目的:探讨玻璃化冷冻和程序化冷冻对猕猴卵巢组织的冷冻保存效果。方法:取新鲜的猕猴卵巢组织随机分成对照组(新鲜卵巢组织)、玻璃化冷冻组和程序化冷冻组，分别进行HE染色、窦前卵泡的分类计数及免疫染色，比较3组卵巢组织内卵泡形态学、各级卵泡正常率及磷酸化组蛋白H3(PHH3)的表达量的差异。结果:①HE染色：3组中，始基卵泡、初级卵泡正常率差异均无统计学意义( P均>0.05)；程序化冷冻组单层次级卵泡正常率[40.6%(28/69)]均低于玻璃化冷冻组[53.5%(38/71)]、对照组[60.7%(34/56)]，3组间差异有统计学意义( P=0.044)，但玻璃化冷冻组、对照组间差异无统计学意义( P>0.05)；玻璃化冷冻组、程序化冷冻组多层次级卵泡正常率[23.4%(11/47)，16.7%(7/42)]均明显低于对照组[57.3%(39/68)]( P均<0.001)，玻璃化冷冻组多层次级卵泡正常率高于程序化冷冻组，但差异无统计学意义( P>0.05)。②分离卵泡比较：玻璃化冷冻组、程序化冷冻组初级卵泡正常形态率均接近对照组，差异无统计学意义( P>0.05)；玻璃化冷冻组和程序化冷冻组次级卵泡正常率[38.2%(34/89)，23.7%(23/97)]明显较低，与对照组[56.4%(61/108)]比较差异均有统计学意义( P均<0.001)；玻璃化冷冻组的次级卵泡正常形态率明显高于程序化冷冻组，差异有统计学意义( P<0.001)；③ PHH3染色：玻璃化冷冻组颗粒细胞PPH3的阳性表达率接近对照组( P>0.05)，程序化冷冻组卵泡颗粒细胞PHH3阳性表达率(58.72%±12.31%)明显低于对照组(67.58%±8.45%， P=0.04)和玻璃化冷冻组(62.87%±9.94%， P=0.03)。 结论:玻璃化冷冻和程序化冷冻均能有效地保存卵巢组织，但玻璃化冷冻对卵巢组织冷冻和复融过程中各级卵泡及颗粒细胞形态学的损伤明显低于程序化冷冻，更适合下一步人类卵巢组织的冷冻保存的研究。

目的:探讨重组胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对 MEX3C基因敲除小鼠卵巢发育的影响。 方法:采用聚合酶链式反应（PCR）法鉴定4周龄FVB（SPF级）小鼠基因型，将鉴定出的雌性小鼠随机分为4组（每组6只）：野生型组、 MEX3C基因敲除小鼠纯合子（简称纯合子组）、纯合子+IGF-1处理组、处理对照组。比较IGF-1注射前后各组小鼠体质量及卵巢湿重变化；酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中雌二醇水平；HE染色观察卵巢形态结构；免疫组织化学法和Western blotting法测定MEX3C、重组胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）和p-AKT （Ser473）蛋白表达。 结果:IGF-1注射前，纯合子组体质量［（6.33±0.31）g］明显轻于野生型组［（15.20±0.35）g］，差异有统计学意义（ P<0.001）。ELISA结果显示，与处理对照组［（8.124 8±0.847 7）ng/L］相比，纯合子+IGF-1处理组［（17.245 3±0.073 1）ng/L］血清雌二醇水平显著较高，差异有统计学意义（ P<0.001）。HE染色结果显示，与处理对照组相比，纯合子+IGF-1处理组中原始卵泡数（19.83±2.94）和初级卵泡数（15.50±2.69）增多，且闭锁卵泡数（7.17±1.42）减少，差异均有统计学意义（ P均<0.05）。Western blotting结果证实，与处理对照组相比，纯合子+IGF-1处理组IGF-1R和p-AKT蛋白表达显著升高，差异有统计学意义（ P=0.014 1， P=0.002 5）。 结论:IGF-1促进 MEX3C基因敲除小鼠卵巢卵泡发育，其机制是通过上调IGF-1R和p-AKT水平，提高血清雌激素水平促进卵泡发育。

目的:研究脐带间充质干细胞改善卵巢早衰家兔卵巢功能的潜在机制。方法:将10只家兔按随机数表法分为治疗组和模型组各5只，均采用腹腔注射环磷酸酰胺（50 mg·kg -1·d -1，连续2 d）构建卵巢早衰模型。造模1周后，治疗组予以耳缘静脉注射人脐带间充质干细胞（2 mL/d，连续3 d），模型组予以注射等量无菌水。第28日后采集两组家兔卵巢组织标本，通过苏木精-伊红染色法观察两组家兔卵巢组织形态结构，并采用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR及免疫组织化学技术检测两组家兔卵巢组织内基质金属蛋白酶组织抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinases 1，TIMP1）、纤连蛋白（fibronectin，FN）、纤维形成相关因子基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases 9，MMP9）在蛋白及mRNA水平上的表达。 结果:①模型组家兔卵巢组织内原始卵泡数量少，闭锁卵泡多，各级卵泡颗粒层排列紊乱，卵细胞核出现固缩，发生凋亡，卵巢间质出现纤维化；而治疗组家兔卵巢组织内原始、初级卵泡数量多，闭锁卵泡少，各级卵泡颗粒细胞排列规则。②与模型组相比较，治疗组家兔卵巢组织内TIMP1蛋白（0.546±0.021比0.820±0.085）和FN蛋白表达量增多（0.221±0.065比0.516±0.064）（ P均<0.001），而MMP9蛋白表达量减少（0.504±0.049比0.204±0.066， P<0.001）。③与模型组相比较，治疗组家兔卵巢组织内 TIMP1 mRNA（0.217±0.024比0.470±0.039）和 FN mRNA的表达量增多（0.039±0.006比0.125±0.012， P均<0.001），而 MMP9 mRNA的表达量减少（0.009±0.000比0.002±0.000， P<0.001）。④TIMP1和FN主要表达在颗粒细胞和卵细胞膜，TIMP1还表达在卵巢间质组织，治疗组TIMP1和FN的表达多于模型组，差异均具有统计学意义（ P<0.001， P=0.005）。MMP9主要表达在颗粒细胞和卵巢间质组织，治疗组MMP9的表达少于模型组，差异具有统计学意义（ P<0.001）。 结论:脐带间充质干细胞能够通过调节卵巢组织内TIMP1、FN和MMP9水平来改善卵巢功能。

目的 分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者胆汁酸代谢特征,并探讨其与性激素水平的关系.方法 回顾性选取2023年1至6月在徐州市妇幼保健院进行健康检查的PCOS患者54例(PCOS组),另择同期来院进行健康检查的正常对照女性53名为对照组.研究对象于月经第2～5天,留取上午空腹肘静脉血检测性激素、胆汁酸代谢物水平.比较两组血清性激素、胆汁酸代谢物水平,并通过建立正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型,寻找两组差异性胆汁酸;分析差异性胆汁酸与性激素的相关性.结果 PCOS组患者血清抗米勒管激素、促黄体生成素、促黄体生成素/卵泡生成素、雄激素睾酮(T)和脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)水平均高于对照组(均P＜0.05).与对照组比较,PCOS组患者血清初级游离胆汁酸鹅脱氧胆酸水平增加(P＜0.05),次级结合胆汁酸甘氨脱氧胆酸(GDCA)和甘氨石胆酸水平均降低(均P＜0.05).通过OPLS-DA模型找到两组差异性最强的胆汁酸为GDCA,相关性分析显示GDCA与T、DHEAS均呈负相关(r=-0.363、-0.342,均P＜0.05).结论 PCOS患者存在胆汁酸代谢紊乱和性激素水平异常,且GDCA与PCOS高雄激素症状密切相关.

目的 探讨仿生电刺激联合人工周期对卵巢储备功能减退(DOR)患者子宫容受性及血清生长分化因子-9(GDF-9)、抑制素B(INHB)、骨形态发生蛋白-10(BMP-10)水平的影响.方法 选取2019年1月至2022年3月广西壮族自治区妇幼保健院收治的87例DOR患者作为研究对象.采用随机数字表法分为A组、B组、C组,每组29例.A组采用仿生电刺激治疗,B组采用人工周期治疗,C组采用仿生电刺激联合人工周期治疗.比较三组治疗前后子宫容受性,血清GDF-9、INHB、BMP-10水平,子宫内膜血流参数及卵巢体积;随访1年,比较三组的妊娠情况;比较三组治疗期间不良反应发生情况.结果 与治疗前比较,治疗后A组、B组、C组初级卵泡数、优势卵泡数、排卵数及血清GDF-9、INHB、BMP-10水平均升高,卵巢体积均增大,且A组、B组、C组呈增高趋势(P＜0.05).与治疗前比较,治疗后A组、B组、C组子宫内膜血流搏动指数(PI)、子宫内膜血流阻力指数(RI)均减小,且A组、B组、C组呈下降趋势(P＜0.05).随访1年,C组妊娠率高于A组、B组(P＜0.05).治疗期间,三组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 仿生电刺激联合人工周期可提高DOR患者子宫容受性,改善子宫内膜血流参数及卵巢体积,也可改善血清GDF-9、INHB、BMP-10水平,提高自然妊娠率,且安全性好.

目的 观察坤泰胶囊结合电针周期疗法治疗卵巢储备功能低下的效果.方法 将医院2019年2月—2021年6月收治的109例卵巢储备功能低下患者以随机数字表法分为观察组(55例)与对照组(54例),对照组患者均予以激素周期疗法治疗,观察组患者采取激素周期疗法及坤泰胶囊结合电针周期疗法治疗.各组数据观察:临床疗效、治疗前后中医证候(月经推后或月经量少、闭经、性欲减退、神疲乏力等)积分变化、雌二醇(Estradiol,E2)及卵泡雌激素(Follicle-Stimulating Hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing Hormone,LH)等血清激素水平变化、卵巢间质血流动力学指标变化、卵泡发育情况以及不良反应、治疗后1年受孕率.结果 对照组与观察组患者治疗总有效率比较(81.48％vs94.55％)(P＜0.05);治疗前,各组患者中医证候(月经推后或月经量少、闭经、性欲减退、神疲乏力等)积分、E2、FSH及LH等血清激素水平、阻力指数(Regular Insulin,RI)及搏动指数(Pulsatility Index,PI)、收缩期最大血流速度(Peak Systolic Veloci-ty,PSV)、动脉血流收缩期峰值流速/舒张末期流速(systolic phase diastolic phase,S/D)等卵巢间质血流动力学指标、排卵日子宫内膜厚度、非排卵日子宫内膜厚度及初级卵泡数、优势卵泡数等卵泡发育情况指标比较,P＞0.05,经治疗后各组患者中医证候(月经推后或月经量少、闭经、性欲减退、神疲乏力等)积分、E2、FSH及LH等血清激素水平、RI及PI、PSV、S/D等卵巢间质血流动力学指标、排卵日子宫内膜厚度、非排卵日子宫内膜厚度及初级卵泡数、优势卵泡数等卵泡发育情况指标均改善,观察组患者治疗后中医证候(月经推后或月经量少、闭经、性欲减退、神疲乏力等)积分、E2、FSH及LH等血清激素水平、RI及PI、PSV、S/D等卵巢间质血流动力学指标、排卵日子宫内膜厚度、非排卵日子宫内膜厚度及初级卵泡数、优势卵泡数等卵泡发育情况指标均优于对照组(P＜0.05);观察组治疗不良反应率与对照组不良反应率均较低(P＞0.05);观察组治疗1年后受孕率(47.27％,26/55)高于对照组患者(25.93％,14/54)(P＜0.05).结论 坤泰胶囊结合电针周期疗法治疗卵巢储备功能低下的效果较为显著,患者症状恢复较好,且卵巢功能恢复好,患者未来1年受孕率高,且不良反应较少,安全可靠,值得进行应用.

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)移植对围绝经期大鼠卵巢功能改善情况.方法:选取13～15 月龄雌性大鼠30 只,构建围绝经期大鼠模型.将围绝经期鼠分为hUCMSCs移植组和空白组,每组 15 只,另选 15 只健康雌性大鼠为青年对照组.hUCMSCs移植前,检测大鼠血清E2、AMH、FSH水平;hUCMSCs移植后 2、3、4 周,每组随机选取5 只大鼠检测血清E2、AMH、FSH,并取卵巢组织检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达水平.结果:hUCMSCs移植后,hUCMSCs组大鼠E2、AMH高于空白组,FSH低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);hUCMSCs组大鼠卵巢始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡、窦状卵泡数均多于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);移植后4 周hUCMSCs组大鼠卵巢组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax高于空白组,Bax、Caspase-3 低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:hUCMSCs移植后大鼠E2、AMH升高,FSH降低;卵巢组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax比率提高,Bax、Caspase-3 下降,进一步支持了hUCMSCs在调节卵巢细胞凋亡过程中可能发挥作用.

目的 观察雷公藤甲素(TP)不同浓度和作用时间对大鼠卵巢氧化应激及颗粒细胞线粒体自噬的影响.方法 取3个月龄雌性Sprague-Dawley大鼠50只,连续观察2个动情周期,筛选出25只动情周期正常的大鼠,按随机数字表法分为空白对照组、实验1组、实验2组、实验3组和实验4组,每组5只.实验1组大鼠每日给予400 μg·kg-1的TP灌胃1次,连续灌胃30 d;实验2组大鼠每日给予400μg·kg-1的TP灌胃1次,连续灌胃40 d;实验3组大鼠每日给予500μg·kg-1的TP灌胃1次,连续灌胃30 d;实验4组大鼠每日给予500μg·kg-1的TP灌胃1次,连续灌胃40 d;空白对照组大鼠每日给予10 mL·kg-1蒸馏水灌胃1次,连续灌胃40 d.应用酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清抗苗勒管激素(AMH)、雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)水平,苏木精-伊红染色观察各组大鼠卵巢组织病理变化,使用酶标仪检测各组大鼠卵巢组织中丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,透射电子显微镜观察各组大鼠卵巢颗粒细胞线粒体形态结构变化及线粒体自噬情况,流式细胞仪检测各组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率.结果 与空白对照组比较,实验1组、实验2组、实验3组和实验4组大鼠血清中AMH、E2水平及卵巢组织中SOD活性显著降低,血清中FSH及卵巢组织中MDA水平显著增高(P＜0.05).与实验1组比较,实验2组、实验3组、实验4组大鼠血清中AMH、E2水平及卵巢组织SOD活性显著降低,血清中FSH及卵巢组织中MDA水平显著增高(P＜0.05).实验2组、实验3组、实验4组大鼠血清中AMH、E2、FSH水平及卵巢组织中SOD活性、MDA水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).实验1组、实验2组、实验3组和实验4组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率均显著高于空白对照组(P＜0.05);实验2组、实验3组和实验4组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率显著高于实验1组(P＜0.05);实验3组、实验4组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率显著高于实验2组(P＜0.05);实验4组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率显著高于实验3组(P＜0.05).空白对照组大鼠卵巢组织被膜完整,皮质区原始卵泡、初级卵泡及次级卵泡等数量较为正常,各级卵泡发育正常,闭锁卵泡少见,黄体数量较少;髓质区纤维结缔组织排列紧密,未见明显水肿或坏死.实验1组、实验2组、实验3组和实验4组大鼠卵巢组织可见卵泡数量减少,闭锁卵泡增多,颗粒层卵泡细胞坏死、脱落和卵泡囊性扩张等病理改变;实验1组大鼠卵巢组织病理改变程度相对较轻,闭锁卵泡少,颗粒层细胞坏死不多;实验4组大鼠卵巢组织病变程度相对最重,可见较多闭锁卵泡和颗粒细胞层坏死、脱落;实验2组和实验3组大鼠卵巢组织病变程度相对轻于实验4组,闭锁卵泡较少,颗粒细胞层不同程度坏死和卵泡囊性扩张.空白对照组大鼠的卵巢颗粒细胞形态结构正常,其细胞核呈不规则多边形,染色质分布均匀,以常染色质为主,核膜清晰完整,细胞质中可见线粒体等细胞器且结构完整清晰.实验1组、实验2组、实验3组和实验4组大鼠卵巢颗粒细胞的细胞质中可见不同程度的线粒体自噬,实验2组、实验3组、实验4组大鼠线粒体自噬程度重于实验1组,实验3组、实验4组大鼠线粒体自噬程度重于实验2组,实验3组与实验4组自噬程度相当;实验3组和实验4组电镜下见卵巢颗粒细胞的细胞质中含较多线粒体自噬小体,多数线粒体发生轻度肿胀,部分线粒体嵴结构消失,粗面内质网扩张呈囊状.结论 采用TP灌胃给药可成功构建大鼠卵巢功能减退模型,大鼠卵巢损伤与TP剂量和干预时间有关;TP诱导的卵巢氧化应激损伤可能是引发卵巢功能低下的重要因素,其作用机制可能是氧化应激影响卵巢内分泌功能和诱导颗粒细胞凋亡等病理生理过程.随着氧化应激损伤加重,线粒体自噬增加,线粒体自噬到达一定程度后不再随着TP的干预时间继续增加而持续增强.

本文旨在探讨山药中尿囊素(allantoin,ALL)对卵巢功能早衰大鼠卵巢的保护作用及其作用机制.采用一次性腹腔注射环磷酰胺75 mg/kg对SD大鼠造成卵巢功能早衰模型,同时给予ALL进行干预,采用卵巢指数、病理切片中卵泡的发育与成熟以及血清中激素水平评估大鼠卵巢功能,运用比色法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)与丙二醛(MDA)的水平,采用免疫组化与Western blotting检测卵巢组织中核因子E2相关因子2(Nrf2),血红素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H醌脱氢酶1(NQO1)蛋白表达.结果显示:与正常组(NC)相比,卵巢早衰模型组(POF)大鼠卵巢指数与体内雌二醇(E2)水平降低(P＜0.05或P＜0.01),黄体生成素(LH)与促卵泡生成素(FSH)水平升高(P＜0.05或P＜0.01),卵巢组织中初级,次级以及成熟卵泡减少,闭锁卵泡增加,卵巢组织匀浆中SOD、GSH-Px、Nrf2与HO-1水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01),而MDA水平显著升高(P＜0.05);治疗14 d后,与POF组相比,ALL可以升高血清中E2,降低LH与FSH水平(P＜0.05或P＜0.01),增加卵巢组织中的初级、次级以及成熟卵泡,升高SOD、GSH-Px、Nrf2、NQO1与HO-1水平(P＜0.05或P＜0.01),降低MDA水平(P＜0.05),从而改善氧化应激造成的卵巢损伤.山药中尿囊素可以通过Nrf2/HO-1途径改善卵巢功能早衰大鼠的氧化应激,对大鼠的卵巢具有保护作用.

目的 探究中药复方益经汤对环磷酰胺(CTX)所致卵巢早衰(POF)小鼠的治疗作用.方法 腹腔注射CTX建立POF小鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组、益经汤低、高剂量组和空白组,每组6只,灌胃给药 30 d.检测小鼠动情周期、体质量,卵巢、子宫指数和组织形态变化;ELISA检测血清中雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、抗缪勒氏管激素(AMH)、孕酮(PROG)的浓度;免疫组织化学法(IHC)检测卵巢PI3K、AKT、FOXO3A蛋白表达水平.结果 益经汤干预模型小鼠后,动情周期趋向正常,高剂量组体质量、卵巢指数、子宫指数皆显著升高(P<0.05);卵巢体积增大,初级和次级卵泡数量增多,细胞纤维化改善;子宫内膜增厚,恢复子宫腺上皮细胞排列;阳性对照组和益经汤高剂量组血清E2、AMH、PROG均升高(P<0.05,P<0.01),FSH、LH显著下降(P<0.01).益经汤组和阳性对照组PI3K、AKT、FOXO3A蛋白表达皆显著降低(P<0.01).结论 益经汤可有效改善动情周期,恢复卵巢和子宫的功能,可提高血清E2、AMH、PROG和降低FSH、LH的表达,机制可能与下调PI3K、AKT和FOXO3A 蛋白表达有关.