目的 建立大盘龙七Bergeniae Scopulosae Rhizoma的HPLC指纹图谱及多酚类成分的含量测定方法,为大盘龙七药材质量控制及临床应用提供依据.方法 采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1％磷酸水为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,检测波长为275 nm,柱温25 ℃;对10批大盘龙七药材进行指纹图谱构建,基于指纹图谱相似度分析结合聚类分析与主成分分析,同时测定熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯的含量.结果 建立了大盘龙七药材的HPLC指纹图谱,其中S5的相似度为0.752,其余批次的相似度均大于0.92,共标定了 14个共有峰,指认出7个色谱峰,分别为熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯.聚类分析将10批大盘龙七药材分为3类;经主成分分析,主成分1～4是影响药材样品质量评价的主要因子;采用正交偏最小二乘法判别分析标记了大盘龙七中6个差异性成分.含量测定结果表明10批大盘龙七药材中熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯的含量范围分别为7.30～63.24、0.26～2.98、15.96～78.04、1.54～11.17,0.97～2.54、2.09～7.38、0.64～12.30 mg/g.结论 建立的大盘龙七药材的HPLC指纹图谱及多酚类成分的含量测定方法操作简便、重复性好,可用于大盘龙七药材的定性定量分析,为大盘龙七药材的质量评价提供参考.

真菌内生细菌是一类特殊细菌,在寄主真菌体内及生态系统中发挥重要作用.为发掘盘龙参内生真菌内具有促生功能的内生细菌资源,并探索其生物学功能,采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测高粱附球菌Epicoccum sorghinum菌丝中内生细菌的存在后,利用菌丝组织研磨法分离内生细菌,通过菌落形态、生理生化特性及分子特征对其进行鉴定.运用特异性引物验证细菌的内生性,采用Salkowski比色法、CAS比色法以及钼锑抗比色法对菌株的促生特性进行测定,通过水稻种子促生长实验初步验证内生细菌的促生长能力,并对内生细菌进行全基因组测序和促生相关功能基因分析.真菌E.sorghinum菌丝内能观察到与荧光素标记的单链核酸探针杂交后的细菌,证实其菌丝内含有细菌,从菌丝内分离出一株内生栖稻根瘤菌Rhizobium oryzihabitans 7-2H,具有产吲哚乙酸(IAA)、铁载体和溶磷能力,可显著提高水稻幼苗的茎长、根长、鲜重和干重.菌株 7-2H与标准菌株R.oryzihabitans M15 基因组之间的平均核酸一致性(average nucleotide identity,ANI)值为 96.98%,通过对基因组分析发现,菌株 7-2H含有与产IAA、铁载体及溶磷能力相关的基因.分离得到一株真菌内生栖稻根瘤菌,该菌具有良好的促进植物生长特性,可作为后续研发微生物菌肥的菌种资源.

目的 研究盘龙参Spiranthes sinensis根的化学成分.方法 采用95％乙醇回流提取,石油醚萃取获得萃取物,运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱等方法进行分离制备,采用波谱学方法鉴定化合物结构.采用计算电子圆二色谱法(ECD)判定新化合物的绝对构型.体外考察化合物对棕榈酸诱导MIN6细胞损伤后的细胞活力影响.结果 从盘龙参根乙醇提取物石油醚萃取部位中分离得到11个化合物,分别鉴定为(R)-2'-(2,4-二甲氧基-8-{4'-羟基-5',6'-二甲基-四氢呋喃[7,8]}-9,10-二氢菲)(1)、红门兰酚(2)、spiranthesphenanthrene A(3)、2-methoxy-4,7-dihydroxy-6-isopentenyl-9,10-dihydrophenanthrene(4)、3,5-二羟基-4',7-二甲氧基黄酮(5)、樱花素(6)、5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮(7)、5-hydroxy-4'-[(2-isopentenyl)oxy]-3,7,3'-trimeoxyflavone(8)、hydroxydihydro-bovolide(9)、原儿茶醛(10)、β-谷甾醇(11).活性测试结果显示化合物1(0.39～25μmol/L)或11(12.5～50 μmol/L)与棕榈酸共同处理后的各组细胞增殖活力均明显增强.结论 化合物1为新的二氢菲类化合物,命名为盘龙参醇A;化合物6～7、9～10为首次从绶草属中分离得到;化合物1和11能够拮抗棕榈酸对MIN6细胞的损伤作用,促进细胞的生长和增殖.

目的 研究盘龙参的化学成分.方法 采用凝胶色谱、硅胶柱色谱和制备薄层色谱等方法分离盘龙参中的化学成分,通过理化性质和波谱分析来鉴定其结构.结果 从盘龙参全草的提取物中分离并鉴定了8个单体化合物,分别为吐叶醇(Ⅰ)、Ⅳ-反式-阿魏酰基甲氧基酪胺(Ⅱ)、Ⅳ-p-香豆酰酪胺(Ⅲ)、N-反式-对羟基苯乙基阿魏酪胺(Ⅳ)、α-细辛脑(Ⅴ)、spiranthol-B(Ⅵ)、3,4-二羟基苯甲酸甲酯(Ⅶ)、5-hydroxy-4'-[(2-isopentenyl)oxy]-3,7,3'-trimethoxyflavone (Ⅷ).结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到,除化合物Ⅵ外,其余化合物均为首次从该属植物中分离得到.

[目的]促进髓样抑制性细胞(MDSCs)凋亡是抑制肿瘤生长的一个有效途径.因此,该实验旨在探究盘龙参活性成分络罗兰糖苷对MDSCs的抑制效应以及可能机制.[方法]采用MTT法分别检测洛罗兰糖苷对MDSCs细胞系(MSC-2)的毒性;采用流式分析法检测洛罗兰糖苷对MSC-2的促凋亡作用;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测洛罗兰糖苷作用后MSC-2细胞内凋亡相关基因的蛋白表达水平.[结果]细胞活性检测证实洛罗兰糖苷可以抑制MSC-2的活性;凋亡抗体染色结果显示洛罗兰糖苷可以促进MSC-2凋亡;Western Blot结果表明,洛罗兰糖苷作用下,JNK2、细胞色素C、caspase-9、caspase-3表达明显上调,而Bcl-2表达下降.[结论]洛罗兰糖苷可以通过激活Bcl-2信号通路,促进MDSCs凋亡增强免疫正调控,从而达到抗肿瘤的效果.

目的 阐明2011-2016年昆明市手足口病病原学特征,为手足口病防控提供参考依据. 方法 收集2011年1月-2016年12月昆明市手足口病临床诊断病例标本,使用实时定量荧光PCR(real-time PCR)方法检测手足口病病毒核酸.用SPSS 20.0软件分析计数结果. 结果 2011-2016年检测粪便、肛拭子及咽拭子等标本共计6 373份,其中人肠道病毒通用型(human enterovirus universal,EV-U)阳性4 679份,阳性率73.42％.昆明市手足口病病原由肠道病毒71型(enterovirus A71,EV-A71)、柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)及其他肠道病毒组成,其优势病原不断变化,2011-2016年优势病原依次为EV-A71型、CV-A16型、其他肠道病毒、CV-A16型、其他肠道病毒、CV-A16型;病原构成差异有统计学意义(x2=967.591,P＜0.001).粪便标本阳性率(81.84％)较肛拭子(60.65％)及咽拭子(32.40％)高(x2=836.895,P＜0.001),重症手足口病标本的EV-A71型检出最多,占重症阳性标本的50.53％ (431/853).发病高峰在4-7月,占病例标本总数的53.68％(3 421/6 373),由单峰分布演变为双峰变化.主城区的官渡、西山、五华、盘龙病例较多,不同地区手足口病病例标本的阳性率差异有统计学意义(x2=1 090.546,P＜0.001).发病年龄集中在6岁以下,其中1～3岁年龄段的病例最多;男、女发病比例为1.46∶1,男女病原构成比差异无统计学意义(x2=3.367,P=0.186). 结论 昆明市手足口病呈现明显季节性、年龄特征及一定的地区分布规律;病原以EV-A71型和CV-A16型为主,其他肠道病毒的构成比逐渐上升;EV-A71型是引起重症病例的主要病原,应重点防控.

目的 了解东南大学附属中大医院血必净注射液的应用情况,为提高合理应用提供参考.方法 调取东南大学附属中大医院2017年1月—2018年12月应用血必净注射液的病历共1 344份,对其临床应用情况进行统计和分析.结果 929份含血必净注射液的病历主要集中在骨科,占69.12%,普外科占24.26%.适应症方面:骨科有适应症使用比例仅为39.3%.用法用量方面,血必净的使用量(50～100 mL)及溶剂体积(100 mL)的合格率分别为98.66%、96.95%,给药频次的合格率仅为17.26%,主要以1次/d给药为主.疗程方面,3～14 d给药时间占79.01%.联合用药方面,抗菌药物与血必净注射液联合应用率高达78.94%,其中27.60%抗菌药物使用为预防用药,51.34%抗菌药物使用为抗感染治疗.此外,血必净注射液与丹参川芎嗪、痹祺胶囊、盘龙七片及接骨七里片等联合使用的频次较高,属于重复用药.结论 需加强血必净注射液在用法用量及联合用药方面的的处方审核,尤其在使用频次及重复给药方面,需严格把控.此外,血必净注射液在骨科的使用比较多,符合适应症的比例较低,临床药师应加大干预力度、多与临床医生沟通,为医生提供合理用药指导,以促进血必净注射液在临床更加安全、合理及有效的应用.

目的:探索盘龙七片治疗骨性关节炎的配伍合理性.方法:采用网络药理学研究方法,对盘龙七片中的活血化瘀组、祛风湿组及补肝肾组的59个化合物与骨性关节炎相关的靶点和通路进行预测和筛选,通过数据整合分析,解析该方防治骨性关节炎作用特点及配伍规律.结果:59个化合物可作用于70个骨性关节炎相关靶点,主要涉及炎性刺激反应、细胞增殖、细胞代谢、免疫调节等相关过程,通路富集分析涉及炎症反应、软骨退化、免疫调节、软骨下骨骨代谢等相关通路.结论:3组药物对炎症反应、软骨细胞凋亡及代谢、软骨细胞外基质降解、骨代谢失衡等骨性关节炎(OA)发生的病理环节起不同程度的调节作用,但各有所侧重.其中活血化瘀组长于抗炎止痛,祛风湿组主要参与调节炎症与免疫过程,补肝肾组与软骨退化和软骨下骨骨代谢更为相关.

目的 探讨手法复位石膏外固定术联合口服盘龙七片治疗A3型桡骨远端骨折的早期疗效,为临床治疗提供参考.方法 选取2018年6月至2020年1月于邳州医院治疗的A3型桡骨远端骨折患者100例,随机分为对照组(手法复位石膏外固定术,50例)和研究组(手法复位石膏外固定术联合口服盘龙七片,50例).比较两组患者治疗前和治疗7d血清IL-1、IL-6、TNF-α水平及治疗后4周Gartland-Werley腕关节评分,评价两组患者早期临床治疗效果.结果 经过7d治疗后,两组血清IL-1、IL-6、TNF-α水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).研究组患者拆除石膏后Gartland-Werley腕关节评分优良率高于对照组,差异有统计学意义(82.0％vs48.0％,x2 =12.703,P＜0.01).结论 手法复位石膏外固定术联合口服盘龙七片治疗A3型桡骨远端骨折,较之单纯手法复位石膏外固定能有效降低骨折炎性反应,缓解疼痛、肿胀.

目的 探索昆明地区妊娠期妇女亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性的空间分布特征,为昆明地区出生缺陷防控工作提供参考依据.方法 回顾性分析2019-2020年昆明地区6004例妊娠期妇女亚甲基四氢叶酸还原酶基因C667T多态性检测结果,采用Arc GIS 10.4软件及SPSS 23.0统计学软件进行空间特征探究.结果 检出野生型(CC型)2306例,占38.41％;杂合突变型(CT型)2814例,占46.87％;纯合突变型(TT型)884例,占14.72％.野生型在安宁市、五华区、石林彝族自治县分布较广;杂合突变型在西山区、盘龙区、呈贡区分布较广;纯合突变型在东川区、宜良县、安宁市分布较广.结论 昆明市部分县区妊娠期妇女亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性存在差异,应对育龄及妊娠早期女性进行亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性检测,个性化补充叶酸,预防出生缺陷及相关孕期疾病.