目的:探讨结节性硬化症（TSC）患者视网膜星形细胞错构瘤（RAH）的自发荧光特征。方法:回顾性系列病例研究。对2012年11月至2018年6月间就诊于北京协和医院内科和眼科临床诊断TSC相关RAH的23例（35只眼）患者的眼底自发荧光检查结果进行回顾分析，同时对比观察其彩色眼底照片及频域相干光层析成像术（SD-OCT）结果。根据彩色眼底图像表现对RAH病灶进行分型（1、2、3型），描述不同类型TSC相关RAH的自发荧光特征。采用Welch检验及Fisher精确检验进行统计学分析。结果:23例患者中男性8例，女性15例，年龄（28±9）岁（15~55岁）。共检测RAH病灶72个，其中1型RAH 59个，2型RAH 7个，3型RAH 6个。根据自发荧光表现，1型RAH可分为低荧光、混合荧光和等荧光3个亚型，其中低荧光型占绝大多数（69.5%，41/59），而混合荧光型在对应SD-OCT中多伴有外层视网膜受累或光感受器外节信号的中断。低荧光、混合荧光和等荧光亚型的1型RAH的病变厚度分别为（490.2±97.9）、（589.2±221.6）、（463.0±76.2）μm，不同亚型间差异无统计学意义（ F=1.426， P=0.283）。低荧光亚型的1型RAH在黄斑旁、视盘旁、鼻下象限、颞下象限、鼻上象限、颞上象限的病灶数量分别为9、4、4、7、4、13个，混合荧光亚型分别为3、0、3、2、3、2个，等荧光亚型分别为3、0、1、1、0、0个，不同亚型间差异无统计学意义（ P=0.452）。2型RAH在自发荧光中呈现密集点状或斑块样高荧光，同一病灶内不同钙化点的荧光强弱各有不同。而3型RAH则兼具1、2型特点，以病灶中心点状高荧光，周边类环形低荧光为典型自发荧光表现，但高荧光范围明显小于彩色眼底图像中对应的钙化范围。 结论:TSC患者不同类型RAH的自发荧光可表现由低荧光到高荧光不等。自发荧光对TSC相关RAH病灶的累及深度及钙化情况具有提示作用，有助于病变的全面评估。（中华眼科杂志， 2020， 56： 211- 216）

目的:分析增强蓝视锥细胞综合征(ESCS)一家系的临床表型及致病基因。方法:采用家系调查研究方法，收集2021年6—9月于河南省立眼科医院就诊的中国汉族疑似ESCS一家系，该家系共3代8人，其中患者1例。对先证者进行全面的眼科检查，包括视力、斜视程度、眼前节和眼底情况、视网膜自发荧光、荧光素眼底血管造影、全视野视网膜电图(ERG)、多焦ERG、光相干断层扫描，以评估表型。收集该家系成员外周血样本，提取DNA，采用全外显子组测序(WES)技术进行测序，筛查致病基因及变异位点。采用Sanger测序验证变异位点是否与临床表型共分离。采用SIFT、Polyphen2、MutationTaster在线工具分析变异位点有害性；采用美国医学遗传学及基因组学会(ACMG)遗传变异分类标准与指南分析变异位点致病性；采用SIFT分析变异位点对应氨基酸序列保守性。结果:该家系符合常染色体隐性遗传方式。先证者自幼夜盲、远视、调节性内斜视、周边视网膜色素样沉积、视网膜劈裂、ERG明视反应以大振幅波为主。WES检测发现1个复合杂合变异 NR2E3 5号外显子c.671C>T：p.S224L和6号外显子c.955G>A：p.E319K，Sanger测序验证结果显示变异位点与临床表型共分离。2个变异位点均为错义变异，在gnomAD数据库东亚人群中变异频率为0；SIFT、Polyphen2、MutationTaster预测基因产物有害；其中c.671C>T变异在疾病数据库ClinVar中有意义不明记录，c.955G>A变异为未报道新位点。ACMG遗传变异分类标准与指南显示2个变异均为临床意义未明变异。2个变异位点对应的氨基酸序列在不同物种中均具有高度保守性。 结论:该家系符合ESCS的临床特征和遗传学诊断。本研究发现了 NR2E3基因2个未报道的变异位点c.671C>T：p.S224L和c.955G>A：p.E319K。

目的:评价不同体细胞来源的人诱导多能干细胞(hiPSCs)向3D视网膜类器官分化的能力。方法:采用血液细胞重编程获得的hiPSCs系绿色荧光蛋白(GFP)标记的BC1细胞(BC1-GFP)及Gibco、尿液细胞重编程获得的hiPSCs系UE017进行视网膜诱导分化。光学显微镜下记录视网膜形态的发生和发展过程，采用免疫荧光染色法检测获得的视网膜中各种细胞亚类的特异性分子标志物表达情况，对不同细胞系分化视网膜的效率进行分析和比较。结果:血液和尿液细胞来源的hiPSCs均可成功诱导分化为3D视网膜类器官，包括神经视网膜和视网膜色素上皮细胞。视网膜类器官能够模拟体内视网膜的发育过程，逐渐分化出所有神经视网膜亚类细胞，包括视网膜神经节细胞、光感受器细胞、无长突细胞、水平细胞、双极细胞和Müller细胞，甚至形成板层状结构。2种体细胞来源的hiPSCs在分化为视网膜类器官的效率上存在差异，血液来源的细胞比尿液来源的细胞分化为视网膜类器官的效率更高。结论:血液和尿液体细胞来源的hiPSCs均可诱导出3D视网膜类器官，获得的视网膜类器官中包括所有视网膜细胞亚类，但2种体细胞来源的hiPSCs分化成视网膜类器官的效率不同。

视网膜由多类细胞组成，每类细胞都有着独特的生物学功能。即使是同类细胞，也会因遗传异质性导致细胞功能出现差异。以往传统的研究手段无法分辨这些差异，有些细胞由于缺乏特异性分子标记或数量稀缺也难以定义，阻碍了人们对这些细胞的认识及研究。随着生物技术的发展，单细胞转录组测序技术可以获得单个细胞转录组表达谱、识别细胞间异质性、鉴别细胞亚类及稀有细胞群，揭示每个细胞的转录组表达谱特征和功能差异，剖析细胞的起源、功能及变异特征。可获得与疾病相关的特征性细胞亚类及特异性差异表达基因，加深我们对疾病起因、发展的理解，也为临床诊断及靶向治疗提供帮助。

目的:观察渗出型老年性黄斑变性（wAMD）患者负荷抗血管内皮生长因子（VEGF）药物治疗反应与单核苷酸多态性（SNP）基因型的关系。方法:回顾性临床研究。2019年8月至2020年9月在天津医科大学眼科医院检查确诊的wAMD患者103例103只眼纳入研究。其中，男性59例（57.28%，59/103），女性44例（42.72%，44/103 ）；平均年龄（68.74±7.74）岁。采用标准对数视力表检测患眼BCVA，统计时换算为最小分辨角对数（logMAR）视力。采用光相干断层扫描（OCT）检测患眼黄斑中心凹视网膜厚度（CRT）。同时检测患者的高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）。所有患眼均行玻璃体腔注射抗VEGF药物治疗，每月1次，连续3个月。初次治疗前，采集患者外周静脉血，质谱法检测白细胞介素-8 （ IL-8）、补体C3基因（ C3）、补体因子H （ CFH）、肝脂肪酶（ LIPC）、胆固醇脂蛋白转移酶（ CETP）、三磷酸腺苷结合盒亚家族A成员1（ ABCA1）、脂蛋白脂肪酶（ LPL）、脂肪酸去饱和基因簇（ FADS1 ）的SNP。按照基因频率将基因型分为野生型和突变型。临床表型中各基因型分布的频率差异和基因型分布的Hardy-Weinberg平衡等定性数据比较行 χ2检验或Fisher确切检验。 结果:IL-8 rs4073突变型（TA+AA）患者中CRT有反应者较野生型（TT）少[比值比（ OR）=0.310，95%可信区间（ CI）0.106~ 0.910， P<0.05）。其中药物分层检验后，康柏西普治疗组中 IL-8 rs4073位点TT基因型患者CRT无反应者占比更少（ OR=0.179，95% CI =0.034~ 0.960， P=0.033）。 LIPC rs2043085突变型（CT+TT）患者中BCVA提高≥0.2 logMAR单位者较野生型（CC）可能性更高（ OR=3.031，95% CI 1.036~ 8.867， P<0.05）；HDL-C水平显著低于野生型（CC），差异有统计学意义（ t=2.448， P=0.016）。 IL-8 rs4073、 LIPC rs2043085突变型和野生型患者治疗前logMAR BCVA、CRT比较，差异无统计学意义（ IL-8 rs4073： Z=-0.198、-1.651， P=0.843、0.099； LIPC rs2043085 ： Z=-0.532、-0.152， P=0.595、0.879）。 C3 rs 225066、 CFH rs800292、 CETP rs708272、 ABCA1 rs1883025、 FADS1 rs174547、 LPL rs12678919与抗VEGF药物治疗反应无相关性。 结论:wAMD患者负荷抗VEGF药物治疗， IL-8 rs4073位点A基因型者可能对CRT反应性更差； LIPC rs2043085位点T基因型者可能对BCVA反应性相对更好。

目的:探讨Anti-白细胞介素(IL)-12/IL-23 p40抗体对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级健康无眼疾6~8周龄雌性C57BL/6N小鼠66只，其中24只采用光感受器维生素A类结合蛋白(IRBP)651-670诱导小鼠EAU模型，分别在免疫前及免疫后第3、12、18天各取6只小鼠，流式细胞术检测各时间点小鼠脾脏、淋巴结和眼球中IL-17A + γ干扰素(IFN-γ) + CD4 + T细胞比例。取6只小鼠制作EAU模型，免疫后18 d采用小动物成像仪进行眼底拍照并行光相干断层扫描(OCT)检查。检查完成后处死小鼠，摘取眼球，采用苏木精－伊红染色法检测小鼠视网膜炎症反应和组织结构形态学改变；取淋巴结行流式细胞术检测IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞比例，按照表达数量不同分为IL-17A + IFN-γ +细胞高表达组和IL-17A + IFN-γ +细胞低表达组，比较2个组小鼠视网膜损伤情况。取36只小鼠制作EAU模型，采用随机数字表法分成Anti-IL-12/IL-23 p40组和IgG组，每组18只，分别尾静脉注射Anti-IL-12/IL-23 p40和IgG，每3天1次。免疫后第12天和第18天每组各取6只小鼠，分别取淋巴结和眼球组织，采用流式细胞仪检测T细胞亚群比例。免疫后第24天，每组各取6只小鼠，摘取眼球，采用苏木精－伊红染色法观察视网膜损害情况；采用流式细胞仪检测CD4 + T细胞体外诱导分化情况；采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞诱导分化后IL-17和IFN-γ表达情况；采用实时荧光定量PCR法检测IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞诱导分化后Th1细胞转录因子T-bet和Th17细胞转录因子维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)相对表达量。 结果:免疫前和免疫后第3、12、18天，淋巴结、脾脏、眼球中IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞比例总体比较差异均有统计学意义( H＝9.642、16.531、10.385，均 P<0.05)，其中与免疫前相比，EAU小鼠免疫后第12天淋巴结IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞比例明显升高；免疫后第18天脾脏、眼球中IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞比例明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。IL-17A + IFN-γ +细胞高表达组小鼠视网膜严重水肿、视网膜脱离、重度炎性细胞浸润和广泛视网膜褶皱；IL-17A + IFN-γ +细胞低表达组小鼠视网膜轻度水肿、局灶性炎性细胞浸润、轻度视网膜褶皱。Anti-IL-12/IL-23 p40组免疫后18 d，眼球中CD3和IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞比例低于IgG组，差异均有统计学意义( t＝15.304、8.080，均 P<0.05)；免疫后12 d，Anti-IL-12/IL-23 p40组淋巴结中IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞比例为(0.33±0.18)%，明显低于IgG组的(4.83±0.45)%，差异有统计学意义( t＝15.974， P<0.001)。与IgG组相比，Anti-IL-12/IL-23 p40组Th1、Th17、IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞百分比及IL-17、IFN-γ、T-bet、ROR-γt表达量明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:Anti-IL-12/IL-23 p40可通过抑制IL-17A + IFN-γ + CD4 + T细胞发挥对EAU的治疗作用。

目的:建立中国人颊黏膜鳞状细胞癌（BMSCC）细胞系SCC117，分析并鉴定其基本生物学特性。方法:纳入2011年1月就诊于北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科的1例BMSCC患者（59岁中国男性），采用改良组织块培养法对其原发灶手术标本进行体外原代培养，连续传代稳定生长后建立人BMSCC细胞系SCC117。光学显微镜和电镜观察SCC117细胞形态特征，通过生长曲线、染色体核型、异种移植裸鼠成瘤实验等分析其基本生物学特征，免疫组化检测细胞角蛋白（CK14）、肿瘤相关蛋白视网膜母细胞瘤抑制蛋白（RB）、P53、上皮钙黏素（E-cadherin）、P21、同源性磷酸酶-张力蛋白（PTEN）表达情况，PCR检测人乳头瘤病毒（HPV）携带情况。基因组 DNA 短串联重复序列（STR）分析鉴定细胞系身份。结果:人BMSCC细胞系SCC117已在体外连续传代培养超过150代。SCC117细胞呈多角形镶嵌状生长，失去接触抑制，电镜观察可见典型的细胞桥粒结构及张力原纤维。免疫组化显示，SCC117细胞CK14阳性，倍增时间为40.16 h。染色体众数集中在67~69条之间，为亚三倍体。接种SCC117细胞的4只裸鼠均成瘤，SCC117细胞系具有异种致瘤能力，HE染色显示，裸鼠移植瘤与人原发肿瘤组织的病理组织学类型一致，均为鳞状细胞癌。免疫组化结果显示，人原发肿瘤及裸鼠移植瘤组织中RB、P53、E-cadherin均为阳性，P21弱阳性，PTEN阴性。PCR结果显示，SCC117细胞系的HPV检测为阴性。STR序列分析结果显示，SCC117细胞系来源于原发肿瘤组织，未被其他细胞系交叉污染。结论:本研究成功建立中国人BMSCC细胞系SCC117，可为无HPV感染的口腔鳞状细胞癌尤其是BMSCC的研究提供新的实验模型。

原发性玻璃体视网膜淋巴瘤（PVRL）是最常见的眼内淋巴瘤，是原发性中枢神经系统淋巴瘤（PCNSL）的一种亚型，临床表现类似葡萄膜炎，是一种罕见的预后不良的眼内恶性肿瘤。细胞病理学检查是确诊PVRL的金标准，此外针对肿瘤细胞的克隆性检测及细胞因子等辅助检查目前已得到应用，近几年一些新的分子生物标志物和检测技术也逐渐发展起来。应结合PVRL的临床表现、细胞学检查、免疫学检测及分子生物学的检测结果综合判断，优化患者的诊断方案。本文就原发性玻璃体视网膜淋巴瘤的诊断研究进展进行综述。

目的 调查老年2型糖尿病(T2DM)患者肌肉减少症(简称"肌少症")发病情况,分析影响跌倒风险的影响因素及合并肌功能降低与跌倒风险的关系.方法 以该院2020年1月至2022年12月512例年龄≥60岁的T2DM患者为研究对象,采用CAMRY-EH101握力器测试握力(HS),秒表、皮尺测试行走速度(GS),生物电阻抗分析测定肌肉含量并计算骨骼肌质量指数(SMI);采用2019年亚洲老年肌少症管理机构(AWGS2019)标准对肌少症进行分组,摩尔斯跌倒风险预测量表评价跌倒风险,使用二元logistic回归分析跌倒风险的影响因素.结果 研究对象肌少症检出率为19.92％,399例患者(77.93％)存在跌倒风险,而是否有肌少症及肌少症严重程度对跌倒风险无影响(P＞0.05);非肌少症患者中,HS、GS、SMI下降组跌倒风险较正常组升高(P＜0.001).多因素分析结果显示,性别、BMI、血糖情况、白细胞介素6、T2DM视网膜病变、T2DM周围神经病变、T2DM血管病变7类变量是跌倒风险的影响因素(P＜0.05).结论 老年T2DM患者跌倒风险较高,T2DM合并肌功能降低可加剧跌倒风险,但合并肌少症对跌倒风险无明显影响.

目的:研究转基因小鼠Thy1-YFP在视神经钳夹(ONC)模型和谷氨酸兴奋性毒性(NMDA)模型中YFP阳性视网膜神经节细胞(YFP+RGCs)的存活率与总体RGCs(RBPMS+RGCs)的存活率差异,以期为Thy1-YFP小鼠在视神经退行性病变中的进一步研究提供实验数据支持.方法:8周龄Thy1-YFP小鼠(雌雄不限)共20只,采用随机数字表法将小鼠随机分为正常组、ONC模型组和NMDA模型组.正常组小鼠进行左右眼对照;模型组小鼠均采用单眼造模,对侧眼为对照眼.其中,ONC小鼠于钳夹后7 d取材,NMDA小鼠于NMDA玻璃体腔注射后24 h取材.取材后,通过全视网膜铺片荧光染色和激光共聚焦拍照的方式获取RGCs信息,利用Image J计数YFP+RGCs和总体RBPMS+RGCs.统计分析ONC模型和NMDA模型中YFP+RGCs的存活率与总体RBPMS+RGCs的存活率差异,存活率差异以实验眼与对照眼的YFP+RGCs(或RBPMS+RGCs)的密度比值计算.结果:Thy1-YFP转基因小鼠视网膜上YFP+RGCs和RBPMS+RGCs的平均密度左右眼一致,具有可比性,其中YFP+RGCs约占总RGCs的0.19％.在ONC模型中,与对照眼相比,ONC眼的YFP+RGCs与RBPMS+RGCs的密度都出现了大幅度下降.YFP+RGCs的平均存活率为(59.4±8.2)％,而RBPMS+RGCs为(33.0±1.7)％,差异达26.4％(P＜0.001).在NMDA模型中,与对照眼相比,NMDA注射眼的YFP+RGCs与RBPMS+RGCs的密度亦都出现了大幅度下降.YFP+RGCs的存活率为(46.1±6.0)％,而RBPMS+RGCs为(32.4±3.5)％,差异达13.7％(P＜0.01).结论:转基因小鼠ONC模型与NMDA模型表明YFP+RGCs存活率并不能良好地反映总RGCs的存活率,说明Thy1-YFP小鼠的RGCs并不能代表总体RGCs,存在一定的RGCs亚类特异性.本研究结果为Thy1-YFP小鼠在视神经退行性病变中的研究提供了数据支持,进一步加深了研究者对于Thy1-YFP转基因小鼠的认识,为将来的研究提供了方向和借鉴.