目的:评价菊苣酸对脓毒症大鼠心肌损伤时氧化应激的影响及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的关系。方法:健康雄性SD大鼠40只，8～12周龄，体重220～250 g，采用随机数字表法分为5组( n＝8)：对照组(C组)、LPS组、LPS+菊苣酸组(LPS+CA组)、LPS+Nrf2抑制剂ML385组(LPS+ML组)和LPS+菊苣酸+ML385组(LPS+CA+ML组)。腹腔注射LPS 15 mg/kg制备大鼠脓毒症心肌损伤模型。腹腔注射LPS即刻，LPS+CA组和LPS+ML组分别腹腔注射菊苣酸10 mg/kg或ML385 15 mg/kg(均用DMSO溶解)，LPS+CA+ML组腹腔注射ML385 15 mg/kg和菊苣酸10 mg/kg，C组腹腔注射等容量DMSO。造模后48 h时，取主动脉血样，采用ELISA法测定血清IL-6浓度、LDH和CK-MB活性。然后处死大鼠，取心肌组织，HE染色后光镜下观察病理学结果，采用化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和SOD活性、ROS和铁含量，计算NAD +/NADH比值，采用Western blot法测定Nrf2、醌氧化还原酶1(NOQ1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)的表达水平。 结果:与C组相比，其余4组血清LDH、CK-MB活性和IL-6浓度升高，心肌组织ROS和铁含量及NAD +/NADH比值升高，GSH-Px和SOD活性降低，Nrf2、NQO1和GPX4表达下调，NOX1表达上调( P<0.05)；与LPS组相比，LPS+CA组血清LDH、CK-MB含量和IL-6浓度降低，心肌组织ROS和铁含量及NAD +/NADH比值降低，GSH-Px和SOD活性升高，Nrf2、NQO1和GPX4表达上调，NOX1表达下调( P<0.05)，心肌细胞病理学损伤明显减轻，LPS+ML组血清LDH、CK-MB含量和IL-6浓度升高，心肌组织NAD +/NADH比值升高，GSH-Px和SOD活性降低，NQO1和GPX4表达下调，NOX1表达上调( P<0.05)，心肌细胞病理学损伤进一步加重；与LPS+CA组相比，LPS+CA+ML组血清LDH、CK-MB活性和IL-6浓度升高，心肌组织ROS和铁含量及NAD +/NADH比值升高，GSH-Px和SOD活性降低，Nrf2、GPX4和NQO1表达下调，NOX1表达上调( P<0.05)，心肌细胞病理学损伤明显加重。 结论:菊苣酸减轻脓毒症大鼠心肌损伤的机制可能与激活Nrf2信号通路，抑制氧化应激有关。

蒲公英始载于《新修本草》,味苦、甘,性寒;归肝、胃经;具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋之功效,广泛应用于临床.通过查阅国内外文献,在综述蒲公英化学成分和药理活性研究进展的基础上,通过分析蒲公英植物亲缘学、化学成分特有性证据、化学成分有效性和可测性等的关系,对蒲公英质量标志物(quality marker,Q-Marker)进行分析,并预测木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、咖啡酸、绿原酸、菊苣酸、蒲公英甾醇可作为其质量标志物的候选化合物,以期为蒲公英质量评价体系的建立提供参考.

目的:建立尿酸盐沉积果蝇模型并确定其造模条件,并初步观察菊苣提取物抗尿酸盐沉积的作用.方法:以5％酵母提取物饲喂诱导果蝇尿酸盐沉积,通过果蝇马氏小管及后肠偏振光成像、六胺银染色及其匀浆液尿酸水平评价果蝇尿酸盐沉积状态,考察雌雄性别、不同造模时间对果蝇尿酸盐沉积的影响,并应用该模型研究菊苣提取物抗尿酸盐沉积的作用.结果:5％酵母提取物饲喂可成功诱导果蝇尿酸盐沉积;雄性果蝇在造模3 d后开始出现尿酸盐沉积,在造模7 d后大部分出现尿酸盐沉积,各造模时间点果蝇马氏小管及后肠匀浆液尿酸水平持续升高,各造模时间点之间差异不明显;雌性果蝇在造模10 d后开始出现尿酸盐沉积,在造模14 d后大部分出现尿酸盐沉积,各造模时间点果蝇马氏小管及后肠匀浆液尿酸水平持续升高,马氏小管及后肠匀浆液尿酸水平持续升高,各造模时间点之间比较,差异有统计学意义(P＜0.001);菊苣提取物可减少果蝇马氏小管及后肠偏振光信号,并明显降低其匀浆液的尿酸水平(P＜0.001).结论:以5％酵母提取物饲喂雌性果蝇14 d可较稳定诱导尿酸盐沉积,菊苣提取物可在果蝇模式动物上发挥抗尿酸盐沉积的作用.

目的:观察菊苣根水提物对正常大鼠糖、脂、尿酸代谢及肝肾安全性的影响.方法:SD大鼠随机分为空白对照组(水灌胃),菊苣高剂量、中剂量、低剂量组(10 mg/kg、5 mg/kg、2.5 mg/kg菊苣根水提物),别嘌醇组(20 mg/kg别嘌醇溶液),连续灌胃28 d,动态检测实验大鼠血清葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清尿酸(SUA)、尿尿酸(UUA)、粪便尿酸(FUA)水平,并计算尿酸清除率(CUUA)及12 h尿尿酸排泄量;检测实验大鼠血清中尿酸代谢相关酶,如黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)水平;检测肝肾功能指标,如谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),并计算肝脏指数及肾脏指数.结果:实验期间,相较于空白对照组,菊苣各给药组大鼠糖、脂、尿酸代谢相关指标GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、SUA、XOD、ADA、UUA、FUA水平、CUUA、12 h尿尿酸排泄量,以及肝肾安全相关指标GPT、GOT、BUN、Cr、肝脏指数及肾脏指数均无明显差异.结论:菊苣根水提物不会影响正常大鼠糖、脂及尿酸代谢,且具有较好的肝肾安全性.

目的 构建唾液酸免疫球蛋白凝集素1(Siglec-1)原核表达载体,表达纯化Siglec-1重组蛋白,构建超滤亲和-液质联用技术(UF-LC-MS)筛选Siglec-1蛋白天然配体.方法 利用DNA重组技术构建Siglec-1重组蛋白原核表达载体,转化到BL21(DE3)感受态细胞中表达Siglec-1重组蛋白,通过Ni柱亲和色谱柱进行蛋白纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析Siglec-1重组蛋白纯度.建立UF-LC-MS技术研究金银花、甘草、迷迭香、菊苣中6个主要组分绿原酸、迷迭香酸、阿魏酸、甘草酸、甘草次酸、菊苣酸对Siglec-1蛋白的亲和力,通过比较样品组和蛋白变性组超滤液中待测物的峰面积,计算各待测物特异结合率.结果 经双酶切及测序鉴定证明,重组表达质粒pET-22b-Siglec-1-His构建正确;纯化的人Siglec-1重组蛋白质量分数达90％以上;建立了UF-LC-MS筛选体系,筛选出甘草次酸可与Siglec-1蛋白特异性结合.结论 成功表达了高纯度、高产量的人Siglec-1重组蛋白,筛选出甘草次酸可与Siglec-1蛋白特异性结合.

目的 建立评价白蒲黄胶囊质量的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱和化学模式识别方法.方法 色谱柱为Waters Acquity BEH C18 柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(梯度洗脱),流速为 0.3 mL/min,柱温为 35℃,切换检测波长 210 nm及 323 nm,进样量为 2μL.建立 2 个厂家 10 批样品的指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析(CA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),筛选不同批次样品的差异性标志物.结果 方法学考察结果显示,精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均小于 2.0%.10 批样品共标定了 19 个共有峰;通过与对照品比对,指认 7 个成分,分别为盐酸黄柏碱(4 号峰)、绿原酸(6 号峰)、咖啡酸(10 号峰)、菊苣酸(11 号峰)、黄芩苷(13 号峰)、盐酸小檗碱(17 号峰)、白头翁皂苷B4(19 号峰).10 批样品的指纹图谱相似度均不低于 0.978.10 批样品按厂家聚为 2 类;在OPLS-DA模型下,以变量重要性投影值大于 1 筛选出 4 个差异性标志物,分别为白头翁皂苷B4(19号峰)、5号峰、菊苣酸(11号峰)、绿原酸(6号峰).结论 该方法操作简单、结果准确,可客观评价白蒲黄胶囊的质量.

目的 建立腺毛菊苣Cichorium glandulosum种子(菊苣子药材)和混伪品菊苣Cichorium intybus种子HPLC指纹图谱及多成分含量测定,并结合化学模式识别法对二者进行分析比较,为其资源利用开发和进一步的质量控制研究提供参考.方法 采用YMC-PACK ODS-A色谱柱,以 0.2%磷酸溶液(A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱,体积流量为 1.0 mL/min,检测波长为 254 nm,柱温为 40℃,进样量为 5 μL.利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)》建立 19 批腺毛菊苣种子和 4 批菊苣种子样品的HPLC指纹叠加图谱并分析相似度,通过对照品比对指认,确定化学成分并进行含量测定,使用SPSS 20.0 和SIMCA-P 14.1 软件进行聚类分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)分析和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)分析,对不同批次样品进行质量评价.结果 建立了 19 批腺毛菊苣种子和 4 批菊苣种子HPLC指纹叠加图谱,并确定 19 个共有峰,通过对照品比对指认了其中 8 个色谱峰;建立了绿原酸、秦皮乙素、1,4-二咖啡酰奎宁酸、异绿原酸 A、1,5-二咖啡酰奎宁酸含量测定方法;指纹图谱相似度在0.915～0.998;OPLS-DA分析与PCA分析结果一致,可将样品分为 3 组,并筛选出1,5-二咖啡酰奎宁酸、槲皮素、绿原酸、菊苣酸 4 个差异性成分.结论 通过HPLC指纹图谱结合化学模式识别方法,建立了一种简单可靠的菊苣子药材质量评价方法,为菊苣子药材的质量评价和资源化利用提供依据.

代谢性疾病是一类由物质或能量代谢异常引起的全身多系统代谢异常的疾病,包括糖尿病、肥胖、非酒精性脂肪性肝病、高脂血症、痛风等.代谢性疾病的病因与遗传、饮食、运动、衰老和环境等众多因素相关,其病程发展缓慢不易察觉且发病后难以治愈,已经成为全球主要的公共卫生问题.从天然化合物中寻找治疗代谢性疾病的有效药物具有重要意义.菊苣酸为蒲公英、菊苣等多种天然药用植物中的重要活性成分,现代药理学研究表明,菊苣酸在抗炎、抗氧化、平衡糖脂代谢、降尿酸、肝脏保护等方面具有显著的生物活性.本文通过汇总国内、外相关文献,全面综述了菊苣酸在治疗糖尿病、肥胖、非酒精性脂肪性肝病、高脂血症、痛风相关代谢性疾病的研究进展,旨在为菊苣酸治疗代谢性疾病药理作用的深入研究提供参考.

目的:建立五味消毒饮UPLC指纹图谱,探究五味消毒饮物质基准制备过程中从中药饮片到物质基准之间关键质量属性量值传递关系.方法:水煎法制备15批五味消毒饮物质基准,并建立物质基准UPLC指纹图谱分析方法指认关键色谱峰,多波长同时测定绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸和蒙花苷的含量,计算转移率和出膏率.结果:15批物质基准指纹图谱相似度＞0.9,指认13个色谱峰,设定7个特征色谱峰.15批物质基准出膏率范围为28.72％～33.85％,绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸和蒙花苷转移率范围分别为35.39％～42.48％,49.72％～61.20％,28.47％～34.30％,28.96％～39.20％,20.09％～23.57％,81.13％～95.02％,30.33％～35.92％,未出现离散数据.结论:研究五味消毒饮UPLC指纹图谱分析方法及其关键质量属性量值传递规律对于其物质基准的开发与应用具有参考价值.

痛风性肾病是痛风及高尿酸血症常见的并发症之一,最终可发展至肾衰竭,危及生命.高血尿酸水平是痛风性肾病发病的基础,在尿酸的生理代谢过程中,尿酸转运蛋白(GLUT9、URAT1、OAT4、OAT10、GLUT12、NPT1、NPT4、OAT1、OAT2及OAT3等)在促进尿酸排泄方面发挥了重要作用,同时也是目前研究降尿酸药物的关键靶点之一.笔者查阅整理近3年中医药治疗痛风性肾病的相关文献,发现中药有效成分(猫须草水提物、菊苣酸、牛膝茎叶总皂苷、木犀草素、枸杞多糖、芍药花总苷、茯苓提取物及穿心莲提取物等)及中药复方(苓泽合剂、痛风宁、健脾清热利浊汤、复方芪苓配方颗粒及排酸护肾汤)在通过调节尿酸转运蛋白降低血尿酸水平方面有其独特优势,多个中药单体及复方可显著调节GLUT9、OAT1、OAT3、URAT1、ABCG2转运蛋白,降低血尿酸水平,改善高血尿酸所引起的肾组织炎症及损伤,保护肾脏.