目的 观察电针"百会""大椎"穴对缺血性脑卒中小鼠脑血流量及运动功能的影响,揭示腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/谷氨酰胺-6-磷酸果糖转氨酶-1(glutamine-fruc-tose-6-phosphate aminotransferase-1,GFAT-1)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分子通路参与电针减轻血管损伤,改善肢体运动功能的作用机制.方法 将C57雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只.采用光栓法制备缺血性脑卒中小鼠模型.采用走格子测试和爬杯实验评估小鼠运动功能;TTC染色和激光散斑血流成像仪评估脑梗死体积与脑血流灌注量变化;Western blot法检测AMPK、磷酸化AMPK(phosphorylated AMPK,p-AMPK)、GFAT-1、VEGF的表达水平.结果 与假手术组比较,模型组小鼠运动功能受损(P<0.05),脑梗死体积增加(P<0.05),脑血流灌注量减少(P<0.05),AMPK、p-AMPK、VEGF蛋白表达水平显著降低(P<0.05),GFAT-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05).与模型组比较,电针组小鼠运动功能显著改善(P<0.05),脑梗死体积显著减小(P<0.05),脑血流灌注量显著增加(P<0.05),AMPK、p-AMPK、VEGF蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),GFAT-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 电针可能通过介导AMPK/GFAT-1/VEGF分子通路,参与改善脑皮质缺血所致脑血管损伤和运动功能障碍.

目的:观察静脉淤血皮瓣的微循环功能变化。方法:2019年5月至6月，取8周龄无特定病原体(SPF)级Wistar大鼠12只(中国医学科学院整形外科医院动物实验中心提供)，采用简单随机化分组方法分为对照组和模型组，每组6只。对照组构建以腹壁浅血管为蒂的轴形皮瓣，模型组构建同样的轴形皮瓣并结扎腹壁浅静脉。应用moorFLPI-2激光散斑血流成像系统检测皮瓣微循环血流灌注量，moorVMS-LDF2激光多普勒血流监测系统检测皮瓣细胞聚集度和血流速度并计算微血管自律运动。应用 t检验比较两组间各指标的差异。 结果:对照组皮瓣术后72 h的皮瓣血流灌注量、细胞聚集度及血流速度分别为100.4、174.2、31.2 PU，模型组则分别为10.5、81.5、13.5 PU，两组之间各指标的差异均有统计学意义( t血流灌注量＝26.214， t细胞聚集度＝20.923， t血流速度＝10.492， P<0.05)。对照组术后72 h微血管自律运动的频率和振幅分别为163 Hz，35.2 PU。模型组大鼠血流灌注水平失去正常节律，术后72 h微血管自律运动的频率及振幅分别为28 Hz，4.5 PU，显著低于对照组( t频率＝29.382， t振幅＝33.816， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:皮瓣静脉淤血导致微循环血流灌注、细胞聚集度和血流速度显著降低，微血管自律运动受损可能是皮瓣淤血的关键环节。

目的:探讨氧化铈纳米酶-甲基丙烯酸酐化明胶（GelMA）水凝胶（以下简称复合水凝胶）在小鼠全层皮肤缺损感染创面修复中的作用。方法:该研究为实验研究。采用水热法制备粒径为（116±9）nm的氧化铈纳米酶，同时制备具有多孔网状结构且成胶性能良好的GelMA水凝胶。筛选出25 μg/mL氧化铈纳米酶可明显促进人皮肤成纤维细胞增殖和具有较高的超氧化物歧化酶活性，将其加入GelMA水凝胶中制备复合水凝胶。计算用磷酸盐缓冲液（PBS）浸泡3、7 d后复合水凝胶中氧化铈纳米酶的释放百分比。将小鼠红细胞悬液分为用相应溶液处理的PBS组、Triton X-100组、氧化铈纳米酶组、GelMA水凝胶组及复合水凝胶组，利用酶标仪检测处理1 h后红细胞的溶血情况。测定用PBS、氧化铈纳米酶、GelMA水凝胶及复合水凝胶培养耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和大肠埃希菌2 h后的细菌浓度。以上实验样本数均为3。取24只8周龄雄性BALB/c小鼠，在背部对称位置各制备1个用MRSA感染的全层皮肤缺损创面。将小鼠分为不进行药物干预的对照组及滴加相应溶液的氧化铈纳米酶组、GelMA水凝胶组和复合水凝胶组，每组6只小鼠。观察伤后3、7、14 d创面愈合情况并测量伤后3、7 d剩余创面面积（样本数为5）。取小鼠伤后3 d创面分泌物，检测MRSA的浓度（样本数为3），采用激光散斑血流成像系统观测小鼠伤后5 d创面血流灌注量（样本数为6）。伤后14 d，取小鼠创面组织，行苏木精-伊红染色观察新生上皮情况，行Masson染色观察胶原情况（样本数均为3）。结果:浸泡3、7 d后，复合水凝胶中氧化铈纳米酶释放百分比分别约为39%、75%。处理1 h后，与Triton X-100组比较，PBS组、GelMA水凝胶组、氧化铈纳米酶组及复合水凝胶组红细胞溶血程度均明显下降（ P<0.05）。与用PBS培养比较，用氧化铈纳米酶、GelMA水凝胶、复合水凝胶培养2 h的MRSA、大肠埃希菌浓度均明显降低（ P<0.05）。伤后3~14 d，4组小鼠创面均逐渐愈合，复合水凝胶组小鼠伤后14 d创面全部愈合。伤后3、7 d，复合水凝胶组小鼠剩余创面面积分别为（29±3）、（13±5）mm 2，明显小于对照组的（56±12）、（46±10）mm 2和氧化铈纳米酶组的（51±7）、（38±8）mm 2（ P值均<0.05），与GelMA水凝胶组的（41±5）、（24±9）mm 2相近（ P值均>0.05）。伤后3 d，复合水凝胶组小鼠创面MRSA浓度明显低于对照组、氧化铈纳米酶组、GelMA水凝胶组（ P值均<0.05）。伤后5 d，复合水凝胶组小鼠创面血液灌注量明显大于对照组、氧化铈纳米酶组、GelMA水凝胶组（ P值均<0.05）。伤后14 d，复合水凝胶组小鼠创面基本完成上皮化，上皮化情况明显优于其他3组；复合水凝胶组小鼠创面胶原含量较其他3组明显增多，排列也更为有序。 结论:复合水凝胶具有良好的生物相容性和体内外抗菌效果，可持续缓释氧化铈纳米酶，改善早期创面血流灌注，促进创面再上皮化及胶原合成，从而促进小鼠全层皮肤缺损感染创面愈合。

青光眼作为视网膜神经退行性疾病，会导致患者出现不可逆转性的视力丢失。越来越多的证据表明，全身血流异常、视神经血流减少和视网膜微循环障碍与青光眼神经节损伤的机制相关。光相干断层扫描血管成像（OCTA）具有无创、分辨率高、检查快捷、三维成像和量化血流灌注等优势，较彩色超声多普勒、激光散斑血流成像等其他血流检测手段的重复性、准确性更高，更易应用于临床。OCTA不仅可以用于青光眼的早期诊断和随访，与视网膜神经纤维层厚度、视野参数之间存在很强的相关性；而且对于晚期青光眼患者的随访，其也能提供客观数据以评估病情进展情况。在未来，OCTA有望成为诊断青光眼的一种常规的检测方法及随访手段。

目的:探讨香芍颗粒对脑卒中后抑郁（PSD）小鼠行为和内侧前额叶皮质（mPFC）少突胶质细胞前体细胞（OPCs）、少突胶质细胞（OLs）的影响。方法:80只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉闭塞（MCAO）组、PSD+PBS组和PSD+香芍组，每组20只。采用MCAO后轻度慢性不可预见性应激（CUMS）和孤独饲养的方法构建PSD模型。采用激光散斑成像、改良神经严重程度评分（mNSS）和TTC染色评估MCAO模型，采用体质量、糖水偏好实验和悬尾实验评估PSD模型。PSD建模后4组小鼠均灌胃28 d，假手术组、MCAO组、PSD+PBS组给予溶剂（PBS）0.2 mL灌胃，1次/d；PSD+香芍组按照60 mg/kg剂量将香芍颗粒溶于0.2 mL PBS中灌胃，1次/d。采用免疫荧光染色法检测mPFC中OPCs和OLs的数量，采用Western blotting实验检测mPFC中髓鞘碱性蛋白（MBP）和磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白（PI3K/AKT/mTOR）通路蛋白的表达。结果:（1）模型验证结果：激光散斑成像实验观察到小鼠在MCAO术前、术中及再灌注后手术侧大脑中动脉供血区脑血流的明显改变；MCAO组、PSD+PBS组、PSD+香芍组小鼠中TTC染色后均观察到典型的红色非梗死区和白色梗死区；MCAO组、PSD+PBS组、PSD+香芍组小鼠mNSS评分均>4分且差异无统计学意义（ P>0.05）；提示MCAO模型构建成功。PSD建模后治疗前，4组小鼠行为学评估结果显示，与假手术组和MCAO组相比，PSD+PBS组和PSD+香芍组小鼠体质量明显下降，糖水偏好度明显降低，悬尾不动时间明显延长，差异均有统计学意义（ P<0.05），提示PSD模型构建成功。（2）治疗后小鼠行为学实验结果：治疗28 d后，4组小鼠体质量、糖水偏好度和悬尾不动时间差异均有统计学意义（ P<0.05）。与PSD+PBS组相比，PSD+香芍组小鼠体质量和糖水偏好度明显上升，悬尾不动时间明显缩短，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（3）免疫荧光染色及Western blotting实验结果：4组小鼠mPFC中OPCs（Olig2 +PDGFRa +）数量、增殖性OPCs（Ki-67 +PDGFRa +、EdU +PDGFRa +）数量、OLs（Olig2 +CC1 +）数量，以及MBP蛋白相对表达量、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白相对表达量差异均有统计学意义（ P<0.05）。与PSD+PBS组比较，PSD+香芍组小鼠上述细胞数量以及蛋白相对表达量均明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:香芍颗粒可通过激活mPFC区的PI3K/AKT/mTOR信号通路促进OPCs增殖和OLs成熟，进而发挥治疗PSD的作用。

随着对解剖学知识了解的深入和科技的进步，人们更加注重美学和功能的修复重建，因此也出现了多种穿支皮瓣的切取和修薄方法。然而，一些学者依然担忧这些方法可能造成血管损伤。先进成像技术可清晰显示穿支血管，特别是脂肪层的穿支，还能准确评估皮瓣血流灌注情况。充分利用这些成像技术，可在不影响皮瓣微循环的情况下获得最佳重建效果。上海交通大学医学院附属第九人民医院昝涛教授团队在《Burns & Trauma》杂志上发文《Imaging for thinned perforator flap harvest: current status and future perspectives》，重点综述了CT血管造影（CTA）、彩色多普勒超声（CDU）、超高频超声、光声层析成像、 吲哚菁绿血管造影（ICGA）、激光散斑衬比成像、动态红外热成像及无创组织血氧测定等技术在薄皮瓣皮下穿支走行及血流灌注评估方面的运用及优点和不足。作者建议根据术前及术中不同目的选择合适的成像技术，如术前穿支定位首选CTA，术前穿支的血流动力学（管径、流速）检测首选CDU；术中穿支灌注情况和浅表血管显影首选ICGA。将来可能通过显影剂和设备创新与混合现实技术和人工智能技术创建的数字手术环境相融合。通过合理运用以上这些技术，有望获取既能满足功能及美学修复需求，又比较安全的薄穿支皮瓣，为患者提供更佳的手术治疗效果。

目的:建立小鼠星状神经节阻滞(SGB)模型，并探讨SGB对脑皮质血流量的影响。方法:清洁级健康雄性C57BL/6小鼠30只，8~9周龄，体重23~27 g，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：对照组(C组)、左侧SGB组(L组)、左侧生理盐水组(SL组)、右侧SGB组(R组)及右侧生理盐水组(SR组)。C组不予任何处理；L组和R组采用0.25%罗哌卡因0.08 ml行经皮后入路SGB；SL组和SR组注射等量生理盐水。于SGB前(T 0)及SGB后10、30、60、90、120 min(T 1~5)时，采用激光散斑血流成像系统检测脑皮质血流量。 结果:L组和R组小鼠均出现阻滞侧上睑下垂，提示小鼠SGB模型制备成功。C组、SL组和SR组各时点脑皮质血流量差异无统计学意义( P>0.05)，L组和R组阻滞侧脑皮质血流量T 1时降低，T 2时开始升高，T 3时达峰值，T 5时降低，但仍高于T 0时( P<0.01)；与C组和SL组比较，L组左侧脑皮质血流量T 1时降低，T 2~5时升高( P<0.01)；与C组和SR组比较，R组右侧脑皮质血流量T 1时降低，T 2~5时升高( P<0.01)；C组与SL组间、C组与RL组间各时点脑皮质血流量差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:本研究成功建立了小鼠经皮后入路SGB模型。单侧SGB可对阻滞侧脑皮质血流量产生影响，表现为短暂降低之后持续性升高。

目的:探讨全组织包埋免疫荧光染色技术及激光散斑血流成像技术在小鼠耳部跨区皮瓣研究中的特点和优势。方法:共选取25只ICR小鼠，取其中10只，剪断鼠耳中间及外尾侧血管束，建立跨区耳瓣模型，观察建模3 d后耳瓣血供变化情况，同时观察健侧鼠耳的面积、组织层次厚度及血管分布情况。另取5只小鼠，建跨区耳瓣模型，方法同前。于建模后第3天，获取建模侧鼠耳并将其解剖分为前层皮肤、软骨及后层皮肤，取前层皮肤，采用全组织包埋免疫荧光染色技术对耳内的血管、神经及单核巨噬细胞进行染色，观测耳瓣中血管、神经及单核/巨噬细胞的分布及形态。取剩余10只小鼠，在小鼠耳部中间血管体分叉以上水平剪穿鼠耳，建立延迟跨区耳瓣模型，采用激光散斑血流成像仪观测小鼠耳部的血流变化情况，记录术后即刻、1 d、2 d、3 d、4 d时血管的血流灌注值。结果:鼠耳面积约为1.3 cm 2，厚度为(0.16±0.04) mm，由外尾侧血管束、中间及内头侧3个血管束供血，在剪断鼠耳中间及外尾侧血管束后可形成跨区皮瓣缺血模型。鼠耳前、后层皮肤及软骨的厚度分别为(88±5)μm、(41±3)μm及(29±2)μm；全组织包埋免疫荧光染色清晰地显示在建模后3 d，choke区域呈放射分布的小血管，直径为(50±6)μm，可见小血管之间扩张弯曲的毛细血管，小鼠耳部神经与动脉呈伴行关系，神经节段攀附至动脉表面，而与静脉并无明显伴行和攀附，扩张、弯曲的动脉内有明显数量的单核巨噬细胞成簇分布，而在动脉外侧仅呈游离散在分布。通过激光散斑血流成像仪可观测到在延迟跨区耳瓣模型后，每个耳瓣内有(6±2)条横向走行的血管管径及血流量有明显增大，术后即刻、1 d、2d、3 d、4d时，横向走行血管的平均血流灌注值分别为(92±11)PU、(136±26)PU、(147±27)Pu及(176±27)PU。 结论:全组织包埋免疫荧光染色及激光散斑血流成像技术可很好地观测小鼠跨区耳瓣的血管、神经、单核巨噬细胞及血流灌注情况，在小鼠跨区皮瓣血供的研究中可发挥重要作用。

目的:建立一种稳定的大鼠皮肤热损伤模型，并探究热损伤对大鼠皮肤choke血管的影响。方法:雄性SD大鼠114只，采用随机数字表法分成3组，应用100 ℃沸水对位于大鼠背部的三血管体穿支区皮肤按实验分组接受10、15或20 s烫伤，每组38只。烫后应用激光散斑灌注成像技术监测皮肤血液灌注变化，采用明胶-氧化铅灌注观察皮肤血管网的密度变化，通过组织学验证各组的热损伤深度并观察其对皮肤choke血管的影响和血管再生情况。计量资料以 ± s表示，采用 t检验、单因素方差分析或重复测量的方差分析进行统计学分析。 结果:组织学染色验证了100 ℃沸水接触皮肤10、15、20 s分别对大鼠背部皮肤造成了浅Ⅱ度、深Ⅱ度和Ⅲ度的热损伤。激光散斑灌注成像显示，在烫后第7天，热损伤10 s组的血流灌注量恢复至烫前水平[皮肤血流散斑流速指数(SFI)：143.25±30.40 vs. 140.28±26.35， P＝0.828]，热损伤15 s组SFI较烫前略有减低，但差异无统计学意义(106.20±10.30 vs. 119.31±9.66, P＝0.072)，而热损伤20 s组SFI较烫前明显减低(67.49±19.93 vs. 136.37±18.96, P＝0.001)。明胶-氧化铅灌注显示，在烫后第14天，热损伤10 s组血管密度恢复至烫前；热损伤15 s组血管密度略高于烫前水平；热损伤20 s组血管密度明显低于烫前水平。组织学染色显示，在烫后第7天，热损伤10 s组微血管密度[(29.16±2.38) 条/mm 2 vs. (27.74±3.66) 条/mm 2, P＝0.696]和管径[(35.61±2.49) μm vs. (41.74±3.31) μm, P＝0.938]较烫前差异无统计学意义；热损伤15 s组微血管密度高于烫前[(36.68±4.65) 条/mm 2 vs. (27.74±3.66) 条/mm 2, P＝0.027]，而管径较烫前差异无统计学意义[(52.88±4.97) μm vs. (41.74±3.31) μm, P＝0.058]；热损伤20 s组与烫前相比微血管密度差异无统计学意义[(30.80±2.27) 条/mm 2 vs. (27.74±3.66) 条/mm 2, P＝0.407]，管径小于烫前[(37.57±5.33) μm vs. (41.74±3.31) μm, P＝0.001]。 结论:浅Ⅱ度热损伤对choke区血管无明显影响；深Ⅱ度热损伤刺激choke区血管新生，三血管体穿支区皮肤的血液灌注可恢复至近似正常水平；Ⅲ度热损伤严重损伤choke区血管，三血管体穿支区皮肤血液灌注无法恢复。

目的:探讨季铵化壳聚糖-重组组织因子途径抑制物（rTFPI）复合物对大鼠碾压撕脱皮瓣的影响。方法:采用实验研究方法。采用离子交联法制备季铵化壳聚糖-rTFPI复合物溶液，用扫描电子显微镜观察复合物形态并测量其直径，用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定并计算复合物中rTFPI的包封率和复合物载药率（样本数为3），采用ELISA法测定放置0、10、30、45、60、90、120、240 min时溶液中rTFPI浓度（观察rTFPI释放情况）并计算其半衰期（样本数为3）。取24只6周龄雄性SD大鼠，按照随机数字表法分为磷酸盐缓冲液（PBS）组、单纯季铵化壳聚糖组、单纯rTFPI组和季铵化壳聚糖-rTFPI组（每组6只），大鼠背部均制备蒂部位于双侧髂棘连线上、从肌膜表面掀起的碾压撕脱皮瓣，原位缝合后即刻及术后1、2、3 d分别注射1次相应试剂治疗。术后1、3、7 d观察皮瓣大体变化；术后7 d，测量皮瓣成活面积并计算皮瓣成活率；将皮瓣平均分为蒂部、近段、中段、远段，用激光散斑血流成像仪检测皮瓣近段、中段、远段组织血流灌注情况；切取皮瓣中段组织行苏木精-伊红染色，观察组织结构变化和炎症细胞浸润情况，计数每100倍视野中栓塞血管和新生血管。对数据行单因素方差分析和LSD检验。结果:季铵化壳聚糖-rTFPI复合物呈不规则球形结构，直径为150~200 nm；复合物中rTFPI的包封率为（88.7±2.1）%，复合物的载药率为（2.83±0.09）%。季铵化壳聚糖-rTFPI复合物溶液中rTFPI浓度随放置时间延长而逐渐增加，90 min时释放基本稳定，半衰期为（651±36）min。术后1 d，单纯季铵化壳聚糖组大鼠皮瓣远段变黑比较明显；术后3 d，单纯rTFPI组和季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣远段结痂、坏死较另外2组轻；术后7 d，各组大鼠皮瓣坏死界限清晰。术后7 d，单纯rTFPI组和季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣成活率分别为（63±7）%、（73±5）%，较PBS组的（41±3）%和单纯季铵化壳聚糖组的（52±7）%显著升高（ P<0.05）；季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣成活率较单纯rTFPI组明显升高（ P<0.05）。术后7 d，各组大鼠皮瓣均有血流灌注；单纯季铵化壳聚糖组大鼠皮瓣近段组织血流灌注值以及单纯rTFPI组和季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣近段、中段、远段组织血流灌注值明显高于PBS组（ P<0.05或 P<0.01），单纯rTFPI组大鼠皮瓣远段组织血流灌注值以及季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣中段和远段组织血流灌注值明显高于单纯季铵化壳聚糖组（ P<0.05或 P<0.01），季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣中段组织血流灌注值明显高于单纯rTFPI组（ P<0.01）。术后7 d，PBS组和单纯季铵化壳聚糖组大鼠皮瓣中段组织中炎症细胞浸润较多，细胞水肿明显；与前面2组相比，单纯rTFPI组和季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣中段组织炎症程度显著降低，栓塞血管数明显减少（ P<0.05或 P<0.01），新生血管数明显增多（ P<0.05或 P<0.01）；与单纯rTFPI组比较，季铵化壳聚糖-rTFPI组大鼠皮瓣中段组织中新生血管数显著增多（ P<0.05）。 结论:通过季铵化壳聚糖装载rTFPI能够起到缓释rTFPI的效果；季铵化壳聚糖-rTFPI复合物较单纯rTFPI能够进一步改善大鼠碾压撕脱皮瓣的血流灌注，提高皮瓣成活率。