目的:分析眼睑松弛症并发泪腺脱垂者泪腺组织的组织病理学特征及泪腺脱垂的可能机制。方法:病例对照研究。收集2009年1月至2016年12月就诊于首都医科大学附属北京同仁医院眼整形科手术治疗的眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者23例（30只眼）的30份泪腺组织标本，并与首都医科大学附属北京同仁医院眼库的8份正常泪腺组织（对照）标本进行对比。分别行HE染色、Verhoeff-Van-Gieson染色、相关抗原及抗体免疫组织化学染色，对比观察患者与对照泪腺标本的组织学变化及相关抗原及抗体表达的差异。应用胶体金标记的免疫电镜技术在超微结构下观察基质金属蛋白酶（MMP）-3和MMP-9的表达及分布。采用非参数秩和检验进行统计学分析。结果:眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者中男性3例，女性20例，平均发病年龄11岁（7~16岁）；对照泪腺组织来自3例男性，5例女性；平均年龄15岁（10~20岁）。眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者30份泪腺组织标本中，仅2份标本HE染色表现为明显腺腔扩张，间质中脂肪细胞浸润及淋巴细胞、嗜酸细胞增多，其余标本与对照正常泪腺组织标本无明显差别或仅有轻度慢性炎性反应；30份标本Verhoeff-Van-Gieson染色均显示包被泪腺的筋膜组织结构破坏，胶原纤维变性，并伴有炎症细胞浸润。免疫组织化学染色显示，眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者泪腺组织中IgA表达为+++、++、+、-的标本分别为12、11、4、3份，对照标本中分别为0、0、1、7份；白细胞分化抗原CD3表达为+++、++、+、-分别为2、19、7、2份，对照标本中分别为0、0、1、7份；MMP-3表达为+++、++、+、-分别为0、0、11、19份，对照标本均为阴性；MMP-9表达为+++、++、+、-分别为14、14、0、2份，对照标本均为阴性；眼睑松弛症并发泪腺脱垂患者泪腺组织中IgA、CD3、MMP-3和MMP-9的表达均高于对照，差异均有统计学意义（ Z=-3.892，-4.168，-2.005，-4.552；均 P<0.05）；而IgG、IgM、CD20、补体C1抑制物的表达强度与对照比较，差异均无统计学意义（均 P>0.05）。免疫电镜技术显示，与对照标本相比，泪腺脱垂者泪腺腺泡细胞内的酶原颗粒形状失去规则的圆形或椭圆形，酶原颗粒表面有MMP-3及MMP-9表达，腺泡细胞膜上有MMP-3表达。 结论:眼睑松驰症并发泪腺脱垂者泪腺组织的组织病理学改变表现为免疫炎性反应、胶原纤维变性、筋膜组织松解断裂以及IgA、CD3 +T淋巴细胞、MMP-3和MMP-9阳性表达，眼睑松驰症并发泪腺脱垂的发病机制可能为细胞介导的免疫应答。（中华眼科杂志， 2020， 56： 205-210）

目的:探讨肺炎支原体抗原(mycoplasma pneumonia antigen，MP Ag)联合肺炎支原体免疫球蛋白M抗体(mycoplasma pneumoniae immunoglobulin M antibody，MP-IgM)诊断肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)的价值。方法:选取2019年1月至2019年10月攀枝花学院附属医院收治的108例高危MPP患者，所有患者均采用抗原量子点标记技术检测MP Ag，采用胶体金法检测MP-IgM水平，咽拭子标本进行肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae，MP)培养和鉴定。统计分析MP Ag、MP-IgM对MPP的诊断价值，并分析MP Ag联合MP-IgM方法诊断MPP的效能。结果:108例高危MPP对象中经MP培养法确诊为MPP患者共45例，余63例未患MPP。45例确诊为MPP的患者中经MP Ag、MP-IgM及MP Ag+MP-IgM诊断阳性者分别为40例、43例、45例；63例未患MPP者中经MP Ag、MP-IgM及MP Ag+MP-IgM诊断阳性者分别为3例、4例、3例。MP Ag+MP-IgM诊断MPP的灵敏度、准确度、约登指数均高于MP Ag、MP-IgM单独诊断，特异度高于MP-IgM单独诊断，但与MP Ag单独诊断无差异。结论:MP Ag联合MPP IgM诊断MPP的效能较高，与MP培养法检测结果的一致性也较高，具有一定的临床推广与应用价值。

目的 建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条.方法 N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试.结果 抗血清效价在1∶32～1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL.纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(Mr)25 000和55 000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5～10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月.结论 建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛.

目的 以棘球蚴囊液纯化抗原特异性单克隆抗体为基础建立一种快速、简便诊断棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法,并对其进行评价.方法 纯化棘球蚴囊液抗原,并以此免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价.筛选基于棘球蚴囊液纯化抗原制备的单克隆抗体对,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记筛选到的单克隆抗体,并将其吸附于交联垫;将另一筛选到的单克隆抗体划线包被于同一硝酸纤维素膜适当位置,制成免疫层析试条.用该试条检测手术确诊的细粒棘球蚴病(87例)、多房棘球蚴病(40例)、囊尾蚴病(25例)、日本血吸虫病(10例)、弓形虫病(5例)、并殖吸虫病(5例)、华支睾吸虫病(5例)患者血清,以及60例健康者血清,以评价其检测的敏感性和特异性.结果 以棘球蚴囊液纯化抗原为免疫源制备单克隆抗体,共筛选了11株能高效分泌效价在1:25600～1:102400特异抗体的细胞株,抗体亚类为IgG1或IgG2a.筛选到的单克隆抗体F3B6作为标记抗体,单克隆抗体C4H6作为包被抗体制成免疫层析试条,用该试条检测127份棘球蚴病患者血清的敏感性为88.12％(112/127),其中试条检测囊型包虫病患者血清的敏感性为88.51％(77/87),检测泡型包虫病患者血清的敏感性为87.50％(35/40),试条法检测两型包虫病患者血清敏感性之间差异无统计学意义(χ2=0.03,P=0.86).与25份囊尾蚴病患者血清、10份日本血吸虫病患者血清、5份弓形虫病患者血清、5份并殖吸虫病患者血清和5份华支睾吸虫病患者血清均无交叉反应,60份健康者血清也均为阴性,总特异性为100.00％.结论 成功制备了棘球蚴囊液纯化抗原的单克隆抗体,以此单抗为基础研制出的快速诊断棘球蚴病胶体金免疫层析试条敏感性、特异性均较高.

目的:改良巨细胞病毒IgM抗体检测试纸条,以消除IgG抗体干扰,提高检测准确度.方法:该试纸条采用胶体金免疫层析法制备,以鼠抗人IgM抗体作为金标抗体.首先,制备胶体金标记抗体,并制成胶体金垫.其次,沿着层析方向在硝酸纤维素(nitrocellulose,NC)膜上依次设置IgG抗体拦截线I、检测线T及对照线C,并在检测线T处包被1.5 mg/mL的巨细胞病毒重组抗原,在对照线C处包被0.5 mg/mL的羊抗鸡IgY抗体,在拦截线I处包被3.0 mg/mL的鼠抗人IgG抗体.最后,将胶体金垫、NC膜、吸水纸、样品垫等粘贴在聚氯乙烯底板上,制成试纸条,并对其性能进行评价.结果:该试纸条可有效降低样本中效价≤1 280的IgG抗体对检测结果的干扰,且在检测国家参考品时的准确度、最低检出限及重复性均符合要求.该试纸条与10种相近病原体无交叉反应,且与酶联免疫吸附试剂盒的检测结果具有较高的一致性.结论:改良后的巨细胞病毒IgM抗体检测试纸条可消除IgG抗体干扰,且检测高效方便、准确度高,能更好地满足基层单位临床检验的需要.

目的 制备一种快速检测β淀粉样蛋白(Aβ)的试纸条,为阿尔茨海默病(AD)的辅助诊断提供新工具.方法 采用免疫层析技术,以胶体金标记的Aβ42单克隆抗体为标记物,将特异性识别Aβ42蛋白的包被单克隆抗体固化于硝酸纤维素膜上作为检测抗体,以Aβ42抗原为质控,制备胶体金快检试纸条.通过盐析实验选择胶体金的最适标记pH以及最适标记蛋白浓度;对包被抗体的包被浓度、划线浓度以及金标物的复溶液量、喷量等一系列工艺进行优化,成功研制出胶体金免疫层析试纸条并对该试纸条的敏感性、特异性、稳定性进行评估.结果 该试纸条可有效检测出1∶1×103～1∶5×106稀释范围内的Aβ42抗原,且同批次试纸条检测结果一致,且与Aβ40无交叉反应.结论 该试纸条具有较高的敏感性、特异性和稳定性,为AD快速筛查提供了新手段.

目的 建立猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)A35R蛋白现场快速半定量检测胶体金免疫层析方法.方法 以微波法6 min快速合成金纳米颗粒(Gold nanoparticles,AuNPs)作为标记物,基于双抗体夹心法体系建立检测MPXV A35R蛋白的免疫层析试纸方法.利用真核系统表达的MPXV包膜成分A35R蛋白配制系列浓度标准液,初步评价胶体金免疫层析试纸条的敏感性、特异性及稳定性等检测性能.结果 20 min内完成检测,建立MPXV抗原的胶体金免疫层析试纸的半定量检测的灵敏度达到62.5pg/mL,肉眼最低检测限是125 pg/mL.与登革病毒(Dengue virus,DENV)、诺如病毒(No-rovirus,NV)均无交叉反应,稳定性良好.结论 本研究建立的胶体金半定量免疫层析试纸条可以实现对MPXV的快速灵敏检测,在MPXV的即时检测(Point of care testing,POCT)领域具有一定潜力.

目的 探讨幽门螺杆菌感染与青光眼的相关性.方法 选择2014年1月-2015年12月医院眼科原发性开角型青光眼患者60例为开角型青光眼组、原发性闭角型青光眼患者60例为闭角型青光眼组、性别及年龄相匹配的健康体检者60名为对照组;采用14C-尿素呼气试验测量幽门螺杆菌浓度,采用胶体金标记免疫斑点渗滤法测定血清幽门螺杆菌免疫球蛋白G(IgG),采用光学相关断层成像测定视网膜神经纤维层厚度.结果 开角型青光眼组幽门螺杆菌阳性率88.33％高于闭角型青光眼组35.00％和对照组31.67％(P＜0.05);开角型青光眼组血清幽门螺杆菌IgG阳性率85.00％高于闭角型青光眼组33.33％和对照组28.33％ (P＜0.05);开角型青光眼组和闭角型青光眼组大视盘、中视盘、小视盘视网膜神经纤维层厚度均低于对照组(P＜0.05),开角型青光眼组大视盘、中视盘、小视盘视网膜神经纤维层厚度低于闭角型青光眼组(P＜0.05);开角型青光眼患者幽门螺杆菌浓度与青光眼患者视盘视网膜神经纤维层厚度呈负相关(P＜0.05).结论 原发性开角型青光眼患者幽门螺杆菌感染率高,幽门螺杆菌可能和原发性开角型青光眼的发病有关.

肢体金免疫层析技术是一种新型的免疫标记技术,在食品安全检测领域得到广泛应用和快速发展.本文综述了胶体金免疫层析技术在兽药残留、真菌毒素、违禁成分等食品安全检测中的应用研究进展,井对谊技术的发展前景作了展望.

目的 建立一种快速检测SMCY抗原的方法.方法 采用胶体金免疫层析技术双抗体夹心检测法,在金标垫上包被胶体金标记的SMCY兔多抗,制成胶体金试纸条,用于检测12份猪、牛、狗、鸡和小鼠等动物血清以及50份人血清.结果 制作的胶体金试纸条检测人和常见动物血清具有明显的种属特异性,能够区分男女血清.结论 该方法可尝试用于鉴别男女血清,并具有一定种属特异性,其为法医学快速鉴别人类样本性别提供了研究方向.