目的:探讨三甲胺氧化物（TMAO）水平与冠心病合并2型糖尿病患者冠状动脉病变程度的相关性。方法:该研究为横断面研究。连续收集2016年11月至2018年1月因疑诊冠心病于北京医院心内科导管室行冠状动脉造影的住院患者，根据是否合并糖尿病分为冠心病合并2型糖尿病组（CHD-DM组）和冠心病不合并糖尿病组（CHD-nDM组）。收集入选患者的一般临床资料。通过液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法检测患者血清TMAO水平。记录入选患者的冠状动脉病变支数并进行Gensini评分。采用Spearman相关分析评估TMAO与冠状动脉病变支数及Gensini评分的相关性。采用多因素logistic回归模型分析TMAO与高Gensini评分的相关性。结果:研究共入组患者590例，其中CHD-DM组238例，CHD-nDM组352例。与CHD-nDM组比较，CHD-DM组患者年龄较大、体重指数较高、收缩压较高，具有高血压病史及他汀类药物应用史的患者比例较高（ P均<0.05）。CHD-DM组多支病变（2支及以上）患者比例高于CHD-nDM组（ P<0.001）。CHD-DM组患者Gensini评分高于CHD-nDM组（ P<0.05）。与CHD-nDM组比较，CHD-DM组患者空腹血糖及糖化血红蛋白水平均较高（ P均<0.001），低密度脂蛋白胆固醇水平较低（ P<0.05），尿素水平较高（ P<0.05），血红蛋白水平较低（ P<0.05）。CHD-DM组患者血清代谢物TMAO水平为272.0（136.2，456.0）μg/L高于CHD-nDM组的171.1（99.3，289.6）μg/L（ P<0.001）。Spearman相关分析结果显示，TMAO水平与冠心病患者冠状动脉病变支数及Gensini评分呈正相关（ r值分别为0.178、0.189， P均<0.001），与年龄、血糖水平呈正相关（ r值分别为0.260、0.111， P分别<0.001和0.01）。在校正了年龄和性别后，TMAO水平仍与冠心病患者冠状动脉病变支数及Gensini评分呈正相关（ r值分别为0.101、0.230， P分别为0.02和<0.001），与血糖水平呈正相关（ r=0.131， P<0.01）。校正了年龄、性别、体重指数、高血压史、血脂异常史、吸烟史、他汀类药物应用史以及低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖水平后，多因素logistic回归分析结果显示，TMAO水平仍与冠心病合并2型糖尿病患者Gensini评分呈正相关（ OR=2.25，95% CI 1.16~4.38， P=0.017），但与冠心病不合并2型糖尿病患者Gensini评分无显著相关性（ OR=1.29，95% CI 0.72~2.31， P=0.386）。 结论:冠心病合并2型糖尿病患者血TMAO水平明显升高，且其与此类患者冠状动脉病变程度独立相关。

目的:探讨不同麻醉深度对糖尿病患者血清降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide, CGRP）和P物质（substance P, SP）浓度的影响。方法:选择全麻下行腹腔镜手术的患者78例，年龄42~70岁，性别不限，ASA分级Ⅰ、Ⅱ级。根据术前是否合并2型糖尿病分为非糖尿病组（NDM组，40例）和糖尿病组（DM组，38例），两组患者再分别按随机数字表法分为非糖尿病浅麻醉组（LNDM组，20例）、非糖尿病深麻醉组（DNDM组，20例）、糖尿病浅麻醉组（LDM组，19例）、糖尿病深麻醉组（DDM组，19例）。LNDM组、LDM组BIS值维持在50~59，DNDM组、DDM组BIS值维持在40~49。记录4组患者术前及术中情况（如麻醉时间、手术时间、停药后睁眼时间、PACU停留时间，麻醉药物用量，术中补液量、术中失血量、尿量等），记录4组患者术中不良心血管事件发生率及血管活性药物使用率，采用ELISA法测定4组患者术前和术毕时血清CGRP、SP浓度。结果:与LNDM组比较：LDM组、DDM组术前血清CGRP、SP浓度均较低（ P<0.05）；DNDM组、DDM组丙泊酚用量增多（ P<0.05）、停药后睁眼时间延长（ P<0.05）；DNDM组、LDM组、DDM组术毕血清CGRP、SP浓度均降低（ P<0.05），DDM组术中不良心血管事件总发生率升高（ P<0.05），术中血管活性药物总使用率升高（ P<0.05）。与DNDM组比较：LDM组、DDM组术前、术毕血清CGRP和SP浓度均较低（ P<0.05）；LDM组丙泊酚用量减少（ P<0.05）、停药后睁眼时间缩短（ P<0.05）；DDM组术中不良心血管事件总发生率升高（ P<0.05），DDM组术中血管活性药物使用率升高（ P<0.05）。与LDM组比较：DDM组丙泊酚用量增多（ P<0.05）、停药后睁眼时间延长（ P<0.05），术中不良心血管事件总发生率升高（ P<0.05），术中血管活性药物使用率升高（ P<0.05），术毕血清CGRP、SP浓度均降低（ P<0.05）。Logistic回归分析示术前血清CGRP[比值比（odds ratio, OR）0.78，95%CI 0.65~0.94， P=0.010]、SP浓度（ OR 0.98，95%CI 0.97~0.10， P=0.020）是术中不良心血管事件发生率升高的影响因素。 结论:深麻醉是CGRP、SP降低的相关危险因素。糖尿病患者血清CGRP、SP浓度降低与深麻醉有关，糖尿病患者术中不良心血管事件发生率升高与血清CGRP、SP浓度降低有关。

目的:探讨病程较长(≥3年)的糖尿病是否影响胰腺癌中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的极化，以及对胰腺癌患者预后的影响。方法:收集2011年至2016年在武汉大学中南医院接受胰腺癌手术的患有长程2型糖尿病或无糖尿病患者的标本83例。采用免疫组织化学法分析组织切片中CD68和CD163的表达。运用Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验分析生存曲线，Cox回归模型进行单因素和多因素分析。结果:长程2型糖尿病(DM)组的CD68 + TAMs ( P<0.05)、CD163 + TAMs ( P<0.01)及CD163 +/CD68 +比例( P<0.01)均高于非糖尿病(NDM)组，差异有统计学意义。长程2型糖尿病与患者的组织分化程度、局部浸润和CA19-9的水平明显相关( P均<0.05)。长程2型糖尿病和CD163 +/CD68 +比例是无复发生存期(RFS)和总生存期(OS)的独立影响因素( P均<0.05)，长程2型糖尿病明显缩短患者的RFS和OS。 结论:长程2型糖尿病与胰腺癌的恶性程度明显相关，并吸引更多的巨噬细胞聚集于肿瘤中，这些巨噬细胞同时大量极化为M2型TAMs。长程2型糖尿病和CD163 +/CD68 +比例是RFS和OS的独立影响因素。

目的:通过对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌（CRKP）的碳青霉烯酶表型的筛查及耐药基因检测，明确青岛市区该细菌耐药基因的分布及构成，为临床上合理应用抗菌药物治疗提供依据。方法:收集2016年10月至2019年9月青岛市区5家三甲医院临床分离出的非重复CRKP共54株，采用琼脂稀释法或纸片扩散法（K-B法）进行常用抗菌药物的药敏试验；应用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型筛查；采用聚合酶链反应（PCR）扩增 blaKPC-2、 blaNDM-1、 blaOXA-48、 blaIMP、 blaVIM目的基因，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。 结果:药敏试验显示，CRKP对阿米卡星耐药率最低（35.2%），其次为复方新诺明（53.7%）、庆大霉素（55.6%）、左氧氟沙星（75.9%）、亚胺培南/西司他丁（88.9%），哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南、头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦钠的耐药率均高于90%。改良Hodge试验阳性菌株有43株（阳性率为79.63%），阴性菌株为11株。PCR耐药基因检测共检出带有碳青霉烯酶耐药基因的菌株40株，目的耐药基因检出率为74.07%。其中35株携带KPC-2基因，7株携带OXA-48基因，4株携带NDM-1基因，1株携带IMP基因，其中携带有OXA-48基因的菌株均同时携带KPC-2基因，未检测出携带VIM基因的菌株，剩余14株未检测出目标碳青霉烯酶基因。结论:青岛市区5家医院CRKP携带的产碳青霉烯酶基因主要为KPC-2，其次为OXA-48及NDM-1。

目的:探讨水通道蛋白7(aquaporin 7，AQP7)以及水通道蛋白9(aquaporin 9，AQP9)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)与中国汉族人群患2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)的相关性。方法:随机纳入1194例T2DM个体和1274例非糖尿病个体(non-diabetic，NDM)进行对照研究，采用MassArray质谱基因分型方法对3个SNP位点( AQP7基因rs3758269、 AQP9基因rs16939881和rs57139208)进行基因分型。评估以上3个SNP位点与T2DM的相关性；探讨NDM组SNP位点处不同基因型与糖脂代谢指标的关联。 结果:AQP7基因rs3758269、 AQP9基因rs16939881和rs57139208的等位基因频率及基因型频率在T2DM组和NDM组中的分布无统计学差异( P > 0.05)；且分析结果显示不同遗传模式与T2DM无相关性( P > 0.05)。在NDM组中， AQP7基因rs3758269、 AQP9基因rs16939881和rs57139208的不同基因型与糖脂代谢指标无相关性( P > 0.05)。 结论:AQP7基因rs3758269和 AQP9基因rs16939881和rs57139208与中国汉族人群T2DM遗传易感性无关。

目的 回顾性分析重症监护病房(ICU)与非ICU鲍氏不动杆菌分离株的耐药性、耐药基因及外排泵基因表达差异,为临床合理使用抗菌药物和多药耐药菌的防控提供科学依据.方法 对来自于2009年1月-2014年3月中山大学附属第三医院住院患者下呼吸道感染的鲍氏不动杆菌分离株213株按照来源分为ICU组(82株)和非ICU组(131株),对上述分离株进行耐药性检测,同时检测耐药基因(OXA-23、OXA-24、OXA-48、OXA-51、OXA-58、OXA-143、OXA-235、NDM-1、KPC、IMP、VIM、GIM-1、SPM-1、SIM-1、FIM-1、ISAba1 和 ISAba4)和外排泵基因(adeB、adeJ、adeG、cra A、abeM 和 amvA)、外膜蛋白基因(omp25、omp33-36、car O)的表达.结果 与非ICU组鲍氏不动杆菌分离株比较,ICU分离株对亚胺培南有更高的耐药率(达到90.2％),差异具有统计学意义(x2=7.117,P=0.008);耐药基因OXA-51检出率在ICU组和非ICU均超过95％,OXA-23、VIM在 ICU组和非 ICU 组检出率分别是 80.0％vs.60.3％(P=0.007),50.0％vs.29.0％(P=0.002);未检出OXA-48、OXA-143、OXA-235、KPC、NDM-1及SIM-1基因;ICU组和非ICU组相比,adeB相对表达量比较有统计学差异(P＜0.05).结论 ICU和非ICU组来源的鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药性、耐药基因(O XA-23、VIM)和外排泵基因adeB表达存在统计学差异,提示ICU鲍氏不动杆菌耐药性高可能是上述多种耐药机制的结果.

探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae，CRKP）的临床分布及耐药特征，为预防CRKP的感染和治疗提供参考依据。回顾性分析2017年1月至2021年12月临床分离的510株CRKP菌株，应用 MALDI-TOF质谱仪和VITEK-2 Compact微生物药敏分析仪进行菌种鉴定和药敏试验，采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验对CRKP菌株进行碳青霉烯酶表型检测，通过免疫显色法对CRKP菌株进一步分型并用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）进行基因检测。结果显示，510株CRKP菌株主要来源于痰液302株（59.2%）、尿液127株（24.9%）、血液47株（9.2%）；科室主要分布于重症医学科231株（45.3%），其次为呼吸内科108株（21.2%）和神经外科79株（15.5%）；药敏试验结果显示对常用抗菌药物的耐药率均较高，仅对替加环素和头孢他啶/阿维巴坦保持很好的敏感性，但对替加环素的耐药率逐年上升，从2017年的1.0%上升到2021年的10.1%，差异有统计学意义（ χ2=14.444， P<0.05）。碳青霉烯酶抑制剂增强试验结果显示，510株CRKP中产碳青霉烯酶 461株（90.4%），其中丝氨酸酶 450株（88.2%），金属酶 9株（1.8%），既产丝氨酸又产金属酶2株（0.4%）；不产酶的有49株（9.6%）；免疫显色法进一步分型显示 461株CRKP中分型检测为KPC 450株（97.6%），IMP 2株（0.4%）；NDM 7株（1.5%）；KPC+NDM 2株（0.4%）；PCR基因检测结果：blaKPC 450株（97.6%），blaIMP 2株（0.4%），blaNDM 7株（1.5%），blaKPC+NDM 2株（0.4%）。综上，CRKP菌株主要来源于痰液标本，分布于重症医学科，耐药特征以产碳青霉烯酶中的KPC型为主，临床微生物实验室应加强对CRKP菌株的监测，为预防CRKP的感染，减少细菌耐药的产生提供参考依据。

目的:评估mCIM联合eCIM试验、Carba-5和Carba-R三种方法检测碳青霉烯类耐药细菌(carbapenem-resistant organisms，CRO)中常见碳青霉烯酶型的性能。方法:随机挑选2019年1月至2020年12月浙江大学医学院附属邵逸夫医院临床分离的122株非重复CRO菌株，应用生物梅里埃MALDI-TOF MS全自动快速质谱仪对菌株进行菌种鉴定，分别采用改良碳青霉烯类抗生素灭活试验(mCIM联合eCIM试验)、Carba-5检测条和Carba-R试剂盒对所有菌株进行碳青霉烯酶型检测；以PCR法检测结果为金标准，评价上述3种检测方法的性能。结果:122株CRO菌株属于12个不同菌种，PCR法碳青霉烯酶型检测结果：共112株检测结果阳性，KPC-2型阳性70株，占57%(70/122)，其中肺炎克雷伯菌46株，铜绿假单胞菌12株，其他菌株12株；OXA-232型阳性19株占15%(19/122)，均为肺炎克雷伯菌；NDM型阳性20株占16%(20/122)，其中NDM-1型阳性7株和NDM-5型阳性13株，以大肠埃希菌为主(12/20)；IMP-4型阳性2株，分别为肺炎克雷伯菌和阿氏肠杆菌；检测出1株同时产KPC-2和IMP-4的肺炎克雷伯菌；未检测到VIM型碳青霉烯酶；有10株未检出以上5种基因型。与金标准PCR方法相比mCIM联合eCIM试验灵敏度为95.65%(22/23)，特异度为100.00%(90/90)，阳性预测值(PPV)为100.00%(22/22)，阴性预测值(NPV)为98.90%(90/91)，诊断准确度为99.11%(112/113)；Carba-5和Carba-R试验的灵敏度、特异性、PPV、NPV和诊断准确度均为100%。结论:碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌和铜绿假单胞菌临床微生物实验室可以使用Carba-5试验快速、准确地检测常见碳青霉烯酶型，有条件的实验室还可以选择Carba-R试验，并监测患者是否存在碳青霉烯耐药菌的定植；而Carba-5和Carba-R检测结果阴性时，建议结合药敏结果进行mCIM联合eCIM试验检测。

目的:分析致血流与腹腔共同感染大肠埃希菌（CoECO）的表型和基因型特征，为经验性抗感染治疗提供线索。方法:回顾性分析2010至2020年解放军总医院第一医学中心检验科自血液和腹腔标本中分离出的大肠埃希菌菌株。使用质谱鉴定仪鉴定菌种。使用全自动细菌鉴定药敏仪测定最小抑菌浓度。采用2×150 bp双末端测序策略对大肠埃希菌进行高通量测序。基因组序列经拼接后，使用kSNP3软件对菌株序列进行单核苷酸多态性（SNP）分析，以明确菌株间的同源关系；若分离自两部位的菌株具有较高同源关系，视为同一菌株，则该病例为CoECO感染病例。使用PubMLST网站确定多位点序列型（MLST），使用CARD网站筛选耐药基因。结果:共筛选出70例CoECO感染病例，其中男45例，女25例，年龄（59.2±16.3）岁。每例CoECO感染病例选取1株大肠埃希菌进行后续分析，共计70株，分属于35种ST型，菌株数量较多的ST型包括：ST38（ n=6）、ST405（ n=6）、ST1193（ n=6）、ST131（ n=5），其他ST型所含菌株均少于5株。菌株间同源关系比较分散，整体呈现散发趋势，仅有个别菌株引起了小规模爆发。药敏结果显示：大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率最高（91.4%，64/70），其次为氨苄西林/舒巴坦（74.3%，52/70）、头孢曲松（72.9%，51/70）、环丙沙星（71.4%，50/70）、左氧氟沙星（71.4%，50/70）；对哌拉西林/他唑巴坦、碳青霉烯类和阿米卡星保持较高敏感性。耐药基因携带数量最多的是tet（A/B）（70.0%，49/70），其次分别为bla TEM（58.6%，41/70）、sul1（55.7%，40/70）、sul2（54.3%，38/70）、bla CTX-M-14（25.7%，18/70）、bla CTX-M-15（17.1%，13/70）、bla CTX-M-55（15.7%，11/70）、bla CTX-M-64/65（5.7%，4/70）、bla CTX-M-27（4.3%，3/70）、mcr-1（4.3%，3/70）、bla NDM-5（2.9%，2/70）。 结论:CoECO整体呈散发分布，无明显优势克隆，未发现具有明显优势的基因型；菌株虽然对部分抗菌药物耐药率较高，但携带耐药基因比例较低，对部分一线抗菌药物有较高敏感性。

目的:探讨糖尿病状态下肾周脂肪组织(PRAT)脂肪细胞来源小细胞外囊泡(sEVs)对肾小管上皮细胞的生物行为影响以及其分子机制。方法:提取原代db/m、db/db小鼠PRAT脂肪细胞进行体外培养，收集培养上清并通过超速离心法提取sEVs(NDM-sEVs PRAT-Adipo, DM-sEVs PRAT-Adipo)。将sEVs与人肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞孵育，观察其增殖、凋亡、自噬以及上皮-间质转化(EMT)水平。通过质谱技术分析sEVs蛋白成分，探讨其作用的分子机制。 结果:CCK8结果表明DM-sEVs PRAT-Adipo干预后HK-2细胞的增殖水平与2个对照组(Ctrl组和NDM-sEVs PRAT-Adipo干预组)相比无明显改变。Western印迹法结果表明，对比2个对照组，DM-sEVs PRAT-Adipo干预组的凋亡(Bcl-2、Cleaved-caspase 3、Caspase 3)和自噬(p62、LC3BⅠ、LC3BⅡ)水平无明显改变。Western印迹法和免疫荧光结果表明，与2个对照组比较，DM-sEVs PRAT-Adipo干预可上调HK-2的间质细胞标志蛋白(Vimentin、α-SMA、Snail2)表达水平，下调上皮细胞标志蛋白ZO-1表达水平。sEVs质谱分析结果表明，DM-sEVs PRAT-Adipo与NDM-sEVs PRAT-Adipo的差异蛋白富集于EMT相关通路。其中，DM-sEVs PRAT-Adipo富集血小板反应蛋白(THBS1)，该蛋白与EMT密切相关。 结论:糖尿病状态下，PRAT来源脂肪细胞分泌sEVs促进肾小管上皮细胞EMT上调，此过程可能由sEVs中所富集的THBS1介导。