肝内胆管癌（ICC）是发病率居第2位的原发性肝癌，近年来该病的发病率上升。ICC通常起病隐匿，导致确诊较晚。目前肝切除是ICC唯一被证实有效的根治性治疗措施，但切除率低，远期疗效不理想。局部治疗联合系统性化疗是目前晚期或不可切除ICC的主要治疗方法，但效果较差。随着对ICC基因表达谱研究的深入及二代测序技术的进展，多个异常信号转导通路（RAS/MAPK、MET、EGFR）及基因突变（FGFR2、IDH1/2）等潜在治疗靶点相继被发现。虽然目前尚无针对ICC的靶向药物获得批准使用，但已有百余项应用范围包括ICC的靶向药物单用或联合化疗的临床试验，部分显示良好的应用前景。随着ICC分子分型研究的进展，个体化的靶向治疗可能是ICC新的治疗突破点。

目的:分析8种人胰腺癌细胞株中常见肿瘤相关基因突变，为胰腺癌基础研究中选择合适的细胞株提供依据。方法:体外培养8种人胰腺癌细胞株(AsPC-1、BxPC-3、Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2、PANC-1、Patu8988和T3M4，均购自美国模式培养物集存库)，采用二代测序技术检测113个肿瘤相关基因突变情况，结合京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对突变基因进行功能分析。结果:二代测序结果显示，8种人胰腺癌细胞株中共确定36个基因、79个位点发生突变。鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、肿瘤蛋白P53(TP53)、细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN2A)和胰腺癌缺失基因(DPC4/SMAD4)在8种胰腺癌细胞株中的突变率分别为87.5%(7/8)、100.0%(8/8)、50.0%(4/8)和37.5%(3/8)。AsPC-1和Capan-1细胞中同时存在上述4个基因的突变，BxPC-3细胞株是KRAS野生型胰腺癌，CDKN2A基因在AsPC-1、Capan-1、Capan-2和Patu8988细胞中检测到突变，而DPC4/SMAD4在AsPC-1、Capan-1和T3M4细胞中发生突变。其他发生率较高的突变基因包括AT丰富结合域1A(ARID1A)基因(AsPC-1、Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREBBP)基因(Capan-1、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、NOTCH1(BxPC-3、Capan-2、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)、腺瘤性息肉病(APC)基因(AsPC-1、Capan-1和Patu8988发生突变)和E1A结合蛋白P300(EP300)基因(BxPC-3、MIA PaCa-2和T3M4发生突变)。突变基因功能主要涉及Ras/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞周期调控、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路、NOTCH信号通路、染色质重塑复合物家族、转化生长因子β(TGF-β)信号通路、DNA损伤修复、Hedgehog和磷脂酰肌醇3激酶丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-Akt)信号通路等。结论:8种胰腺癌细胞株具备人胰腺癌组织的基因学特征，不同细胞株具有不同的基因突变特点，实验研究中应根据不同细胞的基因突变情况合理选择细胞株并分析研究结果。

卡波西样淋巴管瘤病(KLA)是泛发性淋巴管异常的一种侵袭性亚型。由于早期症状缺乏特异性，所以较难做出诊断，而且目前仍缺乏有效的治疗方法，所以该病的预后普遍较差，5年生存率为51%，总体生存率仅为34%。该文总结了与KLA发病有关的遗传学研究进展及潜在的药物治疗靶点。回顾文献发现与KLA发病可能有关的突变包括NRAS基因突变和CBL基因突变，涉及的信号通路主要包括PI3K-AKT-mTOR通路和RAS-MAPK-ERK通路，因此上述信号通路中的关键分子PI3K/AKT/mTOR以及RAS/MEK或许可作为KLA靶向治疗方案的靶点，并发展出特异的治疗方法。

目的:探讨胸乳入路腔镜甲状腺切除术在甲状腺乳头状癌患者中的疗效及对Wnt和整合素信号通路的影响。方法:选取2018年7月至2020年3月三二〇一医院确诊为甲状腺乳头状癌并住院行手术治疗的患者136例，按术式不同分为观察组（68例）和对照组（68例）。对照组予开放甲状腺切除术治疗。观察组予胸乳入路腔镜甲状腺切除术治疗。比较免疫功能（CD4+、CD8+和CD4+/CD8+）、疼痛指标（PGE2、IL-6、Cor和VAS评分），采用RT-PCR法检测手术前后两组（WNT1、 β-catenin、GSK3 β）及整合素信号通路。 结果:术后3 d，较对照组，观察组CD4 +和CD4 +/CD8 +水平明显更高[（27.62±2.52）vs（24.63±2.67）,（0.66±0.18）vs（0.52±0.13）]，而CD8+水平明显更低[（41.62±3.54）vs（45.62±3.63）]（ P<0.001）；观察组PGE2、IL-6、Cor、VAS均显著低于对照组[（48.54±9.86）vs（57.21±8.12）,（5.13±0.71）vs（6.99±0.95）,（511.23±67.52）vs（633.12±71.47）,（1.26±0.56）vs（3.99±2.06）]（ P<0.001）；观察组WNT1、 β-catenin、GSK3 β、整合素 β1、FAK、Ras、MAPK mRNA表达量均显著低于对照组[（1.79±0.15）vs（2.85±0.25）,（1.94±0.15）vs（2.64±0.24）,（2.13±0.19）vs（2.97±0.28）,（1.95±0.17）vs（2.58±0.23）,（2.15±0.16）vs（2.87±0.22）,（1.95±0.18）vs（2.91±0.27）, （1.89±0.12）vs（2.87±0.31）]（ P<0.001）。 结论:胸乳入路腔镜甲状腺切除术可有效减轻甲状腺乳头状癌患者术后疼痛水平，且对免疫功能影响更小，使Wnt和整合素信号通路表达受阻以降低肿瘤转移风险。

目的:分析阑尾腺癌患者Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源(KRAS)基因突变特点及其与Ras-Raf-丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路活性的关系。方法:选取丽水市中心医院2014年1月至2020年1月收治、经手术切除的41例阑尾腺癌患者为观察组，随机抽取50例同期手术的阑尾炎患者为对照组。统计其临床与随访资料，并采用Snapshot法测定患者组织KRAS基因的突变情况，采用蛋白免疫印迹(WB)试验测定癌组织MAPK/ERK信号通路关键蛋白的表达。比较KRAS突变与非KRAS突变阑尾腺癌患者临床特征和预后。结果:观察组的KRAS基因突变率高于对照组(41.5% vs 10.0%)，p-ARAF/ARAF、p-MEK1/MEK1、p-ERK1/ERK1蛋白表达水平也高于对照组，组间差异有统计学意义(均 P<0.05)。观察组KRAS突变患者的p-ARAF/ARAF、p-MEK1/MEK1、p-ERK1/ERK1蛋白表达水平明显高于非KRAS突变者，KRAS突变患者Ⅳ期比例、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)199及CA125的阳性率高于非KRAS突变患者，总生存期和无进展生存期短于非KRAS突变患者，差异有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:阑尾腺癌KRAS突变率较高，KRAS突变导致的MAPK/ERK信号通路激活可能在阑尾腺癌致病机制中发挥作用，具有深入研究的价值。

目的:探讨层粘连蛋白α3（LAMA3）DNA甲基化对卵巢上皮性癌（卵巢癌）铂耐药及预后的影响及可能的机制。方法:（1）通过数据库中生物信息学数据分析LAMA3 DNA甲基化水平与卵巢癌铂耐药的关系。（2）选取2000年1月至2012年12月在广西医科大学附属肿瘤医院诊治的卵巢癌患者共67例（包括铂耐药组35例和铂敏感组32例），采用焦磷酸测序技术检测两组卵巢癌组织中LAMA3 DNA甲基化水平，探讨其对卵巢癌患者铂耐药及预后的诊断效能，并进一步分析其对卵巢癌铂耐药患者化疗效果及预后的影响。结果:（1）从基因互作检索平台（STRING）数据库中筛选出与LAMA3高度互作的10个蛋白，包括层粘连蛋白β（LAMB）3、层粘连蛋白γ（LAMC）3、整合素α（ITGA）6、整联蛋白β4（ITGB4）、ITGA3、LAMC1、LAMB2、肌营养不良蛋白关联糖蛋白1（DAG1）、LAMB1、17型胶原蛋白α1链（COL17A1）蛋白；京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析显示，LAMA3及其相关互作蛋白通过细胞凋亡、细胞周期、DNA损伤反应、上皮间质转化（EMT）、雄激素受体（AR）、雌激素受体（ER）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、大鼠肉瘤癌基因（RAS）/有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）、受体酪氨酸激酶（RTK）、结节性硬化症蛋白复合体（TSC）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）等信号通路，参与恶性肿瘤发生、发展过程的调控，其表达水平与卵巢癌顺铂等化疗药物的敏感性相关。（2）本院临床数据分析发现，铂耐药组、铂敏感组卵巢癌组织中LAMA3 DNA甲基化水平分别为71%（25/35）、69%（22/32），两组比较，差异无统计学意义（ χ2=0.057， P=0.811）；LAMA3 DNA甲基化水平判断卵巢癌铂耐药的曲线下面积（AUC）为0.601，预测患者预后的AUC值为0.686。LAMA3 DNA高甲基化铂耐药卵巢癌患者（24例）的化疗效果较低甲基化铂敏感患者（15例）更差［有效率分别为50%（12/24）和15/15； χ2=10.833， P=0.001］，且LAMA3 DNA甲基化水平对卵巢癌患者的无进展生存时间和总生存时间均有显著影响（ P均<0.05）。 结论:LAMA3 DNA甲基化水平对卵巢癌患者的铂耐药及预后具有一定的诊断和预测价值，可能与卵巢癌的调控机制、铂耐药及预后存在密切联系。

胆管内乳头状肿瘤（IPNB）是1种罕见胆道肿瘤，以胆管扩张、胆管内乳头状增生或囊性改变，伴或不伴黏液分泌为特征。IPNB的病因及机制尚不清楚，已有的研究结果显示：胆管结石、华支睾吸虫感染等引起的胆汁淤积和胆道反复感染与IPNB的发生密切相关；Ras-MAPK、Wnt/β-catenin等信号通路在IPNB的进展过程中发挥重要作用。IPNB缺乏特异临床特征，其症状取决于肿瘤发生部位和胆管梗阻程度，主要表现为腹痛、梗阻性黄疸、发热和反复发作的胆管炎。根据上皮组织形态和免疫组织化学染色标志物，可将IPNB分为胰胆管型、肠型、胃型和嗜酸细胞型；根据主要病变所在位置，可将IPNB分为肝内型、肝外型和弥漫型，该分型具有较好临床指导作用。IPNB根治性手术治疗患者的预后优于姑息性治疗患者，建议所有符合适应证的患者行根治性治疗。笔者总结IPNB病因、进展机制、临床表现、病理学特征和诊断与治疗现状，并对其研究进展进行综述。

目的:探讨人环状RNA 0001400（hsa_circ_0001400）及其线性转录物RELL1在卡波西肉瘤（KS）发生发展中的作用机制。方法:采用人KS相关疱疹病毒（KSHV）感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）并鉴定感染是否成功。取对数生长期HUVEC分为3组：HUVEC组（未感染的HUVEC）、KSHV + HUVEC组（0.5感染复数的KSHV感染HUVEC）、MAPK抑制剂组（0.5感染复数的KSHV感染HUVEC6 h后，再用1 μmol/L MAPK抑制剂处理），细胞计数试剂盒（CCK8）和流式细胞仪分别检测各组细胞增殖能力及凋亡情况。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及Western印迹法检测HUVEC组与KSHV + HUVEC组细胞中hsa_circ_0001400及其线性转录物RELL1、鼠肉瘤病毒癌基因同源物（RAS）/丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号通路的转录和蛋白表达水平。收集5对KS组织及瘤旁组织，并在KS组织样本中验证上述基因mRNA表达。统计分析采用两因素方差分析、单因素方差分析及 t检验等。 结果:与未感染的HUVEC相比，感染KSHV 48 h后HUVEC变圆，生长更密集。感染KSHV的HUVEC可检出KSHV裂解激活基因ORF50与潜伏态基因LANA的mRNA表达，其表达水平均高于未感染的HUVEC（均 P < 0.001），KSHV成功感染HUVEC。在培养24 ~ 72 h内随培养时间延长，KSHV + HUVEC组细胞增殖率逐渐升高，而MAPK抑制剂组细胞增殖活力明显受到抑制；3组48 h时总凋亡率差异有统计学意义（ F = 673.98， P < 0.001），且MAPK抑制剂组细胞总凋亡率明显高于KSHV + HUVEC组和HUVEC组（均 P < 0.001），而KSHV + HUVEC组与HUVEC组差异无统计学意义（ P > 0.05）。qRT-PCR结果显示，KSHV + HUVEC组hsa_circ_0001400、RELL1、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）、MAPK11、细胞外信号调节激酶（ERK）-2 mRNA表达量均高于HUVEC组（均 P < 0.05），而两组间ERK1 mRNA表达量差异无统计学意义（ t = 0.92， P = 0.410）。Western印迹法检测显示，KSHV + HUVEC组RELL1、KRAS、MAPK11、ERK1、ERK2蛋白表达量均明显高于HUVEC组（均 P < 0.01）。KS组织中RELL1、ERK1、ERK2 mRNA表达量显著高于瘤旁组织（均 P < 0.05）。 结论:KSHV感染后，可能通过诱导hsa_circ_0001400及其线性转录物RELL1表达上调，激活MAPK信号通路，从而调控KS的发生发展。

目的:探索研究DNAJB6在部分肝移植肝再生的作用及分子机制。方法:采用DA大鼠作为供体，Lewis大鼠作为受体，构建部分肝移植肝再生模型。按照部分肝移植不同时间点分为6组(每组6对)，分别为灌注前、劈裂肝完成灌注后、门静脉开放后、关腹前、术后第3、7天组。采用C57小鼠构建部分肝切除残余肝再生模型，根据肝切除不同时间点分为6组(每组6只)，分别为对照组、1 d、2 d、3 d、4 d和5 d组。利用基因表达数据库的肝再生数据分析和肝再生动物标本找到肝再生的关键基因。通过转染干扰RNA构建DNAJB6低表达的人源肝细胞。通过蛋白印迹检测细胞增殖核抗原(PCNA)和细胞增殖实验研究DNAJB6与肝再生的关系。通过蛋白印迹检测核蛋白和经典细胞增殖信号通路节点蛋白研究DNAJB6调节部分肝移植肝再生的可能分子机制。结果:部分肝切除残余肝再生结果显示，DNAJ家族基因在再生肝基因芯片中差异表达，其中DNAJB6在再生肝基因芯片中低表达。与此同时，DNAJB6在部分肝移植和部分肝切的再生肝组织中低表达。DNAJB6沉默后，细胞PCNA表达水平升高且增殖速率加快。然而，细胞核提取没有检测到β-catenin胞核/质间改变，且Wnt4蛋白水平也未发生变化。虽然，Ras/MAPK下游的p38和JNK2活化水平没有发生变化，但ERK活化水平升高。结论:在再生肝组织中，肝细胞可能通过降低DNAJB6的表达水平抑制Ras/MEK/ERK信号通路以促进肝再生。

RAS信号通路相关综合征(RASopathies)是由RAS/MAPK通路的基因变异引起的一组疾病，患者的临床表型存在重叠，诊断十分困难。由于几乎所有的RASopathies均呈常染色体显性遗传，许多家庭会反复生育患儿。随着测序技术的发展，这类综合征的基因型与表型的相关性越来越明确。分子遗传学检测可为受累家系提供产前诊断，减少患儿的出生。但对于新发变异，产前诊断RASopathies仍较困难。近期研究发现对于不同的RAS相关疾病，可以从超声表现中找到一些基因检测的线索，本文就RASopathies及其产前诊断的进展做一综述。