目的 利用液相色谱质谱联用(LC/MS)技术探究掌腱膜挛缩症(DD)在代谢组学层面的特性,筛选差异代谢物,为靶标验证提供理论基础.方法 选取2019年1月至2022年12月间在内蒙古包钢医院接受DD手术治疗的患者术中切除的挛缩掌腱膜组织20例为实验组,选取同期行腕管综合征手术治疗的患者术中切取的正常掌腱膜组织20例为对照组.利用LC/MS技术,定性定量分析两组中的代谢物,通过主成分分析及偏最小二乘法判别分析揭示两组代谢差异,进行层次聚类,利用P值、VIP系数及FC值的有效阈值设定筛选出有价值的差异代谢物.绘制箱线图、火山图、和弦图、气泡图、KEGG通路图等观察组间差异及代谢通路富集情况,利用pearson相关系数完成各代谢物的相关性分析,两组间比较采用两独立样本t检验.结果 利用LC/MS技术在40个样本中总计鉴定到931个代谢物,其中439个表达量存在显著差异(P＜0.05,VIP＞1.00,FC＜0.50或FC＞2.00).经KEGG通路注释发现,差异代谢物分别在42条通路中富集(x/n＞y/N,x:某通路相关差异代谢物数;y:某通路相关总代谢物数;n:经注释的差异代谢物数;N:经注释的总代谢物数).结论 掌腱膜挛缩症在碳代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢三条通路中的异常表现,证明其致病机制与炎症、氧自由基、糖尿病及局部缺血缺氧等因素相关.

为寻找对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda具有良好杀虫活性的化学成分,对蔓长春花石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和水萃取物通过小叶碟添加法、浸叶法和浸虫法,测定其拒食、胃毒和触杀活性.结果表明:蔓长春花石油醚萃取物对草地贪夜蛾3 龄幼虫的触杀活性最好,第1、3、5和7天的LC50分别为6.11、5.43、5.27和4.62 mg/mL.采用硅胶柱层析对蔓长春花石油醚萃取物进行分离,得到 22 个馏分,馏分 5 和馏分 7 的触杀活性最好.对馏分 5进行GC-MS分析,主要化学成分为对二甲苯(17.56%)、壬烷(20.92%)和十三烷(28.33%).馏分7经小孔树脂(MCI)分离后得到8个馏分,馏分Ⅵ的触杀活性最好,经GC-MS分析,主要化学成分为壬烷(19.09%)、十三烷(53.19%)和2,2,4,6,6-五甲基庚烷(5.21%).对二甲苯的触杀活性最好,第1、3、5和7天时LC50分别为10.45、8.87、6.54和5.05 mg/mL.随着对二甲苯浓度的升高,乙酰胆碱酯酶(AChE)和Ca2+-Mg2+-ATPase的活性呈现先激活后抑制的趋势,羧酸酯酶(CarE)的活性呈现先抑制后激活的趋势.

目的 研究中国健康受试者在空腹和餐后状态下服用甲磺酸雷沙吉兰片的药代动力学,并评价2种制剂的生物等效性.方法 空腹试验按两周期、两序列交叉设计,入组36例受试者,于2个周期分别服用受试制剂和参比制剂1 mg,采集血浆样本后用液相色谱-串联质谱法检测血浆中雷沙吉兰的浓度,用平均生物等效性(ABE)方法进行等效性评价.餐后试验按四周期、两序列完全重复的交叉设计,入组48例受试者,受试者服用受试制剂和参比制剂各2次(给药剂量均为1 mg),根据Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的个体内变异程度,分别用参比制剂标度的平均生物等效性和ABE的方法评价等效性.结果 在空腹试验中,受试者口服甲磺酸雷沙吉兰片受试制剂与参比制剂后,雷沙吉兰的主要药代动力学参数:Cmax分别为(9.70±3.14)和(9.62±3.85)ng·mL-1,AUC0-t分别为(6.03±1.47)和(6.02±1.95)ng·h·mL-1,AUC0-∞ 分别为(6.13±1.51)和(6.12±1.97)ng·h·mL-1.Cmax、AUC0-t、AUC0-∞ 几何均值比(GMR)的90％置信区间分别为 94.11％～118.06％、99.22％～107.74％、99.16％～107.44％,均在80.00％～125.00％.在餐后试验中,受试者口服甲磺酸雷沙吉兰片受试制剂与参比制剂后,雷沙吉兰的主要药代动力学参数:Cmax分别为(3.00±1.92)和(3.52±1.77)ng·mL-1,AUC0-t分别为(5.02±1.20)和(5.06±1.20)ng·h·mL-1,AUC0-∞ 分别为(5.11±1.23)和(5.14±1.22)ng·h·mL-1.AUC0-t、AUC0-∞ GMR的90％置信区间分别为 96.99％～101.19％和 97.17％～101.41％,均在 80.00％～125.00％;Cmax的单侧 95％置信区间上限小于零,GMR的点估计值是82.01％,在80.00％～125.00％.空腹及餐后试验的不良事件发生率分别为22.86％和22.92％,所有不良事件均为中、轻度.结论 2种甲磺酸雷沙吉兰片在空腹和餐后2种状态下均具有生物等效性,且安全性良好.

目的:联合使用同位素稀释液相色谱串联质谱及酶学参考方法研制冰冻人血清尿素、肌酐国家二级标准物质，作为量值溯源的载体。方法:参照JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》和JJF 1006-1994《一级标准物质技术规范》的要求对候选物质进行均匀性、稳定性、互换性评价；联合广东省中医院、北京航天总医院、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司、迈克生物股份有限公司、北京利德曼生化股份有限公司、浙江美康生物科技股份有限公司的6家参考实验室采用国际检验医学溯源联合委员会推荐的同位素稀释液相色谱串联质谱法及酶学参考方法共同对标准物质进行定值，计算不确定度。结果:所研制标准物质均匀性的方差分析结果为 P>0.05，稳定性评价 t值小于 t（0.05）查表时的 t值，互换性评价结果位于4个常规检测系统测量值95%置信区间内，最终定值结果为尿素：14.7 mmol/L，扩展不确定度0.3 mmol/L（ k=2），肌酐：313.9 μmol/L，扩展不确定度14.5 μmol/L（ k=2）。 结论:成功研制的冰冻人血清尿素、肌酐二级标准物质标示值可靠，均匀性、稳定性较好，不同检测系统间具有良好互换性。

目的:建立了液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定尿样中乙草胺及其3种代谢物。方法:于2021年4月，尿液经HLB小柱净化，1%乙酸乙腈溶液洗脱。以0.01%甲酸溶液-乙腈作为流动相，梯度洗脱，目标物使用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm×1.8 μm）作为分离柱，采用LC-MS/MS在正离子模式下进行测定。结果:4种目标物在1~50 μg/L范围内线性关系良好，相关系数（ r）均>0.997，各目标物质在空白尿样中3个浓度添加水平下的回收率为107.6%~129.1%，相对标准偏差（ RSD）为1.5%~9.9%（ n=6），方法检出限和定量限分别为0.04~0.11 μg/L和0.15~0.42 μg/L。乙草胺职业接触人群尿样中所有目标物均有检出。 结论:该方法操作简单、快速、灵敏度高、特异性好，适用于尿样中乙草胺及其代谢物浓度的快速检测。

目的:探讨三甲胺氧化物（TMAO）水平与冠心病合并2型糖尿病患者冠状动脉病变程度的相关性。方法:该研究为横断面研究。连续收集2016年11月至2018年1月因疑诊冠心病于北京医院心内科导管室行冠状动脉造影的住院患者，根据是否合并糖尿病分为冠心病合并2型糖尿病组（CHD-DM组）和冠心病不合并糖尿病组（CHD-nDM组）。收集入选患者的一般临床资料。通过液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法检测患者血清TMAO水平。记录入选患者的冠状动脉病变支数并进行Gensini评分。采用Spearman相关分析评估TMAO与冠状动脉病变支数及Gensini评分的相关性。采用多因素logistic回归模型分析TMAO与高Gensini评分的相关性。结果:研究共入组患者590例，其中CHD-DM组238例，CHD-nDM组352例。与CHD-nDM组比较，CHD-DM组患者年龄较大、体重指数较高、收缩压较高，具有高血压病史及他汀类药物应用史的患者比例较高（ P均<0.05）。CHD-DM组多支病变（2支及以上）患者比例高于CHD-nDM组（ P<0.001）。CHD-DM组患者Gensini评分高于CHD-nDM组（ P<0.05）。与CHD-nDM组比较，CHD-DM组患者空腹血糖及糖化血红蛋白水平均较高（ P均<0.001），低密度脂蛋白胆固醇水平较低（ P<0.05），尿素水平较高（ P<0.05），血红蛋白水平较低（ P<0.05）。CHD-DM组患者血清代谢物TMAO水平为272.0（136.2，456.0）μg/L高于CHD-nDM组的171.1（99.3，289.6）μg/L（ P<0.001）。Spearman相关分析结果显示，TMAO水平与冠心病患者冠状动脉病变支数及Gensini评分呈正相关（ r值分别为0.178、0.189， P均<0.001），与年龄、血糖水平呈正相关（ r值分别为0.260、0.111， P分别<0.001和0.01）。在校正了年龄和性别后，TMAO水平仍与冠心病患者冠状动脉病变支数及Gensini评分呈正相关（ r值分别为0.101、0.230， P分别为0.02和<0.001），与血糖水平呈正相关（ r=0.131， P<0.01）。校正了年龄、性别、体重指数、高血压史、血脂异常史、吸烟史、他汀类药物应用史以及低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖水平后，多因素logistic回归分析结果显示，TMAO水平仍与冠心病合并2型糖尿病患者Gensini评分呈正相关（ OR=2.25，95% CI 1.16~4.38， P=0.017），但与冠心病不合并2型糖尿病患者Gensini评分无显著相关性（ OR=1.29，95% CI 0.72~2.31， P=0.386）。 结论:冠心病合并2型糖尿病患者血TMAO水平明显升高，且其与此类患者冠状动脉病变程度独立相关。

目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC-MS/MS）方法检测血清中L-色氨酸及其代谢物。方法:方法学建立及评价。收集2022年11月至2023年1月的华西医院166例健康体检者的血清样本。采用L-色氨酸（Trp）、L-犬尿氨酸（Kyn）和犬尿喹啉酸（KA）的同位素标记物为内标，通过蛋白沉淀处理血清样本，应用LC-MS/MS同时检测Trp、Kyn和KA含量。评价该方法的选择性、特异性、线性、检出限（LOD）、定量限（LOQ）、携带污染、精密度、加标回收率、基质效应和稀释一致性。结果:Trp、Kyn和KA的线性相关系数均>0.999，LOD分别为0.10 μmol/L、0.01 μmol/L和1.00 nmol/L，LOQ分别为0.20 μmol/L、0.04 μmol/L和2.00 nmol/L，批内精密度和批间精密度均<10%，平均加标回收率与相对基质效应均在100%左右，超线性范围的样本最多可稀释16倍。健康体检者血清中Trp、Kyn、KA含量、Kyn/Trp和KA/Kyn比值分别为（59.55±10.92）μmol/L、（1.85±0.43）μmol/L、（39.89±17.93）nmol/L、（31.64±8.19）×10 -3和21.51±6.72。 结论:建立了基于ID-LC-MS/MS定量检测Trp、Kyn和KA的方法，该方法简便快捷、灵敏度高、结果准确可靠，为临床相关研究提供了可靠支撑。

液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）集色谱技术的高分离能力和质谱技术的高选择性、高特异性及高灵敏性的优点于一体，成为临床检验领域最具有生命力的新技术之一，但其分析效果往往受待测样品特性制约。由于质谱仪的抗干扰能力有限，生物样本多需要进行合适的样品前处理才能有效提高检测性能，实现精准检测。前处理的主要作用是将目标分析物从生物基质中有选择性地分离出来，减少其他基质组分的干扰。同时，还可将目标分析物浓缩和富集，提高检测灵敏度。目前，临床样本前处理方法不仅种类多，个别方法耗时繁琐，给实验室人员在方法选择和开发及标准化操作等方面带来了困难。因此，本共识旨在为实验室方法建立提供指导，助力临床质谱检测方法的研发规范发展。

目的:研究1种基于液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）技术的血清17α-羟孕酮（17α-OHP）候选参考测量程序并对其进行评价。方法:2019年12月，取上海市临床检验中心员工体检留存的血清标本，采用正己烷乙酸乙酯混合液（体积比3∶2）提取加入同位素内标的血清样本，C18反向色谱柱分离，正离子电喷雾质谱仪检测，参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）C62-A文件对建立的候选参考方法进行校准曲线、检测限与定量限、基质效应、不精密度、正确度、特异性、携带污染、线性范围等基本分析性能验证。结果:17α-OHP的线性范围为0.21~119.67 μg/L。检测限和定量限分别为5.218 ng/L、0.116 μg/L。3种不同比例50∶50、80∶20、20∶80）的血清与溶液混合物的相对基质效应分别为-0.02%、-0.40%、-0.90%。批内变异系数（ CV）在0.164、14.81、81.63 μg/L浓度处分别为1.73%~2.11%、0.98%~1.71%、0.47%~0.87%，批间 CV在上述3个浓度点处分别为1.82%、1.03%、0.80%。加标样本平均回收率在0.5、20、100 μg/L处分别为100.4%、101.7%、102.8%；检测中国计量科学研究院标准参考物质GBW09829，结果均在规定的不确定度范围内。无携带污染和特异性干扰。 结论:成功建立了基于同位素稀释LC-MS/MS技术的血清17α-OHP候选参考测量程序。该候选参考测量程序有着良好的精密度和准确度，能用于常规临床检验方法的量值溯源。

目的:分析女性睾酮测定结果假性升高的病例特点并回顾文献，为临床实验室识别假性睾酮升高提供参考依据。方法:回顾性分析北京协和医院3例睾酮假性升高患者的病例特点，比较不同检测平台与方法测定睾酮水平的结果；通过PUBMED、中国知网检索国际和国内与睾酮假性升高、睾酮检测方法相关文献进行综合分析。结果:3例女性患者免疫法测定睾酮水平升高，经质谱法测定睾酮水平均正常，排除高雄激素血症诊断。共检索到38篇与睾酮检测相关文献，9篇为假性高雄激素血症的病例报道，其中国内于2021年共有2篇文献报道假性高雄激素血症共12例，所有案例均用液相色谱串联质谱法确认睾酮水平。既往研究明确提示临床实验室常规应用的免疫法测定女性睾酮结果与质谱法相关性差，存在不同程度偏差。结论:免疫法检测女性睾酮易受干扰导致结果假性升高，建议临床实验室对所用检测方法进行评估并建立鉴别方案，对于可疑睾酮假性升高的样本采用其他免疫平台或LC-MS/MS法进行确认。