目的:探讨单精子测序技术在植入前胚胎结构异常遗传学检测中区分携带者的应用价值.方法:针对1 例罗氏易位携带者45,XY,der(13;14)(q10;q10)应用单精子分离结合单精子测序技术完成单倍型的构建,用机械制动法分离20 份单精子样本并进行全基因组扩增(WGA),再利用ASA基因芯片对WGA产物进行全基因组183 708个单核苷酸多态性(SNP)位点检测,通过CNV测序检测出与易位相关且可作为单体型推断的单精子,推断亲本正常及携带罗氏易位的染色体单倍型.将 3 份胚胎滋养层细胞活检样本作为对象,在完成全基因组扩增后,通过高通量测序进行检测,判断胚胎携带易位染色体的情况,选取可用囊胚进行移植,于孕 18 周抽取羊水样本,确认胎儿是否携带致病变异.结果:通过单精子测序共筛选出6 037个SNP位点,挑选出30 个可区分正常与易位单体型位点成功构建单体型,植入前单体型分析提示 3 枚胚胎均为不携带罗氏易位染色体的整倍体胚胎,妊娠中期羊水基因检测证实胎儿核型为46,XN,未携带罗氏易位染色体.结论:对于男性罗氏易位携带者,可通过单精子测序筛选SNP位点构建单体型,用于区分正常和罗氏易位携带者胚胎,为胚胎植入前染色体结构遗传学检测胚胎选择提供依据.

目的:构建粪肠球菌（Efs）为载体的多房棘球绦虫（Em）重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗，并探讨其抗原性。方法:采用电穿孔法将重组质粒pGEX-EmⅡ/3-Em14-3-3转化Efs ATCC47077株，构建重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗，抽提质粒进行PCR扩增鉴定；经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹法对表达产物进行分析和鉴定，并使用薄层扫描技术分析表达蛋白在菌体总蛋白中所占比例。结果:以重组Efs菌抽提的质粒为模板，PCR可扩增出大小约2 554 bp的EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因片段。SDS-PAGE显示，表达产物为相对分子质量约119 × 10 3的重组蛋白；IPTG诱导培养5 h，目的蛋白的表达量较高，约占菌体总蛋白的9%。免疫印迹法检测结果显示，重组蛋白能被泡球蚴感染的鼠血清识别。 结论:成功构建了Em重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗，表达的融合蛋白具有特异的抗原性。

目的:比较前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)断裂进行解剖重建手术中,采用透视方法定位骨道位置前、后股骨骨道的分布情况.方法:2019年7月至2022年6月,收集在我科进行关节镜下ACL单束解剖重建手术的患者46例,其中男34例,女12例,左膝27例,右膝19例,平均年龄31.8±4.9岁.股骨骨道初次定位时依据术者经验进行定位,然后根据透视结果调整股骨侧骨道的定位位置.在股骨侧位视图上绘制矩形框,根据骨道中心点在此矩形框的深-浅方向及高-低方向上所占比例而定位骨道位置,比较初次定位及透视定位后,股骨骨道位置在各方向的分布情况及骨道位置良好程度.结果:透视定位前、后骨道位置在x轴情况:偏后7例调整为4例(9%),正常29例调整为36例(78%),偏前10例调整为6例(13%);y轴情况:偏高30例调整为19例(41%),正常14例调整为27例(59%),偏低2例调整为0例(0%).初次定位时股骨骨道位置良好11例(24%),透视定位调整后骨道位置良好25例(54%).结论:ACL单束解剖重建手术中,采用术中透视进行股骨骨道定位,有助于改善股骨侧骨道位置分散情况.

玉米成熟期籽粒含水量(KMC,kernel moisture content)是影响玉米机械化粒收的关键因素,利用多位点全基因组关联分析(ML-GWAS,multi-locus genome-wide association study)挖掘与籽粒含水量相关性状显著关联的遗传位点,解析其遗传基础,可为适机收玉米品种的选育和遗传改良提供参考.本研究以205份玉米自交系为材料,在4个环境下测定成熟期籽粒、苞叶与穗轴的含水量,使用 mrMLM、FASTmrMLM、FASTmrEMMA、pLARmEB、pKWmEB 和 ISIS EM-BLASSO 6 种多位点关联分析方法结合分布于全基因组的76492个单核苷酸多态性位点(SNP,single nucleotide polymorphism)进行关联分析,挖掘其候选基因并进行基因注释.表型分析显示,205份材料的籽粒含水量相关性状的变异系数在10.47％～33.90％,广义遗传率在67.39％～81.24％.6种ML-GWAS方法共检测到26个、15个和23个SNP位点分别与籽粒含水量、苞叶含水量和穗轴含水量显著关联;其中3种及以上方法共同检测到14个显著关联SNP位点,表型贡献率(PVE,phenotypic variation explained)在1.13％～17.21％.6种方法中pLARmEB检测到的显著位点最多,FASTmrEMMA检测到的最少.基于3种及以上方法共同检测到且平均 PVE≥5％的显著 SNP 位点为 Chr1_9232728、Chr4_176596174、Chr8_57716249 和 Chr5_191021635,在这 4 个 SNP 位点上下游220 kb共挖掘到17个候选基因,主要富集到细胞解剖实体、新陈代谢过程和细胞进程与催化活性,推测这些基因通过调节细胞代谢与催化活性最终影响玉米籽粒、苞叶和穗轴的含水量.

[目的]通过翅果油树不同时期种仁的转录组学分析挖掘与脂肪酸合成相关的关键基因.[方法]观察记录翅果油树果实发育情况并以成年翅果油树果实开始膨大期(C6)、迅速膨大期(C7)和成熟期(C8)的新鲜种仁为材料,以水解-提取法测定3个时期种仁的脂肪酸组分与含量,用转录组测序技术分析C6、C7时期样品的表达差异,并寻找关键差异表达基因.[结果]3个时期的脂肪酸平均含量随时间推移呈逐渐上升趋势;C6、C7时期的种仁数据中共获得6 375个上调表达基因、8 124个下调表达基因;8 137个差异表达基因在GO数据库中获得注释;4 275个差异表达基因在KEGG数据库中获得注释,主要涉及代谢途径、次生代谢物的生物合成、激素传导和氨基酸合成途径等通路,其中,脂肪酸生物合成、不饱和脂肪酸生物合成等与脂肪酸相关的通路均被富集,并重点挖掘出8个与脂肪酸合成相关的候选基因,发现与果实膨大时期(C6)相比,EmBCCP1、EmSAD1、EmFAD2-1、Em-FAD3-1、EmPDCT1基因上调表达,同时EmFAbG1、EmPDAT1、EmKASI1基因下调表达.[结论]EmBCCP1、EmSAD1、EmFAD2-1、EmFAD3-1、EmPDCT1、EmKASI1、EmFAbG1、EmPDAT1 基因促进了翅果油树种仁油酸、亚油酸的合成积累,可作为翅果油树种仁脂肪酸合成的关键候选基因.

目的 探讨血清补体1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)、C-X-C基序趋化因子配体14(CXCL14)水平对子宫内膜异位症(EM)术后复发的预测价值.方法 选取手术治疗的EM患者132例为EM组,并根据术后3年内是否复发将患者分为复发组52例、未复发组80例;健康体检妇女76名为对照组.酶联免疫吸附法检测血清CTRP3、CXCL14;收集EM组相关资料;单因素分析与多因素Logistic回归分析血清CTRP3、CXCL14对EM患者术后复发的影响;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CTRP3、CXCL14水平对EM患者术后复发的预测价值.结果 EM组血清CTRP3、CXCL14水平低于对照组(P均<0.05).年龄增加、EM生育指数评分升高、CTRP3升高、CXCL14升高为EM患者术后复发的独立保护因素(P均<0.05),ASRM分期Ⅲ、Ⅳ期为独立危险因素(P<0.05).血清CTRP3、CXCL14水平联合预测EM患者术后复发的曲线下面积为0.855,大于二者单独预测的0.764、0.769(P均<0.05).结论 血清CTRP3、CXCL14水平降低与EM患者术后复发密切相关,二者联合预测EM患者术后复发的价值较高.

目的 汇总肿瘤术后辅助化疗患者特殊用途配方食品营养支持治疗的最佳证据,为肿瘤术后辅助化疗患者的营养管理提供参考.方法 计算机检索UpToDate、国际指南网、美国国立指南网、美国国立综合癌症网络、英国国家卫生与临床优化研究所网站、美国肿瘤护理协会网站、美国肠外肠内营养学会网站、欧洲临床营养与代谢协会网站、中华医学会肠外肠内营养学分会网站、澳大利亚乔安娜布里格斯研究所循证卫生保健中心数据库、Cochrane Library、PubMed、CINAHL、Scopus、Web of Science、Embase、中国生物医学文献数据库、万方数据库、中国知网中关于肿瘤术后辅助化疗患者特殊用途配方食品营养支持治疗的相关证据.检索时限为2012年1月1日—2022年8月14日.由2名经过循证培训的研究者独立完成文献的质量评价,并结合专家的建议进行证据提取及总结.结果 共纳入14篇文献,包括4篇指南、1篇临床决策、2篇系统评价、4篇专家共识、3篇随机对照试验.汇总了 14条最佳证据,涉及营养筛查与评估、营养教育、推荐剂量、配方选择、营养治疗和不良反应处理6个方面.结论 该研究总结的最佳证据具有科学性和系统性,在对患者实施营养治疗时,医护人员应充分评估患者的营养状况,审慎地选择特殊用途配方食品剂量及种类,指导患者安全、有效地改善自身营养状况,提高患者的生活质量.

目的 探讨二补助育汤联合调秘针法针灸对排卵障碍性不孕症患者子宫内膜容受性及临床结局的影响.方法 选取延安市人民医院 2019 年 10月至 2021 年 10月收治的 100 例排卵障碍性不孕症患者作为研究对象,依据治疗方案的不同将其分为观察组与对照组,每组 50 例.所有患者均采取常规西药治疗,对照组患者在常规西药治疗基础上采取二补助育汤治疗,观察组在常规西药治疗基础上采取二补助育汤联合调秘针法针灸治疗,对比 2 组患者月经症状治疗效果,治疗前后促卵泡生成素(FSH)、孕激素(P)、雌二醇(E2)水平,治疗前后超声诊断子宫内膜螺旋动脉阻力指数(RI)、搏动指数(PI)和子宫内膜厚度(Em),并对所有患者在治疗后 3 个月、6 个月和 1 年进行门诊复查随访,对比患者妊娠情况和生化妊娠情况.结果 观察组月经症状总有效率为 94%(47/50),高于对照组 78%(39/50)(P＜0.05);治疗后 2 组患者FSH、P、E2 均升高,且观察组高于对照组[(15.9±2.7)U/L和(12.1±2.4)U/L,(1.32±0.08)ng/ml和(0.74±0.06)ng/ml,(372±23)pg/ml和(320±18)pg/ml,P＜0.05)];治疗后 2 组患者RI、PI均降低,且观察组低于对照组(0.65±0.14 和 0.82±0.13,0.91±0.11 和 1.04±0.26,P＜0.05),Em均升高,且观察组高于对照组[(9.62±1.37)mm和(7.57±1.25)mm,P＜0.05)];观察组 3 个月、6 个月和 1 年妊娠率分别为 14%(7/50)、22%(11/50)、32%(18/50),总妊娠率为72%(36/50),均高于对照组各时间段的妊娠率[2%(1/50)、6%(3/50)、12%(6/50)、20%(10/50),P＜0.05];观察组 3 个月、6 个月和 1 年生化妊娠率分别为 6%(3/50)、14%(7/50)、6%(3/50),均低于对照组各时间段生化妊娠率[22%(11/50)、32%(16/50)、30%(15/50),P＜0.05].结论 采用调秘针法针灸联合二补助育汤对排卵障碍性不孕症患者进行治疗能够提升患者月经症状治疗效果,调整性激素水平,改善子宫内膜受容性,提升患者近远期妊娠率,值得临床应用推广.

目的 研究中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、红细胞分布宽度(RDW)和癌胚抗原(CEA)对结直肠癌TNM分期的预判价值.方法 回顾性分析92例结直肠癌患者临床资料.应用Kruskal-Wallis秩和检验分析NLR、PLR、RDW和CEA值与结直肠癌TNM分期的关系,并行Pearson相关性分析.结果 结直肠癌TNM分期Ⅰ期7例,Ⅱ期33例,Ⅲ期34例,Ⅳ期18例.TNM分期Ⅰ~Ⅳ期NLR中位数值分别为2.53,2.37,2.69和4.57(P=0.010);PLR中位数值分别为114.91,157.41,153.44和183.22(P=0.106);RDW中位数值分别为41.80,43.30,42.40和45.85(P=0.064);CEA中位数值分别为3.60,3.20,7.75和15.15(P=0.007).Spearmann相关性分析结果显示相关系数NLR>CEA>PLR>RDW,NLR、CEA、PLR值与结直肠癌TNM分期明显正相关(P<0.05).结论 NLR、PLR和CEA值在预测结直肠癌患者TNM分期上具有一定的临床意义,可为临床提供参考.

目的 探讨亮丙瑞林和重组人干扰素-α-2b对Sprague-Dawley(SD)大鼠子宫内膜异位症(EMs)的疗效.方法 2016年8月至11月,选择50只无特殊病原体(SPF)级健康、性成熟的雌性SD大鼠为研究对象.通过自体子宫内膜移植方法建立大鼠腹壁EM s模型,将建模成功的SD大鼠按照随机数字表法,将其分为实验A组(n=15)、实验B组(n=15)和对照组(n=15).3组大鼠体重、日龄和健康状况等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05).实验A组大鼠皮下注射重组人干扰素-α-2b,剂量为每次10万IU,每隔48 h 1次,共计3次;实验B组大鼠皮下注射亮丙瑞林20μg/(kg·d)×28 d;对照组大鼠皮下注射生理盐水0.1 mL/d×28 d.治疗4周后,开腹观察各组大鼠子宫内膜异位病灶生长情况,对比分析3组大鼠治疗前及治疗4周后子宫内膜异位病灶体积变化情况,并采用免疫组织化学染色检测异位子宫内膜组织的血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和肿瘤坏死因子(TNF)-α 蛋白的表达水平.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学要求.结果 ①50只SD大鼠中,EM s建模成功率为90％(45/50).②治疗4周后,3组大鼠子宫内膜异位病灶体积比较,差异有统计学意义(F=139.332,P<0.001),其中,实验A组、实验B组SD大鼠子宫内膜异位病灶体积均较对照组明显减小,差异有统计学意义(LSD-t=13.460、15.280,P<0.001);实验B组大鼠子宫内膜异位病灶体积较实验A组减小,但差异无统计学意义(LSD-t=1.820,P=0.076).此外,实验A组、实验B组大鼠子宫内膜异位病灶体积均较治疗前减小,并且差异均有统计学意义(t=9.413、14.545,P<0.001).③治疗4周后,3组SD大鼠血清病灶组织中VEGF蛋白、T N F-α蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(F=224.261、225.391,P<0.001).实验A组、实验B组大鼠VEGF蛋白及TNF-α蛋白表达水平均明显低于对照组,并且差异均有统计学意义(实验A组vs对照组:LSD-t=17.258、19.121,P<0.001;实验B组vs对照组:LSD-t=19.260、17.552,P<0.001).结论 重组人干扰素-α-2b对SD大鼠EMs模型具有明显的治疗作用,并且疗效与亮丙瑞林相当,下调VEGF、TNF-α的表达水平是其可能作用机制之一.但重组人干扰素-α-2b能否代替亮丙瑞林作为新型药物应用于临床,尚待进一步的大样本动物实验及临床循证医学证据以证实.