目的 建立同时测定低分子量肝素钠注射液中醋酸根离子、氯离子、亚硫酸根离子、硫酸根离子和草酸根离子含量的离子色谱法.方法 色谱柱为Dionex IonPac AS11(250mm×4 mm),保护柱为Dionex IonPac AG11(50mm×4mm),用淋洗液自动发生器,采用氢氧化钾梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测器为配有化学抑制器的电导检测器.结果 醋酸根离子、氯离子、亚硫酸根离子、硫酸根离子和草酸根离子分别在0.12～24μg·mL-1、0.24～48μg·mL-1、0.4～80 μg·mL-1、0.04～8 μg·mL-1、0.3～60 μg·mL-1 与测定值线性关系良好,r分别为 0.9991、0.9999、0.9999、0.9995、0.9995;加样回收率分别为 105.3％、101.0％、102.3％、96.8％和 108.3％(n=6),RSD分别为 2.2％、1.8％、1.6％、2.6％和 1.6％.结论 该方法操作简便,灵敏,高效,可用于同时测定低分子量肝素钠注射液中醋酸根、亚硫酸根、硫酸根、草酸根和氯离子的含量,为其质量提供保证.

目的 探讨人参不定根对心肌缺血(myocardial ischemia,MI)诱导的心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及作用机制.方法 采用高效液相色谱法和电感耦合等离子体质谱法检测人参不定根的主要成分.雄性C57BL/6小鼠sc异丙肾上腺素建立心肌缺血模型,心电图用于心肌缺血的诊断;采用苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色评估心脏组织病理变化;ELISA检测血清中炎症因子水平;qRT-PCR和 Western blotting检测心脏组织凋亡、纤维化和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症小体、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)相关因子表达.结果 人参不定根能明显缓解心肌缺血导致的心肌形态的病理变化,减少心肌纤维化面积,改善ST段抬高,抑制过度炎症.此外,人参不定根能明显抑制转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、NF-κB和NLRP3炎症小体通路相关蛋白的表达水平(P＜0.05、0.01、0.001).结论 人参不定根可通过抑制TGF-β1、NF-κB通路和NLRP3炎症小体的激活,缓解心肌缺血诱发的损伤.人参不定根具有缓解心肌缺血损伤的潜力.

目的 基于调节单胺系统功能和神经免疫炎症研究新型5-羟色胺和去甲肾上腺素重摄取抑制剂(SNRI)ZBH2012001的抗抑郁作用机制.方法 ①雄性ICR小鼠分为溶剂组(蒸馏水)、度洛西汀组(10或20 mg·kg-1)、ZBH2012001组(5,10和20 mg·kg-1),ig给药1h后采用小鼠悬尾实验(TST)和强迫游泳实验(FST)2 个行为绝望模型评价ZBH2012001 的抗抑郁作用.② 采用放射性配体结合实验评价ZBH2012001与人源5-HT转运蛋白(hSERT)和NE转运蛋白(hNET)的靶标亲和力.③雄性ICR小鼠分为溶剂组(蒸馏水),度洛西汀组(10或20 mg·kg-1)和ZBH2012001组(5,10和20 mg·kg-1);ig给药1h后采用小鼠5-羟色氨酸(5-HTP)诱导甩头实验、育亨宾毒性增强实验初步评价ZBH2012001对5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)系统功能的影响.④雄性ICR小鼠分为溶剂组(蒸馏水+0.1%冰醋酸),利血平模型组(蒸馏水+利血平5 mg·kg-1),度洛西汀(度洛西汀20 mg·kg-1+利血平5 mg·kg-1)组及ZBH2012001(ZBH2012001 5,10和20 mg·kg-1+利血平5 mg·kg-1)组,ig给予ZBH2012001 1 h后ip注射利血平:通过观察眼睑下垂、体温下降和运动不能行为评价ZBH2012001对利血平诱导的单胺系统功能下调的影响;采用TST评价ZBH2012001对利血平诱导的抑郁样行为的影响;采用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)检测利血平单胺耗竭模型小鼠海马组织中单胺递质及其代谢产物的含量;采用ELISA检测利血平诱导单胺耗竭模型小鼠海马组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量;采用Western印迹法检测利血平诱导单胺耗竭模型小鼠海马组织中离子化钙结合适配分子1(Iba-1)和核因子κB(NF-κB)的表达.结果 ①与溶剂组相比,ZBH2012001(5,10和20 mg·kg-1)显著减少小鼠在TST中的不动时间(P<0.01),ZBH2012001(20 mg·kg-1)显著减少FST中的不动时间(P<0.05).②ZBH2012001可竞争抑制[3H]-丙咪嗪与hSERT和[3H]-尼索西汀与hNET的结合,半抑制浓度(IC50)值分别为 84.95 和712.90 nmol·L-1.③与溶剂组相比,ZBH2012001(10和20 mg·kg-1)可显著增加5-HTP诱导的小鼠甩头次数(P<0.01),提高育亨宾诱导的小鼠死亡率(P<0.05,P<0.01).④在利血平诱导的小鼠抑郁模型上,与溶剂组相比,利血平模型组小鼠出现眼睑下垂,体温下降和运动不能(P<0.01),悬尾不动时间显著延长(P<0.01),海马NE,5-HT和DA水平显著下降(P<0.05,P<0.01),海马5-HT代谢转换率和DA代谢转换率显著升高(P<0.01),海马TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.05),海马Iba-1和NF-κB表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,ZBH2012001(5,10和20 mg·kg-1)可显著拮抗利血平诱导的小鼠眼睑下垂和体温下降(P<0.01),ZBH2012001(10和20 mg·kg-1)可显著缩短利血平小鼠的悬尾不动时间(P<0.05,P<0.01),ZBH2012001(20 mg·kg-1)可显著增加利血平小鼠海马NE和5-HT的水平(P<0.05),降低5-HT代谢转换率(P<0.05),显著降低利血平小鼠海马TNF-α和IL-6的水平(P<0.05),ZBH2012001(5,10和20 mg·kg-1)可显著降低利血平小鼠海马Iba-1表达(P<0.01),ZBH2012001(20 mg·kg-1)可显著降低利血平小鼠海马NF-κB表达(P<0.05).结论 ZBH2012001通过增强单胺系统功能以及抑制神经免疫炎症发挥抗抑郁作用.

目的:建立药用辅料乳糖中痕量亚硝酸盐、硝酸盐的离子色谱-抑制电导(IC-CD)检测法和高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)检测法.搭建在线膜抑制系统,结合LC-MS/MS技术进行结构确证,为药用辅料乳糖的前置风险控制提供新的策略.方法:IC-CD检测法和HPLC-UV检测法均采用高容量阴离子交换柱Dionex IonPacTM AS11-HC RFICTM(4.0mm × 250 mm)和保护柱Dionex IonPacTM AS11-HC RFICTM(4.0mm × 50 mm).IC-CD检测法流动相为氢氧化钾溶液,梯度洗脱,抑制型电导检测器的电导池温度为30℃;HPLC-UV检测法流动相为5 mmol·L-1氢氧化钠溶液,检测波长为210nm;两种方法的流速均为1.0mL·min-1,柱温均为30℃,进样量均为25 μL.结果:两种方法测定亚硝酸根在0.03～10 μg·mL-1范围内、硝酸根在0.02～200 μg·mL-1范围内线性关系均为良好(r＞0.999);亚硝酸根检测限和定量限分别为0.25 ng和0.75 ng,硝酸根检测限和定量限分别为0.25 ng和0.50ng;回收率在84.00％～100.70％之间;进样精密度RSD(n=6)在0.27％～1.33％之间;均满足检验需求.结论:两种方法均具有灵敏度高、专属性强、分离度好、前处理简单的优势,可表征药用辅料乳糖中痕量亚硝酸盐、硝酸盐的含量,也为其他药用辅料前置风险研究提供新的思路和参考.

目的 建立离子色谱法同时测定注射用阿莫西林钠/克拉维酸钾中钠离子与钾离子的含量,通过计算其成盐率,对不同企业样品的成盐工艺进行评价.方法 采用IonPac CS12A阳离子交换色谱柱(4 mm×250 mm)和IonPac CG12A保护柱(4 mm×50 mm),检测器为电导检测器,抑制器电流为20 mA,以6.7 mmol/L甲烷磺酸溶液为淋洗液,流速为1.0 mL/min.结果 钠离子浓度在6.01～18.04 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5);平均回收率为100.4％(RSD=0.4％,n=9);钾离子浓度在3.33～9.98 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998,n=5);平均回收率为100.2％(RSD=0.5％,n=9).测定了37批注射用阿莫西林钠/克拉维酸钾中钠和钾的含量,其成盐率分别为1.00～1.13和0.94～1.05.结论 本方法可用于注射用阿莫西林钠/克拉维酸钾中钠离子与钾离子的含量测定,各企业样品成盐情况较好,但需关注成盐剂的残留.

研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对坐骨神经部分损伤(spared sciatic nerve injury,SNI)诱导的神经病理性疼痛模型大鼠血浆和脑透析液中的药代动力学和镇痛活性的影响,考察TMP的镇痛效应与其脑内的血药浓度的相关性.雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、SNI组和SNI+TMP组,采用von fray纤维丝机械刺激法和冷喷法评价大鼠机械痛敏和冷痛敏行为.另取Sham+TMP组和SNI+TMP组,分别采用大鼠颈总静脉插管和前扣带回脑区(ACC)植入微透析探针,按照 80 mg·kg-1 单次腹腔注射TMP,应用自动采血和脑内微透析(灌流速度 1.0 μL·min-1)采样系统,分别收集血液和脑细胞外液,连续收集 24 h.液相色谱分离采用HSS T3 C18 反相色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.5 μm),流动相为甲醇-水(含0.005%甲酸),流速0.25 mL·min-1,梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾离子源,扫描方式为多反应正离子监测模式.定量分析离子对分别为TMP m/z 137/122,阿司匹林m/z 179/137.利用DAS 2.11 软件计算药代动力学参数.TMP镇痛效应和冷痛敏抑制最佳时间均为药后 60 min.TMP在SNI大鼠血浆和脑细胞外液中Tmax 为 15、30 min,Cmax 为(2 866.43±135.39)、(1 462.14±197.38)μg·L-1,AUC0-t 为(241 463.30±28 070.31)、(213 115.62±32 570.07)μg·min·L-1,MRT0-t 为(353.13±47.73)、(172.16±12.72)min,CLz为 0.73、0.36 L·min·kg-1.TMP的镇痛效应与其疼痛敏感区ACC的血药浓度具有明显的相关性,说明该方法适用于大鼠血浆和脑内透析液中TMP的检测,准确可靠、灵敏度高,能够实现"自动采血-微透析/PK-PD"关联分析理论应用在神经病理性疼痛研究中.

目的 采用离子色谱法测定滴眼剂中抑菌剂苯扎氯铵和苯扎溴铵的含量.方法 采用SH-AC-11色谱柱(250 mm×4.6 mm),电导检测器,淋洗液为23 mmol/L氢氧化钾溶液,流速为0.6 ml/min,抑制器电流为56 mA,进样量为25 μl.结果 苯扎氯铵和苯扎溴铵分别在1.25～62.50 μg/ml和1.02～51.00 μg/ml范围内线性关系良好(r分别为0.9997和0.9998),加样回收率分别为100.6％(RSD=1.7％)和100.4％(RSD=1.6％).结论 该方法准确性高,专属性强,可用于滴眼剂中抑菌剂苯扎氯铵和苯扎溴铵的质量控制.

目的 建立采用抑制电导离子色谱法测定醋酸钙颗粒中钙离子的方法.方法 采用Dionex IonPacTM CS12A色谱柱(250 mm×4 mm),Dionex IonPacTM CG12A保护柱(50 mm×4 mm),以 0.02 mol/L甲烷磺酸溶液为洗脱液,体积流量 1.0 mL/min,柱温 30℃,检测池温度 35℃,电导检测器,抑制器为Dionex CDRS 600 4 mm,电流值 59 mA,进样体积为 25 μL.结果 钙在 0.002～6.000 μg/mL线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为 104.6%,RSD值为 1.8%.结论 方法简单、专属性高、准确可靠,能够有效地控制醋酸钙颗粒中钙离子.

目的 建立一种同时测定唑来膦酸原料药及其粉针剂中的磷酸盐和亚磷酸盐的离子色谱方法.方法 采用Dionex?IonPac?AS18Analytical(250 mm×4 mm)色谱柱,Dionex?IonPac?AG18Analytical(50 mm×4mm)为保护柱,以碳酸钠和碳酸氢钠水溶液为淋洗液进行等度洗脱,体积流量为1.0mL·min-1,采用抑制型电导检测器检测.结果 亚磷酸根和磷酸根与相邻峰的分离效果良好,分离度均大于1.5.亚磷酸根和磷酸根分别在2.075～20.750 μg·mL-1和2.000～20.000 μg·mL-1范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998 9;原料药中亚磷酸根和磷酸根的回收率分别在94.7％～108.0％和98.4％～106.3％,回收率RSD分别为3.6％和2.3％;粉针剂中亚磷酸根和磷酸根回收率分别在93.9％～100.4％和98.2％～104.4％,回收率RSD分别为2.5％和1.9％;重复性、精密度、耐用性、溶液稳定性均符合要求.3批原料药及粉针剂中均未检出亚磷酸根和磷酸根杂质.结论 该方法准确、灵敏、操作简单,适用于唑来膦酸及其粉针剂中磷酸盐和亚磷酸盐杂质的质控研究.

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对藏药宽筋藤Tinospora sinensis藤茎中生物碱类成分进行分析和鉴定.方法 采用色谱柱Waters ACQUITYUPLCC18色谱柱(100mm×2.1 mm,1.7 μm),以流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液进行梯度洗脱.使用电喷雾离子源(ESI),正离子模式下采集数据;通过测定宽筋藤生物碱对脂多糖诱导小鼠巨噬RAW264.7细胞释放一氧化氮的抑制能力,评价其抗炎活性.结果 通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定出73个生物碱,包括12个原小檗碱型生物碱、23个四氢原小檗碱型生物碱、20个苄基异喹啉类生物碱、9个阿朴啡类生物碱、9个其他类生物碱.抗炎活性检测表明,宽筋藤生物碱对脂多糖刺激的RAW264.7细胞的一氧化氮具有较强的抑制作用.结论 对藏药宽筋藤生物碱类成分进行较为全面系统地解析,为药效物质基础研究及开发应用奠定基础.