目的:通过观察薯蓣多糖体外对精子膜及DNA完整性的影响.为少弱精子症的治疗提供新的途径. 方法:正常已生育成年男性,禁欲3～5d手淫法取精液.分为6组,每组各取0.2ml精液;对照组为精液原液,其他5组分别加入等量的生理盐水、维生素C溶液及不同浓度薯蓣多糖溶液(0.25、1.0、5.0 mg/ml).通过伊红-Y染色试验、精子低渗肿胀实验(HOS)以及精子染色质扩散(SCD)实验,观察不同浓度薯蓣多糖体外对精子存活率、精子膜完整性以及精子核DNA的影响. 结果:6份精液样本孵育24 h及48 h后各组的精子存活率均有降低.维生素C组精子存活率分别为(28.5±3.1)％、(6.5±1.2)％;薯蓣多糖低、中、高剂量组的精子存活率分别为(31.3±3.5)％、(6.5±2.2)％,(37.1±3.5)％、(9.5±2.8)％,(38.3±3.3)％、(9.0±3.2)％,均显著高于生理盐水组[(13.4±4.1)％、(3.1±2.0)％,P＜0.01],中、高剂量薯蓣多糖组显著高于维生素C组(P＜0.05及P＜0.01).精子DNA碎片率低剂量薯蓣多糖组为(29.4±2.6)％,与维生素C组[(30.5±2.5)％]无明显差异,但显著低于对照组[(41.7±2.2)％]和生理盐水组[(42.1±3.3)％];中、高剂量薯蓣多糖组精子DNA碎片率分别为(28.5±2.3)％和(27.9±1.9)％,显著低于对照组、生理盐水组及维生素C组(P＜0.05及P＜0.01). 结论:薯蓣多糖具有体外提高精子存活率和保护精子DNA完整性的作用.

目的 探讨经密度梯度离心结合上游法处理前后精子DNA碎片率的变化以及对体外授精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)结局的影响.方法 收集107例行IVF助孕患者的精液,按照WHO标准对处理前精液行精液常规分析,采用精子染色质扩散试验(sperm chromatin dispersion,SCD)检测处理前和处理后精液的精子DNA碎片率,并收集IVF实验室及临床结局.根据处理前精子DNA碎片率将患者分为两组:精子DNA碎片率≤20％的患者为A组,精子DNA碎片率＞20％的患者为B组.结果 处理后精子DNA碎片率显著低于处理前精子DNA碎片率(3.49±3.38％ vs18.69±10.89％,P＜0.001);处理前和处理后精子DNA碎片率均与精子总活动率、前向运动率及受精率有显著负相关关系(Spearman相关系数:-0.508、-0.629、-0.283、-0.299、-0.399、-0.329,P＜0.05)与男方年龄、精液量、精子密度、正常形态率及卵裂率无显著相关关系;B组处理后精子DNA碎片率高于A组,差别有统计学意义(P＜0.05);B组的精子总活动率、前向运动率和受精率均低于A组,差别有统计学意义(P＜0.05);两组男方年龄、女方年龄、不孕年限、获卵数、精液量、精子密度、正常形态率、卵裂率、种植率和妊娠率之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 密度梯度离心加上游法处理精液后可以显著降低精子DNA碎片率,精子DNA碎片率与精子活力最密切相关,碎片率升高会降低受精率,但对种植率、妊娠率等临床结局没有显著影响.

目的:分析与探讨不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相互关系.方法:精子DNA完整性的检验选用精子染色质扩散实验(sperm chromatin dispersion,SCD),以精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)表示.将符合条件的65例男性患者作为实验组,随机选取配偶有正常妊娠史且无流产史的65例男性患者作为对照组,并分别测定两组男性精液相关参数和精子DFI.结果:实验组与对照组比较,在年龄、禁欲时间、精液量、精子活率、精子密度差异无统计学意义(P＞0.05).实验组的DFI为(40.89±14.50),对照组的DFI为(22.89±6.94),差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:不明原因复发性流产与精子DNA损伤存在一定的关系.

男性因素导致的不育占不育症的比例约为30％～55％[1].现有资料提示,弱精子症男性的血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)浓度明显高于正常男性,精液中的Hcy水平升高可以造成精液质量的降低[2-3].研究表明[4-5],精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)增高与复发性流产有密切关系,虽然DNA受损的精子可以正常受精、分裂,但胚胎发育过程中,受损的DNA可诱导胚胎凋亡.本研究对140例确诊为少弱精子症患者以及50例无生精障碍者进行研究,采用精子染色质扩散实验(SCD)检测精子DFI,并收集Hcy检验结果,旨在探讨Hcy与精子DFI是否存在相关性,从而指导少弱精子症的临床治疗以及为改善妊娠结局提供依据.

目的 通过对低渗肿胀实验(HOST)、苯胺蓝(AB)染色实验、染色质扩散(SCD)实验、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)实验、AB/HOST实验,SCD/HOST实验、HOST/TUNEL实验的检测结果中精子活性分级进行比较,探索优化精子活性的检验方法. 方法 选取2012年5月-2016年10月已育成年健康男性志愿者30例.每例样本分为7组,分别为:HOST组、AB组、SCD组、TUNEL组、HOST/AB组和HOST/SCD组、HOST/TUNEL组.分别进行相应方法的染色,观察精子尾部肿胀及核蛋白、DNA受损情况,计算各级活力精子的比例. 结果 单独AB和单独HOST与HOST/AB比较,精子分级差异有统计学意义;单独SCD和单独HOST与HOST/SCD比较,精子分级差异有统计学意义;单独TUNEL和单独HOST与HOST/TUNEL比较,精子分级差异有统计学意义. 结论 HOST/AB联合染色及HOST/SCD联合染色是对精子的核蛋白、DNA及膜完整性判断更为准确和实用的方法.

目的:探讨精子DNA完整性与精液参数、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)胚胎发育及早期自然流产的关系.方法:采用改良精子染色质扩散实验(SCD)检测1160个辅助生殖技术(ART)周期(899对夫妻)中精子DNA的完整性,以精子DNA碎片指数(DFI)为参数,将患者分为高DFI组(DFI≥25％)和低DFI组(DFI＜ 25％),根据采用不同的体外受精方式将两组又分为IVF亚组和ICSI亚组,比较组间精液参数、受精率、卵裂率、可移植胚胎率、优胚率、临床妊娠率、早期流产率、分娩率.结果:精液参数(精液密度、精子活力、正常精子形态率)与DFI显著相关,差异具有统计学意义(P＜0.05),低DFI组中的IVF亚组的受精率、分娩率显著高于高DFI组,早期流产率显著低于高DFI组,差异具有统计学意义(P＜0.05),其余各亚组间的卵裂率、可移植胚胎率、优胚率、临床妊娠率均差异无统计学意义(P＞0.05).结论:精子DNA完整性与精液密度、精子活力、正常形态精子百分率呈负相关,对IVF的受精率、早期流产率和分娩率有显著影响,故建议在DFI≥25％时,优先考虑ICSI授精.同时建议将精子DNA完整性作为辅助生殖的常规精液指标.

目的 通过评估精子DNA碎片指数(DFI),探讨精子DFI对冷冻胚胎移植结局的影响.方法 采用改良精子染色质扩散实验(SCD)对530例接受体外受精(IVF)和1 53卵细胞浆单精子注射(ICSI)的男方进行精子DFI检测,并根据精子DFI值将上述IVF患者分组(DFI≤30％,DFI＞ 30％),根据单因素方差分析统计方法分析各组IVF受精率、卵裂率、优质胚胎率和冷冻胚胎移植的妊娠结局的差异.结果精 子碎片指数DFI≤30％组在临床妊娠率,生化妊娠率和流产率与DFI＞ 30％组相比没有显著变化.在精子DNA碎片指数≤30％的ICSI组,囊胚形成率显著高于DFI＞ 30％组.结论 精子染色质扩散试验(SCD)方法测定的精子DNA碎片指数与冷冻胚胎移植(FET)结局无关,但是与ICSI周期的囊胚形成率有关.

目的 研究精液不液化患者精液各项参数与精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)的相关性,探讨DFI在评估男性不育方面的临床意义.方法 选择70例精液不液化不育患者与40例正常健康生育史男性为研究对象,将前者设为实验组,将后者设为对照组.按照《WHO人类精液检查与处理实验室手册(第五版)》进行精子质量分析、精子形态学分析以及精子染色质扩散实验(SCD)等方法检测各项指标,并分析DFI与精子浓度、前向活动精子、正常形态率的关系.结果 实验组患者的精子浓度、前向活动精子、正常形态率、DFI分别为(40.36±15.42)×106/mL、(29.17±6.13)％、(7.45±3.03)％、(29.17±8.46)％,对照组成员的相关指标分别为(79.03±39.61)×106/mL、(47.15±7.23)％、(22.19±2.06)％、(14.36±3.78)％,两组差异均有统计学意义(均P＜0.05).DFI与精子浓度、前向活动精子、正常形态率的相关系数分别为-0.503、-0.683、-0.799.结论 男性精液不液化不育患者精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态率比对照组均有所下降,而DFI有所升高,这些参数变化也是导致精液不液化患者不育的原因之一.

目的 评估褪黑素对尼古丁处理雄性大鼠生育能力的影响.方法 将32只雄性大鼠随机分为4组,A组腹腔注射生理盐水,B组腹腔注射尼古丁(1 mg/kg),C组腹腔注射褪黑素(10 mg/kg),D组腹腔注射尼古丁+褪黑素.分组处理30 d后处死动物,采用HE染色和Johnsen评分评估精子发生情况,TUNEL染色检测生殖细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)评估血清睾酮和促黄体生成素(LH)水平,WL-9000型精子质量检测系统检测附睾精子参数,精子染色质扩散实验检测精子染色质完整性.结果 与A组比较,B组生精细胞计数和Johnsen评分均明显降低;凋亡细胞个数明显增多;血清LH和睾酮水平降低;附睾精子计数和活力均降低,而异常形态升高;光晕精子比例显著降低,DNA碎片指数显著升高(均P<0.05).与B组比较,C组和D组生精细胞计数和Johnsen评分均升高;凋亡细胞个数减少;附睾精子计数和活力均增加,而异常形态降低;光晕精子比例均升高,DNA碎片指数均降低(均P<0.05).C组血清LH和睾酮水平较B组升高(P<0.05);D组血清LH水平与B组差异无统计学意义,睾酮水平高于B组(P<0.05).DNA碎片指数与血清睾酮水平、LH水平和精子总活力呈负相关(r分别为-0.894、-0.763、-0.786,均P<0.05),与生殖细胞凋亡、精子异常形态呈正相关(r分别为0.782、0.837,均P<0.05).结论 褪黑素可通过减少生殖细胞凋亡和调节睾酮水平改善尼古丁处理大鼠精子生成和精子染色质完整性.

目的 分析探讨男性不育症患者精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)与精液多项参数的相关性,以及精子DFI在评估男性生育力中的诊断价值.方法 对146例不育症患者精液标本进行精液常规分析、精子形态学分析(Diff-Quik法)及DFI检测(精子染色质扩散法).结果 不育症患者精子DFI水平分为三组(A组:DFI≤15％;B组:15％ ＜DFI ＜30％;C组:DFI≥ 30％).A组与B组比较,年龄、精子存活率和前向运动(progressive,PR)比较有统计学意义(Z为-2.036,P＜0.05;-2.910、-3.155,P＜0.01);B组与C组比较,两组精子存活率和PR比较差异有统计学意义(Z分别为-4.602、-4.900,P＜0.01);其余各组及参数比较均无统计学意义(P＞0.05).精子DFI与精子存活率、PR呈显著负相关(r分别为-0.558、-0.561,P＜0.01);与年龄、禁欲天数、精液体积、精子密度、正常形态精子百分率不存在相关性(P＞0.05).结论 精子DFI水平与精子存活率、前向运动精子百分率呈显著负相关;精子形态学和精子DNA碎片指数应作为评估精子结构和功能的常用实验室指标,指导临床药物干预和辅助生殖实验室技术开展.