本研究从案例撰写和以问题为基础的学习（problem-based learning，PBL）的实施体会两个方面展开探讨。PBL案例需依据专业要求，体现专业特色。定位于应用型人才培养的卫生检验检疫专业案例可融入相关实验技能项目；同时案例撰写形式根据主题拓展形式差异，设计为并联式案例与串联式案例，以适用于不同范围的课程整合。在PBL教学实施中，学生学习状态是课堂讨论效率的关键，它决定了PBL实施方式是完全自主学习还是嵌入式讲授；教师需建立合作学习氛围，从而提高课堂讨论效率。

目的 建立血液中布桂嗪的UPLC-MS/MS快速分析方法,并应用于实际案例.方法 血液中加入内标后,用900μL混合溶液(V乙腈:V水=8:2)沉淀蛋白,涡旋离心后,过0.22μm滤膜后测定.经C18色谱柱分离,以乙腈和5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1％甲酸)为流动相梯度洗脱,流速0.4 mL/min,电喷雾正离子模式下进行多反应监测扫描,内标法定量,并进行方法学验证.结果 血液中布桂嗪在0.5～200μg/L范围线性关系良好,相关系数(r)为0.9997,检出限为0.1μg/L,定量限为0.5μg/L,在1、10、100μg/L 3个质量浓度水平的回收率为78.3％～83.8％,基质效应为69.4％～73.8％,日内精密度为1.9％～2.8％,日间精密度为2.8％～3.2％,准确度为3.1％～3.5％.-25℃下1、100μg/L两个质量浓度的稳定性实验结果显示,10 d准确度(偏倚)≤4.5％.结论 本方法前处理过程简单,样品处理速度快,仪器分析灵敏度高,含量测定稳定性好,鉴定结果可靠,可满足案件鉴定的需要.

目的 基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术建立快速检测血液、尿液中6种蘑菇毒素的分析方法,并将其应用于临床实际中毒案例.方法 将0.1 mL血液、尿液经蛋白沉淀、氮吹复溶、超声过滤后用ACQUITY UPLC HSS T3液相色谱柱分离,质谱检测采用多反应监测模式(MRM).结果 该分析方法经过验证,符合方法学验证要求,其定量结果准确可靠,并于9例患者血液和(或)尿液样品中检出目标毒素,血液样品中浓度为1.12～5.63 ng/mL,尿液样品中浓度为1.01～9.27 ng/mL,检出物多为γ-鹅膏毒肽(γ-AMA).新鲜蘑菇样品中检出目标物浓度为1.48～41.54 ng/mg,两份新苦粉孢牛肝菌样品中均检出羧基二羟基鬼笔毒肽(PCD)16.51～41.54 ng/mg.结论 本研究中建立的LC-MS/MS方法前处理过程简单快速,具有较高的灵敏度,能同时检测多种蘑菇毒素类化合物,可为临床毒蕈中毒快速诊断提供策略和参考.

目的 比较似然比(likelihood ratio,LR)法和状态一致性(identity by state,IBS)法在半同胞关系鉴定中的应用价值,为制定半同胞鉴定相关规范提供参考.方法 (1)基于相同的遗传标记组合,比较实际案例与计算机模拟案例的累计状态一致性评分(cumulated identity by state score,CIBS)与累积全同胞关系指数分布,验证计算机模拟方法的可信度;(2)模拟获得全同胞、半同胞、无关个体对各100万对在不同数量的三种类型遗传标记上的分型,分别计算CIBS和相应类型的累积LR参数;(3)比较基于不同数据、不同种类的遗传标记、应用不同准确度标准区分上述三种关系个体对时,LR法和IBS法所能提供的最佳系统效能,以比较两种方法在上述鉴定中的应用价值;(4)根据已有模拟数据,以曲线拟合的方式估计应用不同类型遗传标记鉴别半同胞与另两种关系个体对所需的最低遗传标记数目.结果 (1)经秩和检验,在真实关系和检验的遗传标记组合相同的前提下,模拟方法与实际案例所得结果差异无统计学意义;(2)多数情况下,在其他条件设置相同时,LR法的系统效能大于IBS法;(3)基于现有数据,可以通过曲线拟合的方式得到全-半同胞鉴定和半同胞鉴定在系统效能达到0.95或0.99时所需遗传标记的数目.结论 在进行甄别全同胞对和半同胞对或甄别半同胞对和无关个体对的鉴定时,推荐优先使用LR法,并根据拟进行的鉴定类型和基于的人群数据估计所需遗传标记数目,以保证鉴定效果.

目的 将一个单倍型区块内的遗传标记单核苷酸多态性(SNP)和短串联重复序列(STR)组成SNP-STR单倍型,调查其在成都汉族人群中的分布,并探讨其在特殊亲子鉴定案例中的应用价值.方法 选取DNA联合索引系统(combined DNA index system,CODIS)中突变率较高的基因座D18S51,与其侧翼区的3个SNP位点(rs8089331、rs8094489、rs7236090)组成SNP-STR,通过巢式等位基因特异性PCR的方法获得SNP-STR单倍型,调查该单倍型在75名成都汉族人群中的分布,并应用于两例D18S51基因座不符合遗传规律的二联体亲子鉴定案件.结果 成功建立SNP-STR分型方法,在成都汉族人群中共发现43种单倍型,多态性为0.9486,并成功解决了两例二联体亲子鉴定案件.结论 SNP-STR具有良好的多态性,有望应用于特殊的亲缘关系鉴定.

针对传统教学法在中药药剂学教学方法所存在的不足,创新构建以“T(Thinking系统思维)-P(Problem问题导向)-K(Keypoints重点串联)-C(Case经典案例)-E(Experiment实践助学)-E(Expansion知识拓展)”为基本架构的新型“TPKCEE复合型讲授教学模式”.以代表章节“液体药剂”和“注射剂”为例,对新型教学模式进行了内涵诠释和优势探析.经实践运用和效果预期,该教学模式符合现代《中药药剂学》高等教育特点,契合大学生的认知特点,取得了较好的教学效果,具有创新性和可行性.

目的 建立血液和肝组织中欧夹竹桃苷的液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS),并应用于夹竹桃中毒致死案例中.方法 采用乙醚对血液或肝组织进行液液提取,提取物经Agilent ZORBAX SB-C18柱分离,以乙腈和20 mmol/L乙酸铵(含0.1％甲酸)溶液进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子化(electrospray positive ionization, ESI+)、多反应监测模式检测欧夹竹桃苷.结果 血液和肝组织中欧夹竹桃苷在相应的线性范围内线性良好(r＞0.995 0),检出限分别为1 ng/mL和2 ng/g,提取回收率均大于70.50％,日内和日间精密度均小于10.71％,准确度为98.42％～111.63％,基质效应为91.52％～106.39％.该方法成功应用于1例疑似夹竹桃中毒致死案例,在尸体心血、尿液、肝组织、胆汁、胃壁组织和胃内容物中均检出欧夹竹桃苷,其含量范围为65.5～29 600.0 ng/mL(ng/g).结论 本研究建立的方法操作简便、选择性好,适用于血液、肝组织等生物检材中的欧夹竹桃苷分析,可为夹竹桃中毒的法医学鉴定和临床诊治提供技术保障.

目的:探讨对于血型抗原表型不符合遗传规律的案例,利用短串联重复序列(STR)基因分型检测技术开展亲子鉴定的重要性.方法:采用试管法对3位当事人进行ABO/RH/MN/P1血型鉴定;采用试管法、镜检和卡式法对不符合遗传规律的当事人进行Rhe抗原鉴定;利用PCR-STR方法进行常染色体和Y染色体STR亲权鉴定.结果:①3位当事人的ABO/Rh/MN/P1血型为:被检父B/CCDee/M/P1;母亲O/CCDEe/M/P1;孩子O/CCDEE/M/P1.②采用上述3种方法均未检测到孩子Rhe抗原表达.③针对该三联体检测了D8S1179等20个STR基因位点和1个Amelogenin性别基因位点,其累计亲权指数为9812391621.3481,亲子关系概率大于99.99％;Y18 STR基因位点结果显示孩子与被检父来自于同一父系.结论:STR基因位点检测对于抗原表型不符合遗传规律的亲子鉴定案件更加准确可靠.

目的 推导双方生母参与鉴定时半同胞关系似然比(likelihood ratio,LR)的计算公式.方法 针对双方生母均参与下两个个体之间半同胞关系鉴定的情况建立半同胞关系甄别的检验假设,对备择假设与原假设条件下的遗传学证据的条件概率比值进行化简,并应用于一个半同胞关系鉴定的实际案例中.同时,在假设只有单方生母参与或双方生母均不参与的情形下,分别计算半同胞关系LR.结果 在无生父参与的同父异母半同胞关系鉴定案件中,同样的遗传指标经检验分析后,双方生母参与下的累积LR值高于只有单方生母参与或双亲皆无情形下的累积LR值.结论 用常染色体STR检验进行两个个体之间半同胞关系鉴定分析时,在双方生母均参与的情况下,其LR计算简单、直观、可操作性强.孩子生母应尽可能参与检验,否则需要增加检验STR基因座的数量才能获得更加明确的意见.

目的 采用液液提取与液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)技术,建立同时测定血液中13种安眠镇静类药物及其代谢产物的分析方法,并将其应用于实际案例.方法 血液加入内标后,用乙酸乙酯提取,浓缩至近干后,用甲醇溶解残渣,过0.22μm滤膜后测定.13种安眠镇静类药物及其代谢物经C18色谱柱分离,以甲醇和20 mmol/L甲酸铵(含0.1％甲酸)水溶液进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式检测,内标法定量.结果 血液中13种安眠镇静类药物及其代谢物在5～200μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9903～0.9998,检出限为0.1～1.0μg/L;在10、50、200μg/L 3个添加浓度水平的回收率为71.2％～93.4％,日内和日间精密度≤8.6％,准确度(偏倚)在±9.8％范围内.