目的:利用温敏性水凝胶泊洛沙姆 407(P407)负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞(Ishikawa)铁死亡.方法:构建并评估负载Erastin水凝胶复合物(P407Era)的物理表征、相变时间和缓释性能.实验分为对照(control,Ctrl)组、水凝胶(P407)组、Erastin处理(Erastin)组和水凝胶负载 Erastin(P407Era)组.CCK-8 检测细胞增殖情况,ROS试剂盒检测细胞内活性氧含量,TUNEL原位细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,Mito-Tracker Red CMXRos检测细胞线粒体膜电位,Mito-FerroGreen检测线粒体内Fe2+含量,免疫荧光和RT-qPCR检测铁死亡相关分子的表达水平.结果:P407 水凝胶的相变时间与浓度呈负相关,18%浓度的P407 水凝胶复合物药物缓释性能较优.与对照组相比,P407 组、Erastin组和P407Era组的Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭均受明显抑制,且P407Era组比Erastin组抑制增殖、迁移和侵袭作用更加明显;Erastin组及P407Era组细胞活性氧水平、细胞凋亡相对数量显著升高;细胞线粒体膜电位和线粒体Fe2+结果显示,Erastin组和P407Era组细胞线粒体膜电位显著下降,且线粒体Fe2+含量显著升高;免疫荧光结果显示Erastin组及P407Era组GPX4 含量显著降低,NRF2 含量无明显变化;Erastin组及P407Era组TFR1、NCOA4 和P53 的mRNA表达水平显著升高.结论:温敏性水凝胶泊洛沙姆 407 负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞发生铁死亡.

目的:探讨一种新型光敏粘合剂联合温敏材料泊洛沙姆行血管吻合（简称H-P法）的可行性。方法:2015年6月至2016年3月,合成光敏医用粘合剂聚癸二酸丙三醇丙烯酸酯（PGSA）,并配制特定热敏特性P407组方。选取家兔20只,利用随机数字表法分成2组（H-P法吻合组和传统缝线吻合法组）,每组10只,两组对照,记录两组每个血管吻合口吻合时间,术后6周行影像学及组织学检查,并进行统计学分析。结果:①术中对两组家兔血管吻合所需时间进行记录,H-P法平均耗时为（12.0±3.7）min,传统缝线吻合法耗时（27.0±6.3）min,两者差异有统计学意义（ P<0.05）。②术后6周,超声多普勒、CT检测H-P法组和缝线组口通畅率均为100%；超声多普勒检测两组吻合口处血管内径的大小[H-P组（2.246±0.165）mm,缝线组（2.114±0.117）mm]差异无统计学意义（ P>0.05）；H-P组和缝线组健侧与两组吻合侧血管内径分别为（2.369±0.157）mm和（2.180±0.151）mm,差异有统计学意义（ P<0.05）。③传统缝线组炎性细胞数目（321.6±43.5）较H-P法组（189.0±29.4）明显增加,差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:H-P法行小血管吻合具有可行性,较传统的缝线吻合法具有一定的高效性和优越性。

目的 探讨辛伐他汀对小鼠高血脂合并脑缺血再灌注损伤(CIRI)的预防作用及机制.方法 将60只C57BL/6J小鼠分为假手术组、CIRI组[采用大脑中动脉阻塞再灌注法(MCAO/R)制备小鼠CIRI模型]、高脂组(ip给予泊洛沙姆407)、高脂+CIRI组(ip给予泊洛沙姆407,24 h后MCAO/R造模)、高脂+CIRI+辛伐他汀5和10 mg·kg-1组(先ig给予辛伐他汀连续7d,后按照高脂+CIRI组处理).再灌注24h后,对各组小鼠进行神经功能缺损评分;转棒实验测定掉落潜伏期;自主活动测试小鼠活动次数;TTC染色测定脑梗死体积;激光散斑血流成像检测小鼠脑血流量;取全血分离血清,并测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量;实时荧光定量PCR和Westen印迹法检测小鼠右脑皮质时钟基因Rev-erbα和Bmal1 mRNA及蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,CIRI组小鼠神经功能缺损评分升高(P<0.01),掉落潜伏期缩短(P<0.01),活动次数减少(P<0.01).与CIRI组相比,高脂+CIRI组小鼠神经功能损伤加重(P<0.01);脑梗死体积显著增加(P<0.01);脑血流量显著降低(P<0.01);血清中TC,TG,LDL-C及MDA含量显著升高(P<0.01),GSH-PX水平显著降低(P<0.01);脑皮质Rev-erbα mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01);Bmal1 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01).与高脂+CIRI组相比,高脂+CIRI+辛伐他汀5和10 mg·kg-1组小鼠神经功能损伤减轻(P<0.01);脑梗死体积显著减小(P<0.01);脑血流量显著增加(P<0.01);血清中TC,TG,LDL-C及MDA含量显著降低(P<0.01),GSH-PX水平显著升高(P<0.01);脑皮质Rev-erbα mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01);Bmal1 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01).结论 辛伐他汀预防性给药能有效减轻小鼠高脂血症合并CIRI,其机制与其降血脂及调节时钟基因表达有关.

目的 制备延胡索乙素纳米混悬剂(THP-NS)及其冻干粉,并对其进行体外评价.方法 通过沉淀-均质法制备延胡索乙素纳米混悬剂,在单因素实验基础上,以粒径与多分散系数(PDI)的归一值作为考察指标,考察延胡索乙素用量、透明质酸钠用量、泊洛沙姆407用量对纳米混悬剂制备的影响,通过Box-Behnken设计响应面法优化THP-NS的处方工艺,并制备冻干粉末.采用透射电镜法(TEM)、差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)对THP-NS进行表征,透析袋法评价其体外溶出度.结果 延胡索乙素纳米混悬剂最佳处方为延胡索乙素用量51.0 mg,透明质酸钠用量3.1 mg,泊洛沙姆407用量18.4 mg.平均粒径为(195.57±1.80)nm,PDI为0.23±0.019,与Box-Behnken响应面法预测值接近.Zeta电位值为-31.0 mV,延胡索乙素纳米混悬剂外貌为球形,THP-NS中延胡索乙素以结晶状态存在,THP-NS在24 h累积溶出度达到97.43%.结论 将延胡索乙素制备成纳米混悬剂药物处方设计合理、工艺可行,显著提高了其体外溶出率.

该研究以5-氨基酮戊酸己酯(1)为模型药物,采用超声法制备用于光动力治疗的立方液晶(1-Cubs)纳米制剂.以粒径、PDI为评价指标,优化了超声功率、超声时间、单油酸甘油酯(GMO)与泊洛沙姆407(F127)的质量比、载体(GMO与F127总和)与药物的质量比、药物浓度.考察了优化所得的1-Cubs在635 nm激光辐照下对人表皮癌细胞(A431细胞)存活率和ROS含量的影响.然后,以SD大鼠为模型,累积渗透量和皮肤滞留量为评价指标,考察制品的皮肤渗透行为.结果表明,在超声功率400 W、超声时间15 min、GMO与F127质量比4∶1、载体与药物质量比5∶1、药物浓度1％时,所得的1-Cubs能在细胞水平上显著提高1的PDT疗效和ROS产量.基于HPMC制得的1-Cubs(粒径小于200 nm)纳米凝胶对SD大鼠也具有较优的皮肤渗透性,有望成为一种优良的光动力治疗外用制剂.

目的 制备一种具有缓释和保留性能,用于直肠给药的美沙拉嗪温敏凝胶(MZ-Gel).方法 以胶凝温度为评价指标,采用星点设计-响应面法对泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的用量进行优化.以Franz扩散池法进一步考察体外释药行为,得到最佳处方并对其进行质量评价.结果 MZ-Gel优化处方为P40722.56％,P188 3.34％,胶凝温度为(32.8±0.3)℃;MZ-Gel的体外释药符合一级动力学特征,具有缓释效果;胶凝时间平均值为38.3 s,pH平均值为4.07,膨胀系数平均值为4.81％,持水率平均值为99.78％;红外表征表明,美沙拉嗪的加入并没有破坏温敏凝胶结构.结论 此方法制备工艺简单,性质稳定且具有良好的体外释药特征.

目的 研究复方葛根温敏凝胶(TISG of Gegen compound)的处方与制备工艺,并进行体外质量评价.方法 以泊洛沙姆(P407、P188)为凝胶基质处方,以胶凝温度作为评价指标,采用Box-Beheken法确定复方葛根温敏凝胶的处方和制备工艺,并对其进行流变学特性、体外释放等评价.结果 复方葛根温敏凝胶的最佳处方为葛根-桂枝提取物3％、精油微乳9％、PEG6000 1.54％、P407 20.18％、P188 4.97％,胶凝温度为(32.3±0.3)℃,24 h 内葛根素和肉桂酸的累计释放量分别为(6069.03±2403.78)μg·cm-2、(229.94±36.21)μg·cm-2,均符合零级动力学方程.结论 精油微乳和提取物复配制备成的温敏凝胶具有控释作用,能延长药物停留时间,可为临床治疗项背疼痛的制剂提供参考.

背景:既往研究显示人β-防御素3具有显著的抗真菌、抗细菌和抗病毒活性,并且在连接先天和获得性免疫应答中起到重要的桥梁作用.目的:观察人β-防御素3水凝胶治疗大鼠牙周炎的效果.方法:以泊洛沙姆188与407为基质,采用冷溶法构建空白水凝胶,将人β-防御素3与该水凝胶混合制备人β-防御素3水凝胶.将25只SD大鼠随机分为5组,每组5只:健康组不做任何处理,牙周炎组、空白水凝胶组、盐酸米诺环素组、载药水凝胶组采用正畸结扎钢丝法构建牙周炎模型,造模8周后于颊侧与腭侧牙周袋内分别注射空白水凝胶、盐酸米诺环素、人β-防御素3水凝胶,1次/周,连续给药4周后进行相关检测.结果与结论:①与健康组比较,牙周炎组大鼠牙周菌斑指数、牙龈出血指数及牙周探诊深度均增加(P<0.01);与牙周炎组比较,盐酸米诺环素组与载药水凝胶组大鼠牙周菌斑指数、牙龈出血指数及牙周探诊深度均减少(P<0.05);②大鼠脏器苏木精-伊红染色显示载药水凝胶无毒性作用;③体视显微镜与Micro CT扫描显示,与健康组比较,牙周炎组大鼠牙根暴露及釉牙骨质界-牙槽嵴顶距离均增加(P<0.05);与牙周炎组比较,盐酸米诺环素组与载药水凝胶组大鼠牙根暴露、釉牙骨质界-牙槽嵴顶距离均减少(P<0.05);④苏木精-伊红、Masson及抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,牙周炎组、空白水凝胶组大鼠牙周炎症明显、纤维结构混乱、破骨细胞活跃,盐酸米诺环素组、载药水凝胶组大鼠牙周炎症水平降低、纤维排列较规则、破骨细胞减少;⑤qRT-PCR检测显示,与健康组比较,牙周炎组大鼠牙龈组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达升高(P<0.05);与牙周炎组比较,盐酸米诺环素组、载药水凝胶组大鼠牙龈组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达降低(P<0.05);⑥结果表明,人β-防御素3水凝胶可通过降低炎症因子的相对表达及抑制破骨来减轻大鼠牙周组织炎症.

目的:采用Box-Behnken效应面法优化穿心莲内酯纳米乳原位凝胶的处方,为中药经皮给药制剂的研究与开发提供参考.方法:以泊洛沙姆 188(P188)和泊洛沙姆407(P407)为凝胶基质,采用凝胶基质的质量分数为考察因素,凝胶温度为考察指标,通过二项式拟合分析得到方程,并建立胶凝温度与 2 个考察因素之间的数学关系,采用星点设计-效应面法优化穿心莲内酯纳米乳原位凝胶的处方,并对优化处方进行验证.结果:凝胶温度与考察因素存在可信定量关系,且二项式拟合方程置信度高.穿心莲内酯纳米乳原位凝胶的最佳处方为 20.00%泊洛沙姆 407 和 5.00%泊洛沙姆 188;凝胶温度为(33.8±0.2)℃,处方制备重复性高.结论:该方法适用于穿心莲内酯纳米乳原位凝胶的处方优化,建立的模型预测性良好,优化的制备方法稳定,胶凝温度适宜,可为穿心莲内酯经皮给药制剂的开发提供参考.

目的 优选环孢菌素 A(cyclosporine A,CsA)眼用纳米粒温敏凝胶的处方,并考察其体外释药行为.方法 采用纳米沉淀-高压均质法制备CsA纳米粒溶液.以泊洛沙姆 407(poloxamer 407,F127)、泊洛沙姆 188(poloxamer 188,P188)和壳聚糖的质量比为自变量、加泪液前和加泪液后的胶凝温度为因变量,用中心点复合设计响应面法构建投料比和胶凝温度的数学模型,并按照设定的目标胶凝温度筛选出 F127、P188 和壳聚糖的最优投料比.考察 CsA 眼用纳米粒凝胶的释药行为及机制.结果 CsA纳米粒的粒径为 220 nm,CsA眼用纳米粒温敏凝胶的最佳处方为 F127、P188与壳聚糖的质量比为22.11∶1.75∶1.73,胶凝温度为(25.4±0.3)℃,用人工泪液稀释后的胶凝温度为(33.3±0.3)℃,24 h释药达 90%.结论 CsA眼用纳米粒温敏凝胶具有理想的胶凝温度和缓释作用,具有进一步开发的潜力.