目的 以三七药渣为原料,通过益生菌发酵比较不同益生菌以及复合益生菌对各指标成分影响的差异,探究最佳发酵工艺.方法 采用单因素、Box-Behnken响应面法优化发酵工艺,并通过体外抗氧化实验评价发酵产物的抗氧化能力.结果 最佳发酵工艺为有氧发酵 48 h、厌氧发酵 36 h,嗜热链球菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌的比例为 2∶3∶1,料液比0.14 g·mL-1,接菌量 5%,温度 33℃.在最佳发酵工艺条件下,三七药渣中性多糖、酸性多糖、总黄酮的含量分别提高了105.64%、96.98%、123.83%,相较于单菌发酵均显著升高.发酵产物清除 DPPH、ABTS 自由基的 IC50 值分别为 1.774、3.065 mg·mL-1,还原Fe3+的能力为 0.138 mmol FeSO4·g-1,较未发酵药渣显著增强.结论 最佳发酵工艺能显著提高三七药渣中各指标成分含量,显著增强其抗氧化能力,相较单菌发酵各指标成分含量均显著提高,提示上述益生菌之间没有明显的拮抗作用.研究结果为三七药渣的资源化利用提供了科学依据和数据支撑.

目的 优化灵芝固态发酵三七渣产漆酶工艺.方法 在单因素试验基础上,以发酵时间、发酵温度、接种量为影响因素,漆酶活性为评价指标,Box-Behnken响应面法优化发酵工艺.结果 最佳条件为发酵时间 14 d,发酵温度28.09℃,接种量 26.65%,漆酶活性为 3.612 U/g.结论 该方法稳定可靠,可为灵芝固态发酵三七渣产漆酶后期开发和应用提供依据.

目的 探讨活血化瘀方治疗小儿过敏性紫癜肾炎(HSPN)的临床疗效.方法 选择2016年8月至2017年2月在天津市儿童医院中医科就诊的HSPN患儿60例,按随机分为活血化瘀方组和西医治疗对照组,每组30例.活血化瘀方组给予活血化瘀方加减(五灵脂、蒲黄炭、当归、小蓟、牡丹皮、藕节炭各10 g,茯苓、猪苓、泽泻、荆芥炭各6 g,三七3 g.挟热者加白茅根、淡竹叶,挟湿者加赤小豆、芡实,挟虚者加生黄芪、黄精、何首乌),每日1剂,每日2次;西医治疗组给予维生素C、氨肽素、氯雷他定糖浆;两组治疗30 d后观察临床体征、实验室指标及临床疗效的变化.结果 活血化瘀方组临床体征皮肤紫癜已消退患者数(13例比10例)、部分消退患者数(12例比9例)和实验室指标隐血<+患者数(13例比10例)、24 h尿蛋白定量转为正常患者数(25例比20例)、尿沉渣红细胞<3个/HP患者数(11例比9例)、尿流式红细胞<30 个/μL患者数(11例比8例)均较西医治疗对照组明显增加(均P<0.05)).活血化瘀方组治疗后显效13例,有效12例,无效5例,总有效率83.33%(25例),西医治疗对照组显效10例,有效9例,无效11例,总有效率63.33%(19例),活血化瘀方组总有效率明显高于西医对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 活血化瘀方可明显改善HSPN患儿实验室指标及临床体征,提高临床总有效率,疗效确切,值得临床推广.

目的 研究牛膝Achyranthis bidentataBl.的化学成分及其对细胞增殖的影响.方法 牛膝药渣水提物的分析采用Diaion HP-20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、ODS、硅胶以及HPLC制备柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.MTF法评价其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖作用的影响.结果 从中分离得到10个化合物,分别鉴定为cynarasaponin A(1)、人参皂苷R0 (2)、竹节参皂苷Ⅳa(3)、竹节参苷Ⅳa甲酯(4)、竹节参皂苷Ⅳa乙酯(5)、竹节参皂苷Ⅳa丁酯(6)、竹节参皂苷1(7)、姜状三七苷R1(8)、齐墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(9)、齐墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖醛酸乙酯(10).化合物1、6、7、8对HUVEC增殖有明显的抑制作用.结论 化合物1和10为首次从牛膝中分离得到,化合物1、6、7、8有较强的抑制细胞增殖作用.

血液形态学检查是医学院校临床实验诊断学课程中的重点和难点,通过近几年对临床医学专业五年制、七年制及"5+3"一体化本科阶段《实验诊断学》"临床血液学检测"部分的理论及实验课带教工作,针对学生在血液形态初学时出现的普遍问题进行总结及分析,如涂片观察视野寻找不准确、形态相近的细胞易混淆、过分关注诸如涂抹细胞、染料渣子等非细胞物质;进而从理论与实验课结合、充分利用形态学图谱资源库及完善形态学考核制度三方面提出相应的解决对策,旨在激发学生积极性,培养临床诊断思维,提高教学质量,为培养合格的高素质临床工作人员打下坚实基础.

为考察工业三七药渣中是否含有三七素,探究提取、分离纯化三七素的方法,并考察三七素的止血药理活性.实验以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法,过滤沉淀得滤液,回收滤液中的乙醇得粗提液,粗提液经001 ×7阳离子树脂柱分离,薄层鉴别法检测洗脱液中是否含有三七素,收集与三七素对照品显相同斑点的洗脱液,经丙酮结晶,冷冻干燥得三七素供试品;高效液相色谱法测定三七素供试品中三七素的含量;玻片法测定三七素供试品的凝血时间.建立的高效液相色谱法测定三七素含量,该方法准确度、精密度、稳定性均良好,三七素供试品中三七素含量为59.03％;小鼠腹腔注射不同剂量的三七素供试品与阳性组比较,均能显著缩短凝血时间.建立的高效液相色谱法可用于三七素供试品含量的测定;三七素供试品能显著缩短凝血时间;三七素供试品中三七素含量反推到工业三七药渣中含量为0.72％;采用价格低廉的001 ×7阳离子交换树脂柱分离纯化三七素,此方法简单易行,成本低廉,适合大工业生产.综上,从工业三七药渣中提取纯化三七素具有良好的综合利用前景.

目的 从工业三七药渣中提取、分离及纯化三七多糖,测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量、分子量和pH,并考察其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响.方法 以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法得到三七粗多糖,通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖;采用蒽酮-硫酸法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量,用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量;采用MTT法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响.结果 水提醇沉法得到三七粗多糖的含量为69.7％,得率2.43％;通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到水洗脱部分PNPS Ⅰ及NaCl溶液梯度洗脱部分PNPSⅡ～Ⅴ;三七粗多糖、PNPS Ⅰ～Ⅴ重均分子量分别为38.59、32.00、96.98、148.60、154.40、113.60 kDa;在一定浓度范围内,三七粗多糖、PNPS Ⅰ～Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的生长,PNPSⅢ～Ⅳ能抑制其生长;三七粗多糖、PNPS Ⅰ～Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用.结论 通过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到1种中性多糖和4种酸性多糖;三七粗多糖、PNPS Ⅰ～Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的体外增殖,三七粗多糖、PNPS Ⅰ～Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用.

1 温胆汤的出处及演变温胆汤最早记载于南北朝时期名医姚僧垣(公元499～583年)《集验方》中,后世《备急千金要方》曾引用过“大病之后,虚烦不得眠,此胆寒故也,宜服此温胆汤”,该方由半夏、竹茹、枳实、橘皮、甘草、生姜组成.宋代医家陈言所著《三因极一病证方论》加茯苓、大枣.并加重生姜量,谓之:“治大病之后,虚烦不得眠,此胆寒故也,此药主之.又治惊悸.半夏,竹茹,枳实,陈皮,甘草,茯苓,……姜五片,枣一枚,煎七分,去渣,食前服.”并说;“虚烦者,方论中所谓心虚烦闷是也.大抵阴虚生内热,阳盛生外热,外热日燥,内热日烦……其证内烦,身不觉热,头目昏痛,口干,咽燥,不渴,清清不寐,皆虚烦也”.温胆汤常用来治疗胆胃不和、痰热内扰所致的虚烦不眠,呕吐呃逆,头昏头痛、惊悸不宁、癫痫等.

通过田间试验研究4种天然有机土壤改良剂对三七品质及农残重金属的影响并筛选出4种土壤改良剂合适的用量配比,为三七无公害栽培提供新方向.试验所用4种天然有机土壤改良剂为基施宝、激活、腐毒净及全能营养素,由不同植物地上部分、生物废渣及生物炭等混合发酵产生.试验过程中三七不使用任何农药和肥料仅使用4种新型土壤改良剂,试验为4因素3水平,基施宝(A)、激活(B)、腐毒净(C)、全能营养素(D)均设有低、中、高3个用量梯度,当其中1种土壤改良剂用量变化时,其余土壤改良剂用量均为中用量,以不使用土壤改良剂处理为对照(CK),共10个处理.实验结果表明,使用4种土壤改良剂能显著改善三七生长环境,提高三七存苗率及皂苷含量,其中处理组存苗率高出对照组8.24％～30.05％.此外,三 七中农残及重金属含量极低,农残无法检出,重金属含量远低于2020版《中国药典》标准.4种土壤改良剂用量配比以均为中用量时最佳,皂苷含量最大,且存苗率较高,铅镉砷汞等重金属均显著降低.

目的 从提取过三七总皂苷的工业药渣中提取、分离三七多糖,考察其吸湿、保湿性能及体外抗氧化活性.方法 以工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法提取三七粗多糖(crude polysaccharide from Panax notoginseng,CPPN),DEAE Sepharose Fast Flow分离纯化CPPN.以甘油和海藻酸钠为对照,测定三七多糖在相对湿度(relative humidity,RH)为43％和81％下的吸湿性能及干燥硅胶环境下的保湿性能.以DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基清除试验考察三七多糖体外抗氧化活性.结果 CPPN经DEAE Sepharose Fast Flow分离得到一种中性多糖(neutral polysaccharide from Panax notoginseng,NPPN)和三种酸性多糖(acid polysaccharide from Panax notoginseng,APPN),分别命名为 NPPN、APPN Ⅰ、APPNⅡ 和 APPNⅢ,其得率分别为27.68％、11.89％、15.41％和21.04％.在 RH 为43％时,吸湿率为甘油＞APPNⅢ＞海藻酸钠＞CPPN＞APPN Ⅱ＞APPN Ⅰ＞NPPN;在 RH 为81％时,吸湿率为甘油＞APPNⅢ＞海藻酸钠＞APPNⅡ＞APPN Ⅰ＞CPPN＞NPPN;APPNⅢ吸湿性优于海藻酸钠.在干燥硅胶环境中,保湿率为APPNⅢ＞海藻酸钠＞CPPN＞APPNⅡ＞甘油＞APPN Ⅰ＞NPPN.对 DPPH 自由基、ABTS+自由基清除率为 CPPN＞APPN Ⅰ＞APPN Ⅲ＞APPN Ⅱ＞NPPN,对羟基自由基清除率为CPPN＞APPNⅢ＞APPNⅡ＞APPN Ⅰ＞NPPN.结论 CPPN及分离得到的各组分多糖均有一定吸湿、保湿性能和体外抗氧化活性,其中APPN Ⅲ吸湿保湿性能最强,CPPN体外抗氧化活性最强.