMCs增殖迁移能力低于PDGF组(P＜0.05),PDGF+FA+ miR-152 inhibitor组的VSMCs增殖迁移能力强于PDGF+FA组(P＜0.05).结论 miR-152参与介导FA抑制PDGF-BB诱导的VSMCs增殖迁移作用.

目的:分析贲门癌与癌旁组织中长链非编码RNA (lncRNA)和微小RNA(miRNA)的差异表达谱及二者的相关性.方法:利用基因芯片技术鉴定15例贲门癌与癌旁组织中的lncRNA及miRNA的差异表达谱,生物信息方法分析与H19相互作用的候选miRNA分子,qRT-PCR验证H19和miR-148a-3p在贲门癌中表达的相关性.结果:15例贲门癌与癌旁组织中鉴定出5倍以上差异性表达的lncRNA 182个,2倍以上差异性表达的miRNA 152个.生物信息学预测结果表明,lncRNA H19与7个miRNA表达具有相关性.qRT-PCR验证37例贲门癌与癌旁组织中H19和miR-148a-3p的表达呈负相关(r=-0.398,P＜0.001).结论:贲门癌中差异表达的lncRNA和miRNA分子参与了癌变过程,H19可能直接调控miR-148a-3p的表达.

目的 探讨微小RNA-138(miR-138)对zeste同源增强子2( EZH2)的靶向调控作用及甲状腺癌细胞8505C侵袭迁移的影响.方法 miR_pathway在线分析miR-138在甲状腺癌组织中的表达及调控的生物学过程;脂质体法向8505C细胞转染miR-138模拟物(过表达组)或阴性对照序列(NC组)并设未转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR( QPCR)检测miR-138水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖情况,划痕实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数, QPCR检测EZH2、基质金属蛋白酶-9( MMP-9)、Janus激酶1(JAK1)和信号转导和转录激活因子3( STAT3)的mRNA水平, Western blotting检测EZH2、MMP-9、JAK1、磷酸化JAK1(p-JAK1)、STAT3、磷酸化STAT3( p-STAT3)和MMP-9的蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-138对EZH2的靶向调控作用.结果 miR_pathway在线分析发现miR-138在甲状腺癌中调控多个生物学过程,且在甲状腺癌组织中的表达低于正常组织(P＜0. 05).过表达组的miR-138水平为12. 657±2. 263,高于对照组的1. 025±0. 087和NC组的1. 109±0. 097(P＜0. 05);与对照组和NC组相比,过表达组转染24、48 h的细胞增殖活力降低(P＜0. 05).过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为( 22. 571± 2. 168)%和(152. 3± 16. 5)个,低于对照组的(59. 424± 3. 624)%和(287. 4±17. 5)个及NC组的(61. 280±4. 035)%和(278. 5±16. 3)个( P＜0. 05);miR-138模拟物对EZH2野生型3’端非翻译区的荧光素酶活性有抑制作用( P＜0. 05),但对突变型无影响(P＞0. 05).与其余两组相比,过表达组的 MMP-9、EZH2、p-JAK1和p-STAT3水平降低(P＜0. 05),而JAK1和STAT3水平的差异无统计学意义( P＞0. 05).对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P＞0. 05).结论 miR-138在甲状腺癌组织中低表达,且该miRNA在甲状腺癌中发挥抑制增殖和侵袭迁移的抑癌作用,可能与靶向调控EZH2和JAK1／STAT3／MMP-9通路有关,有作为甲状腺癌治疗候选靶点的潜能.

目的 探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1( JAK1)／信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的miR-520e水平;体外常规培养A549细胞并采用脂质体分别转染模拟物(过表达组)和阴性对照序列(NC组),以仅经脂质体处理的细胞为对照组.采用QPCR、活细胞计数CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-520e和含锌指和BTB结构域7A(ZBTB7A)水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、磷酸化JAK1(p-JAK1)和磷酸化STAT3(p-STAT3)水平;双荧光素酶报告基因系统联合荧光素酶报告质粒psi-CHECK-2验证miR-520e与ZBTB7A的靶向关系.结果 与正常细胞相比,NSCLC细胞的miR-520e水平降低,其中A549细胞最低,差异有统计学意义( P＜0. 05).过表达组的miR-520e水平为19. 562± 1. 448,高于对照组的1. 002± 0. 057和NC组的1. 053±0. 082,ZBTB7A水平为0. 173±0. 026,低于对照组的1. 109±0. 091和NC组的1. 076±0. 136,差异均有统计学意义(P＜0. 05).与对照组和NC组相比,过表达组转染36、48 h后的增殖活力及转染48 h后的MMP-9、p-JAK1和p-STAT3水平均降低(P＜0. 05).过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23. 618±3. 684)%和(51. 644±7. 069)个,低于对照组的(57. 089± 4. 569)%和(152. 269±12. 833)个及NC组的(59. 267±5. 671)%和(149. 075±11. 239)个( P＜0. 05). MiR-520e模拟物与携带野生型ZBTB7A 3’端非翻译区的psiCHECK-2载体共转染细胞的相对荧光强度降低(P＜0. 05).结论 miR-520e在NSCLC细胞中表达下调且可能通过靶向ZBTB7A降低JAK1／STAT3信号通路活性来抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移.

目的 探讨微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对肝癌细胞侵袭、迁移和含锌指和BTB结构域2( ZBTB2)表达的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721的miR-146a-5p水平;体外常规培养SMMC-7721细胞进行转染,根据转染物不同分为增强转染组(转染miR-146a-5p mimics)、抑制转染组(转染miR-146a-5p in-hibitor)和空白转染组(转染脂质体).采用实时定量PCR(QPCR)、四甲基偶氮噻唑蓝( MTT)比色法、Transwell细胞迁移和侵袭实验以及Western blotting检测miR-146a-5p水平、增殖活力、穿膜细胞数和ZBTB2水平;将含ZBTB2基因3’端非翻译区(3’ UTR)特定种子序列克隆至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2并通过双荧光素酶报告基因系统验证miR-146a-5p与ZBTB2的靶向关系.结果 SMMC-7721细胞的miR-146a-5p水平为0. 156±0. 047,低于LO2细胞的1. 157±0. 413(P＜0. 05).与空白转染组的1. 241±0. 375相比,增强转染组的miR-146a-5p水平升高至8. 159±1. 274,而抑制转染组则降低至0. 219±0. 036;与空白转染组相比,增强转染组转染48、72 h后的增殖活力降低,而抑制组则升高;细胞侵袭实验中,与空白转染组的(22. 069±3. 152)个相比,增强转染组的穿膜细胞数降低至(11. 847±2. 031)个,而抑制转染组则升高至(69. 540±4. 257)个;细胞迁移实验中,与空白转染组的(47. 338±5. 067)个相比,增强转染组的穿膜细胞数降低至(29. 640±3. 652)个,而抑制转染组则升高至(136. 426 ±18. 469)个;与对照组的0. 564 ± 0. 089 相比,增强转染组的 ZBTB2 水平降低至0. 168 ± 0. 023,而抑制组则升高至 0. 826 ± 0. 157;以上组间差异均有统计学意义(P＜0. 05).经miR-146a-5p mimics处理后,转染野生型ZBTB2 3’UTR质粒细胞的相对荧光强度低于转染突变型质粒(P＜0. 05).结论 miR-146a-5p在肝癌细胞中低表达并发挥抑癌作用,该miRNA可能通过靶向ZBTB2来抑制迁移侵袭能力,在肝癌靶向治疗中有一定应用前景.

目的:应用基因芯片技术筛选结肠癌耐药相关微小RNAs (miRNAs),探究miRNAs对化疗耐药的调控机制.方法:采用基因芯片技术分析结肠癌细胞系HCT8及其耐长春新碱细胞系HCT8/v中miRNAs的表达差异,对部分差异表达的miRNAs应用RT-qPCR进行验证,对表达差异显著的miRNAs进行靶基因预测,利用GeneOntology (GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对预测到的靶基因进行生物信息学分析.结果:筛选出342个差异表达miRNAs,其中190个表达上调,152个表达下调.RT-qPCR验证结果示miR-125-5p、miR-1 81 c-5p和miR-153-3的表达情况和芯片检测结果一致;miR-130a-3p和miR-149-3p的表达与芯片检测结果不一致.GO分析结果显示,耐药相关基因主要富集的旁路是RNA聚合酶Ⅱ调控区序列特异性DNA结合旁路,主要通过正向调节发挥作用,位置主要是在细胞内有界细胞器上.KEGG分析结果显示,耐药相关基因最为富集的是轴突导向通路、胰岛素信号通路及磷脂酶D信号通路.结论:miRNAs与结肠癌化疗耐药密切相关.对这些miRNAs的研究能使我们对结肠癌的化疗耐药机制有更深入的理解,并为逆转化疗耐药提供新的思路.

目的 膀胱癌(bladder cancer,BC)的诊断通常采用侵入式膀胱镜检查,微小RNA(miRNA)在BC中表达失调,可以作为初级诊断和监测的非侵入性尿标记物.本研究旨在探讨尿液miRNA作为BC标记物的诊断价值.方法 收集2017-12-01-2018-05-31在宁夏医科大学总医院泌尿外科就诊的48例膀胱癌、23例尿路感染及同期22名健康体检者的尿液,分为对照组、感染组、T1期肿瘤组、T2+ T3期肿瘤组.采用Real time PCR技术,筛选尿液样本miRNA标志物;对筛选的miRNA以Ct值比作为计量方式,绘制ROC曲线分析其诊断价值.结果 Real time PCR结果显示,对照组miR-126、miR-182和miR-146a的Ct值分别为30.08±0.49、32.07±1.17和28.13±0.88,感染组分别为28.37±0.51、30.93±0.40和26.72±0.78,T1期肿瘤组分别为27.62±0.78、29.06±0.43和25.62±0.86,T2+T3期肿瘤组分别为26.04±0.74、25.61±0.64和22.7±0.75,差异均有统计学意义,P＜0.05;miR-152表达稳定,组间差异均无统计学意义,P＞0.05.ROC曲线分析发现,以miR-182与miR-152的Ct比值作为诊断标准,其诊断价值最高,AUC值为0.887 5,特异性80.00％,灵敏性83.33％.结论 本研究建立的尿液miRNA比值模型,对于BC诊断有较高参考价值.