目的:探讨轴突生长抑制因子(Nogo)-少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(Omgp)/Ras同源基因(Rho)-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Rock)信号通路在一氧化碳(CO)中毒急性脑损伤中的作用，以及Rock抑制剂盐酸法舒地尔对其治疗的可行性。方法:将135只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、CO中毒组和盐酸法舒地尔组，每组45只。后2组大鼠采用高压氧舱吸入法建立急性重症CO中毒模型。各组大鼠均接受高压氧治疗2周，其中盐酸法舒地尔组大鼠同时给予腹腔注射盐酸法舒地尔[15 mg/(kg·d)，1次/d，共2周]，CO中毒组和正常对照组大鼠给予相同体积的生理盐水注射。于造模后1周时应用透射电镜观察各组大鼠海马组织超微结构的改变，于造模后1 d、1周、1个月、2个月时采用免疫组化染色或免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock阳性细胞染色强度，采用Western blotting检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock蛋白的表达水平。结果:CO中毒组大鼠海马组织超微结构及血脑屏障损伤明显，以细胞核、线粒体及突触结构改变显著，而盐酸法舒地尔治疗能有效地维持海马组织超微结构及功能的完整性，减轻脑水肿。造模后1 d、1周、1个月、2个月时，CO中毒组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显高于同一时间点的正常对照组，盐酸法舒地尔组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显低于同一时间点的CO中毒组，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:Nogo-OMgp/Rho-Rock信号通路相关分子的激活与CO中毒急性脑损伤密切相关，而盐酸法舒地尔能有效下调Nogo、OMgp和Rock蛋白的表达水平，从而明显减轻CO中毒后脑损伤程度。

甲磺酸贝舒地尔是一种口服的选择性Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2（ROCK2）抑制剂，临床研究证实其治疗慢性移植物抗宿主病（cGVHD）患者具有良好的效果和安全性。2021年7月，美国食品药品监督管理局（FDA）批准甲磺酸贝舒地尔用于既往至少接受过2线系统性治疗失败后的cGVHD成年患者和≥12岁的儿童患者。2023年8月，甲磺酸贝舒地尔在我国获批用于治疗对糖皮质激素或其他系统治疗应答不充分的≥12岁cGVHD患者。鉴于上市之初临床医生用药经验尚不丰富，中国临床肿瘤学会（CSCO）白血病专家委员会牵头制定了甲磺酸贝舒地尔治疗cGVHD临床应用指导原则，旨在为我国临床医生提供用药参考。

目的:探讨基质刚度对尿道成纤维细胞(UFBs)活化的影响及其机制。方法:2020年6月至2021年2月从福建医科大学附属第一医院泌尿外科手术患者获得的尿道瘢痕组织中提取原代UFBs；用聚二甲基矽氧烷分别以60∶1(Soft)、40∶1(Moderate)、30∶1(Stiff)的比例加入固化剂，制备不同刚度的基质凝胶，将UFBs接种其上培养。倒置显微镜观察在不同刚度基质凝胶上生长的UFBs形态学特点；蛋白质印迹法(Western blot)检测UFBs活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅲ)表达水平；进一步检测FAK/ROCK-1/YAP通路标志蛋白表达水平，并观察整合素抑制剂Cilengtide (20 ng/ml)对其影响，探索基质刚度是否通过此通路影响UFBs活化；采用方差分析和独立样本 t检验比较组间差异。 结果:随着基质凝胶刚度的增加，接种其上的UFBs形态由椭圆形转变为偏梭形，细胞伪足增长、增多；Soft、Moderate、Stiff组UFBs的α-SMA相对表达量分别为(0.140±0.004、0.815±0.030和1.385±0.051， F＝989.247， P<0.05)；collagen Ⅰ相对表达量分别为(0.138±0.004、0.947±0.021和1.263±0.028， F＝2 415.159， P<0.05)；collagen Ⅲ相对表达量分别为(0.284±0.005、1.089±0.017和1.374±0.038， F＝1 661.310， P<0.05)，均随基质刚度增加而升高；Stiff组中UFBs的p-FAK(1.282±0.029比0.430±0.009， t＝ 48.262， P<0.05)、ROCK-1(1.366±0.111比0.474±0.034， t＝13.300， P<0.05)和YAP(1.272±0.020比0.908±0.007， t＝30.254， P<0.05)表达水平均显著高于Soft组，而p-YAP(0.589±0.006比1.028±0.008， t＝-74.860， P<0.05)表达水平显著低于Soft组；在加入整合素抑制剂Cilengtide后，基质刚度增加引起的p-FAK、ROCK-1、YAP和p-YAP表达改变均减弱。 结论:细胞外基质刚度通过整合素介导的FAK/ROCK-1/YAP通路调控人尿道成纤维细胞活化。

目的:探讨选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布是否通过抑制Rho/Rho相关蛋白激酶（ROCK）通路的表达对2型糖尿病（T2DM）合并非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝脏具有保护作用。方法:雄性SD大鼠40只，随机等分为T2DM合并非酒精性脂肪性肝炎（T2DM-NASH）组、T2DM-NASH+塞来昔布组、对照组、对照+塞来昔布组四组，其中T2DM-NASH及T2DM-NASH+塞来昔布组予高糖高脂饲料喂养，对照组及对照+塞来昔布组予基础饲料（25 kJ/kg）喂养，4周后T2DM-NASH组及T2DM-NASH+塞来昔布组腹腔注射链脲佐菌素（STZ，30 mg/kg）诱导T2DM模型，而对照组及对照+塞来昔布组腹腔注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，STZ注射4周后T2DM-NASH+塞来昔布组及对照+塞来昔布组予塞来昔布（10 mg·kg -1·d -1）溶于生理盐水中灌胃4周，剩余两组大鼠予等体积生理盐水灌胃4周。第12周末处死动物，取肝脏组织，行HE染色观察肝脏病理改变；免疫组织化学及蛋白质印迹法检测RhoA、Rho相关蛋白激酶1（ROCK1）及Rho相关蛋白激酶2（ROCK2）蛋白在肝脏的表达，实时定量PCR法检测RhoA、ROCK1及ROCK2 mRNA在肝脏的表达情况，并采用方差分析及 t检验对比各组间蛋白及mRNA的表达差异。 结果:与对照组及对照组+塞来昔布组相比，T2DM-NASH组及T2DM-NASH+塞来昔布组光镜下肝组织呈重度脂肪变性，部分可见炎症细胞浸润，且肝组织RhoA、ROCK1及ROCK2的蛋白及mRNA表达水平均显著升高（ P < 0.05),而T2DM-NASH+塞来昔布组较T2DM-NASH组肝细胞脂肪变性有所减轻且肝组织RhoA、ROCK1及ROCK2蛋白及mRNA表达水平均降低（ P < 0.05)。 结论:选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对T2DM-NASH大鼠肝脏具有保护作用,而其作用可能是通过抑制Rho/ROCK通路的表达而达到的。

目的:探讨RhoA/Rho激酶1(ROCK1)下调抑制肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化在主动脉夹层(AD)形成过程中的作用。方法:检测正常(NA)和AD主动脉原代平滑肌细胞(SMC)中RhoA/ROCK1的表达与MLC的磷酸化程度。免疫荧光观察SMC中MLC磷酸化程度和结构。β-氨基丙腈(BAPN)联合应用ROCK1抑制剂Fasudil，验证RhoA/ROCK1下调在AD形成中的作用。组间比较采用 t检验或 χ2检验，Kaplan-Meier生存曲线采用非参数检验。 结果:NA组和AD组年龄( t＝－1.439， P>0.05)、性别( χ2＝0.900， P>0.05)差异无统计学意义，AD组高血压患者多于正常组( χ2＝5.562， P<0.05)。AD主动脉SMC中RhoA(NA：42 782±31 339，AD：6 975±3 130， t＝2.585， P<0.05)和ROCK1表达下调(NA：64 626±38 822，AD：13 851±961， t＝2.977， P<0.05)，MLC磷酸化减少(NA：230 193±27 749，AD：51 142±48 151， t＝6.561， P<0.01)。免疫荧光显示AD组SMC和Fasudil处理的SMC中MLC磷酸化降低，结构受损。Fasudil联合BAPN的夹层形成率(100%)高于BAPN的夹层形成率(50%， χ2＝22.780， P<0.01)。 结论:RhoA/ROCK1下调抑制MLC磷酸化促进了AD的发生。

目的:探讨盐酸法舒地尔(fasudil hydrochloride，FH)对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)大鼠早期脑损伤海马区Rho激酶2(Rho-associated kinase 2，ROCK2)蛋白及铁死亡的影响。方法:36只SPF级Sprague-Dawley大鼠用随机数字表法分为3组：假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)、SAH+ROCK2蛋白抑制剂FH组(FH组)，每组12只。颈内动脉刺破法建立SAH大鼠模型，FH组大鼠于造模成功后30 min腹腔注射FH(15 mg/kg)，Sham组与SAH组注射等体积0.9%氯化钠溶液。干预后24 h，采用穿梭箱实验观察大鼠学习记忆能力，比色法检测大鼠海马区脑组织中Fe 2+含量，免疫组化及Western blot检测海马组织中ROCK2蛋白及铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4，ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPX4)的表达水平。采用SPSS 20.0软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。 结果:(1)穿梭箱实验中3组大鼠的躲避反应次数及躲避反应时间均差异有统计学意义( F＝20.348，22.316，均 P<0.05)，SAH组大鼠躲避反应次数少于Sham组[(17.92±2.94)次，(27.13±3.48)次， P<0.05]，躲避反应时间长于Sham组[(9.15±2.87)s，(3.68±1.09)s， P<0.05]，而FH组反应次数[(21.63±4.11)次]多于SAH组，躲避反应时间[(6.08±1.76)s]短于SAH组(均 P<0.05)。(2)比色法检测结果显示，3组大鼠海马组织Fe 2+含量差异有统计学意义( F＝7.965， P<0.05)，SAH组Fe 2+含量高于Sham组[(0.091±0.032)nmol/mg，( 0.038±0.024)nmol/mg， P<0.05]，FH组Fe 2+含量[(0.065±0.021)nmol/mg]低于SAH组( P<0.05)。(3)免疫组化中3组大鼠海马组织ROCK2、ACSL4、GPX4阳性细胞数差异有统计学意义( F＝7.602，14.171，36.077，均 P<0.05)，SAH组ROCK2及ACSL4阳性细胞[(21.63±4.72)个，(55.13±19.41)个]显著高于Sham组[(11.63±3.62)个，(23.38±3.74)个] (均 P<0.05)，FH组ROCK2及ACSL4阳性细胞数[(15.88±6.64)个，(44.75±8.29)个]均低于SAH组(均 P<0.05)，而SAH组GPX4阳性细胞数[(25.38±6.30)个]显著低于Sham组[(60.25±10.36)个]( P<0.05)，FH组GPX4阳性细胞数[(45.13±7.51)个]高于SAH组( P<0.05)。(4) Western blot结果显示，3组大鼠海马组织ROCK2、ACSL4、GPX4蛋白表达水平均差异有统计学意义( F＝4.812，12.573，10.849，均 P<0.05)，SAH组ROCK2及ACSL4蛋白表达水平均显著高于Sham组(均 P<0.05)，FH组ROCK2及ACSL4蛋白表达水平均低于SAH组(均 P<0.05)，而SAH组GPX4蛋白表达水平显著低于Sham组( P<0.05)，FH组GPX4蛋白表达水平高于SAH组( P<0.05)。 结论:FH可抑制海马区的铁死亡，改善大鼠学习记忆能力，其机制可能与下调ROCK2蛋白有关。

目的:探讨Rho激酶抑制剂对脓毒症大鼠肠损伤的影响及其可能机制。方法:将32只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、Rho激酶抑制剂Y-27632对照组（Y+Sham组）、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术（CLP）组〕及Y-27632预处理组（Y+CLP组），每组8只。采用CLP法制备大鼠脓毒症模型；Sham组和Y+Sham组只游离拨动盲肠、不进行结扎穿孔。Y+Sham组和Y+CLP组大鼠于术前15 min腹腔注射Y-27632溶液5 mg/kg进行预处理；Sham组及CLP组大鼠则腹腔注射等量磷酸盐缓冲液（PBS）。于术后24 h取大鼠心脏血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清二胺氧化酶（DAO）含量。收集小肠组织，苏木素-伊红（HE）染色后，光镜下观察肠组织病理学变化，并进行肠黏膜损伤评分（Chiu's评分）；采用免疫组化法检测肠组织Rho相关卷曲螺旋激酶1（ROCK1）和核转录因子-κB（NF-κB）阳性表达；采用ELISA法检测肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）的含量。结果:Sham组和Y+Sham组肠组织结构完整，黏膜纤毛排列整齐；与Sham组相比，CLP组肠道黏膜纤毛排列紊乱，大量炎症细胞浸润，Chiu's评分显著升高（分：3.83±0.27比0.12±0.11， P<0.05），说明大鼠发生了脓毒症肠损伤；与CLP组相比，Y+CLP组大鼠肠上皮细胞坏死程度减轻，可见少量炎症细胞浸润，Chiu's评分显著降低（分：2.85±0.21比3.83±0.27， P<0.05），说明Y-27632预处理可以减轻脓毒症大鼠肠损伤。与Sham组相比，CLP组肠组织ROCK1和NF-κB阳性表达、血清DAO及肠组织TNF-α含量显著增加〔ROCK1表达（ A值）：0.19（0.18，0.22）比0.10（0.09，0.11），NF-κB表达（ A值）：0.40±0.02比0.15±0.01，DAO（ng/L）：287.81±23.31比144.92±17.72，TNF-α（ng/L）：101.08±5.62比74.81±5.56，均 P<0.05〕，而肠组织IL-10含量显著降低（μg/L：55.16±5.20比95.95±7.53， P<0.05）；与CLP组相比，Y+CLP组肠组织ROCK1和NF-κB的阳性表达、血清DAO及肠组织TNF-α的含量均显著降低〔ROCK1表达（ A值）：0.15（0.13，0.18）比0.19（0.18，0.22），NF-κB表达（ A值）：0.28±0.01比0.40±0.02，DAO（ng/L）：243.34±19.76比287.81±23.31，TNF-α（ng/L）：90.41±8.79比101.08±5.62，均 P<0.05〕，而肠组织IL-10的含量则显著增加（μg/L：66.15±5.74比55.16±5.20， P<0.05），说明Y-27632预处理对脓毒症肠损伤大鼠的保护作用可能与调节RhoA/ROCK1/NF-κB信号通路有关。 结论:Rho激酶抑制剂可以减轻脓毒症大鼠肠损伤，其机制可能与抑制肠道RhoA/ROCK1/NF-κB信号通路，减轻肠道炎症反应有关。

目的:探讨双氢睾酮（DHT）对人外周血早期内皮祖细胞（PB-EPCs）增殖、迁移功能的影响及RhoA/ROCK信号通路在其中的作用。方法:取健康成人外周血分离、培养出早期EPCs并鉴定。分别以不同浓度DHT(1、10、100 nmol/L)干预，得出最佳浓度和最佳作用时间后用于后续干预实验。分组：对照组、DHT、RhoA抑制剂C3 exoenzyme+DHT组、ROCK抑制剂Y-27632+DHT组。检测各组EPCs的增殖、迁移能力。ELISA法检测各组细胞上清液液中VEGF蛋白含量。结果:DHT在一定范围内呈浓度-时间依赖性促进EPCs增值、迁移功能，分别在浓度为10 nmol/L和24 h达到最大作用效果。与单纯10 nmol/L的DHT刺激组相比，C3 exoenzyme[(0.22±0.02) vs (0.26±0.05), P>0.05]和Y-27632[(0.21±0.04) vs (0.26±0.05), P>0.05]能够减弱DHT诱导的EPCs增殖，但差异无统计学意义。DHT对EPCs迁移能力的促进作用可被C3 exoenzyme[(35.26±4.27) vs (46.92±5.46), P<0.05]和Y-27632[(33.61±5.33) vs (46.92±5.46), P<0.01]抑制。DHT对EPCs分泌VEGF能力的促进作用可被C3 exoenzyme[(116.75±7.42) vs (156.80±21.74), P<0.05]和Y-27632[(121.73±5.33) vs (156.80 ±21.74), P<0.01]抑制。 结论:DHT呈一定的浓度-时间依赖性促进EPCs的增殖、迁移以及VEGF的表达，其中RhoA/ROCK信号通路参与调控了此过程。

目的:评价Rho亚家族蛋白A(RhoA)/Rho相关的卷曲连接蛋白激酶2(ROCK2)信号通路在多次七氟烷麻醉致新生大鼠远期认知功能障碍中的作用。方法:SPF级健康新生SD大鼠60只，雌雄不拘，6日龄，体重12~20 g，采用随机数字表法分为3组( n＝20)：对照组(C组)、多次七氟烷麻醉组(S组)和RhoA/ROCK2信号通路抑制剂Y-27632组(Y组)。S组和Y组于出生后6、7和8 d时吸入3%七氟烷麻醉2 h；Y组于吸入七氟烷麻醉前腹腔注射Y-27632 5 mg/kg。于出生后35 d时行旷场实验评估自发活动能力；于出生后36 d时行Morris水迷宫实验评估认知功能。水迷宫实验结束后处死大鼠分离海马组织，采用流式细胞术检测神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度([Ca 2+] i)，采用Western blot法测定磷酸化RhoA(p-RhoA)、ROCK2和裂解的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达水平，透射电镜下观察神经元超微结构。 结果:3组旷场实验运动速度、路程及旷场中心停留时间比较差异无统计学意义( P>0.05)。与C组比较，S组逃避潜伏期延长，穿越原平台次数减少，海马神经元凋亡率和[Ca 2+] i升高，p-RhoA、ROCK2和cleaved-caspase-3表达上调( P<0.05)，海马神经元发生病理学损伤。与S组比较，Y组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增加，海马神经元凋亡率和[Ca 2+] i降低，p-RhoA、ROCK2和cleaved-caspase-3表达下调( P<0.05)，海马神经元病理学损伤减轻。 结论:多次七氟烷麻醉诱发新生大鼠远期认知功能障碍的机制与激活RhoA/ROCK2信号通路，诱发海马神经元凋亡有关。

目的 探讨法舒地尔在改善周围神经损伤后的轴突与髓鞘再生及功能恢复的效果.方法 SD大鼠30只,重(200±30)g,切断右侧坐骨神经,缝合后等分入2组,即对照组与法舒地尔组,分别给予生理盐水与10mg/kg的盐酸法舒地尔腹腔注射.术后2周,利用NF-200一抗对损伤远端的轴突密度进行评估.术后4周,利用逆行示踪剂荧光金评估发出轴突进入损伤远端的位于L4～6DRG和腰骶膨大处的神经元数量.术后12周,对腓肠肌的湿重比、肌纤维的横截面积进行测量;利用NF-200与MPZ 一抗及透射电镜对轴突的直径与髓鞘的厚度进行测量.术后4、6、8、10、12周采集足印,对两组大鼠坐骨神经功能指数(SFI)进行评定.此外,体外培养大鼠胚胎脊髓背根神经节(DRG)和脊髓运动神经元(SMN),评估法舒地尔对其轴突生长的影响.结果 术后14 d,法舒地尔组损伤远端神经密度显著高于对照组(P=0.034).术后4周法舒地尔组被荧光金逆行标志的L4～6DRG及脊髓前角运动神经元数目均显著高于对照组(P＜0.05).术后12周,法舒地尔组有髓轴突的数量、有髓轴突的直径以及髓鞘的厚度都高于对照组(P＜0.05),G-ratio值则低于对照组(P＜0.05).SFI数据结果显示,术后6、8、10及12周,法舒地尔组SFI值显著优于对照组(P＜0.05).术后12周,对照组的患侧腓肠肌的湿重比及肌纤维的横截面积显著小于法舒地尔组(P＜0.01).培养5d后,法舒地尔组DRG及SMN的轴突显著长于对照组(P＜0.01).结论 法舒地尔能够促进大鼠坐骨神经横断伤后的轴突与髓鞘再生及其运动功能恢复.