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组氨酸激酶AgrC在亚抑菌浓度环丙沙星促进金黄色葡萄球菌生物膜形成中的作用机制
编辑人员丨5天前
目的:探讨组氨酸激酶AgrC在亚抑菌浓度环丙沙星促进金黄色葡萄球菌生物膜形成中的作用机制,为金黄色葡萄球菌生物膜相关感染的治疗提供新的思路。方法:于2021年中南大学湘雅三医院检验科收集皮肤组织和体液标本,采用微量肉汤稀释法测定环丙沙星对实验菌株的最低抑菌浓度;采用结晶紫染色法观察不同亚抑菌浓度环丙沙星处理金黄色葡萄球菌后的生物膜形成情况;利用SYTO9和PI荧光染料分析亚抑菌浓度环丙沙星对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响;通过逆转录荧光定量PCR检测亚抑菌浓度环丙沙星对金黄色葡萄球菌 agrC基因及其调控基因 agrA、 icaA和 icaR的表达水平的影响;最后,通过等温滴定量热法验证亚抑菌浓度环丙沙星与AgrC蛋白受体的结合作用;数据采用 xˉ±s表示,服从正态分布和方差齐性则采用方差分析,否则采用非参数检验,以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:药敏试验结果显示环丙沙星对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.25~0.5 mg/L。亚抑菌浓度的环丙沙星可促进金黄色葡萄球菌生物膜的形成,在1/4倍最低抑菌浓度即可开始出现显著作用[ATCC 43 300( t=7.42, P=0.002)、临床菌株SA1( t=5.42, P=0.005)、SA2( t=6.38, P=0.002)、SA3( t=4.8, P=0.009)、SA4( t=7.06, P=0.002)和SA5( t=4.36, P=0.004)]。激光共聚焦显微镜观察发现亚抑菌浓度的环丙沙星可明显促进金黄色葡萄球菌生物膜的形成,增加生物膜的形成量并使生物膜显著聚集成三维立体结构。逆转录荧光定量PCR结果显示,亚抑菌浓度的环丙沙星对 agrC基因表达水平无显著影响,但使agr A( t=4.42, P=0.003)和 icaR( t=4.49, P=0.007)表达水平下降[(0.61±0.24)和(0.56±0.12)], icaA表达水平升高[1.51±0.19( t=5.24, P=0.009)],差异有统计学意义。等温滴定量热法分析发现,环丙沙星与AgrC蛋白受体具有较好的结合力。 结论:亚抑菌浓度环丙沙星可能通过结合AgrC蛋白受体,影响下游a grA、 icaA和 icaR基因表达水平,从而促进生物膜形成,增加金黄色葡萄球菌的抗菌药物耐药性。
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编辑人员丨5天前
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从土湿木郁论治胸痞
编辑人员丨5天前
胸痞一病以自觉胸膺部痞塞,满闷不舒为主症。基于黄元御"一气周流"学术思想探析胸痞发病机制及治疗原则,认为土湿木郁是胸痞发病的重要病机,中土湿壅,脾气下陷,胃浊上逆,肝木郁结,痰气交阻于胸中,气机升降不利,发为胸痞;治疗应以疏木培土、化痰理气为主。临床以自拟调肝汤治疗胸痞寓培土于疏木之中,旨在肝脾同调,恢复气机周流,可取得较好疗效。附验案进行分析。
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编辑人员丨5天前
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基于气与离位之相火辨治腹泻型肠易激综合征
编辑人员丨5天前
“相火”作为“火气”的一部分,既秉“一气”周流之性,亦具“火”速快行之能,寄于脏腑经络之间。若相火不安其位,外溢逆冲为害,气机升降失司,则清浊俱下,发为泄泻。可见,泄泻乃脾胃伤损所致气机失调,兼夹相火外溢环节。中医临床治疗腹泻型肠易激综合征可从“气”论病、调“气”而治,立足于相火离位施治,在培土泄湿、调畅气机同时,施降泻、潜镇、固阳之法,以复相火位,寒热并调,阴阳合和,气行条达,而使泄利自止。
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编辑人员丨5天前
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基于数据挖掘分析《中国百年百名中医临床家丛书》辨治胃脘痛用药规律
编辑人员丨5天前
目的:采用数据挖掘方法分析《中国百年百名中医临床家丛书》辨治胃脘痛的用药规律,为临床诊治胃脘痛提供参考。方法:收集《中国百年百名中医临床家丛书》111本分册中收录的名老中医治疗胃脘痛的临床医案,构建临证方药数据库,应用古今医案云平台(V 2.1)对药物功效、性味归经等进行描述分析。通过关联规则、层次聚类、复杂网络分析名老中医治疗胃脘痛的用药规律、常用药对、核心处方等。结果:根据纳入及排除标准进行数据清洗,最终纳入处方270首,涉及药物265种,累计使用频次3 249次。分析结果显示,名老中医治疗胃脘痛常用药物药性以温、平、微寒为主;药味以辛、苦、甘为主;药物归经频次依次为脾、胃、肺、肝、心经;药物功效以燥湿、降逆、理气、清热、健脾、柔肝止痛药为主。关联规则分析发现,常用药对为半夏-陈皮、白术-茯苓、茯苓-陈皮、白术-陈皮、砂仁-陈皮、代赭石-旋覆花等。聚类分析得出六君子汤、左金丸、芍药甘草汤等核心药物组合。药物复杂网络表明用药核心处方为香砂六君子汤。结论:名老中医治疗胃脘痛注重健脾理气化湿、柔肝滋阴、调和气血,用药温清互济,通补兼施,以平为期。
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编辑人员丨5天前
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真武汤加地龙联合顺铂对恶性胸腔积液模型小鼠血清白细胞介素7、血管内皮生长因子水平的影响
编辑人员丨1周前
目的 观察真武汤加地龙联合顺铂给药对恶性胸腔积液模型小鼠血清白细胞介素7(IL-7)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 选取8 周龄的雌性C57BL/6 小鼠40 只,适应性喂养1 周后随机均分为空白对照组、模型对照组、顺铂组、真武汤加地龙组、真武汤加地龙+顺铂组,每组8 只.除空白对照组外,其余4 组的32 只均采用LLC小鼠肺癌细胞建立小鼠恶性胸腔积液模型.建模成功3 天后,顺铂组予顺铂溶液6 mg/kg腹腔注射,隔3 日1 次,共3 次;真武汤加地龙组予33.78 g/kg的真武汤加地龙溶液灌胃,每日 1 次,连续 10 天;真武汤加地龙+顺铂组予顺铂溶液6 mg/kg腹腔注射,隔3 日1 次,共3 次,联合33.78 g/kg的真武汤加地龙溶液灌胃,每日1 次,连续10 天;空白对照组和模型对照组分别予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,每日1 次,连续10 天.给药结束后,常规麻醉小鼠,暴露胸腔,用注射器抽取胸水,精确到0.1 mL,记录胸水量.采用酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清中IL-7、VEGF含量.结果 与空白对照组比较,模型对照组和各药物治疗组胸水量均升高(P<0.05);与模型对照组比较,各药物治疗组胸水量均下降(P<0.05).真武汤加地龙+顺铂组效果最佳,优于真武汤加地龙组和顺铂组(P<0.05).与空白对照组比较,模型对照组和各药物治疗组血清VEGF水平均升高(P<0.05);与模型对照组比较,各药物治疗组血清VEGF水平均降低(P<0.05);真武汤加地龙+顺铂组血清VEGF水平低于真武汤加地龙组和顺铂组(P<0.05).与空白对照组比较,模型对照组和各药物治疗组血清IL-7 水平均降低(P<0.05);与模型对照组比较,真武汤加地龙组和真武汤加地龙+顺铂组血清IL-7 水平均升高(P<0.05),顺铂组血清IL-7 水平降低(P<0.05);真武汤加地龙组和真武汤加地龙+顺铂组血清IL-7 水平高于顺铂组(P<0.05);真武汤加地龙组血清IL-7 水平高于真武汤加地龙+顺铂组(P<0.05).结论 真武汤加地龙联合顺铂对小鼠恶性胸腔积液疗效良好,可以显著降低小鼠胸水量,这可能与下调血清VEGF、上调IL-7表达有关,且真武汤加地龙可以逆转顺铂引起的IL-7 下降.
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编辑人员丨1周前
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利用2'-岩藻糖基乳糖生长的两歧双歧杆菌BD-1免疫调节功能评价
编辑人员丨2周前
目的 探究两歧双歧杆菌BD-1(Bifidobacterium bifidum BD-1,BD-1)以2-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyl-lactose,2'-FL)作为唯一碳源时,与葡萄糖相比,其菌体和代谢产物诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌细胞因子的效应,以探索BD-1菌利用母乳低聚糖后免疫调节的菌株特性.方法 (1)菌体部分干预实验:将BD-1活菌接种于不同碳源的改良MRS肉汤培养基中,改良过的MRS肉汤培养基包括以2%2'-FL作为唯一碳源(2'-FL组)和以2%葡萄糖作为唯一碳源(Glu组)的培养基.将接种后的BD-1活菌在厌氧条件下培养24h后,分离各组菌体和培养基上清液.将菌体部分与RAW264.7细胞共同培养,并以肽聚糖(pep-tidoglycan,PGN)为菌体成分对照,同时设置不添加干预物的阴性对照(Ctrl组).(2)菌体代谢产物部分干预实验:将培养基上清液与RAW264.7细胞共同培养,以含有2%2'-FL或葡萄糖但未进行BD-1菌发酵处理的培养基作为实验对照,并设置不添加干预物的培养基与RAW264.7细胞的共培养上清液作为阴性对照(Ctrl组),以PGN与RAW264.7细胞的共培养上清液作为阳性对照(PGN组).培养24h后,提取RAW264.7细胞总RNA,逆转录后采用实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、IL-12、IL-1β的基因表达量;收集各组受试物与RAW264.7细胞的共培养上清液,采用酶联免疫吸附试验检测共培养上清液中上述细胞因子的分泌量.结果 (1)菌体部分干预:与PGN组相比,菌体部分2'-FL组和Glu组的TNF-α、IL-6、IL-10分泌量及基因表达量显著上升(均P<0.05).与Glu组相比,2'-FL组的IL-6、IL-10分泌量显著下降(均P<0.05),IL-6、IL-10的基因表达具有下降趋势.(2)菌体代谢产物部分干预:BD-1-2'-FL上清组和BD-1-Glu上清组的TNF-α、IL-6及IL-10分泌水平以及基因表达水平较2'-FL组和Glu组(未进行BD-1菌发酵处理的组别)有显著提高(均P<0.05),而且2'-FL组中IL-6、IL-10的分泌量较Glu组显著增加(均P<0.05),IL-6表达水平显著升高(均P<0.05),IL-10表达水平有升高的趋势.2'-FL组相较于Glu组能产生更多的有机酸和种类更为丰富的糖类物质.结论 利用母乳低聚糖或葡萄糖作为唯一碳源培养BD-1菌体和诱导巨噬细胞分泌细胞因子的特征存在差异.当BD-1以母乳低聚糖为唯一碳源时,与葡萄糖相比,菌体成分呈现出抗炎倾向,在巨噬细胞中表现为IL-6的分泌和基因表达能力下降;而其代谢产物则具有刺激免疫激活的趋势,在巨噬细胞中导致IL-6和IL-10的分泌及基因表达能力上升.
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编辑人员丨2周前
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胃衡汤调控Nrf2-Keap信号通路抑制老年胃癌前病变患者氧化应激反应的临床研究
编辑人员丨2周前
目的 探讨胃衡汤调控核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap)信号通路抑制老年胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)患者氧化应激反应的作用.方法 选取2022年3月-2023年3月期间于南京中医药大学第二附属医院消化腔镜中心和脾胃病科就诊的PLGC老年患者60例,按随机数字表法分为基础治疗组与胃衡汤治疗组,每组各30例.另选择同期常规胃镜体检的慢性浅表性胃炎患者30例为对照组.对照组仅入组接受研究相关指标检测,不予治疗.基础治疗组患者给予雷贝拉唑钠肠溶胶囊,胃衡汤组在基础治疗组上加用胃衡汤治疗,均治疗6个月.观察比较两组PLGC患者临床疗效、安全性,治疗前后中医证候评分、胃镜病理分级及Nrf2-Keap通路相关蛋白检测.结果 治疗后胃衡汤治疗组中医证候疗效总有效率93.33%(28/30)明显高于基础治疗组76.67%(23/30),差异有统计学意义(P<0.05).治疗后胃衡汤治疗组病理组织学疗效总有效率83.33%(25/30)明显高于基础治疗组63.33%(19/30),差异有统计学意义(P<0.05).治疗后两组患者中医证候各项积分及总积分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且胃衡汤治疗组中医证候各项积分及总积分均明显低于基础治疗组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后两组患者胃黏膜组织学各项积分及总分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且胃衡汤治疗组胃黏膜组织学各项积分及总分均明显低于基础治疗组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后两组患者Nrf2和SOD表达高于治疗前,Keap1和MDA表达较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且胃衡汤治疗组Nrf2和SOD表达明显高于基础治疗组,Keap1和MDA表达明显低于基础治疗组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗期间,两组患者治疗前后肝肾功能、三大常规及心电图检查均未发现异常.结论 胃衡汤治疗老年PLGC能够改善临床症状,抑制甚至逆转病理学改变,提高治疗效果,其机制与调节Nrf2-Keap信号通路而抑制氧化应激反应有关.
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编辑人员丨2周前
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祛瘀消膜汤联合温针灸对药物流产不全刮宫术后宫腔粘连、内膜纤维化及血清sFIt-1、BNIP3的影响
编辑人员丨3周前
目的:观察祛瘀消膜汤联合温针灸对药物流产不全刮宫术后宫腔粘连、内膜纤维化及血清 Bcl2 相互作用蛋白 3(BNIP3)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)的影响.方法:选择 2020 年 1 月至 2023 年 5 月该院收治的药物流产不全患者96 例,分组方式为随机数字表法.所有患者均给予刮宫术后常规治疗,对照组 48 例患者在刮宫术后给予温针灸治疗,联合组48 例患者在对照组的基础上给予祛瘀消膜汤治疗.比较两组患者的临床疗效、治疗前后中医证候评分,记录腹痛持续时间、阴道出血时间和月经复潮时间,通过宫腔镜检查观察治疗后宫腔粘连发生率,检测治疗前后的血清sFIt-1、BNIP3、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,通过逆转录聚合酶链反应检测子宫内膜组织基质金属蛋白酶 9(MMP9)、转化生长因子β3(TGF-β3)mRNA表达水平.结果:联合组患者的总有效率为 97.92%(47/48),较对照组的 83.33%(40/48)更高,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,联合组患者产后恶露淋漓涩滞不爽、小腹疼痛拒按、淋漓量少、色紫黯有块、脉弦涩或沉而有力、舌紫黯或边有紫点评分较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05).联合组患者腹痛持续时间、阴道出血时间和月经复潮时间短于对照组,宫腔粘连发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).治疗后,联合组患者的E2 水平高于对照组,LH、TNF-α水平低于对照组,BNIP3、sFlt-1水平高于对照组,MMP9、TGF-β3 mRNA表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:祛瘀消膜汤联合温针灸治疗药物流产不全刮宫术后患者,可调节性激素水平,改善炎症状态,提高BNIP3、sFlt-1 水平,改善子宫内膜纤维化,提升宫腔抗粘连作用,缓解病情,提高临床疗效.
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编辑人员丨3周前
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陈霞波基于"治未病"理论防治糖尿病经验
编辑人员丨1个月前
陈霞波教授将糖尿病分为原始期、前驱期、消渴期、逆归期,将未病先防、已病防变、瘥后防复的"治未病"理论同糖尿病四期辨证有机结合,并灵活运用于糖尿病的预防和治疗中,形成"防-治-养"的健康管理模式,遵循整体观,从全方位、全要素、全流程阶段论治.原始期的基本病机为真气不足,主要病在脾、肾两脏,脾虚者常以六君子汤健脾助运,肾精不足者以左归丸、右归丸补肾益精,对于肝郁引起脾虚者常以四逆散合异功散加减疏肝健脾.前驱期,病位在肺、脾,往往虚中夹实,常用参苓白术散、升清降浊汤、参麦四君汤合芪归玉精汤、竹叶石膏汤、玉女煎或人参白虎汤等治疗.根据消渴期气化失常、气郁燥热的基本病机,常用白虎汤、升清降浊汤、舒情宁心汤、肾气丸等治疗.逆归期,病位涉及心、肺、肝、脾、肾等诸多脏腑,陈教授常采用五体辨证同脏腑辨证相结合的方法来诊断,治疗上主张调整阴阳,以调复气机,化痰散瘀,养血活络,调和营卫为主要治法.陈教授认为,对病未发者给予饮食、运动的宣教和指导,中药调体改善偏颇体质,预防疾病发生;对已发消渴者,采取中西医结合治疗,尽可能减少西药用量,减轻药物不良反应;对于逆归期患者,通过五脏和五体辨证治疗,缓解临床症状,提高生活质量,以带病延年;对血糖控制稳定的患者予膏方调理,扶正与祛邪兼顾,以增强体质,调节脏腑机能.
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编辑人员丨1个月前
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栀子在《伤寒杂病论》中配伍应用规律探讨
编辑人员丨1个月前
栀子在《伤寒杂病论》中共涉及经方10首,根据对其相关原文以及文献资料的整理分析,对其配伍规律得出以下结论:(1)仲景对栀子的用量较为稳定,为14~15枚不等,约12.6~19.5 g,皆取生品入汤剂.(2)所伍经方主治症状多以烦、热为主,病位多在上焦,涉及中下二焦,原文提示六经多在太阳、阳明及厥阴,病机皆突出郁热内结的特点.(3)栀子的配伍甚为灵活,基于中医治疗八法分析,其配伍组方规律体现在:①以清法为主,如代表方栀子豉汤,栀子配豆豉而成清宣里热基本药对;②清中兼下-栀子配厚朴、枳实或大黄以清热通腑,利湿退黄,有栀子大黄汤、枳实栀子豉汤等;③清中兼消——栀子配茵陈、黄柏以清消湿热,解毒退黄,有茵陈蒿汤、栀子柏皮汤等;④清中兼温——即栀子干姜汤中配入干姜,寒温并用,清热温中;⑤清中兼补——即栀子甘草豉汤中配入甘草,补益中气,标本兼顾;⑥清中兼和——即栀子生姜豉汤中配入生姜以调理气机,降逆和中.仲景运用栀子灵活巧妙,药简力宏,探析其配伍规律对现代用药组方思路颇具指导性及启发性.
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编辑人员丨1个月前
